DB54T 0329-2024 拉薩裂腹魚規(guī)范

ICS65.15054CCSB5254西 藏 自 治 區(qū) 地 方 標 準DB54/T0329—2024拉薩裂腹魚2024-04-09發(fā)布 2024-05-09實施西藏自治區(qū)市場監(jiān)督管理局??發(fā)布DB54/T0329DB54/T0329—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范圍 1規(guī)范性引用文件 1術語和定義 1主要形態(tài)結構特征 1外部形態(tài)特征 1內部結構特征 3生長與繁殖 3生長 3繁殖 4遺傳學特性 5細胞遺傳學特性 5生化遺傳學特性 5檢測方法 6抽樣 6性狀鑒定 6年齡測定 6染色體檢測 6血清乳酸脫氫酶（LDH） 6檢驗規(guī)則與結果判定 7附錄A（資料性） 生長方程、體長與體重關系式 8體長和體重生長方程 8體長與體重關系式 8附錄B（規(guī)范性） 同工酶各種試劑的配置 9凝膠的制備 9加樣指示劑 9電極緩沖液 9染色液的配制 10前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)起草。請注意本文件的某些內容可能涉及專利，本文件的發(fā)布機構不承擔識別這些專利的責任。本文件由西藏自治區(qū)農業(yè)農村廳提出。本文件由西藏自治區(qū)農業(yè)農村標準化技術委員會歸口。川律貝生物技術有限公司。DB54/T0329DB54/T0329—2024PAGEPAGE1拉薩裂腹魚范圍本文件給出了拉薩裂腹魚（Schizothoraxwaltoni）的主要形態(tài)構造特征、生長與繁殖、遺傳學特性、檢測方法和檢驗規(guī)則。本文件適用于拉薩裂腹魚的種質檢測。規(guī)范性引用文件（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T18654.11GB/T18654.22GB/T18654.33GB/T18654.44GB/T18654.66部分：繁殖性能的測定GB/T18654.1212GB/T18654.1313術語和定義下列術語和定義適用于本文件。3.1學名拉薩裂腹魚（Schizothoraxwaltoni）。3.2地方名尖嘴魚。3.3分類位置硬骨魚綱（Osteichthyes）（Cypriniformes）（Cyprinidae）（Schizothoracinae），裂腹魚屬（Schizothorax）。主要形態(tài)結構特征外部形態(tài)特征外形個體具有細小的中間葉，唇后溝連續(xù)。須2對，后須稍長，末端達眼后緣下方。體被不規(guī)則細鱗，身體之前的下方。下咽骨狹窄，呈弧形。拉薩裂腹魚的外形見圖1。圖1 拉薩裂腹魚外形圖可數(shù)性狀背鰭鰭式D.iii，7~8。臀鰭鰭式iii，5。鱗式31?339223?26?v101第一鰓弓鰓耙數(shù)外側鰓耙數(shù)17～22，內側鰓耙數(shù)22～32。比例性狀體長155mm~450mm個體的比例性狀變動范圍見表1。表1 拉薩裂腹魚比例性狀比例性狀數(shù)值比例性狀數(shù)值體長/體高5.5（4.3~6.9）頭長/吻長2.5（2.3~2.9）體長/頭長4.1（3.2~4.5）頭長/眼徑7.6（5.4~9.2）體長/尾柄長5.5（5.2~4.6）頭長/眼間距3.4（2.9~3.8）體長/尾柄高8.2（7.6~9.4）尾柄長/尾柄高1.7（1.5~2.0）4.2 內部結構特征鰾鰾2室，后室較細長，為前室的2.3倍～3.2倍。下咽齒下咽齒3行，2·3·5/5·3·2。下咽齒細圓，頂端尖，略鉤曲，咀嚼面凹入。脊椎骨脊椎骨總數(shù)47枚。腹膜腹膜為黑色。生長與繁殖生長40377682。表2 拉薩裂腹魚主要年齡組的體長和體重實測值齡組齡雌魚雄魚體長(平均±S.D)mm體重(平均±S.D.)g體長(平均±S.D.)mm體重(平均±S.D)g415146.0186.0±15.686.0±28.55200.1±24.4105.5±40.8205.7±13.9112.2±25.16228.5±36.2153.5±59.9243.2±24.7183.4±51.37261.0±30.2229.5±81.8275.9±33.9257.4±82.98300.3±35.5339.7±130.1295.9±27.9322.8±102.09337.7±48.6514.5±299.9319.1±28.4409.5±120.110361.2±33.1618.9±198.9339.3±30.2491.4±144.311411.8±43.4876.6±295.4358.2±34.3663.9±149.512412.6±40.6904.7±282.2373.0±27.4688.3±218.513432.1±38.41043.7±299.5377.2±37.7807.7±241.314457.0±31.41455.6±525.5398.8±33.8902.1±219.515482.9±47.31451.0±352.1411.0±28.1836.2±208.116501.6±49.01532.5±423.8393.1±59.0829.6±390.817479.8±41.81458.0±416.4418.7±38.0922.2±310.918517.0±30.11681.1±356.3427.2±28.9943.1±262.519503.5±54.11699.0±481.2442.7±29.71200.7±44.420514.3±32.21606.6±437.1436.0±51.61098.1±311.121536.0±28.21967.5±450.7441.0±46.7807.4±340.122505.1±62.51708.2±588.5447.0±37.61069.1±257.923512.7±47.21570.6±340.64681213.424519.8±54.21692.9±491.4448.8±23.71083.3±165.725520.3±44.61765.7±443.1265221603.5419.7±34.8928.0±309.8275601792.74391117.7284871308.229514.3±45.91681.0±564.330504.5±29.01597.8±285.4430929.5314901301.032420.0±21.2889.3±82.3336423788.14701096.234566.0±42.42120.7±805.74761437.935383736.3365041706.4456.5±20.51283.4±11.0376363038.34581235.7385952824.5395842722.9405532390.3生長方程和體長與體重關系式參見附錄A。繁殖成熟年齡雌魚為13齡；雄魚10齡。產卵類型性腺一年成熟一次，一次性產卵。繁殖期3月～4月，3月為繁殖高峰期。懷卵量依據(jù)60尾樣本估算的各年齡組懷卵量見表3。表3 拉薩裂腹魚不同年齡組懷卵量年齡齡體重范圍g懷卵量（均值±標準差）粒相對懷卵量（均值±標準差）粒/克101643.5138001121213.8-1473.812733.9±3059.410.7±0.9131083.7-2177.917696.4±9211.412.0±5.4141248.1-1896.919296.9±14943.912.7±7.0151171.4-2250.718094.9±10910.812.7±4.7161057.7-2668.318345.4±8228.912.6±2.8171121.2-2461.320733.7±11144.213.5±5.4181727.6-2183.423898.6±12618.014.1±6.4192198.53114516.3201460-2398.621735.0±5317.312.9±0.3211308.2-2739.918722.5±7745.711.2±1.9221420.2-2730.625377.2±15248.613.2±5.1231415.6-2267.726376.7±9022.916.1±2.9242182.72220011.3251428.8-2303.421503.9±13414.512.6±3.8271792.72173813.9291657.9-2480.719030.1±10789.511.8±2.7301799.8-1395.719880.3±1846.614.7±4.2382824.53391314.0392722.93476616.0遺傳學特性細胞遺傳學特性染色體數(shù)2n=92。核型公式：26m+28sm+22st+16t；臂數(shù)（NF）：146。染色體核型見圖2。圖2 拉薩裂腹魚染色體核型圖生化遺傳學特性拉薩裂腹魚血清乳酸脫氫酶（LDH）酶帶掃描圖見圖3。圖3 拉薩裂腹魚血清乳酸脫氫酶（LDH）酶帶掃描圖檢測方法抽樣按GB/T18654.2的規(guī)定執(zhí)行。性狀鑒定按按GB/T18654.3的規(guī)定執(zhí)行。年齡測定采用耳石鑒定年齡。方法按GB/T18654.4的規(guī)定執(zhí)行。染色體檢測按GB/T18654.12的規(guī)定執(zhí)行。血清乳酸脫氫酶（LDH）試劑及配置方法同工酶各種試劑的配制見附錄A。樣品的采集與制備血清血清制備，從尾靜脈抽取2ml血，于4℃、1000r/min離心6min，取上清備用。制膠先將混勻的6.5%分離膠液倒入模板約3/436℃左右30min膠聚合好以后，倒掉上面的水，將混勻的3.0%濃縮膠倒入模板，插好梳子，置于36℃左右30min膠聚合好以后，置于冰箱中備用。點樣點樣量為20μL。吸取20μL樣與2μL～3μL加樣指示劑混勻，一起加到樣孔中。電泳分離6.5%3.0%。電極緩沖液：pH8.3Tris—甘氨酸。280V（18~24mA）0.5h220v5h～6h（2h以上。染色:37℃恒溫箱中保溫的同工酶染色液中染色。檢驗規(guī)則與結果判定按GB/T18654.1的規(guī)定執(zhí)行。DB54/T0329DB54/T0329—2024PAGEPAGE10附錄 A（資料性）生長方程、體長與體重關系式體長和體重生長方程雌性和雄性群體的體長和體重生長方程分別見式(A.)、(A.2)、(A.3)和(A.4)：雌魚：Lt=644.3{1–exp[–0.084(t–0.247)]} （A.1）Wt=3291.9{1–exp[–0.084(t–0.247)]}2.984 （A.2）雄魚：Lt=586.2{1–exp[–0.084(t+2.250)]} （A.3）Wt=2477.9{1–exp[–0.084(t+2.250)]}2.999 （A.4）式中：Lt－t齡時魚體體長，mm；Wt－t齡時魚體體重，g；t－魚的年齡。體長與體重關系式雌性和雄性群體的體長與體重關系式見（A.5）和（A.6）：雌性：W=1.365×10?5SL2.984 （A.5）雄性：W=1.238×10?5SL2.999 （A.6）式中：W－魚體體重，g；L－魚體體長，mm附錄 B（規(guī)范性）同工酶各種試劑的配置凝膠的制備凝膠制備溶液配置各種凝膠制備溶液的配方及配制方法見表B.1。表B.1各種凝膠制備溶液配方溶 液配 制 方 法凝膠緩沖液Tris56.75g200mLpH8.9250mL。4℃貯存。凝膠儲液取丙烯酰胺33.3g，N，N′—亞甲基雙丙烯酰胺0.9g，四甲基乙二胺（TEMED）338μL溶于蒸餾水中定容到150mL。4℃貯存。AP取過硫酸銨1.5mg溶解到100mL蒸餾水水中。4℃貯存。分離膠和濃縮膠的制備用6.5%分離膠和3.0%濃縮膠制成聚丙烯酰胺垂直板凝膠，該凝膠液配方見表B.2。表B.2凝膠制備配方6.5?%分離膠3.0?％濃縮膠凝膠緩沖液,mL1.5凝膠緩沖液，mL0.5凝膠儲液，mL7.3凝膠儲液，mL1.2AP,mL1.5AP,mL0.5TEMED，μL－TEMED,μL4.0純水，mL14.7純水，mL6.8總體積，mL25總體積，mL9.0加樣指示劑0.15％溴酚藍—50％甘油：稱取0.15g溴酚藍溶于50mL蒸餾水，再加50mL甘油混勻。電極緩沖液取甘氨酸28.80g溶于800mL水，用約4.0