馬鈴薯莖尖脫毒新技術（病毒鈍化）操作規(guī)程_第1頁
馬鈴薯莖尖脫毒新技術（病毒鈍化）操作規(guī)程_第2頁
馬鈴薯莖尖脫毒新技術（病毒鈍化）操作規(guī)程_第3頁
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文檔簡介

1馬鈴薯莖尖脫毒新技術（病毒鈍化）規(guī)程本文件規(guī)定了馬鈴薯莖尖脫毒技術的術語與定義、材料選擇、催芽處理、材料消毒、資源材料保存、病毒鈍化的技術和方法。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內容通過文中的規(guī)范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T29375-2012馬鈴薯脫毒試管苗繁育技術規(guī)程3術語與定義下列術語和定義適用于本文件。3.1莖尖脫毒shoottipdetoxification根據病毒在植株體內分布不均勻性及越靠近新生組織部位（如莖尖和根尖頂端生長點、新生芽的生長錐等處）病毒含量越少的原理，通過剝取莖尖分生組織進行培養(yǎng)獲得脫毒植株。3.2病毒鈍化virusinactivation病毒在一定條件下（高溫、抗病毒藥劑）出現不侵染植株或已侵染植株緩慢。4材料選擇選擇具有品種典型特性、生長健壯，無明顯病癥的單株作為脫毒基礎材料。5催芽處理將入選材料打破休眠，通過自然發(fā)芽，散光晾曬，待頂芽生長至2～3cm時待用。6材料消毒2取1cm頂芽放入器皿中，自來水沖洗30min后用75%酒精浸泡10s，無菌水沖洗3次，再用5%次氯酸鈉溶液浸泡15min，無菌水沖洗3次，放在已滅菌的培養(yǎng)皿中待用。7資源材料保存在超凈工作臺上，將消毒處理過的材料接入MS培養(yǎng)基中，25℃條件下，光照/黑暗交替12h、3000LX下培養(yǎng)、保存。8病毒鈍化8.1培養(yǎng)基配制選擇合適的培養(yǎng)基是莖尖培養(yǎng)成功與否的關鍵，參照GB/T29375-2012馬鈴薯脫毒試管苗繁育技術規(guī)程，配制MS+6-BA0.2ppm+NAA0.05ppm+病毒唑注射液40mg/kg，pH5.8的鈍化培養(yǎng)基組合。8.2接種將保存苗的頂端部分1cm組織接入鈍化培養(yǎng)基中培養(yǎng)。8.3高溫鈍化將鈍化培養(yǎng)基中的薯苗正常培養(yǎng)7d后，放入37℃條件下，弱光1500LX條件下培養(yǎng)，誘導內源生長素產生，使苗徒長，鈍化病毒，增大無毒區(qū)間。8.4脫毒經高溫處理15d后的材料，取其頂芽1mm接入普通MS培養(yǎng)基中，25℃條件下，光照12h，3000

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