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鏈球菌屬微生物臨床檢驗(yàn)摘要】鏈球菌屬微生物在最初進(jìn)行分類的時(shí)候囊括有40多種類別,后來(lái)在人們進(jìn)行更加細(xì)致的分類后,有些種類就被排除了。所以目前的鏈球菌屬被人們分成了6個(gè)大群和30個(gè)種類加上另外兩個(gè)獨(dú)立的類型。DNA中的G+C在鏈球菌所占的比例為34m0.1%-46m0.1%[1]??梢杂脕?lái)檢驗(yàn)鏈球菌的學(xué)科有衛(wèi)生微生物學(xué)和臨床微生物學(xué)。下文我們將細(xì)致的介紹檢驗(yàn)方法。
關(guān)鍵詞 鏈球菌屬;臨床;檢驗(yàn);反應(yīng)
1臨床樣本的采集和處理
1.1病原體標(biāo)本
從患者身上及可能受污染的環(huán)境和衣物中采集標(biāo)本,并用無(wú)菌試管進(jìn)行保存在進(jìn)行檢測(cè)。
1.2臨床標(biāo)本
收集血液、膿液、分泌物等進(jìn)行送檢。
2鏈球菌屬微生物的分類
因?yàn)樵摼鷮俚姆N類十分多樣,目前我們臨床上大多都一直使用Lancefield血清學(xué)的辦法來(lái)對(duì)該菌群進(jìn)行分群(A、B、C、D、F、G等18個(gè)群),除此之外我們還可以通過它們是否能夠發(fā)生溶血的現(xiàn)象(溶血、溶血或草綠色溶血、溶血或不溶血)來(lái)進(jìn)行大致的分類。臨床上最常見的就是化膿性鏈球菌,它屬于A群且溶血的鏈球菌群[2]。
2.1鏈球菌的形態(tài)與染色
革蘭陽(yáng)性球菌,它的固體培養(yǎng)基之上會(huì)呈現(xiàn)出單個(gè)或者成雙的排列,很少會(huì)出現(xiàn)鏈狀式的排列,它在肉湯的培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)長(zhǎng)鏈狀的排列,肺炎鏈球菌則會(huì)出現(xiàn)矛頭狀,成雙出現(xiàn)或者是鏈狀的排列。
2.2培養(yǎng)特性
鏈球菌落在血瓊脂平板上可呈現(xiàn)出三種不同的溶血現(xiàn)象:1.溶血的周圍出現(xiàn)灰綠色的狹窄的溶血環(huán);2.溶血的周圍有較大的完全透明的溶血環(huán);3.溶血(沒有溶血性)不發(fā)生任何溶血變化。肺炎鏈球菌的菌落是呈現(xiàn)中央有臍窩狀、表面十分光滑、呈灰色又較為扁平,而且四周還伴有草綠色的溶血環(huán)同時(shí)出現(xiàn)。
2.3生化反應(yīng)
觸酶試驗(yàn)后出現(xiàn)陰性,對(duì)許多的碳水化合物的分解因?yàn)榫N的不同而有不一樣的反應(yīng),鏈球菌是不能夠被膽汁所溶解的。
肺炎鏈球菌的膽鹽溶菌的試驗(yàn)會(huì)呈現(xiàn)出陽(yáng)性反應(yīng)。
2.4鏈球菌的鑒別方法及要點(diǎn)
(1)菌屬自身特征:革蘭陽(yáng)性球菌,呈現(xiàn)出單個(gè)、成雙或者是鏈狀的排列,菌落個(gè)體比較小,可以出現(xiàn)溶血、溶血或不溶血的現(xiàn)象,觸酶試驗(yàn)的結(jié)果為陰性。
(2)通過個(gè)體是否發(fā)生溶血及其他關(guān)鍵性的試驗(yàn),對(duì)鏈球菌進(jìn)行推測(cè)性的鑒定和大致分群。
A群種類的鏈球菌(例如化膿性的鏈球菌):出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,對(duì)于桿菌肽敏感。
B群種類的鏈球菌(例如無(wú)乳鏈球菌):菌落四周會(huì)出現(xiàn)溶血,在進(jìn)行CAMP試驗(yàn)時(shí),會(huì)呈陽(yáng)性;馬尿酸鈉試驗(yàn)時(shí),也會(huì)呈陽(yáng)性。
C群種類的鏈球菌(例如獸疫鏈球菌和馬鏈球菌等):使用馬尿酸鈉、6.5%氯化鈉耐鹽對(duì)其試驗(yàn)都會(huì)呈現(xiàn)為陰性。
D群種類的腸球菌(例如糞腸球菌、鳥腸球菌等):使用膽汁七葉苷、6.5%氯化鈉耐鹽對(duì)其進(jìn)行試驗(yàn)均為陽(yáng)性,可以在45℃生長(zhǎng)?,F(xiàn)這一類整體歸屬于腸球菌屬。
C、F及G群種類的鏈球菌都是使用最常見血清學(xué)方法來(lái)進(jìn)行鑒別。
2.5操作步驟
(1)涂片、染色,對(duì)菌落的特征進(jìn)行觀察,挑取可疑的菌落,再次涂片染色鏡檢。
(2)觸酶試驗(yàn),根據(jù)《觸酶試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程》進(jìn)行操作。
(3)鑒定,隨機(jī)的從血瓊脂平板上提取出純菌落,使用微生物的鑒定儀或傳統(tǒng)生化反應(yīng)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行細(xì)致的鑒定和深入的分析。
3檢驗(yàn)結(jié)果解釋與分析
(1)草綠色的鏈球菌是在人體內(nèi)的正常菌群之一,正常情況下是不會(huì)使人患病的,只有當(dāng)草綠色的鏈球菌在血液等無(wú)菌體液中出現(xiàn)的時(shí)候,進(jìn)行鑒定才有意義。
(2)如果通過檢測(cè),發(fā)現(xiàn)鏈球菌對(duì)青霉素十分敏感,鏈球菌霉素o對(duì)于氧氣相對(duì)敏感,而且它的抗原性特別強(qiáng)。同時(shí)該菌群有被認(rèn)為對(duì)許多抗生素例如阿莫西林、頭孢克洛、頭孢唑林等頭孢類藥物極其敏感,則不需要再次進(jìn)行上述的抗生素的藥敏試驗(yàn)。如果通過檢測(cè)發(fā)現(xiàn),肺炎鏈球菌菌落的苯唑西林抑菌圈大于或等于19mm,就應(yīng)該對(duì)其進(jìn)行青霉素、頭孢噻肟和頭孢曲松的MIC檢測(cè),因?yàn)檎呖赡軙?huì)出現(xiàn)青霉素的耐藥或中介現(xiàn)象。如果通過檢測(cè),發(fā)現(xiàn)鏈球菌對(duì)紅霉素敏感或者有耐藥行,則說明該菌對(duì)克拉霉素、阿奇霉素、地紅霉素敏感或者有耐藥行。近年來(lái)因?yàn)閷?duì)病原體和病菌對(duì)于抗生素例如青霉素、阿司匹林等產(chǎn)生了較強(qiáng)的抗藥性,所以給我們對(duì)于病人的臨床治療帶來(lái)了極大的困難。乙型鏈球菌它們對(duì)于青霉素、紅霉素、四環(huán)素、桿菌肽和磺胺藥等治療性藥物都特別的敏感,所以人們應(yīng)該針對(duì)其各類特性研制出針對(duì)它們的藥物或治療手段。
4臨床意義
化膿性鏈球菌(A群鏈球菌)它是造成人體出現(xiàn)化膿性感染的最主要病原菌中的一個(gè),它的使人發(fā)病的能力也是所有鏈球菌中最強(qiáng),它可以引起人們出現(xiàn)癰、蜂窩織炎、急性咽炎、丹毒、膿皰瘡、猩紅熱、醫(yī)源性傷口感染和產(chǎn)后感染等。而且感染了這類鏈球菌之后,也有可能引發(fā)生急、慢性風(fēng)濕熱和急性腎小球腎炎等嚴(yán)重的變態(tài)反應(yīng)性并發(fā)癥。無(wú)乳鏈球菌(B群鏈球菌)正常情況下他寄居于婦女陰道和人體腸道內(nèi),它的帶菌率可達(dá)到30%左右,這種菌會(huì)引起新生兒的感染。肺炎鏈球菌則寄生在健康人群的口腔、鼻咽部位,雖然它們屬正常菌群,但是也會(huì)會(huì)引起人們的急性肺炎或者是支氣管炎草綠色鏈球菌是人體上呼吸道正常菌群,通常不致病。
參考文獻(xiàn)
[1]中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委
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