2023-2024學年湖南省株洲市炎陵縣高二下學期4月期中生物試題（解析版）

高級中學名校試卷PAGEPAGE2湖南省株洲市炎陵縣2023-2024學年高二下學期4月期中試題考試時間：75分鐘；分值：100分一、單選題(每題2分，共24分）1.有關培養(yǎng)基配制原則的表述正確的是（）A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質元素、水以及無機鹽B.碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素C.有的培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及O2的需求D.營養(yǎng)物質的濃度越高越好〖答案〗C〖祥解〗人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質—培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。其中，不含凝固劑（如瓊脂）、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入瓊脂后制成的瓊脂固體培養(yǎng)基，是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一?！驹斘觥緼、培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、無機鹽和水等營養(yǎng)物質，而分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中，不需要加入氮源，A錯誤；B、碳源和氮源必須具有一定比例，但碳元素的含量不一定最多，如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需要加入碳源，B錯誤；C、培養(yǎng)基在含有主要營養(yǎng)物質的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及O2的需求，C正確；D、營養(yǎng)物質的濃度過高可能會造成微生物因滲透失水而死亡，D錯誤。故選C。2.植物細胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交等技術，具有廣泛的應用前景和實用價值。下列對這些操作或應用的描述錯誤的是（）A.可用PEG誘導植物原生質體融合，再生出細胞壁是融合成功的標志B.獲取植物原生質體時，需在與細胞液濃度的相當的緩沖液中進行C.植物體細胞雜交技術去壁前，需對兩種植物細胞進行滅菌處理，以防止雜菌污染D.植物培養(yǎng)基中常用的植物生長調節(jié)劑，一般可以分為生長素類、細胞分裂素類和赤霉素類〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術：1、過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。2、原理：植物細胞的全能性。3、條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）?！驹斘觥緼、植物細胞（或原生質體）融合可用PEG進行誘導，融合成功的標志是再生出細胞壁，A正確；B、獲取植物原生質體時，除使用纖維素酶和果膠酶外，還要在蔗糖濃度與細胞液濃度相當的緩沖液中進行，以免細胞過度吸水或失水，B正確；C、植物體細胞雜交技術去壁前，為了防止雜菌污染，進行該操作前需對甲、乙植物細胞進行消毒處理，C錯誤；C、植物生長調節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)中具有極其重要的作用，根據其功能特點可分為生長素類、細胞分裂素類和赤霉素類，D正確。故選C。3.下列有關于細胞的敘述，錯誤的是（）A.干細胞是具有分裂和分化能力的細胞B.造血干細胞可定向誘導分化成機體所有種類的細胞C.胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)能夠維持不分化的狀態(tài)D.移植胚胎干細胞可使退化的組織得以修復并恢復正常功能〖答案〗B〖祥解〗1、干細胞(StemCell)是一種未充分分化，尚不成熟的細胞，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能，醫(yī)學界稱之為“萬用細胞”。干細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。它包括胚胎干細胞和成體干細胞。2、胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）。其特點是：具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞；另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造。【詳析】A、干細胞具有分裂和分化能力，A正確；B、造血干細胞可分化形成血細胞，胚胎干細胞在一定條件下可定向誘導分化成機體所有種類的細胞，B錯誤；C、胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠維持不分化的狀態(tài)，C正確；D、當身體某一類細胞功能退化時，可以通過誘導胚胎干細胞定向分化來及時修補，并恢復正常功能，D正確。故選B。4.人成體細胞結構和功能專門化的實質是基因的選擇性表達?？茖W家將人成體細胞在特定的化學小分子組合的作用下經過“重編程”形成了多能干細胞，這種細胞稱為人CiPS細胞。下列說法錯誤的是（）A.特定的化學小分子組合可以誘發(fā)成體細胞基因突變實現“重編程”B.與從胚胎的內細胞團中獲取干細胞相比，該方法規(guī)避了倫理爭議C.人CiPS細胞再經誘導后產生特定細胞，可以在新藥的測試中發(fā)揮重要作用D.利用病人自身的體細胞形成的CiPS細胞誘導后治療疾病，可以避免免疫排斥反應〖答案〗A〖祥解〗多能干細胞：具有產生多種類型細胞的能力，但卻失去了發(fā)育成完整個體的能力，發(fā)育潛能受到一定的限制，如造血干細胞?！驹斘觥緼、人成體細胞誘發(fā)形成人CiPS細胞不是通過誘發(fā)基因突變實現的，A錯誤；B、該方法利用人成體細胞獲取多能干細胞，與從胚胎的內細胞團中獲取干細胞相比，規(guī)避了倫理爭議，B正確；C、人CiPS細胞是多能干細胞，可誘導形成特定細胞，在新藥的測試中發(fā)揮重要作用，C正確；D、自體移植不會引起免疫排斥問題，即利用病人自身的體細胞形成的CiPS細胞誘導后治療疾病，可以避免免疫排斥反應，D正確。故選A。5.我國科學家利用基因編輯技術，獲得一只生物節(jié)律核心基因BMAL1敲除的獼猴。取其成纖維細胞與去核的卵母細胞融合，發(fā)育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，獲得5只克隆猴，用于研究節(jié)律機制。以下敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，作為實驗動物便于研究B.可用滅活的病毒誘導去核卵母細胞和成纖維細胞融合C.受精卵經基因編輯后形成的胚胎可發(fā)育為克隆猴D.克隆猴的獲得體現了動物體細胞的細胞核具有全能性〖答案〗C〖祥解〗動物體細胞核移植依據的原理是細胞的全能性。動物細胞的全能性隨著動物細胞分化程度的提高而逐漸受到抑制，全能性表達很難，但是動物的細胞核內仍含有該種動物的全部遺傳基因，具有發(fā)育成完整個體的潛能，即動物的細胞核仍具有全能性。【詳析】A、由于克隆猴基因組成差異小，用克隆猴作為實驗動物，有利于使實驗中的無關變量的控制，有利于增強實驗的可信度，A正確；B、細胞融合的過程需要人工誘導，如聚乙二醇（PEG）融合法、滅活病毒誘導法、電融合法等，可用滅活的病毒誘導去核卵母細胞和成纖維細胞融合，B正確；C、受精卵經基因編輯后形成的胚胎發(fā)育成的個體不能叫做克隆猴，克隆猴是通過核移植技術后發(fā)育而成的，C錯誤；D、動物細胞核含有該物種的全套遺傳信息，克隆猴的獲得體現了動物體細胞的細胞核具有全能性，D正確。故選C。6.下列關于采用胚胎工程技術實現某良種肉用牛快速繁殖的敘述，正確的是（）A.采取激素注射等方法對良種母牛作超數排卵處理B.體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進行移植C.使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應D.利用胚胎分割技術，同卵多胎較同卵雙胎成功率更高〖答案〗A〖祥解〗胚胎移植的基本程序：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理，超數排卵處理）、配種或進行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進行胚胎移植。所以在發(fā)情期給良種母牛注射激素，促進母牛多排卵，這種處理屬于超數排卵處理?！驹斘觥坑么傩韵偌に貙α挤N奶牛進行注射處理，可促使其超數排卵，A正確；進行移植的胚胎是桑椹胚或囊胚，B錯誤；受體對移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應，因此無需使用免疫抑制劑，C錯誤；利用胚胎分割技術，同卵雙胎較同卵多胎成功率更高，D錯誤。7.美國科學家在研究生長在墨西哥某地的野生玉米后發(fā)現，這種玉米含有包括蘇云金芽孢桿菌抗蟲毒蛋白基因在內的轉基因作物的基因，下列有關敘述中正確的是（）A.轉基因作物的基因可傳播到野生植物中B.轉基因作物不可能對天然植物的遺傳多樣性構成威脅C.為防止基因污染，應當禁止轉基因作物的研究D.自然雜交與轉基因過程沒有任何區(qū)別〖答案〗A〖祥解〗根據題意可知，轉基因作物的基因傳播到野生植物中，會對植物遺傳多樣性構成威脅。自然雜交是通過受粉的方式實現基因重組，與轉基因技術中通過重組質粒實現基因重組是有區(qū)別的。【詳析】A、轉基因作物可通過花粉散落到它的近親野生植物中，從而污染生物基因庫，A正確；B、轉基因植物可能會與野生植物雜交，造成基因污染，因而可能會對天然植物的遺傳多樣性構成威脅，B錯誤；C、雖然轉基因生物存在危害，但我們應理性地看待轉基因生物的研究，C錯誤；D、自然雜交是同種生物個體之間的基因交流，而轉基因是將外源基因導入受體細胞的過程，即不同生物之間基因的交流，D錯誤。故選A。8.多種實驗材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定，用香蕉也可以取得較好的實驗效果。下列敘述錯誤的是（）A.將粗提取的DNA加入2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNAB.冷卻的體積分數為95%的酒精可以溶解某些蛋白質，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸餾水并研磨，以釋放核DNAD.將DNA溶于NaCl溶液后加入現配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后會出現藍色〖答案〗C〖祥解〗根據DNA的溶解性提取DNA：（1）DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaC中的溶解度不同；（2）DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質則溶于酒精；（3）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同?！驹斘觥緼、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；將粗提取的DNA加入2mol/L的NaCl溶液中的目的是為了溶解DNA，A正確；B、DNA不溶于酒精，而某些蛋白質溶解于酒精，可用體積分數為95%冷酒精溶解某些蛋白質，析出DNA，獲得粗提取的DNA，B正確；C、香蕉果肉組織細胞有細胞壁保護，因此加蒸餾水不會破壞細胞，不能將DNA釋放出來，C錯誤；D、在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現藍色；將DNA溶于NaCl溶液后，加入現配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后出現藍色，D正確。故選C。9.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化其水解。將幾丁質酶基因轉入菊花體內，可增強其抗真菌病的能力。下列有關敘述錯誤的是（）A.將幾丁質酶基因插入Ti質粒的T-DNA上構建表達載體B.可通過顯微注射法將農桿菌導入菊花受體細胞C.可用PCR技術或DNA分子雜交檢測目的基因是否成功導入D.可用真菌接種實驗檢測轉基因菊花對真菌的抗性程度〖答案〗B〖祥解〗基因工程技術的基本步驟：1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。2、基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。3、將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、Ti質粒的T-DNA可以轉移到受體細胞中，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據這一特點，構建表達載體時，應該將目的基因幾丁質酶基因插入到Ti質粒的T-DNA上，A正確；B、將目基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法，可通過農桿菌轉化法將農桿菌導入菊花受體細胞，顯微注射法是用于將目的基因導入動物細胞的方法，B錯誤；C、在基因工程技術中，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作標記，以此作為探針，使探針與基因組DNA雜交，故可用PCR技術或DNA分子雜交技術檢測目的基因是否成功導入，C正確；D、轉基因植物接種相應的真菌，觀察轉基因植物是否出現抗病性狀，據題幾丁質酶基因轉入菊花體內，可增強其抗真菌病的能力，故可用真菌接種實驗檢測轉基因菊花對真菌的抗性程度，D正確。故選B。10.水稻胚乳含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強?？蒲腥藛T將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉入水稻，實現了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點編輯，從而獲得了三個突變品系。各品系WxmRNA量的檢測結果如下圖所示。下列分析錯誤的是（）A.該基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉入水稻，引起的變異是由于基因突變造成的B.Wx基因啟動子序列的改變可能影響RNA聚合酶與啟動子的識別和結合C.根據各品系WxmRNA量的檢測結果，可推測品系3的糯性最強D.與野生型相比，3個突變品系中直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列發(fā)生改變〖答案〗D〖祥解〗根據題干信息“將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉入水稻，實現了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點編輯，從而獲得了三個突變品系”，說明突變品系的獲得是由于啟動子發(fā)生改變，啟動子位于非編碼區(qū)，是RNA聚合酶結合的位點。根據圖中信息，品系3的WxRNA含量最低，說明其直鏈淀粉合成酶基因表達量最少?！驹斘觥緼、該基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉入水稻，實現了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點編輯，使直鏈淀粉合成酶基因的堿基序列發(fā)生了改變，該變異屬于基因突變，A正確；B、啟動子是RNA聚合酶識別并結合的位點，如果啟動子序列改變將會影響RNA聚合酶與之結合和識別，進而影響基因的轉錄水平，B正確；C、圖中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少，那么合成的直鏈淀粉酶最少，因此該水稻胚乳中含的直鏈淀粉比例最小，糯性最強，C正確；D、在真核生物中，編碼蛋白質的序列位于基因的編碼區(qū)，啟動子序列位于非編碼區(qū)，因此3個突變品系位于非編碼區(qū)的啟動子雖然改變，但不影響位于編碼區(qū)的編碼蛋白質的序列，轉錄翻譯后得到的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列也不變，D錯誤。故選D。11.DNA瓊脂糖凝膠電泳的分子篩效應是指作為支持介質的瓊脂糖，具有網絡結構，使大分子物質在通過時受到較大阻力，借此分離不同大小的DNA片段。下列說法錯誤的是（）A.瓊脂糖凝膠電泳可用于分離、鑒定DNA分子的混合物B.雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越大C.凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結合，用于分離后DNA的檢測D.凝膠中的DNA分子通過染色，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來〖答案〗B〖祥解〗1、凝膠色譜法（分配色譜法）：根據被分離物質（如蛋白質）相對分子質量的大小，利用具有多孔網狀結構的凝膠的分子篩作用，來進行分離。2、PCR的產物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象等有關，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來?！驹斘觥緼、瓊脂糖凝膠電泳利用具有多孔網狀結構的凝膠的分子篩作用，來進行分離，可用于分離、鑒定DNA分子的混合物，A正確；B、凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小有關，雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越小，B錯誤；C、凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結合，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，用于分離后DNA的檢測，C正確；D、DNA分子的大小和構象等有關，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，D正確。故選B。12.下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。下列敘述正確的是（）A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細胞中獲得的致敏T淋巴細胞B.①表示將骨髓瘤細胞去核后進行細胞融合C.乙為融合細胞，同時具有細胞甲和骨髓瘤細胞的特性D.②表示篩選能產生特異性抗體的細胞〖答案〗D〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。2、題中①表示細胞融合，②表示篩選過程?！驹斘觥緼、甲是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應B細胞，A錯誤；B、①是完整骨髓瘤細胞與免疫的B淋巴細胞融合的過程，B錯誤；C、融合細胞不一定同時具有細胞甲和骨髓瘤細胞的特性，也可能是瘤瘤細胞或B細胞，C錯誤；D、②是經篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞，D正確。故選D。二、不定向選擇題（全選對得4分，漏選得2分，錯選得0分）13.黃曲霉毒素在保存不當的霉變糧油食品中含量較高，具有很強的致癌性。研究表明黃曲霉毒素能引起細胞中粗面內質網上的核糖體不斷脫落?？蒲腥藛T用黃曲霉毒素偶聯(lián)抗原制備出單克隆抗體以檢測食品中黃曲霉毒素的含量。下列敘述正確的是（）A.當人誤食黃曲霉毒素后，腸腺細胞可能發(fā)生消化酶的合成分泌減少B.可用電融合法、PEG法或滅活的病毒誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的融合C.細胞融合體現了細胞膜的流動性，雜交瘤細胞體外增殖體現了細胞的全能性D.單克隆抗體用于檢測食品中黃曲霉毒素的原理是抗原－抗體雜交〖答案〗ABD〖祥解〗1、單克隆抗體是指由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。2、單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高，并可能大量制備。3、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。②用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導彈”。【詳析】A、消化酶屬于分泌蛋白，在粗面內質網的核糖體上合成，根據題干信息“研究表明黃曲霉毒素能引起細胞中粗面內質網上的核糖體不斷脫落”，會影響消化酶（分泌蛋白）的合成和分泌，A正確；B、誘導動物細胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法等，可用以上方法誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的融合，獲得雜交瘤細胞，B正確；C、動、植物細胞融合都能體現細胞膜的流動性，雜交瘤細胞體外增殖并沒有形成新個體，不能體現細胞的全能性，C錯誤；D、抗體與抗原結合具有特異性，單克隆抗體是化學性質單一、特異性強的抗體，能與黃曲霉毒素特異性結合，其原理是抗原-抗體雜交，D正確。故選ABD。14.Vero細胞系來源于非洲綠猴腎上皮細胞，具有無限分裂和貼壁生長的特性。將新冠病毒接種到Vero細胞后，經Vero細胞培養(yǎng)、新冠病毒滅活及提純，可制成新冠病毒滅活疫苗。下列敘述錯誤的是（）A.Vero細胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”B.向Vero細胞培養(yǎng)液中加入適量干擾素可防止雜菌污染C.分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細胞D.每傳代1次，培養(yǎng)瓶中的Vero細胞分裂1次〖答案〗BD〖祥解〗1、病毒必須寄生在活細胞內，才能進行正常的生命活動。2、抗生素可抗菌，干擾素可抗病毒。3、胰蛋白酶可使組織細胞分散成單個細胞?！驹斘觥緼、病毒必須寄生在活細胞內，因此Vero細胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”，A正確；B、向Vero細胞培養(yǎng)液中加入適量抗生素可防止雜菌污染，而干擾素抗病毒，B錯誤；C、胰蛋白酶或膠原蛋白酶可使組織細胞分散成單個細胞，因此分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細胞，以進行傳代培養(yǎng)，C正確；D、當細胞發(fā)生接觸抑制時需要進行傳代培養(yǎng)，每傳代1次，培養(yǎng)瓶中Vero細胞分裂不止1次，D錯誤。故選BD。15.金黃色葡萄球菌是一種常見的病原菌，在血平板（完全培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色。某研究小組通過稀釋涂布平板法測定了某處土壤中金黃色葡萄球菌數量，相關說法正確的是（）A.從功能上分類，血平板屬于選擇培養(yǎng)基B.在制作血平板時需要在平板冷卻后加入血液，防止高溫破壞血細胞C.待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后應倒置培養(yǎng)，防止水分過度蒸發(fā)D.實驗統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目高〖答案〗BC〖祥解〗1、培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學物質，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物。②鑒別培養(yǎng)基：根據微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品，鑒別不同種類的微生物。3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．【詳析】A、根據題干信息“金黃色葡萄球菌在血平板上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色”，因此血平板屬于鑒別培養(yǎng)基，A錯誤；B、為防止高溫破壞血細胞，在制作血平板時需要在平板冷卻后加入血液，B正確；C、涂布后的平板待菌液被培養(yǎng)基吸收后應倒置培養(yǎng)，防止水分過度蒸發(fā)，C正確；D、由于兩個或多個菌落連在一起形成一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數比活菌數目低，D錯誤。故選BC。16.高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項正確的是（）A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法 B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法 D.圖2中周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種〖答案〗ACD〖祥解〗接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)；平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。【詳析】A、根據I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻，可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；B、甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋，應為無菌水，B錯誤；C、由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進行接種的方法是平板劃線法，C正確；D、淀粉與碘液反應呈藍色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，因此周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種，D正確。故選ACD。三、非選擇題17.研究深海獨特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學號”考察船對中國南?？瓶贾校袊茖W家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進一步研究了其生物學特性?；卮鹣铝袉栴}：（1）研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用________________法。據圖分析，擬桿菌新菌株在以________________為碳源時生長狀況最好。（2）研究發(fā)現，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是________________。（答一點即可）（3）藻類細胞解體后的難降解多糖物質，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是________________。（4）深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有________________?！即鸢浮剑?）①.高壓蒸汽滅菌②.平板劃線③.纖維素（2）某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質才能生存（或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活）（3）擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質分解為無機物，歸還到無機環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進行（4）耐低溫〖祥解〗進行微生物純種培養(yǎng)物時，人們需要按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求配制培養(yǎng)基；還需要防止雜菌污染，無菌技術主要包括消毒和滅菌。獲得微生物純培養(yǎng)物的常用方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。（1）培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌?？梢圆捎孟♂屚坎计桨宸ɑ蚱桨鍎澗€法，將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，經過培養(yǎng)得到單菌落，從而獲得純凈培養(yǎng)物。分析圖12可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細胞數量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源時生長狀況最好。（2）深海冷泉中可能存在某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質才能生存（或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活），故將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍可能有很多微生物不能被分離篩選出來。（3）擬桿菌為異養(yǎng)生物，作為該生態(tài)系統(tǒng)的分解者，能將沉降到深海底部的難降解多糖物質分解為無機物，歸還到無機環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進行。（4）深海冷泉溫度較低，故生活在其中的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，應具有耐低溫的特性，才能高效降解多糖，保證擬桿菌的正常生命活動所需。18.某研究人員設計了下列技術路線，以期獲得甘藍和蘿卜體細胞雜交植株。請回答下列問題：（1）制備原生質體時，常用兩種酶處理，分別是____________________。誘導原生質體融合常用的化學誘導劑是____________________。原生質體融合成功的標志是_________________。圖中X是____________________，除了被直接誘導出芽生根外，還可以通過形成人工種子獲得再生植株。（2）為誘導融合體產生不定芽，通常應在培養(yǎng)基中加入兩類植物激素，其中起主要作用的是____________________。（3）若想獲得抗鹽植株，可選用融合原生質體作為人工誘變的材料，原因是____________________，且需在含較高濃度的NaCl培養(yǎng)基中篩選?！即鸢浮剑?）纖維素酶和果膠酶PEG（聚乙二醇）雜種細胞再生成細胞壁愈傷組織（2）細胞分裂素（3）具有分裂分化能力，突變頻率高，融合原生質體包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性〖祥解〗植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。（1）誘導融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等．化學法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑。（2）細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成。（3）植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結束。（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質?！驹斘觥浚?）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，所以制備原生質體，需要用纖維素酶和果膠酶將細胞壁去除，誘導原生質體融合常用的化學誘導劑是PEG（聚乙二醇）。原生質體融合成功的標志是雜種細胞再次生成細胞壁；圖中X經過離體培養(yǎng)，可以形成試管苗，所以X是愈傷組織。（2）植物組織培養(yǎng)中常加入植物激素，主要是細胞分裂素和生長素，當生長素和細胞分裂素的比值低時，有利于芽的形成，所以起主要作用的是細胞分裂素。（3）由于融合的原生質體具有分裂分化能力，突變頻率高，而且融合的原生質體包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性，所以可選用融合原生質體作為人工誘變的材料。19.胚胎干細胞必須從胚胎中獲取，但這涉及倫理問題，因而限制了它在醫(yī)學上的應用?？茖W家通過體外誘導成纖維細胞，獲得了類似于胚胎干細胞的一種細胞，稱為誘導多能干細胞（簡稱iPS細胞）。因為誘導過程無須破壞胚胎，而且iPS細胞可來源于病人自身的體細胞，因此iPS細胞的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞。如圖為iPS細胞的獲得及用其培育不同種細胞的示意圖（c-Myc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因與細胞的脫分化有關）?；卮鹣铝袉栴}：（1）在對成纖維細胞進行培養(yǎng)時，常用胰蛋白酶處理使之分散成單個細胞，這說明細胞間的物質為_____，_____（填“能”或“不能”）用胃蛋白酶處理成纖維細胞，原因是_____。（2）在培養(yǎng)iPS細胞的過程中，培養(yǎng)基中應含有細胞所需的各種營養(yǎng)物質，并定期更換培養(yǎng)液。定期更換培養(yǎng)液的目的是_____。（3）過程③④為iPS細胞提供的條件不同，分化得到的細胞不同，可知細胞分化是_____的結果。若iPS細胞來源于病人自身體細胞的誘導，再將其分化出的細胞移入患者體內的優(yōu)勢是_____。（4）如果誘導iPS細胞定向分化為原始生殖細胞，該技術可能的應用是_____?！即鸢浮剑?）①.蛋白質②.不能③.多數動物細胞培養(yǎng)的適宜pH為7．2～7．4，胃蛋白酶在此環(huán)境中失活變性（2）清除代謝物﹐防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害（3）①.基因選擇性表達②.避免了免疫排斥問題（4）解決不育問題〖祥解〗1、細胞分化：在個體發(fā)育中，相同細胞的后代，在形態(tài)、結構和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細胞分化過程遺傳物質不變，只是基因選擇性表達的結果。2、多能干細胞是一類具有自我更新、自我復制能力的多潛能細胞。在一定條件下，它可以分化成多種APSC多能細胞，多能干細胞具有分化出多種細胞組織的潛能，但失去了發(fā)育成完整個體的能力，發(fā)育潛能受到一定的限制。3、動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。（1）用胰蛋白酶分散細胞，說明細胞間的物質主要是蛋白質。胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當pH大于6時，胃蛋白酶就會失去活性。胰蛋白酶作用的適宜環(huán)境pH也為7.2～8.4，多數動物細胞培養(yǎng)的適宜pH也為7.2～7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性，而胰蛋白酶在此環(huán)境中活性較高，因此胰蛋白酶適宜用于細胞培養(yǎng)。（2）定期更換培養(yǎng)液的目的是清除代謝廢物﹐防止細胞代謝產物積累對細胞自身造成危害。（3）細胞分化是基因的選擇性表達的結果，若iPS細胞來源于病人自身體細胞的誘導，再將其分化出的細胞移入患者體內，由于自體細胞組織相容性抗原相同，故可以避免發(fā)生免疫排斥。（4）如果誘導iPS細胞定向分化為原始生殖細胞，可以用該技術解決不育問題。20.2020年8月16日，由我國軍事醫(yī)學研究院陳薇院士團隊及康希諾生物聯(lián)合申報的腺病毒載體新冠疫苗被授予專利權，是我國首個新冠疫苗專利。全面接種新冠疫苗，建立免疫屏障，可有效防止新冠病毒大規(guī)模傳染。（1）新冠病毒是一種RNA病毒，通過其表面的S蛋白與宿主細胞膜表面ACE2受體結合而完成感染。研制疫苗時，通過RT－PCR（反轉錄—聚合酶鏈式反應）獲取S蛋白基因所需要的酶是______________________________________。據圖1分析，選擇的引物是________，其作用是______________________。（2）PCR的產物一般通過電泳來鑒定，結果如圖2所示。1號泳道為標準（Marker），2號泳道為陽性對照（提純的S蛋白基因片段），3號泳道為實驗組。3號泳道的雜帶出現的原因一般有______________________（至少答出兩點）。（3）腺病毒是一種DNA病毒，基因組中的E1區(qū)蛋白與腺病毒的復制有關，對宿主細胞的毒性很強。科研中將去除E1基因構建的復制缺陷型腺病毒作為運載S蛋白基因的載體，經過改造后的腺病毒應該具備的特點有_______________（至少答出兩點）。試說明科研中選用復制缺陷型腺病毒作為載體制備新冠疫苗的原因是_________________?！即鸢浮剑?）①.逆轉錄酶、TaqDNA聚合酶②.Ⅱ、Ⅲ③.使TaqDNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸（2）模板受到污染；引物的特異性不強；復性溫度偏低（3）①.能夠侵染宿主細胞；具有多個限制酶酶切位點；不能復制②.避免人體因重組腺病毒增殖而感染，進而提高疫苗的安全性〖祥解〗疫苗研制已經發(fā)展了三代：第一代疫苗指的是滅活疫苗和減毒活疫苗，通過體外培養(yǎng)病毒，然后用滅活的病毒刺激人體產生抗體，它是使用最為廣泛的傳統(tǒng)疫苗；第二代疫苗又稱為亞單位疫苗，是通過基因工程原理獲得的具有免疫活性的病原特異性結構蛋白，刺激人體產生抗體；第三代疫苗就是核酸疫苗，又稱基因疫苗，包括DNA疫苗和mRNA疫苗，其中DNA疫苗是將編碼某一抗原蛋白的基因作為疫苗，注射到人體中，通過正常的人體生理活動產生抗原蛋白，誘導機體持續(xù)作出免疫應答產生抗體。（1）通過RT-PCR（反轉錄-聚合酶鏈式反應）獲取S蛋白基因，需要將RNA逆轉錄形成DNA，因此需要逆轉錄酶、PCR擴增DNA時需要TaqDNA聚合酶。由于DNA子鏈從5’端向3’端延伸，引物需要互補在模板鏈的3’端，而-OH端屬于3’端，則據圖1分析，選擇的引物是Ⅱ、Ⅲ，引物可以使Taq酶能夠從引物的3＇端開始連接脫氧核苷酸。（2）標準（Marker）的實質為不同已知長度的DNA片段混合物，若實驗的模板受到污染、引物的特異性不強、復性溫度偏低，則3號泳道會出現雜帶。（3）經過改造后的腺病毒應該具備能夠侵染宿主細胞、具有多個限制酶切位點、不能復制等特點。疫苗制備中選取復制缺陷型腺病毒作為載體可以防止病毒在人體內進行增殖，進而提高疫苗的安全性。21.脂肪酶在食品工業(yè)中有著廣泛應用，食品生產常需要在高溫條件下進行，天然脂肪酶難以滿足生產需求?？茖W家對已知氨基酸序列的脂肪酶進行改造，獲得了耐高溫的脂肪酶，提高了食品工業(yè)的生產效率?；卮鹣铝袉栴}。（1）根據耐高溫脂肪酶的結構特點，推測其氨基酸序列，然后重新設計新脂肪酶的基因序列，獲得耐高溫的脂肪酶的技術稱為___。一般來說，新的脂肪酶基因脫氧核苷酸序列會有多種可能，其原因是__。（2）在設計出耐高溫的脂肪酶基因后，對其進行PCR擴增的過程包括_____、復性和延伸。延伸過程中由于DNA聚合酶的特性，子鏈延伸的方向為________。（3）利用質粒將改造后的耐高溫脂肪酶基因導入大腸桿菌，構建基因工程菌甲，若要檢測工程菌甲中的耐高溫脂肪酶基因是否成功表達，則需利用到___雜交技術，若出現雜交帶，則說明基因能在工程菌內正常表達。（4）利用工程菌甲生產耐高溫脂肪酶的過程中，傳代多次后，生產條件未變，但某子代菌株不再產生耐高溫脂肪酶。分析可能的原因是___(答出兩點即可)?！即鸢浮剑?）①.蛋白質工程②.密碼子的簡并性（2）①.變性②.5'端→3'端（3）抗原-抗體（4）耐高溫脂肪酶基因突變、缺失或丟失；工程菌甲在分裂過程中質粒丟失，未遺傳給下一代〖祥解〗題干信息：科學家對已知氨基酸序列的脂肪酶進行改造，獲得耐高溫的脂肪酶，由此可知該過程屬于蛋白質工程。蛋白質工程流程：首先要建立蛋白質功能與結構的聯(lián)系，然后依據所需蛋白質的功能，設計改造天然蛋白質的空間結構，推測出其氨基酸的序列，并根據“中心法則”逆推出基因的核苷酸序列，進而利用基因工程技術改變DNA上特定位點的核苷酸序列，最終將改造了的基因導入受體細胞后進行表達?？梢?，蛋白質工程是通過設計和改造編碼蛋白質的基因獲得特定功能的蛋白質。（1）蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規(guī)律及其與生物功能的關系作為基礎，通過改造或合成基因，來改造現有蛋白質或者制造一種新的蛋白質的過程，因此題干獲得耐高溫的脂肪酶的技術稱蛋白質工程。由于密碼子具有簡并性，所以新的脂肪酶基因脫氧核苷酸序列會有多種可能。（2）目的基因通過PCR擴增，其過程包括變性，復性和延伸三個步驟；由于DNA聚合酶只能將脫氧核苷酸連在子鏈的3'端，故子鏈的延伸方向為5'→3'。（3）基因表達的產物為蛋白質，檢測蛋白質的方法為抗原-抗體雜交。（4）利用工程菌甲生產耐高溫脂肪酶的過程中，傳代多次后，生產條件未變，但某子代菌株不再產生耐高溫脂肪酶，說明該菌種可能沒有該基因，因此子代菌株不再產生耐高溫脂肪酶的原因可能是耐高溫脂肪酶基因突變、缺失或丟失或工程菌甲在分裂過程中質粒丟失，未遺傳給下一代。湖南省株洲市炎陵縣2023-2024學年高二下學期4月期中試題考試時間：75分鐘；分值：100分一、單選題(每題2分，共24分）1.有關培養(yǎng)基配制原則的表述正確的是（）A.任何培養(yǎng)基都必須含有碳源、氮源、礦質元素、水以及無機鹽B.碳源和氮源必須具有一定比例，碳元素的含量最多，其次為氮元素C.有的培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及O2的需求D.營養(yǎng)物質的濃度越高越好〖答案〗C〖祥解〗人們按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質—培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。其中，不含凝固劑（如瓊脂）、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入瓊脂后制成的瓊脂固體培養(yǎng)基，是實驗室中最常用的培養(yǎng)基之一?！驹斘觥緼、培養(yǎng)基一般都含有碳源、氮源、無機鹽和水等營養(yǎng)物質，而分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中，不需要加入氮源，A錯誤；B、碳源和氮源必須具有一定比例，但碳元素的含量不一定最多，如自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需要加入碳源，B錯誤；C、培養(yǎng)基在含有主要營養(yǎng)物質的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質以及O2的需求，C正確；D、營養(yǎng)物質的濃度過高可能會造成微生物因滲透失水而死亡，D錯誤。故選C。2.植物細胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交等技術，具有廣泛的應用前景和實用價值。下列對這些操作或應用的描述錯誤的是（）A.可用PEG誘導植物原生質體融合，再生出細胞壁是融合成功的標志B.獲取植物原生質體時，需在與細胞液濃度的相當的緩沖液中進行C.植物體細胞雜交技術去壁前，需對兩種植物細胞進行滅菌處理，以防止雜菌污染D.植物培養(yǎng)基中常用的植物生長調節(jié)劑，一般可以分為生長素類、細胞分裂素類和赤霉素類〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)技術：1、過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。2、原理：植物細胞的全能性。3、條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。【詳析】A、植物細胞（或原生質體）融合可用PEG進行誘導，融合成功的標志是再生出細胞壁，A正確；B、獲取植物原生質體時，除使用纖維素酶和果膠酶外，還要在蔗糖濃度與細胞液濃度相當的緩沖液中進行，以免細胞過度吸水或失水，B正確；C、植物體細胞雜交技術去壁前，為了防止雜菌污染，進行該操作前需對甲、乙植物細胞進行消毒處理，C錯誤；C、植物生長調節(jié)劑在植物組織培養(yǎng)中具有極其重要的作用，根據其功能特點可分為生長素類、細胞分裂素類和赤霉素類，D正確。故選C。3.下列有關于細胞的敘述，錯誤的是（）A.干細胞是具有分裂和分化能力的細胞B.造血干細胞可定向誘導分化成機體所有種類的細胞C.胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上培養(yǎng)能夠維持不分化的狀態(tài)D.移植胚胎干細胞可使退化的組織得以修復并恢復正常功能〖答案〗B〖祥解〗1、干細胞(StemCell)是一種未充分分化，尚不成熟的細胞，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能，醫(yī)學界稱之為“萬用細胞”。干細胞是一類具有自我更新和分化潛能的細胞。它包括胚胎干細胞和成體干細胞。2、胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內細胞團）。其特點是：具有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物任何一種組織細胞；另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可以進行某些遺傳改造?！驹斘觥緼、干細胞具有分裂和分化能力，A正確；B、造血干細胞可分化形成血細胞，胚胎干細胞在一定條件下可定向誘導分化成機體所有種類的細胞，B錯誤；C、胚胎干細胞在飼養(yǎng)層細胞上，或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，能夠維持不分化的狀態(tài)，C正確；D、當身體某一類細胞功能退化時，可以通過誘導胚胎干細胞定向分化來及時修補，并恢復正常功能，D正確。故選B。4.人成體細胞結構和功能專門化的實質是基因的選擇性表達?？茖W家將人成體細胞在特定的化學小分子組合的作用下經過“重編程”形成了多能干細胞，這種細胞稱為人CiPS細胞。下列說法錯誤的是（）A.特定的化學小分子組合可以誘發(fā)成體細胞基因突變實現“重編程”B.與從胚胎的內細胞團中獲取干細胞相比，該方法規(guī)避了倫理爭議C.人CiPS細胞再經誘導后產生特定細胞，可以在新藥的測試中發(fā)揮重要作用D.利用病人自身的體細胞形成的CiPS細胞誘導后治療疾病，可以避免免疫排斥反應〖答案〗A〖祥解〗多能干細胞：具有產生多種類型細胞的能力，但卻失去了發(fā)育成完整個體的能力，發(fā)育潛能受到一定的限制，如造血干細胞?！驹斘觥緼、人成體細胞誘發(fā)形成人CiPS細胞不是通過誘發(fā)基因突變實現的，A錯誤；B、該方法利用人成體細胞獲取多能干細胞，與從胚胎的內細胞團中獲取干細胞相比，規(guī)避了倫理爭議，B正確；C、人CiPS細胞是多能干細胞，可誘導形成特定細胞，在新藥的測試中發(fā)揮重要作用，C正確；D、自體移植不會引起免疫排斥問題，即利用病人自身的體細胞形成的CiPS細胞誘導后治療疾病，可以避免免疫排斥反應，D正確。故選A。5.我國科學家利用基因編輯技術，獲得一只生物節(jié)律核心基因BMAL1敲除的獼猴。取其成纖維細胞與去核的卵母細胞融合，發(fā)育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，獲得5只克隆猴，用于研究節(jié)律機制。以下敘述錯誤的是（）A.克隆猴基因組成差異小，作為實驗動物便于研究B.可用滅活的病毒誘導去核卵母細胞和成纖維細胞融合C.受精卵經基因編輯后形成的胚胎可發(fā)育為克隆猴D.克隆猴的獲得體現了動物體細胞的細胞核具有全能性〖答案〗C〖祥解〗動物體細胞核移植依據的原理是細胞的全能性。動物細胞的全能性隨著動物細胞分化程度的提高而逐漸受到抑制，全能性表達很難，但是動物的細胞核內仍含有該種動物的全部遺傳基因，具有發(fā)育成完整個體的潛能，即動物的細胞核仍具有全能性。【詳析】A、由于克隆猴基因組成差異小，用克隆猴作為實驗動物，有利于使實驗中的無關變量的控制，有利于增強實驗的可信度，A正確；B、細胞融合的過程需要人工誘導，如聚乙二醇（PEG）融合法、滅活病毒誘導法、電融合法等，可用滅活的病毒誘導去核卵母細胞和成纖維細胞融合，B正確；C、受精卵經基因編輯后形成的胚胎發(fā)育成的個體不能叫做克隆猴，克隆猴是通過核移植技術后發(fā)育而成的，C錯誤；D、動物細胞核含有該物種的全套遺傳信息，克隆猴的獲得體現了動物體細胞的細胞核具有全能性，D正確。故選C。6.下列關于采用胚胎工程技術實現某良種肉用牛快速繁殖的敘述，正確的是（）A.采取激素注射等方法對良種母牛作超數排卵處理B.體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進行移植C.使用免疫抑制劑以避免代孕牛對植入胚胎的排斥反應D.利用胚胎分割技術，同卵多胎較同卵雙胎成功率更高〖答案〗A〖祥解〗胚胎移植的基本程序：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理，超數排卵處理）、配種或進行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進行胚胎移植。所以在發(fā)情期給良種母牛注射激素，促進母牛多排卵，這種處理屬于超數排卵處理?！驹斘觥坑么傩韵偌に貙α挤N奶牛進行注射處理，可促使其超數排卵，A正確；進行移植的胚胎是桑椹胚或囊胚，B錯誤；受體對移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應，因此無需使用免疫抑制劑，C錯誤；利用胚胎分割技術，同卵雙胎較同卵多胎成功率更高，D錯誤。7.美國科學家在研究生長在墨西哥某地的野生玉米后發(fā)現，這種玉米含有包括蘇云金芽孢桿菌抗蟲毒蛋白基因在內的轉基因作物的基因，下列有關敘述中正確的是（）A.轉基因作物的基因可傳播到野生植物中B.轉基因作物不可能對天然植物的遺傳多樣性構成威脅C.為防止基因污染，應當禁止轉基因作物的研究D.自然雜交與轉基因過程沒有任何區(qū)別〖答案〗A〖祥解〗根據題意可知，轉基因作物的基因傳播到野生植物中，會對植物遺傳多樣性構成威脅。自然雜交是通過受粉的方式實現基因重組，與轉基因技術中通過重組質粒實現基因重組是有區(qū)別的。【詳析】A、轉基因作物可通過花粉散落到它的近親野生植物中，從而污染生物基因庫，A正確；B、轉基因植物可能會與野生植物雜交，造成基因污染，因而可能會對天然植物的遺傳多樣性構成威脅，B錯誤；C、雖然轉基因生物存在危害，但我們應理性地看待轉基因生物的研究，C錯誤；D、自然雜交是同種生物個體之間的基因交流，而轉基因是將外源基因導入受體細胞的過程，即不同生物之間基因的交流，D錯誤。故選A。8.多種實驗材料都可以用于DNA的粗提取與鑒定，用香蕉也可以取得較好的實驗效果。下列敘述錯誤的是（）A.將粗提取的DNA加入2mol/L的NaCl溶液的目的是為了溶解DNAB.冷卻的體積分數為95%的酒精可以溶解某些蛋白質，得到粗提取的DNAC.向剪碎的香蕉果肉組織中加入蒸餾水并研磨，以釋放核DNAD.將DNA溶于NaCl溶液后加入現配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后會出現藍色〖答案〗C〖祥解〗根據DNA的溶解性提取DNA：（1）DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的NaC中的溶解度不同；（2）DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質則溶于酒精；（3）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同?！驹斘觥緼、DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于2mol/L的NaCl溶液；將粗提取的DNA加入2mol/L的NaCl溶液中的目的是為了溶解DNA，A正確；B、DNA不溶于酒精，而某些蛋白質溶解于酒精，可用體積分數為95%冷酒精溶解某些蛋白質，析出DNA，獲得粗提取的DNA，B正確；C、香蕉果肉組織細胞有細胞壁保護，因此加蒸餾水不會破壞細胞，不能將DNA釋放出來，C錯誤；D、在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會呈現藍色；將DNA溶于NaCl溶液后，加入現配的二苯胺試劑，沸水浴冷卻后出現藍色，D正確。故選C。9.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化其水解。將幾丁質酶基因轉入菊花體內，可增強其抗真菌病的能力。下列有關敘述錯誤的是（）A.將幾丁質酶基因插入Ti質粒的T-DNA上構建表達載體B.可通過顯微注射法將農桿菌導入菊花受體細胞C.可用PCR技術或DNA分子雜交檢測目的基因是否成功導入D.可用真菌接種實驗檢測轉基因菊花對真菌的抗性程度〖答案〗B〖祥解〗基因工程技術的基本步驟：1、目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。2、基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。3、將目的基因導入受體細胞：根據受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。4、目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA--分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、Ti質粒的T-DNA可以轉移到受體細胞中，并且整合到受體細胞染色體的DNA上，根據這一特點，構建表達載體時，應該將目的基因幾丁質酶基因插入到Ti質粒的T-DNA上，A正確；B、將目基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法，可通過農桿菌轉化法將農桿菌導入菊花受體細胞，顯微注射法是用于將目的基因導入動物細胞的方法，B錯誤；C、在基因工程技術中，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作標記，以此作為探針，使探針與基因組DNA雜交，故可用PCR技術或DNA分子雜交技術檢測目的基因是否成功導入，C正確；D、轉基因植物接種相應的真菌，觀察轉基因植物是否出現抗病性狀，據題幾丁質酶基因轉入菊花體內，可增強其抗真菌病的能力，故可用真菌接種實驗檢測轉基因菊花對真菌的抗性程度，D正確。故選B。10.水稻胚乳含直鏈淀粉和支鏈淀粉，直鏈淀粉所占比例越小糯性越強?？蒲腥藛T將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉入水稻，實現了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點編輯，從而獲得了三個突變品系。各品系WxmRNA量的檢測結果如下圖所示。下列分析錯誤的是（）A.該基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉入水稻，引起的變異是由于基因突變造成的B.Wx基因啟動子序列的改變可能影響RNA聚合酶與啟動子的識別和結合C.根據各品系WxmRNA量的檢測結果，可推測品系3的糯性最強D.與野生型相比，3個突變品系中直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列發(fā)生改變〖答案〗D〖祥解〗根據題干信息“將能表達出基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉入水稻，實現了對直鏈淀粉合成酶基因（Wx基因）啟動子序列的定點編輯，從而獲得了三個突變品系”，說明突變品系的獲得是由于啟動子發(fā)生改變，啟動子位于非編碼區(qū)，是RNA聚合酶結合的位點。根據圖中信息，品系3的WxRNA含量最低，說明其直鏈淀粉合成酶基因表達量最少。【詳析】A、該基因編輯系統(tǒng)的DNA序列轉入水稻，實現了對直鏈淀粉合成酶基因(Wx基因)啟動子序列的定點編輯，使直鏈淀粉合成酶基因的堿基序列發(fā)生了改變，該變異屬于基因突變，A正確；B、啟動子是RNA聚合酶識別并結合的位點，如果啟動子序列改變將會影響RNA聚合酶與之結合和識別，進而影響基因的轉錄水平，B正確；C、圖中品系3的Wx基因的mRNA的含量最少，那么合成的直鏈淀粉酶最少，因此該水稻胚乳中含的直鏈淀粉比例最小，糯性最強，C正確；D、在真核生物中，編碼蛋白質的序列位于基因的編碼區(qū)，啟動子序列位于非編碼區(qū)，因此3個突變品系位于非編碼區(qū)的啟動子雖然改變，但不影響位于編碼區(qū)的編碼蛋白質的序列，轉錄翻譯后得到的直鏈淀粉合成酶的氨基酸序列也不變，D錯誤。故選D。11.DNA瓊脂糖凝膠電泳的分子篩效應是指作為支持介質的瓊脂糖，具有網絡結構，使大分子物質在通過時受到較大阻力，借此分離不同大小的DNA片段。下列說法錯誤的是（）A.瓊脂糖凝膠電泳可用于分離、鑒定DNA分子的混合物B.雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越大C.凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結合，用于分離后DNA的檢測D.凝膠中的DNA分子通過染色，可在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來〖答案〗B〖祥解〗1、凝膠色譜法（分配色譜法）：根據被分離物質（如蛋白質）相對分子質量的大小，利用具有多孔網狀結構的凝膠的分子篩作用，來進行分離。2、PCR的產物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定。在凝膠中DNA分子的遷移速率與凝膠的濃度、DNA分子的大小和構象等有關，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來?！驹斘觥緼、瓊脂糖凝膠電泳利用具有多孔網狀結構的凝膠的分子篩作用，來進行分離，可用于分離、鑒定DNA分子的混合物，A正確；B、凝膠中DNA分子的遷移速率與DNA分子的大小有關，雙鏈DNA分子片段長度越大，在瓊脂糖中的移動速率越小，B錯誤；C、凝膠制備中加入的核酸染料能與DNA分子結合，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，用于分離后DNA的檢測，C正確；D、DNA分子的大小和構象等有關，凝膠中的DNA分子通過染色，可以在波長為300nm的紫外燈下被檢測出來，D正確。故選B。12.下圖為單克隆抗體的制備流程示意圖。下列敘述正確的是（）A.甲是從已免疫的小鼠脾臟細胞中獲得的致敏T淋巴細胞B.①表示將骨髓瘤細胞去核后進行細胞融合C.乙為融合細胞，同時具有細胞甲和骨髓瘤細胞的特性D.②表示篩選能產生特異性抗體的細胞〖答案〗D〖祥解〗1、單克隆抗體的制備過程是：對小動物注射抗原，從該動物的脾臟中獲取效應B細胞，將效應B細胞與骨髓瘤細胞融合，篩選出能產生單一抗體的雜交瘤細胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細胞（體內培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。2、題中①表示細胞融合，②表示篩選過程?！驹斘觥緼、甲是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的效應B細胞，A錯誤；B、①是完整骨髓瘤細胞與免疫的B淋巴細胞融合的過程，B錯誤；C、融合細胞不一定同時具有細胞甲和骨髓瘤細胞的特性，也可能是瘤瘤細胞或B細胞，C錯誤；D、②是經篩選獲得的能分泌特異性抗體的雜交瘤細胞，D正確。故選D。二、不定向選擇題（全選對得4分，漏選得2分，錯選得0分）13.黃曲霉毒素在保存不當的霉變糧油食品中含量較高，具有很強的致癌性。研究表明黃曲霉毒素能引起細胞中粗面內質網上的核糖體不斷脫落?？蒲腥藛T用黃曲霉毒素偶聯(lián)抗原制備出單克隆抗體以檢測食品中黃曲霉毒素的含量。下列敘述正確的是（）A.當人誤食黃曲霉毒素后，腸腺細胞可能發(fā)生消化酶的合成分泌減少B.可用電融合法、PEG法或滅活的病毒誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的融合C.細胞融合體現了細胞膜的流動性，雜交瘤細胞體外增殖體現了細胞的全能性D.單克隆抗體用于檢測食品中黃曲霉毒素的原理是抗原－抗體雜交〖答案〗ABD〖祥解〗1、單克隆抗體是指由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。2、單克隆抗體的優(yōu)點：特異性強、靈敏度高，并可能大量制備。3、單克隆抗體的作用：①作為診斷試劑：（最廣泛的用途）具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。②用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療癌癥，可制成“生物導彈”?！驹斘觥緼、消化酶屬于分泌蛋白，在粗面內質網的核糖體上合成，根據題干信息“研究表明黃曲霉毒素能引起細胞中粗面內質網上的核糖體不斷脫落”，會影響消化酶（分泌蛋白）的合成和分泌，A正確；B、誘導動物細胞融合的常用方法有PEG融合法、電融合法和滅活病毒誘導法等，可用以上方法誘導B淋巴細胞和骨髓瘤細胞的融合，獲得雜交瘤細胞，B正確；C、動、植物細胞融合都能體現細胞膜的流動性，雜交瘤細胞體外增殖并沒有形成新個體，不能體現細胞的全能性，C錯誤；D、抗體與抗原結合具有特異性，單克隆抗體是化學性質單一、特異性強的抗體，能與黃曲霉毒素特異性結合，其原理是抗原-抗體雜交，D正確。故選ABD。14.Vero細胞系來源于非洲綠猴腎上皮細胞，具有無限分裂和貼壁生長的特性。將新冠病毒接種到Vero細胞后，經Vero細胞培養(yǎng)、新冠病毒滅活及提純，可制成新冠病毒滅活疫苗。下列敘述錯誤的是（）A.Vero細胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”B.向Vero細胞培養(yǎng)液中加入適量干擾素可防止雜菌污染C.分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細胞D.每傳代1次，培養(yǎng)瓶中的Vero細胞分裂1次〖答案〗BD〖祥解〗1、病毒必須寄生在活細胞內，才能進行正常的生命活動。2、抗生素可抗菌，干擾素可抗病毒。3、胰蛋白酶可使組織細胞分散成單個細胞?！驹斘觥緼、病毒必須寄生在活細胞內，因此Vero細胞可作為新冠病毒大量繁殖的“培養(yǎng)基”，A正確；B、向Vero細胞培養(yǎng)液中加入適量抗生素可防止雜菌污染，而干擾素抗病毒，B錯誤；C、胰蛋白酶或膠原蛋白酶可使組織細胞分散成單個細胞，因此分瓶前需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的Vero細胞，以進行傳代培養(yǎng)，C正確；D、當細胞發(fā)生接觸抑制時需要進行傳代培養(yǎng)，每傳代1次，培養(yǎng)瓶中Vero細胞分裂不止1次，D錯誤。故選BD。15.金黃色葡萄球菌是一種常見的病原菌，在血平板（完全培養(yǎng)基中添加適量血液）上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色。某研究小組通過稀釋涂布平板法測定了某處土壤中金黃色葡萄球菌數量，相關說法正確的是（）A.從功能上分類，血平板屬于選擇培養(yǎng)基B.在制作血平板時需要在平板冷卻后加入血液，防止高溫破壞血細胞C.待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后應倒置培養(yǎng)，防止水分過度蒸發(fā)D.實驗統(tǒng)計的菌落數往往比活菌的實際數目高〖答案〗BC〖祥解〗1、培養(yǎng)基按功能分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基：①選擇培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入某種化學物質，以抑制不需要的不需要的微生物的生長，促進所需要的微生物生長，培養(yǎng)、分離出特定的微生物。②鑒別培養(yǎng)基：根據微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品，鑒別不同種類的微生物。3、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個細胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個細菌繁殖而成的子細胞群體--菌落．【詳析】A、根據題干信息“金黃色葡萄球菌在血平板上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色”，因此血平板屬于鑒別培養(yǎng)基，A錯誤；B、為防止高溫破壞血細胞，在制作血平板時需要在平板冷卻后加入血液，B正確；C、涂布后的平板待菌液被培養(yǎng)基吸收后應倒置培養(yǎng)，防止水分過度蒸發(fā)，C正確；D、由于兩個或多個菌落連在一起形成一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數比活菌數目低，D錯誤。故選BC。16.高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產中有很大的實用性。研究者從熱泉中篩選高效產生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉接于同時含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項正確的是（）A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法 B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法 D.圖2中周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種〖答案〗ACD〖祥解〗接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)；平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料，在無菌平板表面進行平行劃線、扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細胞數量將隨著劃線次數的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。【詳析】A、根據I號培養(yǎng)基上菌落分布均勻，可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；B、甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋，應為無菌水，B錯誤；C、由Ⅱ號培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號培養(yǎng)基上挑選的菌落進行接種的方法是平板劃線法，C正確；D、淀粉與碘液反應呈藍色，但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍色，因此周圍不顯藍色的菌落含有所需菌種，D正確。故選ACD。三、非選擇題17.研究深海獨特的生態(tài)環(huán)境對于開發(fā)海洋資源具有重要意義。近期在“科學號”考察船對中國南海科考中，中國科學家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉積物樣品，分離、鑒定得到新的微生物菌株并進一步研究了其生物學特性。回答下列問題：（1）研究者先制備富集培養(yǎng)基，然后采用________________法滅菌，冷卻后再接入沉積物樣品，28℃厭氧培養(yǎng)一段時間后，獲得了含擬桿菌的混合培養(yǎng)物，為了獲得純種培養(yǎng)物，除了稀釋涂布平板法，還可采用________________法。據圖分析，擬桿菌新菌株在以________________為碳源時生長狀況最好。（2）研究發(fā)現，將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍有很多微生物不能被分離篩選出來，推測其原因可能是________________。（答一點即可）（3）藻類細胞解體后的難降解多糖物質，通常會聚集形成碎屑沉降到深海底部。從生態(tài)系統(tǒng)組成成分的角度考慮，擬桿菌對深海生態(tài)系統(tǒng)碳循環(huán)的作用可能是________________。（4）深海冷泉環(huán)境特殊，推測此環(huán)境下生存的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能還有________________?！即鸢浮剑?）①.高壓蒸汽滅菌②.平板劃線③.纖維素（2）某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物質才能生存（或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活）（3）擬桿菌作為分解者，將沉降到深海底部的難降解多糖物質分解為無機物，歸還到無機環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進行（4）耐低溫〖祥解〗進行微生物純種培養(yǎng)物時，人們需要按照微生物對營養(yǎng)物質的不同需求配制培養(yǎng)基；還需要防止雜菌污染，無菌技術主要包括消毒和滅菌。獲得微生物純培養(yǎng)物的常用方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。（1）培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌?？梢圆捎孟♂屚坎计桨宸ɑ蚱桨鍎澗€法，將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，經過培養(yǎng)得到單菌落，從而獲得純凈培養(yǎng)物。分析圖12可知，在以纖維素為碳源的培養(yǎng)基中，細胞數量最多，可推知擬桿菌新菌株在以纖維素為碳源時生長狀況最好。（2）深海冷泉中可能存在某些微生物，只有利用冷泉中的特有物質才能生存（或需要在深海冷泉的特定環(huán)境中才能存活），故將采集的樣品置于各種培養(yǎng)基中培養(yǎng)，仍可能有很多微生物不能被分離篩選出來。（3）擬桿菌為異養(yǎng)生物，作為該生態(tài)系統(tǒng)的分解者，能將沉降到深海底部的難降解多糖物質分解為無機物，歸還到無機環(huán)境中，有利于碳循環(huán)的順利進行。（4）深海冷泉溫度較低，故生活在其中的擬桿菌所分泌的各種多糖降解酶，應具有耐低溫的特性，才能高效降解多糖，保證擬桿菌的正常生命活動所需。18.某研究人員設計了下列技術路線，以期獲得甘藍和蘿卜體細胞雜交植株。請回答下列問題：（1）制備原生質體時，常用兩種酶處理，分別是____________________。誘導原生質體融合常用的化學誘導劑是____________________。原生質體融合成功的標志是_________________。圖中X是____________________，除了被直接誘導出芽生根外，還可以通過形成人工種子獲得再生植株。（2）為誘導融合體產生不定芽，通常應在培養(yǎng)基中加入兩類植物激素，其中起主要作用的是____________________。（3）若想獲得抗鹽植株，可選用融合原生質體作為人工誘變的材料，原因是____________________，且需在含較高濃度的NaCl培養(yǎng)基中篩選?！即鸢浮剑?）纖維素酶和果膠酶PEG（聚乙二醇）雜種細胞再生成細胞壁愈傷組織（2）細胞分裂素（3）具有分裂分化能力，突變頻率高，融合原生質體包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性〖祥解〗植物體細胞雜交技術：就是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術。（1）誘導融合的方法：物理法包括離心、振動、電刺激等．化學法一般是用聚乙二醇（PEG）作為誘導劑。（2）細胞融合完成的標志是新的細胞壁的生成。（3）植物體細胞雜交的終點是培育成雜種植株，而不是形成雜種細胞就結束。（4）雜種植株的特征：具備兩種植物的遺傳特征，原因是雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質?！驹斘觥浚?）植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，所以制備原生質體，需要用纖維素酶和果膠酶將細胞壁去除，誘導原生質體融合常用的化學誘導劑是PEG（聚乙二醇）。原生質體融合成功的標志是雜種細胞再次生成細胞壁；圖中X經過離體培養(yǎng)，可以形成試管苗，所以X是愈傷組織。（2）植物組織培養(yǎng)中常加入植物激素，主要是細胞分裂素和生長素，當生長素和細胞分裂素的比值低時，有利于芽的形成，所以起主要作用的是細胞分裂素。（3）由于融合的原生質體具有分裂分化能力，突變頻率高，而且融合的原生質體包含了兩個物種的全部遺傳信息，且具有全能性，所以可選用融合原生質體作為人工誘變的材料。19.胚胎干細胞必須從胚胎中獲取，但這涉及倫理問題，因而限制了它在醫(yī)學上的應用?？茖W家通過體外誘導成纖維細胞，獲得了類似于胚胎干細胞的一種細胞，稱為誘導多能干細胞（簡稱iPS細胞）。因為誘導過程無須破壞胚胎，而且iPS細胞可來源于病人自身的體細胞，因此iPS細胞的應用前景優(yōu)于胚胎干細胞。如圖為iPS細胞的獲得及用其培育不同種細胞的示意圖（c-Myc、Klf4、Sox2和Oct3/4等基因與細胞的脫分化有關）?；卮鹣铝袉栴}：（1）在對成纖維細胞進行培養(yǎng)時，常用胰蛋白酶處理使之分散成單個細胞，這說明細胞間的物質為_____，_____（填“能”或“不能”）用胃蛋白酶處理成纖維細胞，原因是_____。（2）在培養(yǎng)iPS細胞的過程中，培養(yǎng)基中應含有細胞所需的各種營養(yǎng)物質，并定期更換培養(yǎng)液。定期更換培養(yǎng)液的目的是_____。（3）過程③④為iPS細胞提供的條件不同，分化得到的細胞不同，可知細胞分化是_____的結果。若iPS細胞來源于病人自身體細胞的誘導，再將其分化出的細胞移入患者體內的優(yōu)勢是_____。（4）如果誘導iPS細胞定向分化為原始生殖細胞，該技術可能的應用是_____?！即鸢浮剑?）①.蛋白質②.不能③.多數動物細胞培養(yǎng)