《生物技術大實驗》教學大綱

生物技術大實驗－細胞工程課程編號：適用專業(yè)：生物技術學時數(shù)：48學分數(shù)：1一、實驗目的與要求：本課程是生物技術專業(yè)的專業(yè)課程的綜合性大實驗，是結合基因工程、細胞工程、微生物工程、蛋白質工程、酶工程、生物工程下游技術的相關技術而開設的綜合性、設計性實驗，由細胞工程實驗、生物大分子分離與分析技術實驗、微生物工程實驗三部分組成。細胞工程技術是一般包括細胞培養(yǎng)技術、細胞融合技術、單克隆抗體技術、細胞折合技術、染色體工程技術、繁殖生物學技術等一系列重要基礎技術。實驗目的：通過本課程的學習使學生初步掌握植物、動物細胞的培養(yǎng)、融合和核移植等細胞水平上的基本操作技術和實驗設計方法。使學生系統(tǒng)地掌握生物工程領域內的基本技術和基本技能，為更好地將生物技術應用于人類的生產(chǎn)和生活實踐打下堅實的基礎。同時，通過實驗，培養(yǎng)學生觀察、思考、探究、分析和解決問題的能力；養(yǎng)成實事求是、嚴肅認真的科學態(tài)度以及勤儉節(jié)約、愛護公物的良好作風。實驗要求：1．掌握基本細胞工程技術的操作技能。2．了解細胞工程的各種技術的基本原理，技術路線和方法。3.

在掌握基本知識的前提下，能針對具體課題對重要研究的技術路線進行初步設計。

二、實驗項目與提要：序號實驗項目必做選做時數(shù)內容提要實驗類型每套儀器人數(shù)1動物細胞工程常用培養(yǎng)液配制與檢測必做41．細胞工程實驗室基本操作技術2.

液體配制的準備3.

常用操作液及培養(yǎng)液的配制綜合性實驗4-52CO2培養(yǎng)箱等培養(yǎng)設備使用必做31．CO2培養(yǎng)箱使用方法2.

倒置顯微鏡使用方法基礎性實驗15-203小鼠組織細胞原代培養(yǎng)必做41．組織塊法原代細胞培養(yǎng)2．酶消化法原代細胞培養(yǎng)綜合性實驗4-54小鼠睪丸、附睪及輸精管精子采集、運動能力檢測與結構觀察必做41．精子采集2．精子運動能力檢查3．精子整體結構觀察4．精子頂體結構觀察綜合性實驗4-55小鼠輸卵管卵母細胞采集與結構觀察必做41．激素的分裝、配制2．小鼠超排處理日程安排與超排處理3．小鼠卵母細胞采集及結構觀察綜合性實驗4-56小鼠超數(shù)排卵及附植前不同發(fā)育階段胚胎采集與結構觀察必做121．小鼠超排處理日程安排與超排處理2．胚胎采集2.1輸卵管胚胎采集2.2子宮角胚胎回收3．檢胚及胚胎的形態(tài)學觀察與鑒定設計性實驗4-57小鼠組織細胞傳代培養(yǎng)必做41．原代培養(yǎng)的首次傳代2．細胞傳代方法（酶消化法）3．細胞凍存保存綜合性實驗4-58小鼠胎兒成纖維細胞活性檢測及細胞計數(shù)必做41．臺盼藍排除檢測法檢測小鼠胎兒成纖維細胞活性2．溴化乙錠和碘化丙錠排除檢測法檢測小鼠胎兒成纖維細胞活性3.

細胞計數(shù)綜合性實驗4-59細胞的凍存和復蘇選做31．動物細胞的冷凍2．動物細胞的復蘇

綜合性實驗4-510生產(chǎn)轉基因動物綜合技術體系的方案設計必做61.了解動物克隆技術的綜合過程2.

掌握利用體細胞克隆技術生產(chǎn)轉基因動物的原理和技術流程3.設計一套生產(chǎn)轉基因動物綜合技術體系的方案綜合性實驗4-5三、成績考核方法：1．平時成績：包括出勤、課堂提問、討論情況等，占20％2．操作成績：實驗的操作，及實驗的效果等，占20％3．報告成績：實驗報告等，占20％4．考試成績：占40％5．綜合考核成績占100％

四、教材及主要參考書：教材：1.《細胞工程實驗指導》自編教材

2005.92.《細胞工程》李志勇編著科學出版社

2003.8參考書：1.《植物細胞工程原理與技術》周維燕主編中國農(nóng)業(yè)大學出