（高清版）GBZT 334-2024 尿中亞硫基二乙酸測(cè)定標(biāo)準(zhǔn) 離子色譜法VIP

ICS13.100CCSC52中華人民共和國(guó)國(guó)家職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)代替WS/T63—1996Determinationstandardofthiodiglycolicacidinurine—IonchromatographicIGBZ/T334—2024本標(biāo)準(zhǔn)為推薦性標(biāo)準(zhǔn)。本標(biāo)準(zhǔn)代替WS/T63—1996《尿中亞硫基二乙酸的氣相色譜測(cè)定方法》，與WS/T63—1996相比，主要技術(shù)變化如下：——?jiǎng)h除了尿中亞硫基二乙酸的氣相色譜法（見(jiàn)1996年版——增加了尿中亞硫基二乙酸離子色譜法（見(jiàn)第4章）。本標(biāo)準(zhǔn)由國(guó)家衛(wèi)生健康標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)職業(yè)健康標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會(huì)負(fù)責(zé)技術(shù)審查和技術(shù)咨詢，由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心負(fù)責(zé)協(xié)調(diào)性和格式審查，由國(guó)家衛(wèi)生健康委職業(yè)健康司負(fù)責(zé)業(yè)務(wù)管理、法規(guī)司負(fù)責(zé)統(tǒng)籌管本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：北京市化工職業(yè)病防治院（北京市職業(yè)病防治研究院）、中國(guó)疾病預(yù)防控制中心職業(yè)衛(wèi)生與中毒控制所、國(guó)家衛(wèi)生健康委職業(yè)安全衛(wèi)生研究中心、深圳市職業(yè)病防治院。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：潘興富、劉曉東、牛東升、丁曉文、郭啟芬、趙瑋、崔師偉、鄭玉橋、李添娣、贠建培。本標(biāo)準(zhǔn)及其所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：——1996年首次發(fā)布為WS/T63—1996；——本次為第一次修訂。1GBZ/T334—2024尿中亞硫基二乙酸測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)離子色譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了尿中亞硫基二乙酸的離子色譜測(cè)定法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于職業(yè)接觸氯乙烯人員尿中亞硫基二乙酸濃度的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本標(biāo)準(zhǔn)必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GBZ/T210.5職業(yè)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)制定指南第5部分：生物材料中化學(xué)物質(zhì)測(cè)定方法GBZ/T224職業(yè)衛(wèi)生名詞術(shù)語(yǔ)GBZ/T295職業(yè)人群生物監(jiān)測(cè)方法總則3術(shù)語(yǔ)和定義GBZ/T224及GBZ/T295界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。4原理尿樣用固相萃取小柱凈化，經(jīng)陰離子交換色譜柱分離，電導(dǎo)檢測(cè)器檢測(cè)，以保留時(shí)間定性，測(cè)定峰面積或峰高，采用外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。5儀器5.1純水機(jī)。5.2離心機(jī)。5.3渦旋振蕩器。5.4尼龍濾膜過(guò)濾頭：0.22μm。5.5電子天平：感量0.01mg。5.6尿比重折射儀。5.7固相萃取小柱ODS-C18（200mg，3mL），或等效萃取柱。5.8離心管：50mL、15mL。5.9離子色譜儀：配備電導(dǎo)檢測(cè)器和陰離子抑制器。儀器操作參考條件：a)色譜柱：IonPacAS19陰離子交換色譜柱（250mm×4mm），或其他等效離子交換色譜柱；b)淋洗液：氫氧化鉀溶液；c)梯度淋洗模式：0min～10min，20.0mmol/L；10min～20min，20.0mmol/L～30.20min～30min，30.0mmol/L～60.0mmol/L；30min～36min，60.0mmol/L。d)淋洗液流速：1.0mL/min；2GBZ/T334—2024e)抑制器：抑制電流150mA；f)進(jìn)樣體積：25μL。6試劑6.1亞硫基二乙酸：純度≥99.5%。6.2甲醇：色譜純。6.3去離子水：電阻率≥18.2MΩ?cm。6.4亞硫基二乙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取亞硫基二乙酸標(biāo)準(zhǔn)品50.0mg于50mL容量瓶中，用去離子水定容至刻度，所得濃度為1000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液，于冰箱4℃冷藏，可保存7d。臨用時(shí)用去離子水稀釋成濃度為100.0μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液。7樣品的采集、運(yùn)輸和保存7.1按照GBZ/T295的要求進(jìn)行尿樣采集和運(yùn)輸。7.2樣品采集：采集氯乙烯接觸者班后2h～10h的尿，或下一個(gè)班前尿，采樣時(shí)防止污染。尿樣的采集應(yīng)大于20mL。必要時(shí)采集雙份樣品，一份作為備份樣品。7.3樣品空白：在樣品采集的過(guò)程中，同時(shí)制備3份樣品空白。模擬采集去離子水，并與樣品同時(shí)運(yùn)輸和儲(chǔ)存。7.4樣品采集后，2h內(nèi)用尿比重折射儀測(cè)尿樣比重。7.5樣品運(yùn)輸：將采集后的樣品和樣品空白置于清潔容器中4℃冷鏈運(yùn)輸。7.6樣品保存：樣品在4℃下可保存5d；樣品在-20℃下可保存14d。8分析步驟8.1標(biāo)準(zhǔn)系列的配制和測(cè)定用標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液和去離子水配制成濃度分別為0.00μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.50μg/mL、2.50μg/mL、10.00μg/mL、50.00μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。按照儀器操作參考條件，將離子色譜儀調(diào)節(jié)至最佳測(cè)定狀態(tài)，取25μL進(jìn)樣，測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列，以保留時(shí)間定性，峰面積或峰高值對(duì)亞硫基二乙酸濃度(μg/mL）計(jì)算線性回歸方程。8.2活化小柱在固相萃取小柱中依次加入2mL甲醇和2mL去離子水，自然淋洗以活化固相萃取小柱，并用吸耳球吹掉柱內(nèi)殘液。8.3樣品處理尿樣放至室溫，取10mL加入15mL離心管中，3000r/min常溫離心10min；取上層尿樣2.5mL于10mL容量瓶中，用去離子水定容至刻度，渦旋振蕩1min；準(zhǔn)確量取2.0mL稀釋后的尿樣通過(guò)活化后的固相萃取小柱，用1.0mL去離子水淋洗小柱并用吸耳球吹出柱內(nèi)殘液，收集全部流出液，渦旋振蕩1min；用0.22μm尼龍濾膜過(guò)濾頭過(guò)濾后轉(zhuǎn)移到進(jìn)樣小瓶待測(cè)?；蚴褂米詣?dòng)固相萃取裝置處理。8.4樣品測(cè)定3GBZ/T334—2024用測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的儀器操作條件測(cè)定處理后的樣品及樣品空白溶液的峰面積或峰高，由回歸方程得亞硫基二乙酸的濃度(μg/mL）。當(dāng)樣品空白檢驗(yàn)結(jié)果大于方法檢出限時(shí)，應(yīng)對(duì)方法空白、采樣容器空白、容器空白、試劑空白和儀器空白等進(jìn)行檢驗(yàn)，以確定樣品空白結(jié)果的來(lái)源。樣品濃度超過(guò)測(cè)定范圍，可用去離子水稀釋后測(cè)定，計(jì)算時(shí)乘以稀釋倍數(shù)。8.5質(zhì)量控制檢測(cè)過(guò)程質(zhì)量控制應(yīng)按照GBZ/T295的要求進(jìn)行。9計(jì)算9.1按式（1）計(jì)算尿樣中亞硫基二乙酸的濃度：1）式中：ρ——尿樣中亞硫基二乙酸質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mLρ0——由回歸方程計(jì)算的亞硫基二乙酸質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升(μg/mL6——稀釋系數(shù)；k——尿樣換算成標(biāo)準(zhǔn)比重（1.020）下的濃度校正系數(shù)。9.2按照GBZ/T295中的方法測(cè)定尿比重，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比重較正。10.1本標(biāo)準(zhǔn)按照GBZ/T210.5的方法和要求進(jìn)行研制。10.2本方法檢出限為0.1μg/mL，定量下限為0.3μg/mL；方法測(cè)定范圍為0.3μg/mL～300.0μg/mL；批內(nèi)精密度范圍為0.7%～5.0%；批間精密度范圍為0.5%～8.8%；加標(biāo)回收率為80.1%～104.2%。10.3尿樣應(yīng)在冷凍前測(cè)定比重，剔除尿比重低于1.010g/mL和大于1.030g/mL的尿樣。亞硝酸根離子（NO2-）、硝酸根離子（NO3-）、碳酸根離子（CO32-）、硫酸