人的唾液淀粉酶最適宜ph值的探索

人的唾液淀粉酶最適宜ph值的探索一、作者：XXX二、地址：XXX三、摘要本實驗用唾液淀粉酶為材料來觀察酶活性受pH影響的情況，實驗結(jié)果表明，在pH為單一變量時，pH值的變化會影響酶的活性。在pH6.6的時候，唾液淀粉酶有最大活性，由于實驗受到各種因素的影響，所以得到的結(jié)果會與理論值有一定的誤差。四、目的：測定酶的最適pH值，進一步了解酶生物學(xué)活性五、關(guān)鍵詞：pH值；酶；酶活性；唾液淀粉酶六、前言生物體內(nèi)的酶是對其特異底物起高效催化作用的蛋白質(zhì)和核酸，前者是機體催化各種代謝反應(yīng)最重要的催化劑。酶分子中的許多極性基團。在不同的pH條件下解離狀態(tài)不同，其所帶電荷的種類和數(shù)量也各不相同，酶活性中心的某些必需基團往往僅在某一解離狀態(tài)時才容易同底物結(jié)合或具有最大的催化活性。許多具有可解離基團的底物和輔酶的荷電狀態(tài)也受pH改變的影響，從而影星酶對它們的親和力。此外，pH還可以影響酶活性中心的空間構(gòu)象，從而影響酶的活性。因此，pH的改變對酶的催化作用影響很大。酶催化活性最高時反應(yīng)體系的pH稱為酶促反應(yīng)的最適pH。唾液中含有唾液淀粉酶，淀粉在該酶的催化下會隨著時間的延長而出現(xiàn)不同水解程度，碘液與淀粉及其不同水解程度的水解產(chǎn)物呈現(xiàn)不同顏色，用分光光度計測量哥溶液在660nm處的吸光度從而間接測出唾液淀粉酶的最適pH值。結(jié)果測得A在pH值6.0~7,6范圍內(nèi)變化并且隨著pH的變化而變化，pH=6.6左右，吸光度值最低，所以所測唾液淀粉酶最適pH約為6.6。七、材料與方法1、材料與試劑1)人唾液中的唾液淀粉酶2）中試管、試管架、吸耳球、毛刷、小燒杯、漱口水3）37℃恒溫水浴箱、分光光度計4）1.0ml、5.0ml、10.0ml刻度吸管、膠頭滴管5）0.2mol/L磷酸二氫鈉溶液、0.2mol磷酸氫二鈉溶液、碘液、蒸餾水方法（1）收集唾液：用少量蒸餾水漱口（為了清除口腔內(nèi)食物殘渣），收集唾液2ml，。（2）配制不同pH緩沖液pH值0.2mol/L磷酸氫二鈉（ml）0.2mol/L磷酸二氫鈉（ml）6.0 0.615 4.3856.20.9254.0756.41.3253.6756.61.8753.1256.82.4502.5507.03.0501.9507.23.6001.4007.44.0500.9507.64.3500.650（3）摸索操作1）最適合加入的淀粉量（緩沖液pH=7)名稱試管12345蒸餾水ml0.90.90.90.90.9唾液稀釋10倍數(shù)（參考），ml0.10.10.10.10.1淀粉ml0.050．10．150.20.25混勻，37度水浴7.5分鐘碘3滴最適宜所以應(yīng)取淀粉0.15ml2）酶稀釋倍數(shù)的探索，其中ph=7，如下表名稱試管12345678910蒸餾水ml0.90.90.90.90.90.90.90.90.90.9淀粉ml0.150.150.150.150.150.150.150.150.150.15唾液稀釋倍數(shù)，取0.1ml1：31：41:51:61:71:81:91:101:111:12混勻，37度水浴7.5分碘3滴最適宜所以應(yīng)取稀釋倍數(shù)9倍3）唾液淀粉酶的最適宜ph值名稱試管123456789淀粉ml0.150.150.150.150.150.150.150.150.15唾液稀釋倍數(shù)，取0.1ml9倍9倍9倍9倍9倍9倍9倍9倍9倍Ph（取0.9ml）6.06.26.46.66.87.07.27.47.6混勻，37度水浴7.5分碘3滴吸光度值0.027—0.0040.003—0.0060.0230.0330.1330.0720.081最好作圖在坐標紙上作出平滑曲線，取曲線最低點對應(yīng)的pH值，即為唾液淀粉酶的最適pH值結(jié)果圖表討論、理論上是“U”形的，導(dǎo)致出現(xiàn)“W”形的原因有：1、操作原因比色杯光滑面不夠光滑；2、在測定吸光度的時候拉得不到位；3、儀器（吸光計）不夠精確；4、1---7號試管中除了淀粉---碘的絡(luò)合物可以吸收660的光之外，還有唾液淀粉酶，也屬于蛋白質(zhì)，變性的量隨著pH的變化而相應(yīng)地發(fā)生改變，通過資料的查詢，我們得以了解到變性前蛋白質(zhì)的吸光度在280nm處最大，而變性后吸收峰也會改變。雖然如此，但是在660nm處會有一定的吸收值，所以也會影響到最終結(jié)果的測定。、對于出現(xiàn)負值原因有下：1、調(diào)零時沒調(diào)好，導(dǎo)致負值的出現(xiàn)；參考文獻[1]查錫良,周春燕.生物化學(xué)[M],第七版,北京:人民衛(wèi)生出版社，2010.[2]許冰,原媛,趙文獻.