【雞大腸桿菌病治療探究4600字（論文）】

雞大腸桿菌病治療研究目錄TOC\o"1-2"\h\u21263摘要 282261前言 2126581.1國(guó)內(nèi)外雞大腸桿菌病治療研究的進(jìn)展 2134861.2雞大腸桿菌病的病理特征 2290901.3本試驗(yàn)的研究目的意義 3251492材料與方法 3265492.1材料 3103382.1.2試驗(yàn)試劑 3212862.1.3試驗(yàn)器材 3322432.2試驗(yàn)方法 3123982.2.1試驗(yàn)動(dòng)物分組及處理 3100422.2.2確定雞的感染成功 4207352.2.3治療考核指標(biāo) 513522.2.4統(tǒng)計(jì)分析 5200333結(jié)果與分析 5234413.1試驗(yàn)各組對(duì)人工感染雞大腸桿菌病的治療作用 5290473.2試驗(yàn)各組對(duì)人工感染大腸桿菌雞只血清生化指標(biāo)的影響 632754表2試驗(yàn)各組雞血清生化指標(biāo)的對(duì)比 617743.3試驗(yàn)各組對(duì)人工感染大腸桿菌雞只血常規(guī)指標(biāo)的影響 612774表3試驗(yàn)各組雞血常指標(biāo)的對(duì)比 7111784討論 7243284.1雞大腸桿菌治療效果討論 7288944.2黃連解毒湯的作用機(jī)理 8198995結(jié)論 8摘要摘要：目的:探究黃連解毒湯對(duì)肉雞人工感染大腸桿菌病的治療效果和最佳使用濃度。方法：試驗(yàn)選取100只健康的雛雞，隨機(jī)選取20只為健康組，其余的雛雞人工感染雞大腸桿菌后將其隨機(jī)分成4組，分別為感染對(duì)照組和低、中、高濃度黃連解毒湯治療組。觀察各組臨床癥狀變化和檢測(cè)血清生化指標(biāo)及血常規(guī)指標(biāo)。結(jié)果:感染組與中、高濃度黃連解毒湯治療組的死亡率相比差異極顯著(p<0.01)，中濃度黃連解毒湯治療組的谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶活性極顯著低于攻毒對(duì)照組（p<0.01），中濃度黃連解毒湯治療組的白細(xì)胞數(shù)分別極顯著低于攻毒對(duì)照組（p<0.01），中濃度黃連解毒湯治療組的凝血細(xì)胞數(shù)顯著高于攻毒對(duì)照組（p<0.05）。結(jié)論：中濃度黃連解毒湯對(duì)肉雞人工感染大腸桿菌病的治療效果良好。關(guān)鍵詞：黃連解毒湯雞大腸桿菌治療效果1前言雞大腸桿菌病是一種由雞致病性大腸桿菌局部或全身感染引起的急性或慢性傳染病[1],是雞類養(yǎng)殖的常見(jiàn)病和高發(fā)病，發(fā)展速度較快，不僅通過(guò)接觸傳播還可通過(guò)空氣進(jìn)行呼吸道傳播[2]，春、冬發(fā)病多，夏、秋發(fā)病少各日齡都有，是嚴(yán)重危害世界養(yǎng)禽業(yè)的三大細(xì)菌病之一，給養(yǎng)雞業(yè)造成了嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。1.1國(guó)內(nèi)外雞大腸桿菌病治療研究的進(jìn)展前人對(duì)雞大腸桿菌病的治療進(jìn)行了許多研究，大量研究表明復(fù)方中藥對(duì)雞大腸桿菌病有治療作用，沈永恕[3]等用復(fù)方中藥“禽痢康”對(duì)雞大腸桿菌病進(jìn)行了治療試驗(yàn)，連用5d對(duì)雞大腸桿菌病平均治愈率可達(dá)97％。張丁華等[4]試驗(yàn)研究表明，用黃柏、黃連、秦皮等13味藥物組方的復(fù)方中草藥添加到飼料中去治療雞大腸桿菌病的平均治愈率和有效率分別達(dá)到89.1%和94.1%。以上研究均表明，中藥對(duì)雞大腸桿菌病有很好的治療作用。1.2雞大腸桿菌病的病理特征發(fā)病雛雞主要以肝周炎、氣囊炎、敗血癥和心包炎為主要特征；病理癥狀為發(fā)熱，被毛松亂，離群呆立，精神不振,食欲降低或廢絕，排綠色水樣糞便或黃白色水樣腹瀉,嚴(yán)重者臥地不起，隨后出現(xiàn)死亡。剖檢可見(jiàn)脾臟、肝臟腫大易碎，肝臟充血，有大量滲出物，心包發(fā)炎，心包腔中有大量纖維素性滲出物；氣囊渾濁，有干酪樣物質(zhì)覆蓋[5]。1.3本試驗(yàn)的研究目的意義探究合適的黃連解毒湯濃度來(lái)治療雞大腸桿菌病，為以后治療大腸桿菌病提供依據(jù)。2材料與方法2.1材料2.1.1試驗(yàn)動(dòng)物采用的試驗(yàn)動(dòng)物購(gòu)自張家口養(yǎng)雞專業(yè)戶，試驗(yàn)雞只選用體況相當(dāng)而且未經(jīng)過(guò)免疫雞大腸桿菌疫苗的健康雛雞。2.1.2試驗(yàn)試劑大腸桿菌購(gòu)自中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所；試驗(yàn)用中藥購(gòu)于利民大藥房；蛋白胨、瓊脂、牛肉浸膏，深圳康泰生物制品股份有限公司。2.1.2.1菌液的制備大腸桿菌菌種復(fù)壯后用接種環(huán)劃線接種在瓊脂平皿上,放于37℃恒溫箱中培養(yǎng)24h至長(zhǎng)出菌落,選取典型大腸桿菌菌株于肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h，采用傾注法倒平板，最后用稀釋法計(jì)數(shù)。2.1.2.2中藥的制備根據(jù)所選處方稱量中草藥黃連15g、黃芩10g、黃柏10g、梔子5g三份，分別加蒸餾水1200mL浸泡一小時(shí)，武火煎沸改用文火煎煮，三份體積分別加熱濃縮至80ml、40ml、20ml，其濃度分別為0.5g·mL-1（低）、1.0g·mL-1（中）、2.0g·mL-1（高），放冷，冷藏于4℃冰箱中備用。2.1.3試驗(yàn)器材普通光學(xué)顯微鏡，型號(hào)XSP3B，上海巴拓儀器有限公司；生化測(cè)定試劑盒，中生北控生物科技股份有限公司；血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，上海市求精生化試劑儀器有限公司。2.2試驗(yàn)方法2.2.1試驗(yàn)動(dòng)物分組及處理本試驗(yàn)選用15日齡未經(jīng)免疫雞大腸桿菌疫苗的健康雛雞100只，隨機(jī)選取20只為健康組，其余的雛雞均用雞大腸桿菌O1于胸部肌肉注射攻毒，每只1ml，然后根據(jù)病理癥狀、染色鏡檢和生化試驗(yàn)鑒定確認(rèn)感染成功后，將其隨機(jī)分成四組，每20只一組。1組為健康對(duì)照組，隔離飼養(yǎng)；2組為感染對(duì)照組，只攻毒不給藥；3組為低濃度黃連解毒湯治療組，早晚各灌胃1次，每次1ml\只；4組為中濃度黃連解毒湯治療組，早晚各灌胃1次，每次1ml\只；5組為高濃度黃連解毒湯治療組，早晚各灌胃1次，每次1ml\只；1，3，4，5組連續(xù)用藥治療5天后，停止用藥，一周后觀察記錄。2.2.2確定雞的感染成功2.2.2.1根據(jù)病理癥狀確定雛雞表現(xiàn)為精神沉郁，食欲下降，羽毛松亂，閉眼縮頸，擠堆，腹瀉，嚴(yán)重者出現(xiàn)死亡。2.2.2.2染色鏡檢分離菌培養(yǎng)物涂片，干燥固定后做革蘭氏染色鏡檢于顯微鏡下觀察，鏡檢可見(jiàn)兩端鈍圓、散在或成對(duì)存在的革蘭氏陰性紅色短桿菌[6]，有菌毛，無(wú)可見(jiàn)的莢膜，無(wú)芽孢[7]，可初步判斷為大腸桿菌。2.2.2.3生化試驗(yàn)鑒定將鏡檢結(jié)果為陽(yáng)性的細(xì)菌接種于葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、吲哚、M-R、V-P細(xì)菌生化微量鑒定管中及三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基中進(jìn)行生化試驗(yàn)鑒定。菌株使麥芽糖、甘露醇、葡萄糖、蔗糖、乳糖、山梨醇發(fā)酵；能在三糖鐵培養(yǎng)基上產(chǎn)酸產(chǎn)氣并使培養(yǎng)基變黃，M-R試驗(yàn)、吲哚試驗(yàn)為陽(yáng)性，V-P試驗(yàn)為陰性，為符合雞大腸桿菌的生化特性[8]。呈現(xiàn)上述病理癥狀、染色鏡檢并做生化試驗(yàn)鑒定方可確定感染成功。2.2.3治療考核指標(biāo)2.2.3.1測(cè)定死亡率和治愈率、有效率試驗(yàn)期間每天觀察并記錄雛雞的病理癥狀，在試驗(yàn)期結(jié)束后分別計(jì)算各組的有效率、治愈率、死亡率、。2.2.3.2血清生化指標(biāo)測(cè)定試驗(yàn)結(jié)束后,把所有活著的雞稱重,每組抓三只進(jìn)行采血,每只采兩份，一份用于血清生化指標(biāo)：谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST)活性的測(cè)定。2.2.3.3血常規(guī)指標(biāo)測(cè)定另一份用于血常規(guī)指標(biāo)：紅細(xì)胞、白細(xì)胞和凝血細(xì)胞的數(shù)量的測(cè)定。2.2.4統(tǒng)計(jì)分析所有原始數(shù)據(jù)均先用MicrosoftExcel軟件進(jìn)行簡(jiǎn)單的匯總，有效率和治愈率、死亡率用卡方檢驗(yàn)進(jìn)行系統(tǒng)分析；再將血清生化指標(biāo)和血常規(guī)指標(biāo)結(jié)果用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件分析軟件對(duì)進(jìn)行單因素方差分析和Duncan's多重比較，其數(shù)據(jù)用“x-±s”表示。3結(jié)果與分析3.1試驗(yàn)各組對(duì)人工感染雞大腸桿菌病的治療作用由表1可知：健康對(duì)照組無(wú)死亡，感染對(duì)照組病死率為85﹪，健康對(duì)照組與感染對(duì)照組對(duì)比差異極顯著(p<0.01)。低濃度黃連解毒湯治療組和感染組的死亡率對(duì)比差異顯著(p<0.05)，中、高濃度黃連解毒湯治療組和感染組的死亡率對(duì)比差異極顯著(p<0.01)。表1試驗(yàn)各組對(duì)雞大腸桿菌病的治療作用的對(duì)比組別試驗(yàn)雞數(shù)//羽死亡數(shù)//羽發(fā)病數(shù)//羽存活數(shù)//羽死亡率/％治愈率/％有效率/％健康對(duì)照組2000200——感染對(duì)照組201720385——低濃度黃連解毒湯治療組2051915256575中濃度黃連解毒湯治療組2021818108590高濃度黃連解毒湯治療組20320171580853.2試驗(yàn)各組對(duì)人工感染大腸桿菌雞只血清生化指標(biāo)的影響由表2可知：健康對(duì)照組和中濃度黃連解毒湯治療組的ALT、AST活性分別極顯著低于攻毒對(duì)照組（p<0.01），低、高濃度黃連解毒湯治療組與攻毒對(duì)照組的ALT、AST活性對(duì)比差異顯著（p<0.05），低、高濃度黃連解毒湯治療組與中濃度黃連解毒湯治療組的ALT、AST活性對(duì)比差異顯著（p<0.05），但低、高濃度黃連解毒湯治療組ALT、AST活性對(duì)比差異不顯著（p>0.05）。表2試驗(yàn)各組雞血清生化指標(biāo)的對(duì)比組別AST（卡門(mén)氏單位）ALT（卡門(mén)氏單位）健康對(duì)照組62.6±11.1A12.5±A攻毒對(duì)照組220.5±39.0C59.8±25.7C低濃度黃連解毒湯治療組118.8±35.8B18.9±8.6B中濃度黃連解毒湯治療組80.9±25.3A13.5±4.8A高濃度黃連解毒湯治療組103.7±27.5B17.4±5.5B注：同列數(shù)據(jù)右上標(biāo)相同字母一樣表示差異不顯著（p＞0.05）；相鄰字母表示差異顯著（p＜0.05）；相隔字母表示差異極顯著（p＜0.01）。3.3試驗(yàn)各組對(duì)人工感染大腸桿菌雞只血常規(guī)指標(biāo)的影響由表3可知：試驗(yàn)各組紅細(xì)胞數(shù)均有變化，但各組的紅細(xì)胞數(shù)之間對(duì)比差異不顯著（p>0.05），健康對(duì)照組和中濃度黃連解毒湯治療組的白細(xì)胞數(shù)分別極顯著低于攻毒對(duì)照組（p<0.01），低濃度黃連解毒湯治療組的白細(xì)胞數(shù)顯著低于攻毒對(duì)照組（p<0.05），高濃度黃連解毒湯治療組的白細(xì)胞數(shù)與攻毒對(duì)照組的白細(xì)胞數(shù)差異不顯著（p>0.05），但低、中、高濃度黃連解毒湯治療組之間的白細(xì)胞也有顯著差異（p<0.05）。對(duì)比凝血細(xì)胞數(shù)能看出：健康對(duì)照組和中濃度黃連解毒湯治療組的凝血細(xì)胞數(shù)顯著高于攻毒對(duì)照組（p<0.05），高濃度黃連解毒湯治療組凝血細(xì)胞數(shù)量與攻毒對(duì)照組相比無(wú)顯著差異（p>0.05），低、高濃度黃連解毒湯治療組分別與中濃度黃連解毒湯治療組有顯著差異（p<0.05），但低、高濃度黃連解毒湯治療組之間無(wú)顯著差異（p>0.05）。表3試驗(yàn)各組雞血常指標(biāo)的對(duì)比組別紅細(xì)胞數(shù)（×1012個(gè)/L）白細(xì)胞數(shù)（×1011個(gè)/L）凝血細(xì)胞數(shù)（×1012個(gè)/L）健康對(duì)照組23.48±6.22A0.40±0.41C2.60±0.16B攻毒對(duì)照組20.16±8.86A1.52±0.16A2.05±0.45A低濃度黃連解毒湯治療組20.45±2.17A0.78±0.22B2.24±0.27A中濃度黃連解毒湯治療組21.75±4.44A0.42±0.16C2.56±0.34B高濃度黃連解毒湯治療組20.25±3.27A0.91±0.38A1.98±0.25A注：同列數(shù)據(jù)右上標(biāo)相同字母一樣表示差異不顯著（p＞0.05）；相鄰字母表示差異顯著（p＜0.05）；相隔字母表示差異極顯著（p＜0.01）。4討論4.1雞大腸桿菌治療效果討論各濃度黃連解毒湯對(duì)雞大腸桿菌均有效果，而且在血液指標(biāo)上也表現(xiàn)出一定的療效，但中濃度治療效果顯著，有效率達(dá)到了90%[9]。以上結(jié)果可以得出中濃度的黃連解毒湯能有效抑制白細(xì)胞的迅速增長(zhǎng)，提高紅細(xì)胞和凝血細(xì)胞數(shù)，高濃度黃連解毒湯治療組的紅細(xì)胞數(shù)、凝血細(xì)胞數(shù)與其他濃度治療組相比略少，而白細(xì)胞數(shù)略多，分析其原因大概是由于高濃度黃連解毒湯治療組用藥劑量稍大，使其出現(xiàn)了輕微的中毒現(xiàn)象。雞患大腸桿菌病會(huì)造成肝損傷，從而影響谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶的活性升高，當(dāng)肝損傷輕微時(shí)，ALT指標(biāo)會(huì)明顯升高；肝損傷嚴(yán)重時(shí)，AST指標(biāo)會(huì)明顯升高。黃連解毒湯各濃度均能恢復(fù)肝損傷，但中濃度黃連解毒湯治療組肝損傷恢復(fù)相較其他兩組效果更好。因此在治療雞大腸桿菌病時(shí)采用中濃度黃連解毒湯治療。大量試驗(yàn)研究結(jié)果表明：中藥組方和各種中藥制劑對(duì)雞大腸桿菌病都有一定的治療作用，對(duì)大腸桿菌也有很好的抑制作用[10]。

郭永剛等[11]以金銀花、黃連、黃芩、魚(yú)腥草復(fù)方制劑對(duì)人工感染肉仔雞大腸桿菌病進(jìn)行了治療及預(yù)防保護(hù)試驗(yàn)，其制劑對(duì)大腸桿菌具一定的抑制作用。國(guó)內(nèi)外報(bào)道的致病性雞大腸桿菌的血清型很多，但是以O(shè)1、O2、O78為常見(jiàn)的致病力強(qiáng)的血清型[12]。本試驗(yàn)結(jié)果表示中濃度黃連解毒湯對(duì)O1血清型大腸桿菌具有良好的治療效果,黃連解毒湯對(duì)其他血清型的雞大腸桿菌作用是否顯著還有待探索。4.2黃連解毒湯的作用機(jī)理中獸醫(yī)理論認(rèn)為雞大腸桿菌病屬于外感溫?zé)岵》懂?，病邪依次進(jìn)入衛(wèi)分、氣分、營(yíng)分和血分，由表及里、逐漸加重的發(fā)展趨勢(shì)，基于此對(duì)該病辨證論治，治則以清熱解毒為主，以涼血止痢、清肝瀉火等為輔[13]。黃連解毒湯由黃芩、黃連、黃柏、梔子四味中藥組成，黃芩含有的黃芩苷和黃芩素具有較強(qiáng)的抗菌作用，而且不產(chǎn)生抗藥性，對(duì)急性、慢性炎癥均有抑制作用[14]，黃芩具有清熱燥濕、瀉火解毒的功效，為臣藥；黃連高濃度殺菌，低濃