菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序

菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序前言Introduction菌落總數(shù)：是指食品檢樣經(jīng)過處理，在一定條件下(如培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度和時(shí)間)培養(yǎng)后，所得1g或1mL檢樣中形成的微生物菌落總數(shù)。以CFU/g（mL）來表示。檢測方法：GB4789.2-2016

菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序圖檢樣：25g（ml）樣品加入225ml稀釋液，均質(zhì)10倍系列稀釋選擇2~3個(gè)適宜樣品勻液，各取1mL分別加入無菌培養(yǎng)平皿內(nèi)每皿內(nèi)加入適量（15-20ml）培養(yǎng)基(PCA)，混勻，培養(yǎng)菌落計(jì)數(shù)36±１℃48±2h報(bào)告檢驗(yàn)程序樣品的處理濃度的稀釋培養(yǎng)計(jì)數(shù)培養(yǎng)基傾注1

樣品的稀釋：1.1

固體和半固體樣品：稱取25g（mL）樣品至盛有225mL磷酸鹽緩沖稀釋液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)，8000r/min～10000r/min均質(zhì)1min～2min，或放入盛有225mL稀釋液的無菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1min～2min，制成1:10的樣品勻液。如樣品ph值較低，建議使用磷酸鹽緩沖液，以免影響培養(yǎng)基的凝膠強(qiáng)度。

1.2液體樣品：以無菌吸管吸取25mL樣品至盛有225mL磷酸鹽緩沖稀釋液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無菌玻璃珠)中，充分混勻，制成1:10的樣品勻液。2樣品稀釋：

用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液的試管內(nèi)（注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面），振搖試管或換用1支無菌吸管反復(fù)吹打使之混合均勻，制成1:100的稀釋液。

按上述操作制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1次1mL無菌吸管或吸頭。。3

培養(yǎng)基傾注：

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)ξ廴厩闆r的估計(jì)，選擇2～3個(gè)適宜稀釋度（液體樣品可包括原液），分別在制作10倍遞增稀釋的同時(shí)，以吸取該稀釋度的吸管移取1ml稀釋液于滅菌平皿中，每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。

同時(shí)分別取1ml空白稀釋液（不含樣品），加入兩個(gè)滅菌平皿內(nèi)作空白對照

稀釋液移入平皿后，及時(shí)將冷卻至46℃平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基注入平皿約15～20ml，并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿，使其混合均勻。4

培養(yǎng)計(jì)數(shù)：

瓊脂凝固后，將平板翻轉(zhuǎn)，36℃±1℃培養(yǎng)48h±2h。水產(chǎn)品30℃±1℃培養(yǎng)72h±3h。

如樣品中可能含有