(高清版)GB∕T 38793-2020 生物產(chǎn)品降解雜環(huán)類農(nóng)藥功效評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范

ICS07.080A21中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)生物產(chǎn)品降解雜環(huán)類農(nóng)藥功效評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范T國家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)ⅠGB／T38793—2020本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：河北農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院、北京工商大學(xué)、河北科技大學(xué)、北京薩姆伯科技有限公司、浙江東杰生物科技有限責(zé)任公司、中國生物技術(shù)發(fā)展中心。1GB／T38793—2020生物產(chǎn)品降解雜環(huán)類農(nóng)藥功效評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了生物產(chǎn)品降解雜環(huán)類農(nóng)藥功效評(píng)價(jià)基本要求、過程要求、證實(shí)方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于生物產(chǎn)品降解雜環(huán)類農(nóng)藥效果評(píng)價(jià)。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB21523雜環(huán)類農(nóng)藥工業(yè)水污染物排放標(biāo)準(zhǔn)3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1生物產(chǎn)品由生物技術(shù)制備的產(chǎn)品。注：本標(biāo)準(zhǔn)中的生物產(chǎn)品特指具有降解雜環(huán)類農(nóng)藥功能的微生物及酶產(chǎn)品。3.2雜環(huán)類農(nóng)藥分子中含有雜環(huán)結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物農(nóng)藥。注：包括莠去津、吡蟲啉、三唑酮、多菌靈、百草枯、氟蟲腈等。4基本要求4.1生物產(chǎn)品標(biāo)簽或說明書有明確的微生物和酶名稱的方可開展評(píng)價(jià)。4.2科學(xué)、公正地開展功效評(píng)價(jià)工作，評(píng)價(jià)過程及評(píng)價(jià)方法科學(xué)。4.3評(píng)價(jià)結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，采用科學(xué)的統(tǒng)計(jì)方法進(jìn)行比較，不得偽造、變?cè)鞕z驗(yàn)報(bào)告或者數(shù)據(jù)、結(jié)果。4.4按照相關(guān)法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)要求對(duì)樣品進(jìn)行接收、保管、交接、配制、回收、退還／銷毀處理，并制定相應(yīng)的管理制度和程序。4.5應(yīng)具備功效評(píng)價(jià)相適應(yīng)的專業(yè)技術(shù)人員。4.6實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件應(yīng)滿足評(píng)價(jià)要求，開展微生物評(píng)價(jià)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)符合生物安全一級(jí)要求。4.7功效評(píng)價(jià)使用的儀器與設(shè)備種類、數(shù)量、性能、量程、精度應(yīng)能滿足功效評(píng)價(jià)的需要。微生物產(chǎn)品功效評(píng)價(jià)需要的器皿材料應(yīng)經(jīng)過無菌處理。4.8功效評(píng)價(jià)使用的試劑應(yīng)為分析純，水應(yīng)符合GB/T6682規(guī)定的二級(jí)水。4.9功效評(píng)價(jià)選用的雜環(huán)類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品純度應(yīng)大于或等于95%;應(yīng)根據(jù)微生物種類選擇培養(yǎng)基。4.10實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，實(shí)驗(yàn)材料應(yīng)經(jīng)過無害化處理，保證實(shí)驗(yàn)環(huán)境的潔凈與安全要求。2GB／T38793—20205過程要求應(yīng)符合表1的要求。項(xiàng)目產(chǎn)品種類微生物產(chǎn)品酶產(chǎn)品處理設(shè)計(jì)供試樣品、失活樣品、空白對(duì)照雜環(huán)類農(nóng)藥選擇根據(jù)評(píng)價(jià)需要選擇一種或幾種重復(fù)次數(shù)不少于3次反應(yīng)體系按正交試驗(yàn)結(jié)果確定aa微生物和酶產(chǎn)品說明書中有明確反應(yīng)體系的按說明書要求進(jìn)行。5.2溶液制備準(zhǔn)確稱取一定量的雜環(huán)類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇（液相色譜法測(cè)定或者丙酮（氣相色譜法測(cè)定）配制成100mg/L的農(nóng)藥儲(chǔ)備液或直接購買帶標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書、質(zhì)量濃度為100mg/L的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品，4℃冷藏，用錫箔紙避光保存。試驗(yàn)時(shí)稍微加熱溶解完全，用緩沖液稀釋成一定濃度的工作液，現(xiàn)用現(xiàn)配。5.3樣品處理供試微生物和酶產(chǎn)品若為塊狀固體產(chǎn)品應(yīng)進(jìn)行研磨處理，稱取一定質(zhì)量的供試固體樣品，采用不同pH的緩沖液按要求稀釋為不同質(zhì)量濃度(g/mL)備用；若供試樣品為液體，用不同pH的緩沖液按要求稀釋為不同濃度（體積比）備用。取部分供試樣品在121℃處理30min,備用。用不同pH的緩沖液代替待測(cè)生物產(chǎn)品，備用。5.4反應(yīng)體系確定設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)，宜選取底物濃度、樣品濃度、pH值、溫度、溶氧量（搖床轉(zhuǎn)速）、時(shí)間等影響微生物或酶產(chǎn)品作用的因素確定反應(yīng)體系。5.5.1微生物產(chǎn)品降解處理取250mL三角瓶9個(gè)，其中空白樣品3個(gè)、供試樣品3個(gè)、失活樣品3個(gè)。按照最佳反應(yīng)體系確定的底物濃度、微生物添加量，制備成反應(yīng)體系為100mL的培養(yǎng)液，在最佳反應(yīng)體系條件下進(jìn)行降解反應(yīng)。GB／T38793—20205.5.2酶產(chǎn)品降解處理取50mL離心管9個(gè)，空白樣3個(gè)，供試樣品3個(gè)，失活樣品3個(gè)。按照最佳反應(yīng)體系確定的底物濃度、酶的添加量，制備成反應(yīng)體系為15mL的反應(yīng)液，在最佳反應(yīng)體系條件下進(jìn)行降解反應(yīng)。6證實(shí)方法6.1底物濃度測(cè)定降解處理結(jié)束后，取15mL的反應(yīng)液，按照GB21523的規(guī)定進(jìn)行底物濃度測(cè)定。6.2降解率計(jì)算按式(1)計(jì)算：式中：犡i—底物原始質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);—供試樣品降解反應(yīng)終點(diǎn)底物質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);—失活樣品降解反應(yīng)終點(diǎn)底物質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L);—空白樣品降解反應(yīng)終點(diǎn)底物質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L)。以平行樣的平均值為最終的降解率值，計(jì)算結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后兩位。6.3.1功效評(píng)價(jià)結(jié)果以降解率表示，見表2。表2