大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲(chóng)病鑒定技術(shù)規(guī)程

Q/LB.□XXXXX-XXXX目次TOC\o"1-1"\h前言 II1范圍 12術(shù)語(yǔ)和定義 13病圃建設(shè) 14鑒定前準(zhǔn)備 15鑒定方法 26鑒定圃管理 27調(diào)查 28抗性評(píng)價(jià) 2附錄A（資料性）調(diào)查用表 4附錄B（資料性）生理小種鑒別 5前言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件代替DB14/T1613—2018《大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲(chóng)病鑒定技術(shù)規(guī)程》，與DB14/T1612—2018相比，除結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外，主要技術(shù)變化如下：——增加了“章節(jié)3病圃建設(shè)”——增加了“章節(jié)6鑒定圃管理”；——對(duì)附錄A的表A.1進(jìn)行完善，增加了調(diào)查人及記載人的信息；本文件由山西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出、組織實(shí)施和監(jiān)督檢查。本文件由山西省市場(chǎng)監(jiān)督管理局對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的組織實(shí)施情況進(jìn)行監(jiān)督檢查。本文件由山西省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)（SXS/TC47）歸口。本文件起草單位：山西農(nóng)業(yè)大學(xué)。本文件主要起草人：陳妍、張海平、聶萌恩。2018版文件起草人：張海平、王志、陳妍?！疚募?018年1月首次發(fā)布，2023年第一次修訂。——DB14/T1613—2018《大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲(chóng)病鑒定技術(shù)規(guī)程》廢止。大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲(chóng)病鑒定技術(shù)規(guī)程范圍本文件規(guī)定了大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲(chóng)鑒定技術(shù)的術(shù)語(yǔ)和定義、病圃建設(shè)、鑒定試驗(yàn)準(zhǔn)備、鑒定方法、鑒定圃管理和抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。本文件適用于大豆種質(zhì)資源抗胞囊線蟲(chóng)抗性鑒定和抗性評(píng)價(jià)。術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。胞囊線蟲(chóng)病指大豆胞囊線蟲(chóng)病，是由病原物大豆胞囊線蟲(chóng)（HeteroderaGlycinesIchinode）感染引起的土傳病害，其主要癥狀為葉片變黃，發(fā)育不良，植株矮小，開(kāi)花少，結(jié)莢少甚至不結(jié)莢。大豆根系根瘤數(shù)明顯減少，且不發(fā)達(dá)。在感病初期，根系附著白色、黃褐色小顆粒，后期根系開(kāi)始腐爛，導(dǎo)致地上部分枯死。生理小種簡(jiǎn)稱為“小種”，在形態(tài)上相似而在培養(yǎng)性狀、生理、生化、病理（致病力）或其他特性上有差異的生物型或生物群型。鑒別寄主用于鑒別病原物生理小種（菌系、毒系）的抗病性不同的一套寄主植物品種。病圃建設(shè)立地條件病圃所在地塊應(yīng)地勢(shì)平整，形狀規(guī)正，肥力均勻，排灌方便，不受陰庇，具有人工灌溉措施。面積根據(jù)鑒定規(guī)模確定病圃面積，但不應(yīng)小于100m2。鑒定前準(zhǔn)備塑缽制備將厚度0.1mm的透氣性塑料膜裁為寬26cm，高22.5cm的小塊，用訂書(shū)機(jī)將其制成寬11cm，高22cm的袋狀塑料缽。接種病土制備根據(jù)試驗(yàn)需要在病圃取適量的病土（大豆胞囊線蟲(chóng)密度≥30個(gè)胞囊/100g風(fēng)干土），將病土與無(wú)菌20目細(xì)沙以2:1的比例充分混勻后制備成試驗(yàn)病土。鑒定方法田間病圃法選擇大豆胞囊線蟲(chóng)密度≥30個(gè)胞囊/100g風(fēng)干土的病圃，當(dāng)氣溫大于20℃時(shí)播種。穴播，行距50cm，株距13cm。每份材料播種10穴。每穴留苗1株。每30個(gè)材料設(shè)1個(gè)感病對(duì)照。同時(shí)種植1套生理小種鑒別材料。病土塑缽法將試驗(yàn)病土裝入塑缽至距缽口1cm處。然后將裝好土的塑缽依次裝入塑料箱中，放于溫室。將塑料缽中土壤澆透，待缽內(nèi)土壤干濕程度適宜后開(kāi)始播種。每缽留苗3粒種子，表面覆蓋病土1cm。出苗后每缽留苗2株，每個(gè)品種3個(gè)重復(fù)。每30個(gè)材料設(shè)1個(gè)感病對(duì)照。同時(shí)種植1套生理小種鑒別材料，隨機(jī)擺放。溫室溫度保持在25℃～30℃，含水量控制在50%～60%。人工接種鑒定法試驗(yàn)在溫室中進(jìn)行。將待鑒定的種質(zhì)在育苗盤(pán)中育苗，同時(shí)播種小種鑒別材料。將出苗后子葉展開(kāi)、根系發(fā)達(dá)、健壯一致的植株移栽到裝有滅菌沙土的塑缽中，每缽2株，三次重復(fù)。每30個(gè)材料設(shè)1個(gè)感病對(duì)照。提前在病土中種植感病品種，在胞囊顯盛期，將根系上的胞囊沖洗下來(lái)，制備成濃度為1000個(gè)/ml的卵懸浮液。待鑒定材料在移栽后3天接種卵懸浮液2mL。溫室溫度保持在25℃～30℃，含水量控制在50%～60%。鑒定圃管理播種后，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充水分，保持土壤濕潤(rùn)。及時(shí)中耕除草，鑒定期間不使用殺菌劑和除草劑。調(diào)查待感病對(duì)照白色胞囊突破根系表皮時(shí)即可調(diào)查。將待調(diào)查植株根系上的土輕輕抖掉或用水沖洗干凈、晾干，統(tǒng)計(jì)其根上的胞囊數(shù)。鑒定調(diào)查表格見(jiàn)附錄A?？剐栽u(píng)價(jià)生理小種鑒別大豆胞囊線蟲(chóng)生理小種劃分具體見(jiàn)附錄B。鑒定有效性評(píng)價(jià)感病對(duì)照品種Lee根系上的胞囊數(shù)應(yīng)在30.0個(gè)以上，抗性級(jí)別達(dá)高感，視為該次鑒定有效?？剐约?jí)別劃分根據(jù)根系平均胞囊數(shù)進(jìn)行抗性級(jí)別劃分，劃分依據(jù)見(jiàn)表1。大豆對(duì)胞囊線蟲(chóng)的抗性級(jí)別劃分依據(jù)抗性級(jí)別抗性類別胞囊數(shù)與癥狀0免疫（I）（根系胞囊數(shù)為0，植株生長(zhǎng)正常）1高抗（HR）（0＜根系胞囊數(shù)≤3.0，植株正常生長(zhǎng)）3抗（R）（3.0＜根系胞囊數(shù)≤10.0，植株生長(zhǎng)基本正?；虿糠职S）7感（S）（10.0＜根系胞囊數(shù)≤30.0，植株矮小，葉片發(fā)黃、結(jié)實(shí)少）9高感（HS）（根系胞囊數(shù)＞30.0，植株不結(jié)實(shí)，干枯死亡）重復(fù)鑒定當(dāng)鑒定結(jié)果為抗或高抗時(shí)（抗性級(jí)別劃分依據(jù)見(jiàn)表1），應(yīng)進(jìn)行重復(fù)鑒定確定其抗性。若重復(fù)鑒定結(jié)果有差異，以抗性級(jí)別低的結(jié)果為準(zhǔn)。確定抗性后，將抗性品種移栽。

（資料性）

調(diào)查用表大豆抗胞囊線蟲(chóng)鑒定調(diào)查表大豆抗胞囊線蟲(chóng)鑒定調(diào)查表見(jiàn)表A.1。表A.1年大豆抗胞囊線蟲(chóng)鑒定調(diào)查匯總表播種日期：鑒定編號(hào)品種名稱出苗日期調(diào)查日期胞囊數(shù)平均胞囊數(shù)病情指數(shù)抗性評(píng)價(jià)1234567891012345……調(diào)查人：記載人：

（資料性）

生理小種鑒別大豆胞囊線蟲(chóng)生理小種的鑒別有兩種模式，一種為傳統(tǒng)的Riggs鑒別模式（大豆胞囊線蟲(chóng)生理小種Riggs鑒別模式見(jiàn)表B.1），共4份材料，分別為Pickett、Peking、PI88788、PI90763，根據(jù)寄主根系平均胞囊指數(shù)來(lái)確定大豆胞囊線蟲(chóng)小種；一種為HG分類系統(tǒng)（大豆胞囊線蟲(chóng)生理小種HG鑒別模式見(jiàn)表B.2），輔助鑒別線蟲(chóng)是否變異，共7份材料，分別為PI548402、PI88788、PI90763、PI437654、PI209332、PI89772、PI548316。根據(jù)寄主根系平均胞囊數(shù)計(jì)算胞囊指數(shù)（FI），按照表B.1和表B.2劃分標(biāo)準(zhǔn)確定生理小種。FI=（供試品種胞囊數(shù)/感病對(duì)照品種胞囊數(shù)）×100%；大豆胞囊線蟲(chóng)生理小種Riggs鑒別模式鑒別寄主小種類型12345678910111213141516Pickett-+-+++--++++-Peking-+-++-++++-+PI88788++-+-++++PI90763+--++-+-+-+++注：“+”表示