檢驗(yàn)科sop-生化室作業(yè)指導(dǎo)書(shū)(SOP)

ABCD人民醫(yī)院檢驗(yàn)科程序文件文件編號(hào)：版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容關(guān)于發(fā)布《程序文件》的聲明生效日期：20060808郾城微檢綜合門(mén)診部生化檢驗(yàn)作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2編制：劉桂菊審核：周風(fēng)霞編輯日期：2017年8月20日生效日期：2017年8月30日郾城微檢綜合門(mén)診部檢驗(yàn)科檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容目錄生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：目錄序號(hào)主題內(nèi)容編號(hào)頁(yè)號(hào)1血清總膽紅素測(cè)定2血清直接膽紅素測(cè)定3血清總蛋白測(cè)定（雙縮脲法）4血清白蛋白測(cè)定（溴甲酚綠法）5血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定6血清天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定血清g-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶測(cè)定血清堿性磷酸酶測(cè)定血清α-淀粉酶測(cè)定血清葡萄糖測(cè)定（己糖激酶法）血清尿素氮測(cè)定血清肌酐測(cè)定（酶法）血清尿酸測(cè)定（TBHBA法）血清總膽固醇側(cè)定（酶法）血清甘油三酯測(cè)定（酶試劑法）血清載脂蛋白A1測(cè)定血清載脂蛋白B測(cè)定血清高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定血清低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定血清肌酸激酶(CK)測(cè)定血清肌酸激酶MB同工酶測(cè)定血清乳酸脫氫酶DGKC法測(cè)定血清乳酸脫氫酶測(cè)定編號(hào)頁(yè)號(hào)血清a-羥丁酸脫氫酶測(cè)定血清總膽汁酸循環(huán)酶法測(cè)定Xxx冰箱操作維護(hù)規(guī)程Xxx純水機(jī)操作維護(hù)規(guī)程MH-480生化分析儀操作維護(hù)規(guī)程離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容修訂頁(yè)生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：修訂頁(yè)序號(hào)文件編號(hào)頁(yè)碼需更改的內(nèi)容更改內(nèi)容批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期123456789101112131415161718192021檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清總膽紅素(T-BIL)測(cè)定生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清總膽紅素(T-BIL)測(cè)定1.實(shí)驗(yàn)原理血清中的膽紅素分為直接（結(jié)合）膽紅素和間接（未結(jié)合）膽紅素。大多數(shù)方法是在1883年Ehrlich提出的重氮法膽紅素測(cè)量法1，一些改良的方法已被用來(lái)增進(jìn)反應(yīng)。這些改良的方法是使直接膽紅素直接和重氮化合物進(jìn)行反應(yīng)，生成一種有顏色的化合物，而間接膽紅素需要一種溶劑，如表面活性劑后才能進(jìn)行反應(yīng)。申能總膽紅素試劑是改良的重氮法。使用一種穩(wěn)定的重氮鹽，2,4-二氯苯胺重氮鹽（DCA），與膽紅素反應(yīng)，形成紅色偶氮化合物，它在540nm吸光度最大。在540/600nm時(shí)的吸光度與標(biāo)本中總膽紅素的濃度成正比。膽紅素+DCA紅色偶氮化合物表面活性劑2.標(biāo)本： 2.1病人準(zhǔn)備：無(wú)特殊要求。最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。2.2類型：血清、肝素或EDTA血漿，應(yīng)避光保存。3.標(biāo)本存放：15～25℃保存可穩(wěn)定2天；2～8℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定3個(gè)月，如冰凍保存，不可反復(fù)凍融！。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下避光保存運(yùn)輸。5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、脂血、非避光保存運(yùn)輸?shù)臉?biāo)本。6.實(shí)驗(yàn)材料6.1試劑：申能總膽紅素試劑盒劑1＋試劑2）6.1.1試劑組成試劑1：6×64ml磷酸緩沖液40mmol/L氯化鈉9g/L表面活性劑,穩(wěn)定劑適量試劑2：6×16ml2,4-二氯苯胺重氮鹽1mmol/L鹽酸30mmol/L表面活性劑適量6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存試劑避光保存于2～8℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個(gè)月。試劑2必需避光保存。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時(shí)，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：此試劑為體外診斷用，不要入口，毒性還末確定；警告！腐蝕劑！不要入口；避免和眼睛，皮膚或衣服接觸，如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘，接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護(hù)。6.2校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件6.3質(zhì)控品：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-64000生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件。8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件。9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果無(wú)需手工計(jì)算，以μmol/L報(bào)告。手工測(cè)定計(jì)算方法為：△Au總膽紅素(μmol/L)=×校準(zhǔn)液濃度△As12.參考值范圍：嬰兒：出生24小時(shí)內(nèi)＜150μmol/L出生第2天22-193μmol/L出生第3天12-217μmol/L出生第4～6天1.7-216μmol/L兒童：＞一個(gè)月3.4-17μmol/L成年人：1.7-21μmol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。游離膽紅素非極性很強(qiáng)，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復(fù)合物由脾臟向肝臟運(yùn)輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。溶血（肝前黃疸）、實(shí)質(zhì)的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會(huì)導(dǎo)致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見(jiàn)先天性慢性高膽紅素血癥，稱為Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細(xì)胞破碎增多，使60～70%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測(cè)方法能檢測(cè)總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測(cè)定主要檢測(cè)水溶性的結(jié)合膽紅素，因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來(lái)估計(jì)游離膽紅素的含量。14.操作性能14.1線性范圍：1.2～513μmol/L14.2精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法5，CS-64000批內(nèi)精密度小于3%或SD≤0.07，總精密度小于5%或SD≤0.10。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)批間精密度n=20(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)樣品115.220.4643.05樣品114.880.4082.74樣品217.440.4052.32樣品219.660.6863.49樣品382.600.7850.95樣品379.522.2742.8614.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)247個(gè)樣品進(jìn)行T-BIL檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=1.00x-0.00mol/L；r=1.000。14.4靈敏度：本試劑的檢測(cè)限為1.2μmol/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍：1.2～513μmol/L15.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為513μmol/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。16.病危報(bào)警值的處理當(dāng)新生兒血清標(biāo)本測(cè)定結(jié)果總膽紅素〉340μmol/L時(shí)，在經(jīng)過(guò)復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時(shí)向臨床主管醫(yī)生匯報(bào)。17.方法局限性17.1本法線性上限為513μmol/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度≤1704μmol/L，血紅蛋白濃度≤5.00g/L，甘油三酯濃度≤22.6mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾。18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清直接膽紅素(T-BIL)測(cè)定生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清直接膽紅素（D-BIL）測(cè)定1.實(shí)驗(yàn)原理直接膽紅素與2,4-二氯苯胺重氮鹽形成重氮化合物，在酸性條件下呈紅色。2.標(biāo)本：2.1病人準(zhǔn)備：無(wú)特殊要求。最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。2.2類型：血清、肝素或EDTA血漿，應(yīng)避光保存。3.標(biāo)本存放：15～25℃保存可穩(wěn)定2天；2～8℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定3個(gè)月，如冰凍保存，不可反復(fù)凍融！。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下避光保存運(yùn)輸。5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、脂血、非避光保存運(yùn)輸?shù)臉?biāo)本。6.實(shí)驗(yàn)材料6.1試劑：申能總膽紅素試劑盒試劑＋試劑26.1.1試劑組成試劑1：16×64mlEDTA-Na20.07mmol/L氯化鈉6.6g/L氨基磺酸70mmol/L試劑2：6×16ml2,4-二氯苯胺重氮鹽0.09mmol/L鹽酸130mmol/LEDTA-Na20.02mmol/L6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于2～8℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為18個(gè)月。試劑2必需避光保存。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時(shí)，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：此試劑為體外診斷用。警告！腐蝕劑！不要入口。避免和眼睛，皮膚或衣服接觸。如果接觸到，立即用大量的水沖洗受損害的部位15分鐘。接觸到眼睛或吞服，立即尋找醫(yī)療保護(hù)。6.2校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件6.3質(zhì)控品：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果無(wú)需手工計(jì)算，以μmol/L報(bào)告。手工測(cè)定計(jì)算方法為：△Au直接膽紅素(μmol/L)=×校準(zhǔn)液濃度△As12.參考值范圍：≤6.8mol/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：膽紅素是血紅蛋白的降解產(chǎn)物。游離膽紅素非極性很強(qiáng)，幾乎不溶解于水。在血液中與白蛋白形成復(fù)合物由脾臟向肝臟運(yùn)輸。在肝臟中，膽紅素與葡萄糖醛酸結(jié)合,生成可溶性膽紅素葡萄糖醛酸酯由膽管排入腸道。溶血（肝前黃疸）、實(shí)質(zhì)的肝損傷（肝性黃疸）和膽管堵塞（肝后黃疸）都會(huì)導(dǎo)致血液膽紅素增高，形成高膽紅素血癥。人群中常見(jiàn)先天性慢性高膽紅素血癥，稱為Gilbert綜合癥。由于膽紅素降解酶的功能滯后以及出生后紅細(xì)胞破碎增多，使60～70%的嬰兒血液出現(xiàn)總膽紅素增高。常用的膽紅素檢測(cè)方法能檢測(cè)總膽紅素和直接膽紅素。直接膽紅素的測(cè)定主要檢測(cè)水溶性的結(jié)合膽紅素，因此可以根據(jù)總膽紅素和直接膽紅素的差來(lái)估計(jì)游離膽紅素的含量。14.操作性能14.1線性范圍：1.7～171mol/L14.2精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法5，AU1000批內(nèi)精密度小于4%或SD≤0.04，總精密度小于5%或SD≤0.07。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)批間精密度n=20(μmol/L)s(μmol/L)CV(%)樣品16.00.203.34樣品16.20.193.12樣品212.80.121.00樣品213.00.191.46樣品336.40.260.71樣品335.40.461.3014.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)85個(gè)樣品進(jìn)行DBIL檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=0.95x+0.68μmol/L；r=0.995。14.4靈敏度：1.7mol/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍：1.7～171μmol/L15超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為171mol/L。樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。16.病危報(bào)警值的處理無(wú)。17.方法局限性17.1本法線性上限為171mol/L。樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度≤1704μmol/L，甘油三酯濃度≤22.6mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾。血紅蛋白濃度≥0.50g/L將產(chǎn)生干擾。18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清總蛋白測(cè)定生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清總蛋白液體(TP)雙縮脲法測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理雙縮脲比色終點(diǎn)法。在堿性條件下，蛋白與銅離子生成紫藍(lán)色復(fù)合物。顯色強(qiáng)度和蛋白濃度成正比。OH—蛋白質(zhì)+Cu2+﹥紫紅色復(fù)合物2.標(biāo)本采集2.1病人準(zhǔn)備：無(wú)特殊要求。最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。2.2類型：血清或血漿。3.標(biāo)本存放20～25℃保存可穩(wěn)定6天；4～8℃保存可穩(wěn)定4周；-20℃保存至少可穩(wěn)定1年。4.標(biāo)本運(yùn)輸室溫條件下運(yùn)輸5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的不能做測(cè)定。6.實(shí)驗(yàn)材料:6.1上海申能總蛋白測(cè)定試劑盒貨號(hào)劑1＋試劑26.1.1試劑組成試劑1（R1）：6×64ml氫氧化鈉80mmol/L酒石酸鉀鈉12.8mmol/L試劑2（R2）：6×16ml氫氧化鈉100mmol/L酒石酸鉀鈉16mmol/L碘化鉀15mmol/L硫酸銅6mmol/L6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于2～25℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為24個(gè)月。試劑不可冰凍。開(kāi)蓋后應(yīng)避免污染。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時(shí)，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：試劑中含有氫氧化鈉，不可入口！如與皮膚及粘膜接觸，請(qǐng)立即用大量水沖洗。使用試劑時(shí)應(yīng)采取必要的防護(hù)。6.2校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品總蛋白校準(zhǔn)值或標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果，以g/L報(bào)告。12.參考值范圍[g/L]成人：66～88兒童/青少年：男女1～30天42～6241～631～6個(gè)月44～6647～676個(gè)月～1歲56～7955～701～18歲57～8057～80（注：各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有自己的參考范圍。）參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：總蛋白檢測(cè)對(duì)于多種疾病的診斷都有價(jià)值。肝臟蛋白合成缺陷、腎功能損傷引起蛋白丟失、腸道吸收不良或營(yíng)養(yǎng)不良時(shí)總蛋白濃度下降。而在慢性炎癥疾病、肝硬化和脫水時(shí)總蛋白濃度升高。14.操作性能14.1線性范圍：0.5～150g/L14.2精密度：重復(fù)性的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，AU1000批內(nèi)重復(fù)性小于3%，總不精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)天間精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)樣品152.70.50.91樣品152.40.61.06樣品270.50.71.01樣品270.71.11.53樣品31040.80.80樣品31041.41.3214.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)68個(gè)樣品進(jìn)行TP檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=1.00x-0.7g/L；r=0.997。14.4靈敏度：本試劑的檢測(cè)限為0.5g/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍0～150g/L，如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。15.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為150g/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。16.病危報(bào)警值的處理無(wú)。17.方法局限性17.1本法線性上限為150g/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì)：靜脈滴注大量右旋糖酐的病人血清或血漿，使用雙縮脲方法的檢測(cè)結(jié)果會(huì)明顯增高，請(qǐng)選用其它方法（如凱氏定氮法）；當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度11.3mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清白蛋白溴甲酚綠法測(cè)定生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清白蛋白（ALB）溴甲酚綠（BCG）法測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理在pH值4.2時(shí)，白蛋白和溴甲酚綠染料結(jié)合產(chǎn)生藍(lán)綠色復(fù)合物，在630nm處比色，顏色的深度與白蛋白濃度成正比。pH4.2白蛋白+溴甲酚綠綠色化合物2.標(biāo)本采集2.1病人準(zhǔn)備：無(wú)特殊要求。最好用禁食的標(biāo)本以減少乳糜血的干擾。2.2類型：血清、肝素或EDTA血漿。3.標(biāo)本存放留取標(biāo)本后請(qǐng)盡快分離血清/血漿。在室溫條件下（15～25℃）可以穩(wěn)定一周，在冰箱保存的條件下（2～8℃）穩(wěn)定一個(gè)月，-20℃保存至少可以穩(wěn)定3個(gè)月。4.標(biāo)本運(yùn)輸室溫條件下運(yùn)輸5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的不能做測(cè)定。6.實(shí)驗(yàn)材料:6.1上海申能白蛋白測(cè)定試劑盒（貨號(hào)：11202271701，8×70ml）6.1.1試劑組成檸檬酸鹽緩沖液pH4.230mmol/L溴甲酚綠(BCG)0.26mmol/L表面活性劑適量6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑避光保存于2～25℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑有效期為24個(gè)月。試劑不可冰凍。開(kāi)蓋后應(yīng)避免污染。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時(shí)，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：避免試劑與皮膚及粘膜接觸。6.2校準(zhǔn)品：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件6.3質(zhì)控品：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品白蛋白校準(zhǔn)值或標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果。手工測(cè)定計(jì)算方法為：Au白蛋白(g/L)=×校準(zhǔn)液濃度As12.參考值范圍成人35～52g/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：白蛋白是血漿中多種物質(zhì)重要的結(jié)合與運(yùn)輸?shù)鞍?，并是維持血漿滲透壓的主要組分。血清白蛋白可用于眾多疾病的診斷。血清白蛋白升高通常見(jiàn)于脫水的。血清白蛋白降低多見(jiàn)于營(yíng)養(yǎng)不良、腎臟疾病，肝臟疾病，感染性疾病，嚴(yán)重的燒傷和癌癥。白蛋白的定量測(cè)定有助于對(duì)肝臟疾病如肝硬化的診斷與監(jiān)視。此外，白蛋白量反映了個(gè)體的健康與營(yíng)養(yǎng)狀況，因此可用于營(yíng)養(yǎng)不良的診斷及老年住院患者的預(yù)后評(píng)估。14.操作性能14.1線性范圍2～60g/L14.2精密度：重復(fù)性的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，AU1000批內(nèi)重復(fù)性小于3%，總不精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)天間精密度n=20(g/L)s(g/L)CV(%)樣品135.20.30.91樣品133.50.51.58樣品245.00.51.12樣品243.20.61.44樣品368.91.21.79樣品367.31.11.6014.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)59個(gè)樣品進(jìn)行ALB檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=1.00x-1.1g/L；r=0.99814.4靈敏度：2g/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍：2～60g/L，如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。15.超出范圍結(jié)果處理本法線性上限為60g/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。16.病危報(bào)警值的處理17.方法局限性17.1本法線性上限為60g/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9％氯化鈉溶液作1:1稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以2。17.2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度4.00g/L，甘油三酯濃度5.63mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾。18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定（IFCC推薦法）實(shí)驗(yàn)原理國(guó)際臨床化學(xué)學(xué)會(huì)(IFCC)推薦的紫外連續(xù)監(jiān)測(cè)法。ALTLDH（乳酸脫氫酶）L-丙氨酸+-酮戊二酸丙酮酸+L-谷氨酸LDH（乳酸脫氫酶）丙酮酸+NADH+H+L-乳酸+NAD++H2O加入磷酸吡哆醛（P-5-P）是為了穩(wěn)定ALT活性，避免樣品中因內(nèi)源性磷酸吡哆醛不足造成測(cè)定結(jié)果假性偏低。(如心肌梗死、肝病和特別監(jiān)護(hù)病人的結(jié)果)[1]2.標(biāo)本： 2.1病人準(zhǔn)備：12小時(shí)禁食。2.2類型：血清，肝素或EDTA血漿。3.標(biāo)本存放：3天內(nèi)的活性損失：2～8℃保存：<10%；15～25℃保存：<17%；標(biāo)本穩(wěn)定性：-20℃保存至少可穩(wěn)定4周。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染的標(biāo)本。6.實(shí)驗(yàn)材料6.1試劑申能ALT測(cè)定試劑盒（貨號(hào)：141270171701試劑16×64ml試劑26×16ml）6.1.1試劑組成試劑1（R1）：Tris緩沖液pH7.5100mmol/LL-丙氨酸500mmol/LLDH（乳酸脫氫酶） ≥1200U/L試劑2（R2）：a-酮戊二酸 15mmol/LNADH 0.18mmol/L磷酸吡哆醛試劑：Good’s緩沖液pH9.60.7mmol/L磷酸吡哆醛 0.09mmol/L6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見(jiàn)的微生物生長(zhǎng)，有濁度，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。6.2校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品ALT校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果，以U/L報(bào)告。12.參考值范圍[4]不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛女性<31U/L10～35U/L男性<41U/L10～50U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義[1,2]：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）舊稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT），天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）舊稱谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）。它們是氨基轉(zhuǎn)移酶類的典型代表。氨基轉(zhuǎn)移酶催化氨基從氨基酸轉(zhuǎn)移給-酮酸的反應(yīng)。ALT是肝臟的特異性酶，僅在肝膽疾病時(shí)顯著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌損傷，以及肝組織損害等都有關(guān)。因此同時(shí)進(jìn)行ALT和AST的檢測(cè)，可用于鑒別肝損傷和心肌或骨骼肌損傷。AST/ALT比率用于肝病的鑒別診斷。比率<1預(yù)示中度的肝損傷；比率>1和嚴(yán)重肝病有關(guān)，常見(jiàn)慢性肝病。14.操作性能14.1線性范圍4～800U/L14.2精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，AU1000批內(nèi)精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。不含磷酸吡哆醛批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品122.80.703.08樣品122.21.386.22樣品242.60.681.60樣品244.81.172.62樣品399.30.920.92樣品31011.021.00含磷酸吡哆醛批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)批間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品133.30.992.96樣品133.81.253.71樣品272.11.361.88樣品272.02.042.83樣品31331.761.32樣品31282.772.1614.3方法學(xué)比較：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)78個(gè)樣品進(jìn)行ALT活力檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)80個(gè)樣品進(jìn)行ALT活力檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.994。14.4靈敏度：本試劑的檢測(cè)限為4U/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍4U/L-800U/L15.超出范圍結(jié)果處理本法對(duì)ALT活力檢測(cè)的最大ΔA/min在340、334nm為0.16,在365nm為0.08。當(dāng)樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1：9稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以10。16.病危報(bào)警值的處理17.方法局限性17.1本法對(duì)ALT活力檢測(cè)的最大ΔA/min在340、334nm為0.16,在365nm為0.08。當(dāng)樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1：9稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以10。17.2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度4.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾。18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶IFCC推薦方法測(cè)定1.實(shí)驗(yàn)原理：國(guó)際臨床化學(xué)學(xué)會(huì)(IFCC)推薦的紫外連續(xù)監(jiān)測(cè)法。L-天門(mén)冬氨酸+-酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸草酰乙酸+NADH+H+MDH蘋(píng)果酸脫氫酶L-蘋(píng)果酸+NAD++H2O2.標(biāo)本： 2.1病人準(zhǔn)備：12小時(shí)禁食。2.2類型：血清，肝素或EDTA血漿。3.標(biāo)本存放：3天內(nèi)的活性損失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<10%；標(biāo)本穩(wěn)定性：-20℃保存至少可穩(wěn)定3個(gè)月。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染的標(biāo)本。6.實(shí)驗(yàn)材料6.1試劑：申能AST測(cè)定試劑盒（貨號(hào)：141260171701試劑1：6×64ml；試劑2：6×16ml）6.1.1試劑組成試劑1（R1）：Tris緩沖液pH7.880mmol/LL-天門(mén)冬氨酸 240mmol/LMDH(蘋(píng)果酸脫氫酶)≥600U/LLDH(乳酸脫氫酶) ≥600U/L試劑2(R2)：a-酮戊二酸 12mmol/LNADH 0.18mmol/L磷酸吡哆醛試劑：Good’s緩沖液pH9.60.7mmol/L磷酸吡哆醛0.09mmol/L6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存試劑保存于2～8℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見(jiàn)的微生物生長(zhǎng)，有濁度，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：試劑中含疊氮鈉（0.95g/L）為防腐劑。不可入口！避免接觸皮膚及粘膜。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。6.2校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品AST校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果。不使用校準(zhǔn)品進(jìn)行AST活力檢測(cè)，可以直接使用ΔA/min均值乘以計(jì)算因子得到結(jié)果，但是這樣所得結(jié)果的可靠性不如使用校準(zhǔn)品。計(jì)算ALT活力的計(jì)算因子見(jiàn)下表：ΔA/min×因子=AST活力[U/L]底物起始的反應(yīng)（37℃）樣品起始的反應(yīng)（37℃）340nm21431745334nm21841780365nm3971323512.參考值范圍[4]不含磷酸吡哆醛含磷酸吡哆醛女性<31U/L10～35U/L男性<37U/L10～50U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義[1,2]丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）舊稱谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT），天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）舊稱谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）。它們是氨基轉(zhuǎn)移酶類的典型代表。氨基轉(zhuǎn)移酶催化氨基從氨基酸轉(zhuǎn)移給-酮酸的反應(yīng)。ALT是肝臟的特異性酶，僅在肝膽疾病時(shí)顯著升高。而AST水平的升高和心肌或骨骼肌損傷，以及肝組織損害等都有關(guān)。因此同時(shí)進(jìn)行ALT和AST的檢測(cè)用于鑒別肝損傷和心肌或骨骼肌損傷。AST/ALT比率可用于肝病的鑒別診斷。比率<1預(yù)示中度的肝損傷；比率>1和嚴(yán)重肝病有關(guān)，常見(jiàn)慢性肝病。14.操作性能14.1線性范圍2-800U/L。14.2精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，AU1000批內(nèi)精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。不含磷酸吡哆醛批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品125.10.823.25樣品125.71.134.40樣品251.31.573.06樣品248.60.671.38樣品31160.900.77樣品31150.800.69含磷酸吡哆醛批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)天間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品143.61.102.51樣品144.01.593.61樣品274.51.792.41樣品277.03.053.97樣品31743.181.83樣品31873.371.8014.3方法學(xué)比較：不含磷酸吡哆醛本公司不含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)78個(gè)樣品進(jìn)行AST活力檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=0.98x-0.51U/L；r=0.999。含磷酸吡哆醛本公司含磷酸吡哆醛的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)80個(gè)樣品進(jìn)行AST活力檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=0.97x-0.79U/L；r=0.995。14.4靈敏度：本試劑的檢測(cè)限為2U/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍2-800U/L。15.超出范圍結(jié)果處理：本法對(duì)AST活力檢測(cè)的最大ΔA/min在340、334nm為0.16，在365nm為0.08。當(dāng)樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以10。16.病危報(bào)警值的處理無(wú)。17.方法局限性17.1本法對(duì)AST活力檢測(cè)的最大ΔA/min在340、334nm為0.16,在365nm為0.08。當(dāng)樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以10。17.2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾。紅細(xì)胞內(nèi)富含AST，因此溶血血清檢測(cè)結(jié)果明顯偏高。18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清淀粉酶測(cè)定生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清堿性磷酸酶（ALP）磷酸對(duì)硝基苯酚法測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理堿性磷酸酶的活性由在pH值為10.4，2-氨基-2甲基-1-丙醇（AMP）存在的情況下測(cè)量p-硝基-磷酸苯酯（pNPP）的轉(zhuǎn)換速率決定。ALPpNPP+AMP﹥pNP+AMP-PO4在410/480nm測(cè)定pNP的生成速率，它與標(biāo)本中ALP的活性成正比。2.標(biāo)本采集與處理：2.1病人準(zhǔn)備：無(wú)特殊要求。2.2標(biāo)本類型：標(biāo)本最好是無(wú)溶血的血清或肝素化的血漿。2.3血清分離：應(yīng)在收集后兩小時(shí)內(nèi)分離出來(lái)。避免使用含EDTA或草酸鹽的血漿。3.標(biāo)本存放：2～3天內(nèi)的活性損失：15～25℃保存：<10%；標(biāo)本穩(wěn)定性：4～8℃保存穩(wěn)定7天；-20℃保存至少可穩(wěn)定2個(gè)月標(biāo)本。如果分析延遲8小時(shí)以上，最好把血清冷藏。冷凍的血清在融解后會(huì)表現(xiàn)出血清值的顯著降低。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下運(yùn)輸5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的不能做測(cè)定。6.實(shí)驗(yàn)材料：6.1上海申能ALP測(cè)定試劑盒試劑16×64ml＋試劑26×16ml）6.1.1試劑組成試劑1：2-氨基-2甲基-1-丙醇（AMP）緩沖液0.90mol/L（pH:10.4）醋酸鎂1.6mmol/L硫酸鋅0.4mmol/LHEDTA2.0mmol/L試劑2：磷酸對(duì)硝基酚16.0mmol/L6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：原試劑避光保存于2～8℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有濁度時(shí)，表明有細(xì)菌污染，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：堿性磷酸酶試劑中含疊氮鈉，避免接觸皮膚及粘膜。反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的對(duì)硝基苯酚有毒性，切勿吸入、吞食、接觸皮膚或粘膜。若反應(yīng)液與皮膚或粘膜接觸，請(qǐng)速用水沖洗。6.2校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品ALP校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果。不使用校準(zhǔn)品進(jìn)行ALP活力檢測(cè)，可以直接使用ΔA/min均值乘以計(jì)算因子得到結(jié)果，但是這樣所得結(jié)果的可靠性不如使用校準(zhǔn)品。計(jì)算ALP活力的計(jì)算因子見(jiàn)下：ΔA/min×因子=ALP活力[U/L]底物起始的反應(yīng)（37℃）樣品起始的反應(yīng)（37℃）05nm3433275712.參考值范圍成年人[4]男性20～50歲53～128U/L男性60歲以上56～119U/L女性20～50歲42～98U/L女性60歲以上53～141U/L兒童[5]男性女性1～30天75～319U/L48～406U/L1個(gè)月～1歲82～383U/L124～341U/L1歲～3歲104～345U/L108～317U/L4歲～6歲93～309U/L96～297U/L7歲～9歲86～315U/L69～325U/L10歲～12歲42～362U/L51～332U/L13歲～15歲74～390U/L50～162U/L16歲～18歲52～171U/L47～119U/L參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義[1,2]：堿性磷酸酶（ALP）是一種在堿性條件下具有較強(qiáng)活性的水解酶，并以多種形態(tài)存在于血液中，其大多來(lái)自骨骼的成骨細(xì)胞和肝臟，也來(lái)源于其他一些組織例如腎臟、胎盤(pán)、腸、睪丸、胸腺、肺及腫瘤。在兒童生長(zhǎng)期和妊娠期，血清中ALP生理性活性增高，骨疾病與肝膽疾病等引起ALP病理性活性增高。在肝膽疾病中引起ALP活性增高的原因包括膽道梗阻，例如因膽結(jié)石、腫瘤或炎癥造成的膽汁郁積。在傳染性肝炎中也可發(fā)現(xiàn)ALP活性增高。在骨疾病中，Paget病、骨軟化癥（佝僂?。?、骨轉(zhuǎn)移瘤和甲狀旁腺功能亢進(jìn)等，使成骨活性升高引起ALP活力增高。14.操作性能14.1線性范圍2～850U/L14.2精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的典型方法5，AU1000批內(nèi)不精密度小于5%，總不精密度小于10%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則7。批內(nèi)精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)批間精密度n=20(U/L)s(U/L)CV(%)樣品197.81.151.18樣品11031.061.02樣品21891.820.96樣品21881.040.55樣品32351.680.72樣品32361.640.7014.3方法學(xué)比較：本公司試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)78個(gè)樣品進(jìn)行ALP活力檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=1.00x+0.00U/L；r=0.999。14.4靈敏度：本試劑的檢測(cè)限為2U/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍：2～850U/L15.超出范圍結(jié)果處理：本法對(duì)ALP活力檢測(cè)的最大ΔA/min在405nm為0.25。當(dāng)樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以10。16.病危報(bào)警值的處理17.方法局限性17.1本法對(duì)ALP活力檢測(cè)的最大ΔA/min在405nm為0.25。當(dāng)樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用9g/L氯化鈉溶液作1+9稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以10。17.2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度2.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清葡萄糖（氧化酶法）測(cè)定生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清葡萄糖（GLU）氧化酶測(cè)定法實(shí)驗(yàn)原理樣品中的葡萄糖在試劑中葡萄糖氧化酶（GOD）的催化作用下氧化生成葡萄糖酸和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶(POD)的催化下與苯胺類色原物質(zhì)和4-氨基安替比林作用產(chǎn)生水和醌亞胺色素，醌亞胺色素的生成量與樣品中葡萄糖的含量成正比，通過(guò)測(cè)定特定波長(zhǎng)反應(yīng)最終生成的色素量，可以計(jì)算樣品中葡萄糖的濃度。2.標(biāo)本： 2.1病人準(zhǔn)備：12小時(shí)禁食。2.2類型：血清或血漿（EDTA，肝素或氟化鈉），標(biāo)本最好不要溶血。迅速分離血清或血漿，減少紅細(xì)胞糖酵解時(shí)葡萄糖的損失。隨機(jī)收集尿樣。3.標(biāo)本存放：血清、血漿應(yīng)在血液采集1小時(shí)內(nèi)，盡早分離。加入糖分解抑制劑（NaF，KF）后的穩(wěn)定性：15～25℃保存可穩(wěn)定1天,4～8℃保存可穩(wěn)定7天。血清中的葡萄糖，無(wú)溶血，無(wú)細(xì)菌污染，沒(méi)有添加的防腐劑，在25℃下可穩(wěn)定8個(gè)小時(shí)，在4℃下可穩(wěn)定72小時(shí)。尿樣應(yīng)保存在2～8℃下并盡快進(jìn)行分析。腦脊髓液如果避免蒸發(fā)可在2～8℃下穩(wěn)定至少5天，5天內(nèi)不檢驗(yàn)的標(biāo)本應(yīng)在收集后立即儲(chǔ)存在-20℃的條件下。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染、超時(shí)送檢的的標(biāo)本。6.實(shí)驗(yàn)材料6.1試劑迪瑞血糖測(cè)定試劑盒試劑14×50ml＋試劑21×50ml）6.1.1試劑組成試劑1：過(guò)氧化物酶375U\L4-羥基苯甲酸15mmol/L4-氨基安替比林0.75mmol/L磷酸鹽緩沖液110mmol/L試劑2：葡萄糖氧化酶6KU/L磷酸鹽緩沖液110mmol/L6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～8℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見(jiàn)的微生物生長(zhǎng)，有濁度，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：此試劑為體外診斷用。不要入口，吞下有害。保護(hù)劑為疊氮鈉，避免接觸皮膚及粘膜，與下水管中的鉛反應(yīng)形成爆炸性化合物，即使只含有少量的疊氮鈉，如排向下水道請(qǐng)用大量的水沖洗。6.2校準(zhǔn)品：建議使用試劑盒配套的校準(zhǔn)品，以純化水和校準(zhǔn)品進(jìn)行2點(diǎn)校準(zhǔn)測(cè)定。測(cè)定后儀器自動(dòng)擬合成校準(zhǔn)曲線。當(dāng)試劑號(hào)更換或質(zhì)控失控時(shí)。需要重新校準(zhǔn)。具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：美康MH-880生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)美康MH-880生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)美康MH-880生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品血糖校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果，以mmol/L報(bào)告。手工測(cè)定計(jì)算方法為：Au 葡萄糖濃度（mmol/L）＝×校準(zhǔn)液濃度 As12.參考值范圍：（mmol/L）新生兒 臍帶血 3.5～8.81小時(shí) 2.0～5.52小時(shí)2.2～4.95～14小時(shí)1.9～4.310～28小時(shí)2.6～4.544～52小時(shí)2.7～4.4兒童（空腹）1～6歲4.1～7.07～19歲3.9～5.9成人（空腹）3.9～6.11參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：檢測(cè)血清或血漿中葡萄糖主要用于糖尿病的診斷和治療監(jiān)視，還可用于檢出新生兒低血糖癥、排除胰島細(xì)胞癌以及評(píng)估各種疾病碳水化合物代謝狀況。血清葡萄糖水平可能會(huì)異常高（高血糖）或異常低（低血糖）。葡萄糖測(cè)量用于診斷和治療碳水化合物代謝紊亂，包括糖尿病，新生兒低血糖，自發(fā)性低血糖，郎格罕氏島細(xì)胞癌等。葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，懷孕的婦女中很常見(jiàn)。妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之間或一天之中有一個(gè)顯著的變化。腦脊髓液（CSF）葡萄糖的測(cè)定幫助區(qū)別病毒性腦膜炎與細(xì)菌性腦膜炎；細(xì)菌性腦膜炎和結(jié)核性腦膜炎中的葡萄糖值通常很低（不到的40%至50%血清葡萄糖），病毒性腦膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。癌性腦膜炎（腫瘤細(xì)胞在腦膜中廣泛滲透）也使CSF葡萄糖值在正常值以下。14.操作性能14.1線性范圍：0mmol/L～30mmol/L14.2精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，AU1000批內(nèi)精密度小于3%，總精密度小于3%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)批間精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)樣品15.050.0470.94樣品13.650.0772.11樣品26.500.0590.91樣品26.720.1422.11樣品316.100.1270.79樣品316.540.2961.7914.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)76個(gè)樣品進(jìn)行GLU檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=1.00x+0.00mmol/L；r=0.998。14.4靈敏度：本試劑的檢測(cè)限為0.1mmol/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍：0.1～28mmol/L15.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限為30mmol/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:10稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以11。16.危急值的處理：女性及嬰兒的血糖測(cè)定值<2.2mmo/L或者>22.2mmol/L；男性的血糖測(cè)定值<2.7mmo/L或>22.2mmol/L；新生兒的血糖測(cè)定值<1.6mmo/L或>16.6mmol/L時(shí)，在經(jīng)過(guò)復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時(shí)向臨床主管醫(yī)生匯報(bào)。17.方法局限性17.1本法線性上限為30mmol/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9%氯化鈉溶液作1:10稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以11。17.2干擾物質(zhì)：使用試劑起始法，當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾。18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0主題內(nèi)容血清尿素氮谷氨酸脫氫酶測(cè)定法生效日期：2017.8.30頁(yè)碼：血清尿素氮（BUN）谷氨酸脫氫酶測(cè)定法實(shí)驗(yàn)原理脲酶-谷氨酸脫氫酶（Urease-GLDH）連續(xù)監(jiān)測(cè)法。尿素被脲酶水解產(chǎn)氨。在NADH的存在下，氨和α-酮戊二酸反應(yīng)生成谷氨酸，NADH同時(shí)被氧化成NAD＋。NADH的減少和樣品中尿素濃度成正比。本法是連續(xù)監(jiān)測(cè)法。脲酶尿素+2H2O2NH4＋+2HCO3－谷氨酸脫氫酶NH4＋+α-酮戊二酸+NADHL-谷氨酸+NAD＋+H2O2標(biāo)本：2.1病人準(zhǔn)備：血清無(wú)特殊要求。要留取24小時(shí)尿樣。2.2類型：血清、血漿（不可使用肝素銨）、新鮮尿液。無(wú)溶血和凝塊的血清，如果必須使用血漿，建議使用無(wú)銨離子的抗凝血?jiǎng)鏓DTA和肝素鈉。用新鮮尿液作樣品時(shí)，用蒸餾水作1:100稀釋。3.標(biāo)本存放：血清或血漿穩(wěn)定性：4～25℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定1年。尿液穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定2天；4～8℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存可穩(wěn)定1個(gè)月。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下保存運(yùn)輸。5.標(biāo)本拒收標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的標(biāo)本。6.實(shí)驗(yàn)材料6.1試劑：申能尿素測(cè)定試劑盒劑1：6×64ml＋試劑2：6×16ml）6.1.1試劑組成試劑1：Tris緩沖液pH7.8120mmol/Lα-酮戊二酸7mmol/LADP0.6mmol/L谷氨酸脫氫酶≥1000U/L脲酶≥6000U/L試劑2：NADH0.25mmol/L6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存試劑保存于2～25℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見(jiàn)的微生物生長(zhǎng)，有濁度，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：此試劑為體外診斷用。不要入口，吞下有害。保護(hù)劑為疊氮鈉，避免接觸皮膚及粘膜，與下水管中的鉛反應(yīng)形成爆炸性化合物，即使只含有少量的疊氮鈉，如果排向下水道請(qǐng)用大量的水沖洗。應(yīng)采取必要的預(yù)防措施使用試劑。6.2校準(zhǔn)品：使用DiaSys公司提供的TruCalU校準(zhǔn)品對(duì)自動(dòng)分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。6.3質(zhì)控品：具體參見(jiàn)生化檢驗(yàn)校準(zhǔn)品和質(zhì)控品.SOP文件。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.檢驗(yàn)結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品尿素氮校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠的檢測(cè)結(jié)果，以mmol/L報(bào)告。將尿素量乘以系數(shù)2.8可以換算成尿素氮量；將尿素氮量乘以系數(shù)0.357可以換算成尿素量。手工測(cè)定計(jì)算方法為：Au尿素氮濃度（mmol/L）＝×校準(zhǔn)液濃度As12.參考值范圍血清/血漿[1]成人（mmol/L）全球2.8～7.2女性<50歲2.6～6.7女性>50歲3.5～7.5男性<50歲3.2～7.3男性>50歲3.0～9.2兒童1～3歲1.8～6.04～13歲2.5～6.014～19歲2.9～7.5尿素/肌酐比率[1]25～40[(mmol/L)/(mmol/L)]尿液[2]0.43～0.72mol/d（注：各實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有自己的參考范圍。）參考值因性別、年齡、飲食和地域的不同而有所差別。根據(jù)好的實(shí)驗(yàn)室經(jīng)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立自己的參考值。13.臨床意義：尿素是蛋白質(zhì)分解代謝的含氮終產(chǎn)物。高尿素血癥或氮血癥表現(xiàn)為血液中尿素水平升高。鑒別腎前和腎后氮血癥時(shí)可以同時(shí)檢測(cè)尿素和肌酐。因脫水、蛋白質(zhì)代謝增加、皮質(zhì)醇治療或腎臟灌注減少等引起的腎前氮血癥，表現(xiàn)為尿素水平升高而肌酐水平正常。由泌尿管道阻塞引起的腎后氮血癥，表現(xiàn)為尿素和肌酐水平都升高，但肌酐升高程度較小。發(fā)生腎病時(shí)，腎小球?yàn)V過(guò)作用明顯下降或蛋白質(zhì)攝入量大于200g/天都會(huì)導(dǎo)致尿素濃度升高。尿素氮的檢測(cè)用于診斷和治療某些腎臟疾病和代謝紊亂。尿素氮大約占血液中非蛋白氮的75%。它通過(guò)肝臟中的氨進(jìn)行合成，是蛋白質(zhì)脫氨作用的產(chǎn)物。通過(guò)腎小球從血液中過(guò)濾尿素到尿中，是消除體內(nèi)多余氮的主要方法。血液尿素氮（BUN）水平是腎功能以及腎前狀態(tài)和腎后狀態(tài)的度量標(biāo)準(zhǔn)，腎前因素引起的BUN的升高包括心臟代償失調(diào)，缺水或增加的蛋白質(zhì)分解代謝。水平增加的腎臟因素有急性腎小球腎炎，慢性腎炎，多囊腎，腎纖維化和腎小管壞死。任何類型的泌尿道的梗塞受阻是BUN水平升高的腎后因素1。腎小球清除尿素和肌酸酐，但是，尿素隨后部分地被腎小管重吸收，然而肌酸酐卻不會(huì)。因此，血清尿素氮和血清肌酸酐測(cè)定經(jīng)常同時(shí)用于腎功能的不同診斷中。14.操作性能14.1線性范圍：0.3～50mmol/L14.2精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，AU1000批內(nèi)不精密度小于3%，總不精密度小于5%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)天間精密度n=20(mmol/L)s(mmol/L)CV(%)樣品14.960.275.41樣品15.230.305.79樣品28.770.273.13樣品28.770.343.87樣品319.480.251.27樣品319.480.552.8614.3方法學(xué)比較：本公司的試劑(y)與某商品化試劑(x)，同時(shí)對(duì)68個(gè)樣品進(jìn)行Urea檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=0.99x+0.176mmol/L；r=0.999。14.4靈敏度：本試劑的檢測(cè)限為0.3mmol/L。14.5病人結(jié)果可報(bào)告范圍：0.3～50mmol/L15.超出范圍結(jié)果處理：本法線性上限血清/血漿為50mmol/L、尿液為5mol/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9%的氯化鈉溶液作1:2稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以3。16.病危報(bào)警值的處理：當(dāng)尿素氮測(cè)定值>36mmol/L時(shí)，在經(jīng)過(guò)復(fù)查等確認(rèn)手段處理后應(yīng)及時(shí)向臨床主管醫(yī)生匯報(bào)。17.方法局限性17.1本法線性上限血清/血漿為50mmol/L、尿液為5mol/L。如樣品測(cè)定值超過(guò)上限時(shí)，應(yīng)將樣品用0.9%的氯化鈉溶液作1:2稀釋，重新測(cè)定，結(jié)果乘以3。17.2干擾物質(zhì)：當(dāng)樣品中抗壞血酸濃度1704mol/L，膽紅素濃度684mol/L，血紅蛋白濃度5.00g/L，甘油三酯濃度22.6mmol/L時(shí)沒(méi)有觀察到干擾。銨離子會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果，因此收集血漿時(shí)勿用肝素銨抗凝！18.補(bǔ)救措施：當(dāng)儀器發(fā)生故障時(shí)，迅速聯(lián)系儀器廠家進(jìn)行維修。檢驗(yàn)科生化作業(yè)指導(dǎo)書(shū)文件編號(hào)：YCWJZHMZB-2版本/修訂號(hào)：A/0生效日期：2017.8.30主題內(nèi)容血清肌酐（酶法）測(cè)定頁(yè)碼：血清肌酐（Creatine）酶法測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理樣本中的肌酐在試劑中肌酐酰胺水解酶的催化下水解成肌酸，肌酸在試劑中肌酸脒基水解酶的催化作用下，被水解成肌氨酸和尿素，肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下，生成肌氨酸與水和氧反應(yīng)，產(chǎn)生甘氨酸、甲醛和過(guò)氧化氫。生成的過(guò)氧化氫在過(guò)氧化物酶的催化下與苯胺類色原物質(zhì)和4-氨基安替比林作用產(chǎn)生水和醌亞胺色素的生成量與樣本中總肌酐的含量成正比，通過(guò)測(cè)定特定波長(zhǎng)處反應(yīng)最終生成的色素量，可計(jì)算出樣品中總肌酐的濃度。2.標(biāo)本采集2.1病人準(zhǔn)備：早晨空腹采血（空腹12小時(shí)左右），靜脈采血。2.2類型：血清，肝素血漿，尿液。2.3血漿樣本應(yīng)采用EDTA抗凝，應(yīng)不溶血。樣本采集后應(yīng)盡快分析。3.標(biāo)本存放：血清、血漿的穩(wěn)定性：4～25℃保存可穩(wěn)定7天；-20℃保存至少可穩(wěn)定3個(gè)月。尿液的穩(wěn)定性：20～25℃保存可穩(wěn)定2天；4～8℃保存可穩(wěn)定6天；-20℃保存可穩(wěn)定6個(gè)月對(duì)尿液用蒸餾水作1:49稀釋后檢測(cè)，結(jié)果乘50后報(bào)告。4.標(biāo)本運(yùn)輸：常溫條件下運(yùn)輸5.標(biāo)本拒收的標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌污染的標(biāo)本不能作測(cè)定。6.實(shí)驗(yàn)材料6.1長(zhǎng)春迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司試劑1：4×50ml＋試劑2：1×50ml）。6.1.1試劑組成：試劑1（R1）：Tris緩沖液100mmol/L、N-乙基-N磺基羥丙基-間-甲苯胺2mmol/、氯化鉀20mmol/、肌酸脒基水解酶400KU/L、肌氨酸氧化酶8KU/、辣根過(guò)氧化物酶700U/L.試劑2（R2）：Tris緩沖液100mmol/L、乙酸酶2mmol/L、4-氨基安替比林1.2mmol/L、肌酐酰胺水解酶40ku/L.6.1.2試劑準(zhǔn)備：試劑為即用式。6.1.3試劑穩(wěn)定性與貯存：試劑保存于2～25℃，若無(wú)污染，可穩(wěn)定至失效期。試劑不可冰凍。6.1.4變質(zhì)指示：當(dāng)試劑有看得見(jiàn)的微生物生長(zhǎng)，有濁度，或者未開(kāi)蓋的液體有沉淀時(shí)，表明試劑已變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。6.1.5注意事項(xiàng)：1.1本品僅用于體外診斷。1.2避免測(cè)試中途添加試劑。1.3試劑和樣本用量可根據(jù)不同儀器要求按比列改變。1.4若試劑混濁，不能再使用。6.2校準(zhǔn)品：建議使用試劑盒配套的校準(zhǔn)品，以純化水和校準(zhǔn)品進(jìn)行2點(diǎn)校準(zhǔn)測(cè)定。測(cè)定后儀器自動(dòng)擬合成校曲線。當(dāng)試劑批號(hào)更換或質(zhì)控失控時(shí)、需要重新校準(zhǔn)。6.3質(zhì)控品：建議使用迪瑞公司的質(zhì)控品，進(jìn)行質(zhì)量控制。實(shí)驗(yàn)室自行建立質(zhì)控區(qū)間和限值。若質(zhì)控值失控，每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)采取糾正措施。7.儀器：迪瑞CS-6400生化分析儀8.操作步驟8.1項(xiàng)目基本參數(shù)：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀項(xiàng)目測(cè)定參數(shù).SOP文件8.2儀器操作步驟：參見(jiàn)生化檢驗(yàn)CS-6400生化分析儀操作規(guī)程.SOP文件9.結(jié)果的判斷與分析10.質(zhì)量控制：在每一批標(biāo)本中都應(yīng)把非定值血清水平I與II質(zhì)控做為未知標(biāo)本進(jìn)行分析，以2S為質(zhì)控警告限，3S為失控限，繪制質(zhì)控圖，判斷是否在控。質(zhì)控規(guī)則參見(jiàn)生化室室內(nèi)質(zhì)控操作規(guī)程.SOP文件。11.計(jì)算方法：以TruCalU復(fù)合校準(zhǔn)品肌酐校準(zhǔn)值校準(zhǔn)儀器后，在病人結(jié)果可報(bào)告范圍內(nèi)，儀器直接報(bào)告可靠檢測(cè)結(jié)果，以mmol/L報(bào)告。12.參考值范圍血清/血漿[1]女性45～84mmol/L男性59～104mmol/L尿液[1]女性177～195mmol/L男性210～230mmol/L13.臨床意義：肌酐是通過(guò)腎臟經(jīng)由腎小球?yàn)V過(guò)作用排泄的廢物。健康人血漿中肌酐的濃度相當(dāng)穩(wěn)定，與每天水的攝取量、活動(dòng)和生成尿量無(wú)關(guān)。因此血漿肌酐水平升高常指示排泄量的降低，即腎功能受損。肌酐清除率能較好地評(píng)估腎小球?yàn)V過(guò)率（GFR），通過(guò)它能較好地檢出腎病和監(jiān)視腎功能。為此，在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)同時(shí)收集血清和尿液，進(jìn)行肌酐檢測(cè)。肌酐經(jīng)腎小球?yàn)V過(guò)后不被腎小管重吸收,通過(guò)腎小管排泄。在腎臟疾病初期,血清肌酐值通常不升高,直至腎臟實(shí)質(zhì)性損害,血清肌酐值才增高。在正常腎血流條件下，肌酐值如升高至176～353μmol/L,提示為中度至嚴(yán)重的腎損害。所以,血肌酐測(cè)定對(duì)晚期腎臟病臨床意義較大。14.操作性能14.1線性范圍：0μmol/L～2500μmol/L14.2精密度：精密度的評(píng)估是根據(jù)NCCLS推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法，AU1000批內(nèi)不精密度小于3%，總不精密度小于5%。用于分析的質(zhì)控血清和數(shù)據(jù)處理符合以上的NCCLS的規(guī)則。批內(nèi)精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)批間精密度n=20(mol/L)s(mol/L)CV(%)樣品171.62.63.63樣品169.84.56.45樣品2141.41.20.87樣品2137.93.32.38樣品3506.54.30.85樣品3507.44.20.8314.3方法學(xué)比較：本公司的試劑盒(y)與某商品化試劑盒(x)，同時(shí)對(duì)68個(gè)樣品進(jìn)行Crea檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果作方法學(xué)比較，其統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下：y=1.01x-2.65mol/L；r=1.000。14.