藥物分析知識點

藥分

第一章

1.藥物進行鑒別含量測定檢查的意義和相應(yīng)的方法：

鑒別是根據(jù)藥品的某些物理、化學(xué)或生物學(xué)特性進行的試驗，以判定已知藥物的真?zhèn)危?/p>

含量測定是指采用藥品標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的試驗方法，對藥品中有效成分（API）的含量進行測定，

一般可采用化學(xué)、儀器或生物測定方法；

檢查是對藥品的安全性、有效性、均一性和純度四個方面的狀態(tài)所進行的試驗分析。

2.中國藥典，英文縮寫ChP,收載國家藥品標(biāo)準(zhǔn)。

2015版由一部、二部、三部、四部及其增補本組成。一部收載中藥，二部收載化學(xué)藥品，三

部收載生物制品，四部收載通則和藥用輔料

國家藥品標(biāo)準(zhǔn)由凡例與正文及其引用的通則共同構(gòu)成。

（1）凡例是正確使用《中國藥典》進行藥品質(zhì)量檢定的基本原則，是對《中國藥典》正文、

通則及其質(zhì)量檢定有關(guān)的共性問題的統(tǒng)一規(guī)定。

（2）正文就是各品種藥品標(biāo)準(zhǔn)的具體內(nèi)容。通則主要收載制劑通則、通用檢測方法和指導(dǎo)原

則。

（3）性狀是對藥品的外觀、臭、味、溶解度以及物理常數(shù)等的規(guī)定。

通常反映藥品特有的物理性質(zhì)，在一定程度上反映藥品的質(zhì)量特性。

3.溶解度（7個等級）：極易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、極微溶解、幾乎不溶或不溶

4.物理常數(shù)包括相對密度、儲程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、吸收系數(shù)等；

其測定結(jié)果不僅對藥品具有鑒別意義，也可反映藥品的純度，是評價藥品質(zhì)量的主要指標(biāo)之一。

5.精確度：稱重與量?。?舍6入5成雙）；

精密稱定指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一；

稱定是百分之一；

約是±10%；

恒重系指供試品連續(xù)兩次干燥或熾灼后稱重的差異在0.3mg以下的重量。

6.熔點：由固態(tài)熔化成液態(tài)的溫度、熔融同時分解的溫度、在熔化時自初熔至全熔的一段溫度。

鑒別藥物和反映藥物的純雜程度（純度降低，熔點降低，熔距增加）

7.旋光度：平面偏振光通過含有某些光學(xué)活性化合物的液體或溶液時，能引起旋光現(xiàn)象，使偏

振光的平面向左或向右旋轉(zhuǎn)。

左旋（-）,右旋（+）

8.吸收系數(shù)：用于定性和定量分析，光吸收能力

9.藥物的鑒別是根據(jù)藥物的特性，采用專屬可靠的方法，證明已知藥物真?zhèn)蔚脑囼灐?/p>

不是對未知物質(zhì)的定性鑒定或確證分析試驗。

10.藥物檢查（4個方面）：安全性、有效性、均一性、純度

第AA"一—-草

1.鑒別項目：性狀、一般鑒別（通則）、專屬鑒別【同類或相同母核】（正文）

2.一般鑒別：

（-）有機氟化物：氧瓶燃燒法進行有機破壞，氫氧化鈉為吸收液，吸收成為無機氟化物，與

茜素氟藍、硝酸亞車市在ph4.3溶液中形成藍紫色絡(luò)合物。

（二）有機酸鹽：

①水楊酸鹽（酚羥基或羥基跟酸成酯的）…-中性或弱酸性，與三氯化鐵生成配位化合物

中性紅，弱酸紫

稀鹽酸，析出白色水楊酸沉淀，分離，醋酸餒溶解。【弱酸性抑制解離】；

②酒石酸鹽一中性，氨制硝酸銀，水浴加熱，銀鏡?！具€原性】

（三）芳香第一類（伯鏤基）：

稀鹽酸，亞硝酸鈉+胭溶液+堿性B蔡酚，生成粉紅到猩紅色沉淀

【堿性，還原性，重氮偶合反應(yīng)】

（四）托烷生物堿類（蔗若酸，Vitali反應(yīng)）

水解成葭若酸，硝酸轉(zhuǎn)為三硝基衍生物，氫氧化鉀醇溶液成醍，顯深紫色。

（五）無機金屬鹽（焰色反應(yīng)）：

鈉黃、鉀紫、鈣磚紅、車貝黃綠色（綠玻璃顯藍色）

鏤鹽+過量氫氧化鈉加熱+紅色石蕊試紙顯藍或硝酸亞汞濾紙顯黑

（六）無機酸根

3.鑒定方法有化學(xué)反應(yīng)法、色譜法、光譜法、顯微鑒別（中藥及其制劑）、生物學(xué)法、指紋圖

譜與特征圖譜鑒別

①化學(xué)鑒別法：

（一）呈色反應(yīng)

（二）沉淀生成反應(yīng)

（三）熒光反應(yīng)

（四）氣體生成反應(yīng)

（五）使試劑褪色的鑒別

（六）測定生成物熔點

②光譜法：紫外光譜鑒別、紅外光譜鑒別（組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥，IR）、近紅外光譜

法、原子吸收法、核磁共振法、質(zhì)譜、粉末X射線衍射法

③色譜法：薄層色譜鑒別法（TLC）--標(biāo)準(zhǔn)對照法、加標(biāo)法、雜質(zhì)排除法，最優(yōu)0.3?0.5、

高效液相色譜、氣相色譜

第三章

1.藥物中的雜質(zhì)系指規(guī)定工藝和規(guī)定原輔料生產(chǎn)的藥品中，由生產(chǎn)工藝或原輔料帶入的藥物自

身以外的其他物質(zhì)，或在貯存過程中產(chǎn)生的其他物質(zhì)。

2.雜質(zhì)的分類：

（一）來源：一般雜質(zhì)和特殊雜質(zhì)；

一般雜質(zhì)的含量高低與生產(chǎn)工藝水平密切相關(guān)，也稱為信號雜質(zhì)

（二）毒性：毒性雜質(zhì)和信號雜質(zhì)；

信號雜質(zhì)一般無毒（如氯化物、硫酸鹽等），但其含量的多少可反映出藥物的純度、生產(chǎn)工藝

水平以及生產(chǎn)過程中的問題

（三）化學(xué)性質(zhì)：無機雜質(zhì)、有機雜質(zhì)及有機揮發(fā)性雜質(zhì)（殘留溶劑）

3.雜質(zhì)限量：藥物中所含雜質(zhì)的最大允許量，通常用百分之幾或百萬分之幾表示。

4.雜質(zhì)限量的控制方法一般分為限量檢查法（對照法、靈敏度法、比較法）和定量測定法。

L=CV/S

5.雜質(zhì)的常用檢查法：

①化學(xué)法（顯色反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、生成氣體、滴定法）；

②色譜法

薄層色譜法-雜質(zhì)對照品法、供試品溶液的自身稀釋對照法、兩法并用法、對照藥物法

高效液相色譜法--外標(biāo)法雜質(zhì)對照法、加校正因子的主成分自身對照法、不加校正因子的主成

分自身對照法、面積歸一法

氣相色譜法

毛細(xì)管電泳法；

③光譜法（紫外-可見分光光度法、紅外分光光度法、原子吸收分光光度法）；

④其他方法（熱分析法、酸堿度檢查、物理性狀檢查）

6.一般雜質(zhì)的檢查：

（一）氯化物檢查法：對照法

AgCI有感光性

標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液（10ugCI/ml）,

硝酸的作用：可避免弱酸銀鹽；加速氯化銀沉淀生成并產(chǎn)生較好的乳濁

--50ml供試品中10ml硝酸為宜

供試品有顏色用內(nèi)消色法，納比色管

（二）硫酸鹽檢查法：稀鹽酸+氯化鋼===硫酸釧白色渾濁。

供試品要中性。

標(biāo)準(zhǔn)硫酸鉀溶液（100ugS04/ml）

鹽酸作用：防止碳酸鋼或磷酸鋼等弱酸形成鐵鹽沉淀對比濁的影響，過酸會使硫酸鋼溶解，降

低檢查靈敏度

（三）鐵鹽檢查法：

硫氟酸鹽法…鐵鹽+鹽酸+硫氟酸鹽=紅色可溶性硫氟酸鐵配離子

與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液（10ugFe/ml）比

Fe3+為5?90ug時，，吸光度與濃度呈良好線性關(guān)系

鹽酸酸性下，防止三價鐵離子水解

加過硫酸筱氧化劑既可氧化供試品中二價為三價，也防止由于光線使硫氧酸鐵還原或分解褪色

（四）重金屬檢查法：

能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)，以鉛為限量。

①硫代乙酰胺法

用于溶于水、稀酸或與水互溶有機溶劑

（甲管-標(biāo)準(zhǔn)品，乙-供試品，丙-標(biāo)準(zhǔn)+供試）

標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液（10ugPb/ml）,PH3.0-3.5,醋酸鹽緩沖液；

②熾灼后的硫代乙酰胺法

用于難溶于水、稀酸或與水互溶有機溶劑的有機藥物以及含有可與金屬離子強配位基團的芳環(huán)、

雜環(huán)藥物

③硫化鈉法

用于溶于堿性水溶液而難溶于稀酸或在稀酸中即生成沉淀的藥物，如磺胺類、巴比妥類藥物。

（五）神鹽檢查法：

①古蔡氏法（不含sb或少量）

鋅與酸生成新生態(tài)氫與種鹽生成揮發(fā)性神化氫，浪化汞試紙產(chǎn)生黃色至棕色的神斑

（比較顏色的深淺）

標(biāo)準(zhǔn)硅溶液（1ugAs/ml）

碘化鉀及氯化亞錫的催化作用：五價碎在酸性溶液中能被鋅還原成碑化氫，但生成碑化氫的速

度較三價神慢，有利于生成碑化氫的反應(yīng)不斷進行，抑制睇化氫的生成，形成zn-sb電池去極

化，使氫氣均勻連續(xù)發(fā)生

醋酸鉛棉花的作用：鋅中可含少量硫代物酸性下與淡化汞作用生成硫化汞的色斑，這里用來排

除干擾

②二乙基二硫代氨基甲酸銀法（DDC-Ag）

與上一個一樣生成碎化氫，還原二乙基二硫代氨基甲酸銀產(chǎn)生紅色膠態(tài)銀；

③白田道夫法對含睇較高的藥物，葡萄糖酸睇鈉

（）次磷酸法

3（六）干燥工o重測定法：主要檢查藥物中的水分及其他揮發(fā)性物質(zhì)。

常壓恒溫干燥法、減壓干燥法或恒溫減壓干燥法、干燥劑干燥法。

（七）水分測定法（三種水：自由水、結(jié)合水、非結(jié)合水）：

費休氏法（碘與水1:1）

（A）熾灼殘渣檢查法：

系指有機藥物或揮發(fā)性無機藥物，在硫酸存在下進行碳化和熾灼所殘留的非揮發(fā)性無機雜質(zhì)的

硫酸鹽灰分。

一般使熾灼殘渣量為1~2mg,殘渣限量為0.1%?0.2%,700-800℃?

一般重金屬如鉛于高溫下易揮發(fā)，溫度在500?600℃。

（九）易炭化物檢查法：

藥物存在遇硫酸易炭化或氧化而呈色的微量有機雜質(zhì)

目視比色法（三類對照液…不同色調(diào)色號的標(biāo)準(zhǔn)比色液；

比色用氯化鉆液（紅）、重倍酸鉀液（黃）、硫酸銅液（藍色）；高鎰酸鉀液（紫））。

（十）殘留溶液測定法：氣相色譜法。

（十一）溶液顏色檢查法：控制有色雜質(zhì)的限量，目視比色法、吸光度比較法（分光光度法）、

色差計法。

（十二）溶液的澄清度檢查法：不溶性雜質(zhì)（濁度）比濁法，傘棚燈。

第四章

1.含量系指藥物中所含主成分的量，是評價藥物質(zhì)量的重要指標(biāo)。

采用的分析方法一般要求操作簡便、結(jié)果準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好。

2.定量分析方法：容量分析法、光譜分析法、色譜分析法

（1）容量分析法的特點：操作簡便快速、耐用性高、（相對誤差在02%以下）測定結(jié)果準(zhǔn)確、

專屬性差。廣泛應(yīng)用于化學(xué)原料藥測定，較少制劑。

含量計算的方法：

直接滴定法、間接滴定法一生成物滴定法、剩余量滴定法（大多進行空白試驗校正）

3.滴定度系指每1ml規(guī)定濃度的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y藥物的質(zhì)量，用mg表示。

（2）光譜分析法：

①紫外-可見分光光度法：朗伯比爾定律，低于最大吸收波長，吸光度讀數(shù)在0.3?0.7之間為

宜o

含量測定方法：對照品比較法（原料藥的百分含量、固體制劑含量）

②熒光分光光度法

（3）色譜分析法：色譜行為差異

①高效液相色譜法，腐蝕性最強

色譜系統(tǒng)適用性試驗通常包括理論塔板數(shù)、分離度、靈敏度、拖尾因子和重復(fù)性五個參數(shù)。測

定法：內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法。

②氣相色譜法

藥物分析方法的驗證：鑒別試驗、限度或定量檢查、原料藥或制劑中有效成分含量測定、制劑

中其他成分的測定。

4.分析方法驗證的內(nèi)容：準(zhǔn)確度、精密度（重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性）、專屬性、檢查限、

定量限、線性、范圍和耐用性。

<1>準(zhǔn)確度系指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。

原料藥…采用對照品測定或本法所得結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方法測定的結(jié)果進行比較。

制劑一考察輔料影響。

<2>精密度系指在規(guī)定的條件下，同一份均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程

度，一般用偏差、標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD）或相對偏差（RSD）表示。維生素B1的實驗。

<3>專屬性系指在其他成分存在下，采用的分析方法能正確測定被測物質(zhì)的能力。

<4>檢測限（LOD）系指試樣中被測物質(zhì)能被檢測出的最低量。

<5>定量限（LOQ）系指試樣中被測物質(zhì)能被定量測定的最低量其測定結(jié)果應(yīng)應(yīng)符合準(zhǔn)確度和

精密度要求。

<6>線性系指在設(shè)計的范圍內(nèi)，測定響應(yīng)值與試樣中被測物質(zhì)濃度之間呈正比關(guān)系的程度。

<7>范圍系指分析方法能達到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性要求時的高低限濃度或量的區(qū)間。

<8>耐用性系指在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。

（一般因素和色譜條件會變）

第五章

體內(nèi)藥物分析采用的體內(nèi)樣品包括血液、尿液、唾液、頭發(fā)、臟器組織、乳汁等。

樣品的制備：

（1）血樣--離心分離（血漿/淡黃色；血清/淡黃色）

（2）組織一沉淀蛋白法、酸水解或堿水解法、酶水解法

第六章

1.芳酸類非俗體抗炎藥，同時具有游離竣基（酸性）和苯環(huán)。

2.三氯化鐵反應(yīng)：

（1）水楊酸反應(yīng)：水楊酸的水溶液加三氯化鐵試液，生成紫堇色配位化合物，在中性或弱酸

性（ph4?6）下進行。

（2）酚羥基反應(yīng)：對乙酰氨基酚的水溶液加三氯化鐵顯藍紫色。

3.縮合反應(yīng)：酮洛芬具有二苯甲酮結(jié)構(gòu)，酸性與二硝基苯朋縮合生成橙色偶氮化合物

4.重氮化偶合反應(yīng)：

對乙酰氨基酚有潛在芳伯氨基，稀鹽酸加熱水解對氨基酚，酸性下與亞硝酸鈉、堿性貝塔蔡酚

生成紅色偶氮化合物。

阿司匹林與碳酸鈉加熱水解得水楊酸鈉及醋酸鈉，加過量稀硫酸酸化生成白色水楊酸沉淀和醋

酸臭氣。

5.光譜法：（1）紫外-可見分光光度法；（2）紅外分光光度法

6.色譜法：

（一）薄層色譜法；

（二）高效液相色譜法

7.含量測定：

原料藥除對乙酰氨基酚采用紫外-可見分光光度法、雙氯芬酸鈉與毗羅昔康采用非水溶液滴定

法，主要采用酸堿滴定法。

酸堿滴定法包括直接滴定法和剩余量回滴法。

直接滴定法系指藥物溶于中性乙醇、甲醇或丙酮中，以酚獻、酚紅或酚磺獻為指示劑，用氫氧

化鈉滴定液直接滴定；返滴定法；水解后剩余量滴定法。

藥物制劑用紫外-可見分光光度法和高效液相色譜法。

8.對氨基水楊酸鈉（不溶于醴）的特殊雜質(zhì)：間氨基酚（溶于酸）…來源于原料有剩余，用雙

向滴定法，鹽酸變色。

第七章

1.留體激素類藥物是一類具有環(huán)戊烷并多氫菲母核的激素類藥物

按照碳10、碳13、碳17位取代基不同，分為雄幽烷、雌幽烷和孕留烷。

2.留體激素類藥物按藥理作用可分為腎上腺皮質(zhì)激素和性激素（雄激素及蛋白同化激素、孕激

素和雌激素）

（1）腎上腺皮質(zhì)激素：氫化可的松、醋酸地塞米松等。

結(jié)構(gòu)特征：A環(huán)有△4-3酮基，共軌體系，240nm有紫外吸收，向長波移動；

碳17位為a醇酮基，還原性；部分藥物的碳6或碳9位有鹵素取代。

（2）雄激素與蛋白同化激素：睪酮。

結(jié)構(gòu)特征：A環(huán)有△4-3酮基，具有紫外吸收；

碳17位有羥基，部分藥物的羥基被酯化。

（3）孕激素：黃體酮。

結(jié)構(gòu)特征：A環(huán)有△4-3酮基；

碳17位有甲酮基或乙快基；多數(shù)在碳17位有羥基，部分被酯化。

米非司酮為抗孕激素藥物，有留體母核結(jié)構(gòu)。

（4）雌激素：雌二醇。

結(jié)構(gòu)特征：A環(huán)為苯環(huán)，碳3位有酚羥基，有的成酯；

碳17位有羥基，有的羥基成酯；有些碳17位有乙快基。

3.苗體類藥物均為有留體母核的弱極性有機化合物，均有旋光性、脂溶性和紫外特征吸收。

鑒別：

（一）性狀特征：性狀與溶解度、熔點、比旋度、吸收系數(shù)

（二）化學(xué)鑒別法：

①與強酸的顯色反應(yīng)，與硫酸的呈色反應(yīng)應(yīng)用廣泛，反應(yīng)機理是酮基先質(zhì)子化形成正碳離子與

硫酸氫根作用呈色。

②官能團反應(yīng)：

碳17a醇酮基的呈色反應(yīng)，能與四氮噗試液【還原成有色的甲嗜/TTC2,3,5-三苯基氯化銅

四氮陛紅/BT藍四氮嗖紅藍】、氨制硝酸銀試液（多倫試液）以及堿性酒石酸酮試液（斐林試

液）反應(yīng)呈色；

酮基的呈色反應(yīng)（碳3和碳20）和一些段基試劑（2,4-二硝基苯助、硫酸苯月井、異煙腓）形

成黃色腺用于鑒別。

比色含量測定，異煙脫可選擇作用于碳3酮基，但目前已被高效液相色譜法代替；

碳17甲酮基的呈色反應(yīng)，含有甲酮基以及活潑亞甲基時，能與亞硝基鐵氟化鈉、間二硝基酚、

芳香醛類反應(yīng)呈色。

黃體酮可與亞硝基鐵氟化鈉反應(yīng)生成藍紫色產(chǎn)物（齊默爾曼反應(yīng)，專屬、靈敏的鑒別法）；

酚羥基的呈色反應(yīng)，雌激素碳3位酚羥基可與重氮苯磺酸生成紅色偶氮染料；

煥基的沉淀反應(yīng)遇硝酸銀試液生成白色的快銀沉淀；

鹵素反應(yīng)，有氟或氯取代，氧瓶燃燒法或回流水解法將鹵原子轉(zhuǎn)化為無機離子；

酯的反應(yīng)，碳17或21位有羥基的酯，一般先水解生成相應(yīng)竣酸，再鑒別。

③紫外-可見分光光度法

④紅外分光光度法

⑤.色譜法

4.有光物質(zhì)的檢查：

薄層色譜法一自身稀釋對照法，比較斑點深淺；

高效液相色譜法一自身對照法，看峰個數(shù)和峰面積。

①硒的檢查：因為二氧化硒脫氫引入雜質(zhì)，氧瓶燃燒法破壞，硝酸溶液為吸收液，二氨基蔡

比色法測定含量。

②殘留溶劑的檢查：氣相色譜法。

③游離磷酸鹽的檢查：磷鋁酸比色法，一定濃度磷酸二氫鉀作為標(biāo)準(zhǔn)磷酸鹽對照溶液，與磷鑰

酸顯色，740nm測吸光度。

含量測定：高效液相色譜法、紫外-可見分光光度法（紫外分光光度法--幽體激素在240nm有

最大吸收，雌激素在280nm有最大吸收；比色法-…四氮畦比色法/柯柏反應(yīng)比色法，雌激素與

硫酸-乙醇呈色反應(yīng)，520nm有最大吸收，雌激素類的靈敏測定/異煙腳法）

第八章

1.藥物制劑（FPP）是原料藥物或與適宜的輔料制成的供臨床使用的劑型，是活性藥物成分

（API）的臨床使用形式。

2.原料藥物分析與藥物制劑分析相比：

（1）原料藥物的性