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文檔簡(jiǎn)介
全國(guó)統(tǒng)編教材《畜產(chǎn)食品工藝學(xué)》配套教材
征求意見稿
《畜產(chǎn)食品工藝學(xué)》實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)
主編蔣愛民樊明濤
副主編李志成馬兆瑞丁武張靜
西北農(nóng)林科技大學(xué)
2003-08-06
前s
1985年西北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)系成立。1986年蔣愛民寫了《畜產(chǎn)食品工藝
學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》。隨后,蘇惠珊教授、張富新博士、樊明濤教授、李志成副教授、
馬兆瑞副教授、丁武博士、張靜博士、祝戰(zhàn)斌和韓非老師參加了《畜產(chǎn)食品工藝
學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》的修改和完善。結(jié)合我國(guó)特別是西部資源,經(jīng)過近20年的不斷改
進(jìn)和完善,《畜產(chǎn)食品工藝學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)》已經(jīng)形成了內(nèi)容先進(jìn)、實(shí)用性和針對(duì)性
強(qiáng)的明顯特色。
全國(guó)統(tǒng)編教材《畜產(chǎn)食品工藝學(xué)》2000年由中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社出版后,受到
好評(píng)。目前正在修改再版。根據(jù)要求,在西北農(nóng)林科技大學(xué)《畜產(chǎn)食品工藝學(xué)實(shí)
驗(yàn)指導(dǎo)》修改完善過程中,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)周光宏教授、彭增歧教授,東北農(nóng)業(yè)大
學(xué)駱承庠、霍貴成、張?zhí)m威教授,中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)南慶賢、馬長(zhǎng)偉教授,吉林農(nóng)業(yè)
大學(xué)胡耀輝、劉景盛、張鳳寬教授,四川農(nóng)業(yè)大學(xué)李紅軍教授,云南農(nóng)業(yè)大學(xué)葛
長(zhǎng)榮教授,湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)馬美湖教授,內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)德力格爾桑、靳煒、賀銀
鳳,黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)張麗萍教授,新疆石河子大學(xué)李開雄教授,貴州農(nóng)業(yè)大
學(xué)羅愛蘋等專家朋友提出了建設(shè)性建議,再次表示感謝。
學(xué)科發(fā)展日新月異,不妥之處,希望兄弟院校及讀者提出寶貴意見,更希望共
同編寫,以便作為全國(guó)統(tǒng)編教材《畜產(chǎn)食品工藝學(xué)》的配套教材出版發(fā)行、共享。
蔣愛民
電879092940
Email:jiangaimin20000@163.com
2003-08陜西楊陵
泰
前言
第一篇肉與肉制品...........................................................4
實(shí)驗(yàn)一肉新鮮度的檢驗(yàn)........................................................4
實(shí)驗(yàn)二原料肉品質(zhì)的評(píng)定.......................................................10
實(shí)驗(yàn)三鮮肉水分活度的測(cè)定...................................................12
實(shí)驗(yàn)四肉制品中粗脂肪的測(cè)定...................................................13
實(shí)驗(yàn)五肉及肉制品中蛋白質(zhì)的測(cè)定...............................................14
實(shí)驗(yàn)六肉制品中淀粉的測(cè)定.....................................................17
實(shí)驗(yàn)七肉制品中亞硝酸鹽與硝酸鹽的測(cè)定........................................18
實(shí)驗(yàn)八肉及肉制品中肉毒梭菌和肉毒毒素的檢驗(yàn)..................................21
實(shí)驗(yàn)九臘腸加工...............................................................23
實(shí)驗(yàn)十豬肉灌腸加工...........................................................24
實(shí)驗(yàn)十一煙熏干火腿加工.......................................................24
實(shí)驗(yàn)十二西式鹽水火腿加工.....................................................25
實(shí)驗(yàn)十三牛肉干加工...........................................................25
實(shí)驗(yàn)十四肉脯加工.............................................................26
實(shí)驗(yàn)十五肉松加工.............................................................26
第二篇乳與乳制品.............................................................27
實(shí)驗(yàn)一乳的采樣和樣品的預(yù)處理.................................................29
實(shí)驗(yàn)二乳與乳制品的感官評(píng)定...................................................32
實(shí)驗(yàn)三乳與乳制品的理化檢驗(yàn)...................................................33
實(shí)驗(yàn)四乳及乳制品中脂肪的測(cè)定.................................................41
實(shí)驗(yàn)五乳及乳制品中蛋白質(zhì)的測(cè)定...............................................43
實(shí)驗(yàn)六乳與乳制品的微生物學(xué)檢驗(yàn)...............................................44
實(shí)驗(yàn)七摻假摻雜乳的檢驗(yàn).......................................................53
實(shí)驗(yàn)八乳粉中水分、溶解度和雜質(zhì)度的測(cè)定......................................61
實(shí)驗(yàn)九乳粉中乳糖和蔗糖的測(cè)定.................................................64
實(shí)驗(yàn)十奶油和硬質(zhì)干酪中食鹽的測(cè)定.............................................69
實(shí)驗(yàn)十一酸奶加工.............................................................70
實(shí)驗(yàn)十二冰淇淋加工...........................................................70
實(shí)驗(yàn)十三干酪加工.............................................................71
實(shí)驗(yàn)十四發(fā)酵型奶油的生產(chǎn).....................................................74
第三篇蛋與蛋制品.............................................................74
實(shí)驗(yàn)一鮮蛋的衛(wèi)生檢驗(yàn).........................................................76
實(shí)驗(yàn)二蛋的物理性質(zhì)檢驗(yàn).......................................................76
實(shí)驗(yàn)三蛋粉油量及游離脂肪酸的測(cè)定.............................................78
實(shí)驗(yàn)四蛋中揮發(fā)性鹽基氮的測(cè)定.................................................79
實(shí)驗(yàn)五變蛋加工...............................................................81
實(shí)驗(yàn)六咸蛋加工...............................................................82
實(shí)驗(yàn)七蛋黃醬加工.............................................................83
第一篇肉與肉制品
實(shí)驗(yàn)一肉新鮮度的檢驗(yàn)
檢驗(yàn)肉品的新鮮度,一般是從感官性狀、腐敗分解產(chǎn)物的特性和數(shù)量及細(xì)菌和污染程度
等三方面來進(jìn)行的,采用單一的方法很難獲得正確的結(jié)果。因?yàn)槿獾淖冑|(zhì)是一個(gè)漸進(jìn)性過程,
其變化又很復(fù)雜,很多因素都影響著人們對(duì)肉新鮮度的正確判斷。所以,實(shí)踐中一般都采用
感官檢驗(yàn)和實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)合的綜合檢驗(yàn)方法。通常先進(jìn)行感官檢驗(yàn),其感官性狀完全符合新
鮮肉指標(biāo)時(shí),可允許出售。當(dāng)感官檢驗(yàn)不能確定是否為新鮮肉時(shí),則應(yīng)做實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn),并綜
合兩方面的結(jié)果做了衛(wèi)生評(píng)定。
一、肉新鮮度的感官檢驗(yàn):感官檢驗(yàn)是通過檢驗(yàn)者的視覺、嗅覺、觸覺及味覺等感覺
器官,對(duì)肉品的新鮮度進(jìn)行檢查。這種方法簡(jiǎn)便易行,一般既能反映客觀情況,又能及時(shí)做
出結(jié)論。感官指標(biāo)是國(guó)家規(guī)定檢驗(yàn)肉品新鮮度的標(biāo)準(zhǔn)之一,是肉品質(zhì)鮮度檢驗(yàn)最基本的方法。
感官檢驗(yàn)主要是觀察肉品表面和切面的顏色,觀察和觸摸肉品表面和新切面的干燥、濕
潤(rùn)及粘手度,用手指按壓肌肉判斷肉品的彈性,嗅聞氣味判斷是否變質(zhì)而發(fā)出氨哧、酸味和
臭味,觀察煮沸后肉湯的清亮程度、脂肪滴的大小,以及嗅聞其氣味,最后根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果作
出綜合判定。肉品新鮮的感官檢驗(yàn)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)見表1-1。
表1-1鮮豬肉感官指標(biāo)(GB2722-81)
項(xiàng)目一級(jí)鮮度二級(jí)鮮度
色澤肌肉有光澤,紅色均勻,脂肪潔白肌肉色稍暗,脂肪缺乏光澤
粘度外表微干或微濕潤(rùn),不粘手外表干燥或粘手,新切面濕潤(rùn)
彈性指壓后的凹陷立即恢復(fù)指壓后的凹陷恢復(fù)慢且不能完全恢復(fù)
氣味具有鮮豬肉正常氣味稍有氨味或酸味
煮沸后肉湯透明澄清,脂肪團(tuán)聚于表面,具有香味稍有渾濁,脂肪呈小滴浮于表面,無鮮味
表1-2鮮豬肉、鮮羊肉、鮮兔肉感官指標(biāo)(GB2723-81)
項(xiàng)目一級(jí)鮮度二級(jí)鮮度
色澤肌肉有光澤,紅色均勻,脂肪潔白或淡黃色肌肉色稍暗,切面尚有光澤,脂肪缺乏光澤
粘度外表微干或有風(fēng)干膜,不粘手外表干燥或粘手,新切面濕潤(rùn)
彈性指壓后的凹陷立即恢復(fù)指壓后的凹陷恢復(fù)慢且不能完全恢復(fù)
氣味具有鮮豬肉、鮮羊肉、鮮兔肉的正常氣味稍有氨味或酸味
透明澄清,脂肪團(tuán)聚于表面,具特有香味稍有渾濁,脂肪呈小滴浮于表面,香味差或無
煮沸后肉湯
表1-3鮮雞肉感官指標(biāo)(GB2724-81)
項(xiàng)目一級(jí)鮮度二級(jí)鮮度
眼球眼球飽滿眼球皺縮凹陷,晶體稍渾濁
皮膚有光澤,因品種不同而呈淡黃、淡紅、灰
色澤皮膚色澤轉(zhuǎn)暗,肌肉切面有光澤
白或灰黑等色,肌肉切面發(fā)光
粘度外表微干或微濕潤(rùn),不粘手外表干燥或粘手,新切面濕潤(rùn)
彈性指壓后的凹陷立即恢復(fù)指壓后的凹陷恢復(fù)慢M不能完全恢復(fù)
氣味具有鮮雞肉的正常氣味無其它異味,唯腹腔內(nèi)有輕度不快味
煮沸后肉湯透明澄清,脂肪團(tuán)聚于表面,具特有香味稍有渾濁,脂肪呈小滴浮于表面,香味差或無彈球
表1-4凍豬肉(解凍后)感官指標(biāo)(GB2707-81)
項(xiàng)目一級(jí)鮮度二級(jí)鮮度
色澤肌肉有光澤,色紅均勻,脂肪潔白無霉點(diǎn)肌肉色fi璃紅,缺乏爆脂肪微黃或有少量霉點(diǎn)
組織狀態(tài)肉質(zhì)緊密,有堅(jiān)實(shí)感肉質(zhì)軟化或松弛
粘度外表及切面微濕潤(rùn),不粘手外表濕潤(rùn),微粘手,切面有滲出液,不粘手
氣味無異味稍有氨味或酸味
表1-5凍牛肉(解凍后)感官指標(biāo)(GB2708-81)
項(xiàng)目一級(jí)鮮度二級(jí)鮮度
肌肉色均勻,有光澤,脂肪白色或微黃色肉色稍暗,肉與脂肪缺乏光澤,但切面尚有光澤
色澤
脂肪稍發(fā)黃
粘度肌肉外表微干或有風(fēng)干膜,或外表濕潤(rùn)不粘手外表干燥或輕度粘手,切面濕潤(rùn)粘手
組織狀態(tài)肌肉結(jié)構(gòu)緊密,有堅(jiān)實(shí)感,肌纖維韌性強(qiáng)肌肉組織松弛,脫纖維有韌性
氣味具有牛肉的正常氣味稍有氨味或酸味
透明澄清,脂肪團(tuán)聚于表面,具有鮮牛肉湯固有的稍有渾濁,脂肪呈小滴浮于表面,香味、鮮味較差
煮沸后肉湯
香味和鮮味
表1-6凍羊肉(解凍后)感官指標(biāo)(GB2709-81)
項(xiàng)目一級(jí)鮮度二級(jí)鮮度
色澤肌肉色鮮艷,有光澤,脂肪白色肉色稍暗,肉與脂肪缺乏光澤,但切面尚有光澤
粘度外表微干或有風(fēng)干膜,或濕潤(rùn)不粘手外表干燥或輕度粘手,切面濕潤(rùn)粘手
組織狀態(tài)肌肉結(jié)構(gòu)緊密,有堅(jiān)實(shí)感,肌纖維韌性強(qiáng)肌肉組織松弛,用囪維有韌性
氣味具有羊肉的正常氣味稍有氨味或酸味
透明澄清,脂肪團(tuán)聚于表面,具有鮮牛肉湯固有的稍有渾濁,脂肪呈小滴浮于表面,香味、魚就較差
煮沸后肉湯
香味和鮮味
表1-7凍雞肉(解凍后)感官指標(biāo)(GB2710-81)
項(xiàng)目一級(jí)鮮度二級(jí)鮮度
眼球眼球飽滿或平坦眼球皺縮凹陷,晶體稍渾濁
皮膚有光澤,因品種不同而呈淡黃、淡紅、
色澤皮膚色澤轉(zhuǎn)暗,肌肉切面有光澤
灰白或灰黑等色,肌肉切面發(fā)光
粘度外表微濕潤(rùn),不粘手外表干燥或粘手,新切面濕潤(rùn)
彈性指壓后的凹陷恢復(fù)慢,且不能完全恢復(fù)肌肉發(fā)軟,指壓后的凹陷不能恢復(fù)
氣味具有雞肉的正常氣味無其它異味,唯腹腔內(nèi)有輕度不快味
煮沸后肉湯透明澄清,脂肪團(tuán)聚于表面,具特有香味稍有渾濁,油珠呈小滴浮于表面,香味差或無鯽
二、肉新鮮度的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn):肉新鮮度的實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)方法較多,如揮發(fā)性鹽基氨的測(cè)定、
納斯靳(Nessler)氏試劑氨反應(yīng)、球蛋白沉淀反應(yīng)、pH值的測(cè)定、硫化氫的測(cè)定、細(xì)菌學(xué)
檢查等。但只有揮發(fā)性鹽基氨的測(cè)定作為國(guó)家現(xiàn)行法定檢測(cè)方法,其他的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法只
能作為肉品新鮮度的輔助檢驗(yàn)方法,應(yīng)根據(jù)情況選用。
(-)揮發(fā)性鹽基氮(TVB-N)的測(cè)定
1.半微量定氮法
(1)原理:蛋白質(zhì)在酶和細(xì)菌的作用下分解后產(chǎn)生堿性含氮物質(zhì),有氨、伯胺、仲胺
等,此類物質(zhì)具有揮發(fā)性,可在堿性溶液中被蒸儲(chǔ)出來,用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定,計(jì)算含量。
(2)試劑
①氧化鎂混懸液②2%硼酸溶液(吸收液)③0.2%甲基紅乙醇液④0.1%亞甲藍(lán)水
溶液
臨用時(shí)將③④等量混合為混合指示液⑤0.0100N鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液或0.0100N硫酸標(biāo)
準(zhǔn)溶液
(3)儀器
①半微量定氮裝置:Markhan氏式②微量滴定管:最小分度0.01ml
(4)操作方法
①樣液的制備:將樣品除去脂肪、骨頭及筋腱后,切碎攪勻,稱取10g于錐形瓶中,加
100ml水,不時(shí)振搖,浸漬30nlin后過濾,濾液置于冰箱中備用。
②測(cè)定:預(yù)先將盛有10ml吸收液并加有5-6滴混合指示液的錐形瓶置于冷凝管下端,
并使其下端插入錐形瓶?jī)?nèi)吸收的液面下,精密吸取5ml上述樣品濾液于蒸儲(chǔ)器反應(yīng)室內(nèi),加
5mll%氧化鎂混懸液,迅速蓋塞,并加水以防漏氣,通入蒸汽,待蒸汽充滿蒸儲(chǔ)器內(nèi)時(shí)即關(guān)
閉蒸汽出口管,由冷并行管出現(xiàn)第一滴冷凝水開始計(jì)時(shí),蒸儲(chǔ)5min即停止,吸收液用0.0100N
鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液或0.0100N硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,終點(diǎn)呈藍(lán)紫色。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。
(5)計(jì)算
(V.-VJXN.X14
X產(chǎn)---------------------------X100
miX5/100
式中:——樣品中揮發(fā)性鹽基氮的含量,mg/100g
V,——測(cè)定用樣液消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,ml
V2——試劑空白消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,ml
N1一一鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度,mol/L
mi----樣品質(zhì)量,g
14一一1N鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml相當(dāng)?shù)暮量藬?shù)
2.微量擴(kuò)散法
(1)原理:揮發(fā)性含氮物質(zhì)在堿性溶液中釋出,在擴(kuò)散皿中于37℃時(shí)揮發(fā)后吸收于吸
收液中,用標(biāo)準(zhǔn)酸滴定,計(jì)算含量。
(2)試劑
①飽和碳酸鉀溶液:稱取50g碳酸鉀,加50ml水,微加熱助溶,使用時(shí)取上清液。
②水溶性膠:稱取10g阿拉伯膠,加10ml水,再加5ml甘油及5g無水碳酸鉀(或無水
碳酸鈉),研勻。
③吸收液:混合指示液、0.0100N鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液,與半微量定氮法相同。
(3)儀器
①擴(kuò)散皿(標(biāo)準(zhǔn)型):玻璃質(zhì),內(nèi)外室總直徑61mm,內(nèi)室直徑35mm;外室深度lOnrn,
內(nèi)室深度5mm;外室壁存3mm,內(nèi)室壁存2.5mm,回壁紗厚玻璃蓋,如圖所示,其他型
號(hào)亦可用。
②微量滴定管:最小分度0.01ml。
(4)操作方法
①將水溶性膠涂于擴(kuò)散皿的邊緣,在皿中央內(nèi)室加入1ml吸收液及1滴混合指示液。在
皿外室一側(cè)加入1.00ml按半微量定氮法制備的樣液,另一側(cè)加入1ml飽和碳酸鉀溶液,注
意勿使兩滴接觸,立即蓋好;密封后將皿于桌面上輕輕轉(zhuǎn)動(dòng),使樣液與堿液混合。
②將擴(kuò)散皿置于37℃溫箱內(nèi)放置2h,揭去蓋,用0.01N鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液
滴定,終點(diǎn)呈藍(lán)紫色。同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。
圖1-1微量擴(kuò)散皿(標(biāo)準(zhǔn)型)
(5)說明
①加碳酸鉀時(shí)應(yīng)小心加入,不可濺入內(nèi)室。
②擴(kuò)散皿應(yīng)潔凈、干燥,不帶酸堿性。
③檢樣測(cè)定與空白試驗(yàn)均需各作2份平行試驗(yàn)。
④計(jì)算
(V3-V4)XN1X14
x2=---------------------------X100
miX100/5
式中:X2一一樣品中揮發(fā)性鹽基氮的含量,mg/100g
V3一一測(cè)定用樣液消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,ml
V4——試劑空白消耗鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積,ml
N.——鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的摩爾濃度,mol/L
mi---樣品質(zhì)量,g
14一—1N鹽酸或硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml相當(dāng)?shù)暮量藬?shù)
(二)納斯勒(Nessler)氏試劑氨反應(yīng)
1.原理:氨和胺類化合物是肉變質(zhì)腐敗時(shí)所產(chǎn)生的特征產(chǎn)物,它能夠與納斯勒氏試劑在
堿性環(huán)境中生成不溶性的復(fù)合鹽沉淀一一碘化二亞汞錢(橙黃化),顏色的濃淡和沉淀物的
多少取決于肉中的氨和胺類化合物的量。該反應(yīng)對(duì)游離氨或結(jié)合氨都能進(jìn)行測(cè)定。反應(yīng)式如
下:
2HgCh+4KI-2HgL+4KCI
2HgI2+4KI+3KOH+NH3-HgOHgNH2I+2H2O+7KI
2.納斯勒氏試劑:稱取10g碘化鉀,溶解于10ml熱蒸儲(chǔ)水中,陸續(xù)加入飽和氯化汞溶
液(HgCk在20℃時(shí)100ml水中能溶解6.1g),不斷振搖,直到產(chǎn)生的珠紅色沉淀不再溶解
為止。然后向此溶液中加入35%氫氧化鉀溶液80ml,最后加入無氨蒸儲(chǔ)水將其稀釋至200ml,
靜置24h后,取上清液作為試劑。移于棕色瓶中,塞上橡皮塞,置陰涼處保存。
3.儀器:試管、吸管、試管架
4.操作方法
(1)肉浸出液的制備:用揮發(fā)性鹽基氨測(cè)定時(shí)所制備的(1:10)肉浸出液。
(2)具體操作:取2支試管,1支內(nèi)加入1ml肉浸出液,另1支加入1ml煮沸2次冷
卻的無氨蒸儲(chǔ)水作對(duì)照,然后向其中各滴入納斯勒氏試劑,每加1滴振搖數(shù)次,并觀察顏色
的變化。一直加到10滴為止。
5.判定標(biāo)準(zhǔn):納斯勒氏試劑反應(yīng)結(jié)果判定見表1-8
(三)球蛋白沉淀反應(yīng)
1.原理:肌球蛋白也稱肌凝蛋白,是構(gòu)成肌纖維的主要蛋白質(zhì),它易溶于堿性溶液中,
在酸性環(huán)境中則不溶解。當(dāng)肉腐敗變質(zhì)時(shí),由于肉中氨和鹽胺類等堿性物質(zhì)的蓄積,肉的酸
度減小,pH值升高,使肌肉中球蛋白呈溶膠狀態(tài),在重金屬鹽(如硫酸銅)或者酸(如醋
酸)的作用下發(fā)生凝結(jié)而沉淀。
表1-8納斯靳氏試劑反應(yīng)質(zhì)量判定表
氨和胺類的含量反應(yīng)
試劑滴數(shù)顏色和沉淀的變化情況肉的品質(zhì)
(mg/100g)結(jié)果
10顏色未變,沒有混濁和沉淀<16一新鮮肉
10淡黃色,輕度混濁,無沉淀16-20土次鮮肉
10呈黃色,輕度混濁,稍有沉淀21-30+自溶肉
6呈黃色或橙黃色,有沉淀31-45++腐敗肉
1-5明顯的黃色或橙黃色,有較多沉淀46以上+++完全腐敗肉
2.試劑
(1)10%醋酸溶液:量取10ml醋酸,加蒸儲(chǔ)水至100ml,混勻。
(2)10%硫酸銅溶液:稱取五水硫酸銅(CuSO,-5H2O)15.6妹8,先以少量蒸儲(chǔ)水使其
溶解,然后加蒸儲(chǔ)水稀釋至100ml。
3.儀器:(1)試管(2)試管架(3)吸管(4)水浴鍋
4.操作方法
(1)肉浸液的制備:同揮發(fā)性鹽基氮所用的肉浸出液(1:10)。
(2)具體操作
①醋酸沉淀法:向試管中加入肉浸出液2ml,加10%醋酸2滴,將試管置于80℃水浴3min,
然后觀察結(jié)果。
②硫酸銅沉淀法:向試管中加入肉浸出液2ml,加10%硫酸銅溶液5滴,振搖后靜置5min,
然后觀察結(jié)果。
5.判定標(biāo)準(zhǔn):新鮮肉:液體清亮透明,次新鮮肉,液體稍混濁,變質(zhì)肉,液體混濁,
并有絮片或膠凍樣沉淀物。
(四)pH值的測(cè)定
1.原理:家畜生前肌肉的pH值為7.1-7.2。宰后由于缺氧,肌肉中代謝過程發(fā)生改變,
肌糖原無氧酵解,產(chǎn)生乳酸,三磷酸腺甘(ATP)迅速分解,使肉pH值下降,如宰后lh的
熱鮮肉,其pH值可降落到6.2-6.3,宰后24h的熱鮮肉,其pH值可降落到5.6-6.0,此pH
值在肉品回工叫做“排酸值”,它能一鹽城持續(xù)到肉發(fā)生腐敗分解之前,所以新鮮肉浸出液
的pH值通常在5.8-6.2范圍之內(nèi)。肉腐敗時(shí),由于肉內(nèi)蛋白質(zhì)在細(xì)菌酶的作用下,被分解
為氨和胺類化合物等堿性物質(zhì),因而使肉趨于堿性,ph值顯著增高,
此外,家畜在宰前由于過勞、虛弱、患病等原因使能量消耗過大,肌肉中糖原減少,所
以宰后肌肉中形成的乳酸和磷酸量也較少。在這種情況下,肉雖具有新鮮肉的感官特征,但
卻有較高的pH值(6.5-6.8)。因此,在測(cè)定肉浸液pH值時(shí),要考慮這方面的因素,測(cè)定肉
pH值的方法,通常有比色法和電化學(xué)法。電化學(xué)法簡(jiǎn)便易行。
2.試劑
(1)指示劑:甲基紅(pIM.6-6.0)、溪麝香草酚藍(lán)(pH6.0-6.7)及酚紅(pH6.8-8.0)
(2)0.01%硝嗪黃溶液
3.儀器
(1)天平⑵量筒⑶燒杯⑷錐形瓶⑸刻度吸管⑹剪刀⑺pH精密試紙⑻
比色箱⑼電位計(jì)⑩pH計(jì)?酸度計(jì)
4.肉浸液的制備
(1)稱取精肉肉樣10g,剪成豆粒大小的小塊(約50-60塊),置于200ml燒杯中,
加100ml蒸儲(chǔ)水,浸泡15min,其間振搖3-4次。
(2)用濾紙將浸泡液過濾即為肉浸出液。備用。
5.測(cè)定方法
(1)比色法:利用不同的酸堿指示劑來指示出被測(cè)液的pH值。
常用的比色法有pH試紙法和溶液比色法。
由于酸堿指示劑在溶液中隨著溶液pH值的改變而顯示不同的顏色,而且溶液中氫離子
濃度在一定范圍內(nèi),某種指示劑的色度與離子濃度成比例。因此,可以利用不同指示劑的混
合物顯示的各種顏色來指示溶液的pH值。根據(jù)這一原理,制成一種由淺至深的標(biāo)準(zhǔn)試紙或
標(biāo)準(zhǔn)比色管,測(cè)定時(shí)以指示劑呈現(xiàn)的顏色與標(biāo)準(zhǔn)比較。
①pH試紙法:將pH精密試紙條的一端浸入被檢肉浸出液中或直接貼在肉的新鮮切面上,
數(shù)秒鐘后取出與標(biāo)準(zhǔn)色板比較,直接讀取pH的近似數(shù)值。
②肉浸液比色法:借助于比色箱進(jìn)行測(cè)定,首先利用萬(wàn)能指示劑,預(yù)測(cè)被測(cè)液的pH
值范圍,以便選擇適宜的指示劑(通常選用漠麝香草酚藍(lán)),然后取3支專用的比色管分別
加入5ml肉浸液,其中1支加入0.25ml,插于比色箱有玻璃側(cè)之左右孔。由標(biāo)準(zhǔn)比色管排
上取出蒸鐳水管插于比色箱有玻璃測(cè)之中間孔,再由與該指示劑相應(yīng)的比色管排上,選取2
支與加入指示劑之被測(cè)液管色調(diào)近似的比色管,插于比色箱無玻璃側(cè)之左右孔。
此時(shí),將比色箱舉至距眼睛25cm之水平處,使有下班側(cè)向著光源進(jìn)行比色,當(dāng)某標(biāo)準(zhǔn)
比色管顏色與加入指標(biāo)劑之被測(cè)液管的顏色完全相同時(shí),則該標(biāo)準(zhǔn)比色管上的pH數(shù)值就相
當(dāng)于被測(cè)液之pH值。如被測(cè)液的色度處于兩標(biāo)準(zhǔn)比色管色度之間時(shí),則采取其pH的平均值。
③硝嗪黃試劑反應(yīng)法:取0.01%硝嗪黃溶液5Tom1,注入類似蒸發(fā)皿樣的白瓷皿中,再
取檢樣肉片l-2g,放入皿中,然后用小刀在甲內(nèi)擠壓肉片,擠出肉汁,觀察溶液變化。
溶液呈深紫色者,pH值在6.5以上,溶液無變化者,pH值在6.5以下;溶液呈綠色者,
pH值在6.5。
此法不適用于宰后pH值異常的病畜肉及PSE肉的檢驗(yàn)。
(2)電化學(xué)法:比色法只能測(cè)得粗略近似的pH值,有一定的局限性。而電化學(xué)法對(duì)于
有色、渾濁及膠狀溶液的pH值都能夠測(cè)量,準(zhǔn)確度高。
①酸度計(jì)法:該方法比較快速準(zhǔn)確。將酸度計(jì)調(diào)零、校正、定位,然后將玻璃電極和參
比電極插入容器內(nèi)的肉浸液中,按下讀數(shù)開關(guān),此時(shí)指針移動(dòng),到某一刻度處?kù)o止不動(dòng),讀
取指針?biāo)傅闹?,加上pH范圍調(diào)節(jié)檔上的數(shù)值,即為該肉浸液的pH值.
②電表pH計(jì)測(cè)定法:用電表pH計(jì)測(cè)定肉pH值時(shí),可不必制備肉浸液,只需將電表pH
計(jì)的電極直接插入被檢肉的組織中或新鮮切面上,使可自電表pH計(jì)上讀取肉(或餡)的pH
值。
判定標(biāo)準(zhǔn):
(1)新鮮肉:pH5.8-6.2(2)次鮮肉:pH6.3-6.6(3)變質(zhì)肉:pH6.7以上
(五)硫化氫的測(cè)定
1.原理:構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸中,半胱氨酸和胱氨酸含有筑基,在細(xì)菌酶的作用下能
形成硫化氫,硫化氫與可溶性鉛鹽作用時(shí),形成黑色的硫化鉛。此種反應(yīng)在堿性環(huán)境下進(jìn)行,
則能提高反應(yīng)的靈敏度。因此,測(cè)定肉中的硫化氫時(shí),常酸酸鉛堿性溶液作為直接點(diǎn)肉法或
濾紙法的試劑。其反應(yīng)式如下
HzS+Pb(CH;iC00)2fPbSI+2CH:(C00H
2.試劑
醋酸鉛堿性溶液:在10%醋酸鉛液內(nèi)加入10%氫氧化鈉溶液,直到析出沉淀為止。
3.儀器:(1)100ml具塞錐形瓶(2)定性濾紙
4.測(cè)定方法和結(jié)果判定
(1)醋酸鉛滴肉法:將醋酸鉛堿性溶液直接滴在肉面上,2-3min后,觀察反應(yīng)。正常
新鮮肉無變化;腐敗肉滴上試劑后就能出現(xiàn)褐色或黑色反應(yīng)。此法靈敏度較高,簡(jiǎn)單易行,
便于在市場(chǎng)上檢驗(yàn)肉品時(shí)應(yīng)用,作為綜合判定的參考。
(2)醋酸鉛濾紙法
①將被檢肉剪成綠豆或黃豆粒大小的肉粒,放入100ml帶塞的三角燒瓶中,使之達(dá)到燒
瓶容量的1/3,鋪平在瓶底。
②瓶中懸掛經(jīng)醋酸鉛堿性溶液潤(rùn)濕過的濾紙條,使之略接近肉面(但不接觸肉面),另
一端固定在瓶頸內(nèi)壁與瓶塞之間。
③在室溫下放置15min后,觀察瓶?jī)?nèi)濾紙條的變色反應(yīng)。
新鮮肉:濾紙條無變化。
次鮮肉:由于硫化鉛的形成,濾紙條邊緣變?yōu)榈稚?/p>
變質(zhì)肉:由于硫化鉛大量形成,濾紙條變?yōu)楹诤稚蜃厣?/p>
(3)濾紙貼肉法:用一條浸過醋酸鉛堿性溶液的濾紙條,直接貼在肉切面上,有硫化
氫時(shí),約條變?yōu)楹稚蚝谏?/p>
(六)細(xì)菌鏡檢
1.原理:肉發(fā)生腐敗變質(zhì)的原因很多,但主要是腐敗性細(xì)菌作用的結(jié)果。細(xì)菌污染肉
體的路徑,少數(shù)是內(nèi)源性感染,多數(shù)外源性污染。污染肉體(或肉塊)的細(xì)菌,可由表層向
深層侵入,隨著侵入的深度而發(fā)生菌類交替,即需氧菌僅在表面發(fā)育,厭氧菌在深層繁殖。
檢驗(yàn)時(shí),要表里兼顧,表層和深層都要進(jìn)行檢驗(yàn)。
2.試劑:(1)革蘭氏染色液一套(2)瑞特氏染色液
3.儀器:(1)顯微鏡(2)有蓋搪瓷盤(3)酒精燈(4)鐐子(5)剪刀(6)載
玻片
4.檢驗(yàn)方法
(1)肉樣的采用:用滅菌鑲子和剪刀采取。每個(gè)胴體(或肉塊)采兩個(gè)肉樣,第一個(gè)
由表層1-1.5cm處采取,第二個(gè)由深層2-4cm處采取。
(2)觸片的制作
①用無菌的方法,從肉樣剪下蠶豆大肉塊1個(gè),用鏡子夾住,將切面在載玻片上觸壓下,
制成觸片。
②在空氣中自然干燥或經(jīng)火焰固定后,用革蘭氏染色法染色。
(3)鏡檢:每個(gè)觸片至少要檢驗(yàn)5個(gè)視野,計(jì)算其中的球菌數(shù)和桿菌數(shù),然后求出每
個(gè)視野中球菌和桿菌的平均數(shù)。
5.判定標(biāo)準(zhǔn)
(1)新鮮肉:在載玻片上幾乎不留肉的痕跡,著色不明顯,表層肉觸片上,可看到少
數(shù)球菌或桿菌;深層肉觸片上無細(xì)菌。
(2)次鮮肉:由于肌肉組織開始分解,組織中含有大量的致密物質(zhì),觸片著染良好,
表層肉觸片上,平均每個(gè)視野內(nèi)可看到20-30個(gè)球菌或幾個(gè)桿菌,深層肉觸片上,不超過
20個(gè)細(xì)菌。
(3)變質(zhì)肉:肌肉組織有明顯的分解現(xiàn)象,觸片高度著色,表層肉和深層肉的觸片上,
平均細(xì)菌數(shù)都超過30個(gè),其中以桿菌為主。當(dāng)肉進(jìn)一步腐敗時(shí),則球菌幾乎完全消失,整
個(gè)視野內(nèi)布滿桿菌。
實(shí)驗(yàn)二原料肉品質(zhì)的評(píng)定
一、原理:通過評(píng)定或測(cè)定原料肉的顏色、酸度、保水性、嫩度、大理石紋及熟肉率,
對(duì)原料肉品質(zhì)作出綜合評(píng)定。
二、儀器
1.肉色評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)圖2.大理石紋評(píng)分圖3.定性濾紙
4.酸堿度計(jì)5.鋼環(huán)允許膨脹壓力計(jì)6.C-LM型肌肉嫩度儀
7.書寫用硬質(zhì)塑料板8.分析天平
三、評(píng)定方法
1,肉色:豬宰后2-3h內(nèi)取最后1個(gè)胸椎處背最長(zhǎng)肌的新鮮切面,在室內(nèi)正常光度下目
測(cè)評(píng)分法評(píng)定,評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見表卜9,應(yīng)避免在陽(yáng)光直射或陰暗處評(píng)定。
表1-9肉色評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)*
肉色灰白微紅正常鮮紅微暗紅暗紅
評(píng)分12345
肉質(zhì)劣質(zhì)肉不正常肉正常肉正常肉正常肉
*為美國(guó)《肉色評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)圖》。因我國(guó)的豬肉較深,故評(píng)分3-4者為正常。
2.肉的酸堿度:宰后在45min內(nèi)直接用酸堿度計(jì)測(cè)定背最長(zhǎng)肌的酸堿度。測(cè)定時(shí)先用
金屬棒在肌肉上刺一個(gè)孔。按國(guó)際慣例,用最后胸椎部背最長(zhǎng)肌中心處的pH值表示,正常
肉的pH值為6.1-6.4,灰白水樣肉PSE肉)的pH值一般為5.1-5.5。
3.肉的保水法:測(cè)定保水性使用最普遍的方法是壓力法。我國(guó)現(xiàn)行的測(cè)定方法是用35kg
重量壓力法度量肉樣的失水率,失水率愈高,系水力愈低,保水性愈差。
(1)取樣:在第卜2腰椎背最長(zhǎng)肌處,切取1.0mm厚的薄片,平置于干凈橡皮片上,
再用直徑2.523cm的圓形取樣器切取中心部肉樣。
(2)測(cè)定:切取的肉樣用感量為0.001g的天平稱重后置于兩層紗布間,上下各墊定性
濾紙。濾紙外各墊一塊書寫用硬質(zhì)塑料板,然后放置于改裝鋼環(huán)允許土壤膨脹壓縮儀上,用
均速搖動(dòng)使加壓至35kg,保持5min,撤除壓力后立即稱量肉樣重。
(3)計(jì)算
加壓前肉樣重一加壓后肉樣重
失水率(%)=-----------------------------------------X100%
加壓前肉樣重
4.肉的嫩度:嫩度評(píng)定分為主觀評(píng)定和客觀評(píng)定兩種方法
(1)主觀評(píng)定:主要評(píng)定是依靠咀嚼和舌與頰對(duì)肌肉的軟、硬與咀嚼的難易程度等方
面進(jìn)行綜合評(píng)定。但評(píng)定人員須經(jīng)專門訓(xùn)練。感官評(píng)定可從以下三個(gè)方面進(jìn)行:
①咬斷肌纖維的難易程度
②咬碎肌纖維的難易程度或達(dá)到正常吞咽程度時(shí)的咀嚼次數(shù)
③剩余殘?jiān)?/p>
(2)客觀評(píng)定:用肌肉嫩度計(jì)測(cè)定剪切肉樣時(shí)的剪切力的大小來客觀表示肌肉的嫩度。
實(shí)驗(yàn)表明,剪切力(ShearValue)與主觀評(píng)定法之間的相關(guān)系數(shù)達(dá)0.60-0.85,平均為0.75。
測(cè)定時(shí)在一定溫度下將肉樣煮熟,用直徑為1.27cm的取樣器切取肉樣,在室溫條件下
置于剪切儀上測(cè)量剪切肉樣所需的力,用千克表示。其數(shù)值越小,肉愈嫩。重復(fù)三次,計(jì)算
其平均值。
5.大理石紋:大理石紋反映了一塊肌肉內(nèi)可見脂肪的分布狀況。通常以最后一個(gè)胸椎
處的背最長(zhǎng)肌為代表,用目測(cè)評(píng)分法評(píng)定:脂肪只有痕跡評(píng)1分;微量脂肪評(píng)2分;少量脂
肪評(píng)3分;適量脂肪評(píng)4分;過量脂肪評(píng)5分。目前暫用大理石紋評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)圖測(cè)定。如課評(píng)
定鮮肉時(shí)脂肪不清楚,可將肉樣置于冰箱內(nèi)在4℃下保持24h后再評(píng)定。
6.熟肉率:將完整腰大肌用感量為0.1g的天平稱重后,置于蒸鍋屜上用沸水在蒸煮
45min,取出后冷卻30-40min或吊掛于室內(nèi)無風(fēng)陰涼處30min后,稱重,用下列公式計(jì)算:
蒸煮后肉樣重
熟肉率(%)=---------------------X100%
蒸煮前肉樣重
實(shí)驗(yàn)三鮮肉水分活度的測(cè)定
一、原理:樣品在康威氏微量擴(kuò)散皿的密封和恒溫的條件下,分別在A*較高和較低的標(biāo)
準(zhǔn)飽和溶液中擴(kuò)散平衡后,根據(jù)樣品重量的增加(即在較高A,標(biāo)準(zhǔn)溶液中平衡后)和減少
(即在較低A.標(biāo)準(zhǔn)溶液中平衡后)的量,求出樣品中A,值,此法亦稱為擴(kuò)散法。
二、試劑:標(biāo)準(zhǔn)水分活度試劑如表1T0所示:
表1-10標(biāo)準(zhǔn)水分活性試劑及其在25℃時(shí)的A.值
試劑名稱A,試劑名稱A,
重鋁酸鉀(K2Cr20T?2Hg)0.986'浪化鈉(NaBr?2HS)0.577
硝酸鉀(KNO.,)0.924硝酸鎂[Mg(NO。z?6H20]0.528
氯化鋼(BaCU?2H20)0.901硝酸鋰(LiNOs?3HQ)0.476
氯化鉀(KC1)0.842碳酸鉀(K2CO3?2壓0)0.427
澳化鉀(KBr)0.807氯化鎂(MgCL0.330
氯化鈉(NaCD0.752醋酸鉀(KAc-FLO)0.224
硝酸鈉(NaNO。0.737氯化鋰(LiCC?H2)0.110
氯化鋸(SrCl?6H◎0.708氫氧化鈉(NaOH?H20)0.070
三、儀器:康威氏(Conway)微量擴(kuò)散皿(見實(shí)驗(yàn)一肉新鮮度的檢驗(yàn))
四、操作方法
1.樣品制備:除掉樣品容器包裝,隨機(jī)采取樣品10-20g,迅速將檢樣切碎,從中取出
約1g(或用內(nèi)徑25mm的穿扎器鉆取樣品,隨后取出1g剪成薄片),放于預(yù)先精密稱量過的
鋁箔(直徑25mm)上,稱量后作為試樣,稱取2份。
2.準(zhǔn)備A.>0.94的飽和溶液A和A.<0.94的飽和溶液B。
3.取2只康威皿,于皿四周涂好凡士林。然后將試樣迅速分別放入2只皿的內(nèi)室,分
別將A、B兩飽和溶液3-4ml置于2只皿的外室,蓋好皿蓋,保持密閉,在25±1℃下靜置2
±0.5ho
4.精確稱量上述處理后的兩試樣的質(zhì)量,比較其質(zhì)量的增減。
五、計(jì)算
bx-ay
Aw=
x-y
式中:a——飽和溶液A的h值
b——飽和溶液B的限值
x——使用A時(shí)試樣質(zhì)量的增加量,g
y一一使用B時(shí)試樣質(zhì)量的增加量,g
六、說明
1.以兩種飽和溶液在25±1℃下的水分活度值為橫坐標(biāo),兩試樣重量變化量為縱坐標(biāo),
作圖求直線,該線與橫軸的交點(diǎn)即為該樣品的水分活度值。
2.配制飽和溶液時(shí),要預(yù)先掌握好25℃時(shí)的溶解度。
3.為防止試樣腐敗變質(zhì)而影響A“值,可按2%比例加入山梨酸鉀作為防腐劑。
實(shí)驗(yàn)四肉制品中粗脂肪的測(cè)定
一、原理:將粉碎或經(jīng)前處理而分散的試樣,放入園筒濾紙內(nèi),將濾紙置于索氏提取管
中,利用乙隧或石油酸(B.P30℃-60℃)在水浴中加熱迥流,提取試樣中的脂類于接受瓶
中,經(jīng)蒸發(fā)去除乙醛,稱出燒瓶中殘留物質(zhì)量,即為試樣中脂肪含量。
用本法抽提出除含有游離脂肪外,還有游離的脂肪酸、磷脂、膽固醇、芳香油,某些色
素和有機(jī)酸等,因此稱為粗脂肪。
此法適用于脂類含量較高,且主要是游離脂肪的的食品。
二、試劑:無水乙酸,無水硫酸鈉,海砂。
三、儀器:索氏抽提器,電熱恒溫水浴(50—80℃),電熱
恒溫烘箱(200℃)
四、操作方法
1.索氏抽提器的準(zhǔn)備:索氏抽提器是由回流冷凝器、提脂管、燒瓶三部
分組成,見圖2。抽提脂肪之前,應(yīng)將各部分洗滌干凈并干燥,接受燒瓶需烘
干,并稱至恒重。
2.濾紙筒的制備:將濾紙裁成8X15cm大小,以直徑為2.0cm大試管為
模型,將濾紙緊靠試管壁卷成園筒形,把底端封口,內(nèi)放一小團(tuán)脫脂棉,用
白細(xì)線對(duì)定型。
3.樣品制備:稱取2-4g樣品置于蒸發(fā)皿中,加入5g海砂,
再加入無水硫酸鈉10g,混勻,全部移入濾紙筒內(nèi),蒸發(fā)甲及附
有樣品的玻棒,用沾有乙醛的脫脂棉擦凈,并將此棉花放入濾紙
筒內(nèi)。
4.抽提:將裝有試樣的濾紙筒放入帶有虹吸管的提脂管中,圖2索氏提
取器接上冷并行管,由冷凝管上端加入無水乙醛至接受瓶?jī)?nèi)容積2/31.提取管
2.冷凝管,于水浴(50-60℃)上加熱,控制乙醛回流量,約每分鐘滴下3.
接受管
乙醛80滴左右,一般抽提3-4小時(shí),至抽提管下口滴下的乙酸滴
在干凈的濾紙上,揮發(fā)后不留下油脂的痕跡,表示抽提完全。
5.回收溶劑:取出濾紙筒,用抽提器回收乙酸,當(dāng)乙酸在提脂管內(nèi)將發(fā)生虹吸時(shí)立即取
下提脂管,將其下口放到盛乙酸的試劑瓶口,使液面超過虹吸管,乙醛即虹吸管流入瓶?jī)?nèi),
按同法繼續(xù)回收。待乙醛抽提完后,取下提脂瓶,于水浴上蒸去殘留乙醛,用紗布擦凈燒瓶
外部,于100-105℃烘箱中干燥2h,再放入干燥器內(nèi)冷卻25min后稱重。
五、計(jì)算
mi-mo
X=----------X100
田2
式中:x——樣品中脂肪的含量,%
m,一一接受瓶的脂肪質(zhì)量g
mo----接受瓶的質(zhì)量g
m2——樣品的質(zhì)量(如是測(cè)定水分后的樣品,應(yīng)按測(cè)定水分前的質(zhì)量計(jì))g
六、說明
1,對(duì)半固體或液體樣品,稱取5T0g于蒸發(fā)皿中,加入海砂約20g于沸水浴上蒸干后,
再于95-105C干燥研細(xì),再全部移入濾紙筒內(nèi)。
2.裝樣品的濾紙筒一定要嚴(yán)密,不能往外漏樣品,但也不要包得太緊,影響溶劑滲透,
放入濾紙筒高度不要超過回流彎管,否則超過彎管的樣品中的脂肪不能提盡,造成誤差。
3.抽提用的乙醛或石油酸要求無水、無醇、無過氧化物、揮發(fā)殘?jiān)康?。因水和?/p>
可導(dǎo)致水溶性物質(zhì)(樣品中糖和無機(jī)鹽)溶解使得測(cè)定結(jié)果偏高。
乙醛中存在過氧化物,會(huì)導(dǎo)致脂肪氧化,在烘干時(shí)也有引起爆炸的危險(xiǎn)。
4.過氧化物的檢查方法:取6ml乙醛,加2ml10%碘化鉀溶液,用力振搖放置Imin后,
若出現(xiàn)黃色,則證明有過氧化物,應(yīng)另先乙醛或處理后再用。
5.提取后燒瓶烘干稱量過程中,反復(fù)加熱會(huì)因脂類氧化而增重,故在恒重中若質(zhì)量增
加時(shí),應(yīng)以增重前的質(zhì)量作為恒重,為避免脂肪氧化造成的誤差,對(duì)富含脂肪的食品,應(yīng)在
真空干燥箱中干燥。
6.本法系國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測(cè)定方法,GB50096-85規(guī)定中第一法,索氏抽提法。
實(shí)驗(yàn)五肉及肉制品中蛋白質(zhì)的測(cè)定
一、原理:蛋白質(zhì)是復(fù)雜的含氮有機(jī)化合物,主要是由碳、氫、氧、氮、硫五種元
素組成,由20種氨基酸通過酰胺鍵(肽鍵)以一定的方式結(jié)合而成。
不同的蛋白質(zhì)其氨基酸構(gòu)成比例及方式不同,故各種不同的蛋白質(zhì)其含氮量也不同,蛋
白質(zhì)中的氮含量一般為15T7.6%,按16%計(jì)算,氮含量為蛋白質(zhì)的系數(shù)為6.25。一般雞蛋、
肉及肉制品為6.25,乳制品為6.38。
在食品和生物材料中,還包括有非蛋白質(zhì)氮的化合物,如核酸、含氮碳水化合物、生物
堿、含氮類脂、葉咻和含氮色素等。因此,用凱氏定氮法測(cè)定蛋白質(zhì)含量的同時(shí),還包括非
蛋白質(zhì)的含氮部分,故結(jié)果稱為粗蛋白質(zhì)含量。
樣品與濃硫酸和催化劑一同加熱消化,使蛋白質(zhì)分解,分解有有機(jī)氮與硫酸結(jié)合生成硫
酸核。然后,堿化蒸儲(chǔ)使氨游離,用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,根據(jù)酸的消
耗量乘以蛋白質(zhì)換算系數(shù),即為蛋白質(zhì)含量。該法稱為凱氏定氮法,由Kieldahlgf1833
年首先提出,經(jīng)長(zhǎng)期改進(jìn)已演變?yōu)槌A糠ā?/p>
微量法、自動(dòng)定氮儀法及改良式微量凱氏法等多種方法。
本法是測(cè)定食品中蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)方法
二、試劑:所有試劑均用不含氨的蒸儲(chǔ)水配制。
三、儀器:1.改良式微量凱氏定氮儀(圖3);2.凱氏燒瓶250ml;3.酸式微量滴定
管10ml
四、操作方法
1.消化:精密稱取0.2-2.0g固定樣品或
2-5g半固體樣品,或吸取10-20ml液體樣品,睛4
置于250ml凱氏燒瓶?jī)?nèi),不能沾染瓶頸,加入
0.2g硫酸銅,3g硫酸鉀及20ml硫酸,稍搖勻
后于瓶品放一小漏斗,將瓶以45度角斜支于有
小孔的石棉網(wǎng)上,在通風(fēng)櫥內(nèi)小心加熱,待內(nèi)
容物全部炭化,泡沫完全停止后,加強(qiáng)火力,
并保持瓶?jī)?nèi)液體微沸,至液體呈蘭綠色澄清透
明后,再繼續(xù)加熱0.5h。取下放冷卻后,移入
100ml容量瓶中,并用少量水洗凱氏燒瓶,洗
液并入容量瓶中,再加水至刻度,搖勻備用。
同時(shí)做一空白試驗(yàn)。
2.熟悉改良式微量凱氏定氮儀:將自來水經(jīng)(1)注
入到蒸儲(chǔ)瓶夾層中,使水面稍低于蒸儲(chǔ)瓶頸部的轉(zhuǎn)彎處,
把裝有2%硼酸溶液的接受瓶,置于冷凝
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