DB34∕T 3293-2018 農(nóng)田雜草反枝莧對草甘膦抗性檢測技術(shù)規(guī)程

DB34DB34/T3293—2018農(nóng)田雜草反枝莧對草甘膦抗性檢測技術(shù)規(guī)程Codeofpracticefordetectionofglyphosate-resistantredrootpigweed(AmaranthusretroflexusL.)incropland2018-12-29發(fā)布2019-01-29實施安徽省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I12采集有機質(zhì)含量≤3g/kg、pH6.0～6.首先將供試反枝莧種子用質(zhì)量分數(shù)為0.3％的高錳酸鉀溶液浸泡消毒10min，用無菌水清洗3次。然后在9cm培養(yǎng)皿內(nèi)放2層濾紙，每皿放入50粒反枝莧種子，置于光照培養(yǎng)箱內(nèi)催芽，周期和溫度設(shè)為白天30℃12h、黑夜25℃12試驗土壤定量裝至盆缽的4/5處。采用盆缽底部滲灌方式，使土壤完全濕潤。將預處理的枝莧種子均勻撒播于土壤表面，覆土0.5～1.0cm左右，播種后移入人工氣候箱常規(guī)培養(yǎng)。以盆3012心葉出現(xiàn)萎蔫現(xiàn)象，葉片開始黃化卷曲，部3％～％，45根據(jù)培養(yǎng)皿測定法調(diào)查數(shù)據(jù)，按式（1）計算各藥劑處理的胚根長或胚軸長占空白對照的生長百分（％），RL=×100％........................RL——生長百分率(%);LL）（i為雜草藥害等級。I=×100％..................................(2)4i——毒害級別；RG=×100％.....................................(3)RG——生長百分率(%);GGRL（或I、RGC＋D—C..............................(4)1＋()bRL——生長百分率；RG——干重百分率；x——草甘膦濃度(mg/L)；b——ED50處的曲線斜率。x——草甘膦濃度(mg/L)；D——當草甘膦濃度為0時莽草酸積累量；b——曲線在ED50處的斜率。5TRR＝S...........................T——測試雜草生物型的ED50值；S——敏感雜草生物型的ED50值。根據(jù)抗性倍數(shù)的計算結(jié)果，按照表2中抗藥性水平的分級標準，對測試雜草生物型的抗藥性水平作6培養(yǎng)皿測定法A.1將草甘膦母液用0.1％TritonX-100水溶液按照等比梯度配制成5～7個系列濃度（0～320mA.2選20粒經(jīng)預處理露白的反枝莧種子均勻擺放于墊有2張濾紙的培養(yǎng)皿（直徑9cm）內(nèi)，種子A.3向培養(yǎng)皿內(nèi)加入5mL系列濃度的草甘膦藥液，使種子充分浸入藥液中；將處理78莽草酸測定法C.6用紫外可見光分光光度計在380