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第六章植物細(xì)胞工程制藥
植物組織細(xì)胞培養(yǎng)優(yōu)點:1.化合物的產(chǎn)量比之能從天然植物分離的要高;2.加入適當(dāng)?shù)那绑w能生物合成具有更好藥理性質(zhì)的類似物;3.能夠獲得通常在植物中含量極低的有重要藥理作用的化合物;4.能將容易得到的天然產(chǎn)物經(jīng)生物轉(zhuǎn)換成更有價值的藥物;5.能開發(fā)出含固相植物細(xì)胞或固相植物酶的生物反應(yīng)器。
5、外植體外植體(explant)是指用于植物組織(細(xì)胞)培養(yǎng)的器官或組織(的切段),植物的各部位如根、莖、葉、花、果、穗、胚珠、胚乳、花藥和花粉等均可作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)。四、植物培養(yǎng)細(xì)胞的生理特性1、延遲期(lagphase)細(xì)胞分裂的初始期和最大生長期之間,其持續(xù)時間取決于培養(yǎng)前的條件、時期和培養(yǎng)基性質(zhì),其特征是細(xì)胞數(shù)量、干重近乎恒定,細(xì)胞壁厚度達(dá)最大;高RNA含量;高蛋白質(zhì)合成能力;高聚核糖體含量;有絲分裂加速;增加細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)部分2、加速期(accelerationphase)細(xì)胞最大生長期和最大細(xì)胞濃度,最佳DNA濃度和蛋白質(zhì)累積率,持續(xù)時間3~4代,其特征為常數(shù):干重增加:細(xì)胞數(shù)、DNA和蛋白質(zhì)濃度減少:有絲分裂活性、RNA含量和蛋白質(zhì)合成能力3、對數(shù)期(logphase)介于最大生長率和蛋白質(zhì)合成完全停止期之間,其特征為蛋白質(zhì)合成能力減退;4、穩(wěn)定期(stationaryphase)細(xì)胞數(shù)穩(wěn)定,其特征為細(xì)胞高液泡化、極度脆弱、高度分化,有機化合物的濃度高。植物培養(yǎng)細(xì)胞的生理特性:1.植物培養(yǎng)細(xì)胞重量的增加主要取決于對數(shù)期,而次級代謝產(chǎn)物的積累則主要在穩(wěn)定期完成。2.纖維素細(xì)胞壁使得其外骨架相當(dāng)脆弱,表現(xiàn)為抗張力強度大,抗剪切能力小。3.植物細(xì)胞培養(yǎng)基粘度比較高,且隨培養(yǎng)時間的延長,細(xì)胞數(shù)量呈指數(shù)上升。4.很少以單一細(xì)胞懸浮生長,多以非均相集合體的細(xì)胞團形式存在二、培養(yǎng)基及其組成1、無機鹽2、碳源3、植物生長調(diào)節(jié)劑植物激素是指植物代謝過程中形成的生長調(diào)節(jié)物質(zhì),在極低濃度時即能調(diào)節(jié)植物的生長和發(fā)育過程,并能從合成部位轉(zhuǎn)運到作用部位而發(fā)揮作用。植物激素只限于天然產(chǎn)生的調(diào)節(jié)物質(zhì)。已發(fā)現(xiàn)植物組織中可以形成5種植物激素,即生長素、分裂素(6-FA)、赤霉素、脫落酸和乙烯。吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)、6-芐基腺嘌呤(6-BA)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)4、有機氮源使用較多的有機氮源為蛋白質(zhì)水解產(chǎn)物(如谷氨酰胺)或各種氨基酸。有機氮源對細(xì)胞的早期生長有利,5、維生素植物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)系統(tǒng)1、成批培養(yǎng)法2、半連續(xù)培養(yǎng)法3、連續(xù)培養(yǎng)法二階段連續(xù)培養(yǎng)法連續(xù)培養(yǎng)時間長,細(xì)胞的生產(chǎn)能力要比成批培養(yǎng)法高;細(xì)胞生產(chǎn)緩慢,培養(yǎng)時間長,要維持系統(tǒng)的無菌狀態(tài),技術(shù)條件要求較為苛刻。因此,設(shè)計出二階段連續(xù)培養(yǎng)法:第一罐中投入適于細(xì)胞增長的培養(yǎng)基并連續(xù)加入該培養(yǎng)基;第二罐中投入適于產(chǎn)生次級代謝產(chǎn)物產(chǎn)生的培養(yǎng)基。兩罐之間通過管道連接,第一罐中培養(yǎng)液不斷流入第二罐,同時第二罐培養(yǎng)液不斷放出,可大大提高細(xì)胞生長速度。(4)植物生長調(diào)節(jié)劑由于材料生理狀態(tài)的差異,其作用也有很大的不同。(5)氧氣和酸度氧氣,懸浮細(xì)胞和固定化細(xì)胞供氧方式有所不同,前者可采用通
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