2025年浙江省杭州市七縣區(qū)高三3月份網上考試生物試題含解析

2025年浙江省杭州市七縣區(qū)高三3月份網上考試生物試題注意事項1．考生要認真填寫考場號和座位序號。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．2012年諾貝爾生理學或醫(yī)學獎授予了在細胞核重編程研究領域做出杰出貢獻的科學家。細胞核重編程是將人類成熟的體細胞重新誘導回干細胞狀態(tài)，以發(fā)育成各種類型細胞的過程。下列敘述錯誤的是（）A．細胞核重編程與基因的選擇性表達有關B．“動物細胞的分化是一個不可逆的過程”將被改寫C．該項研究證明了動物細胞具有全能性D．該項研究為臨床上解決器官移植的排斥反應帶來了希望2．向魚鰾內注入適量質量濃度為1．3g/mL的蔗糖溶液，扎緊口并稱重，然后將其浸入質量濃度為1．15g/mL的蔗糖溶液中，每隔11分鐘稱重一次。l小時內，魚鰾重量逐漸增加；l小時后，魚鰾重量不再增加。下列說法錯誤的是（）A．魚鰾重量增加是因為外界水分子的進入B．魚鰾重量不再增加時，水分子的進出處于動態(tài)平衡狀態(tài)C．魚鰾重量不再增加時，魚鰾內外蔗糖溶液的濃度可能相等D．若實驗開始時，在魚鰾外的蔗糖溶液中加入蔗糖酶，魚鰾重量增加的速率加快3．下列相關實驗中涉及“分離”的敘述正確的是A．T2噬菌體侵染細菌實驗中，離心的目的是使噬菌體的DNA與蛋白質分離B．植物細胞質壁分離實驗中，滴加蔗糖溶液的目的是使細胞質與細胞壁分離C．植物根尖細胞有絲分裂實驗中，可以觀察到姐妹染色單體彼此分離的過程D．綠葉中色素的提取和分離實驗中，色素分離是因其在層析液中溶解度不同4．當人體注射了用禽流感病毒蛋白制備的疫苗后，體內不會發(fā)生的反應是A．吞噬(巨噬)細胞處理和呈遞抗原B．產生針對該禽流感病毒蛋白的抗體C．效應T細胞消滅被疫苗感染的細胞D．形成能識別禽流感病毒的記憶細胞5．下列有關細胞的說法，正確的是A．衰老細胞的各種酶活性均下降B．原癌基因抑制細胞不正常增殖C．細胞核是細胞生命活動的代謝中心和控制中心D．細胞器中不一定含有磷脂，但一定含有蛋白質6．下列有關細胞的成分。結構或功能的敘述，正確的是（）A．有絲分裂中期，細胞核的體積變大B．所有細胞內核糖體的形成均與核仁有關C．真核細胞在生長過程中都會出現(xiàn)核DNA加倍現(xiàn)象D．核糖體和線粒體均參與了唾液淀粉酶的合成7．研究發(fā)現(xiàn)，分泌蛋白的合成起始于細胞質中游離的核糖體，合成的初始序列為信號序列，當它露出核糖體后，靠自由碰撞與內質網膜上的受體接觸，信號序列穿過內質網的膜后，蛋白質合成繼續(xù)，并在內質網腔中將信號序列切除。合成結束后，核糖體與內質網脫離，重新進入細胞質。基于以上事實，相關推測不正確的是（）A．內質網對蛋白質有加工功能B．核糖體的“游離”狀態(tài)或“附著”狀態(tài)是相對的C．核糖體與內質網的結合受制于mRNA中特定的密碼序列D．附著在內質網上的核糖體合成的蛋白質都是分泌蛋白8．（10分）如圖為某基因型為AaBb的動物部分組織切片顯微圖像，下列敘述錯誤的是（）A．該組織切片來源于卵巢B．甲細胞中有2套遺傳信息C．丙細胞基因型為AABB或AAbb或aaBB或aabbD．按分裂過程判斷，圖中標號的先后順序為甲→丙→乙二、非選擇題9．（10分）艾滋病藥物能治療新型冠狀病毒肺炎嗎?國家衛(wèi)健委新型冠狀病毒肺炎診療方案(試行第七版)中提供了用于一般治療的抗病毒藥物，其中洛匹那韋/利托那韋是原本用于艾滋病治療的藥物。為什么治療艾滋病的藥物能治療新型冠狀病毒引起的肺炎?HIV病毒和新型冠狀病毒都具有包膜，包膜上有侵染宿主細胞所必需的蛋白質，其中，新型冠狀病毒包膜上的S蛋白能識別并結合呼吸道上皮細胞表面的受體血管緊張素轉化酶2(ACE2)，HIV病毒包膜上的gp120在宿主細地T細胞表面的受體則是C04蛋白。HIV病毒和新型冠狀病毒的遺傳物質均為RNA，但兩種病毒進入宿主細胞后所經歷的生化歷程不盡相同。HIV病毒侵入宿主細胞后經過逆轉錄—整合—轉錄—翻譯—裝配的過程，最終出芽釋放。其中，翻譯時會先表達出一個多聚蛋白，該多聚蛋白在一種HIV蛋白酶的催化下被剪切成多個有功能的蛋白質。而新型冠狀病毒侵入宿主細胞后，其RNA可以直接作為模板進行翻譯，翻譯時產生的多聚蛋白也需要在其自身蛋白酶的催化下進行剪切以形成RNA復制酶等有功能的蛋白質。隨后，新型冠狀病毒RNA在RNA復制酶的催化下進行復制，與轉錄、翻譯所得的其他成分裝配后釋放。洛匹那韋/利托那韋的作用對象正是這種HIV蛋白酶。它們與HIV蛋白酶的活性中心結合進而抑制其活性。冠狀病毒切割多聚蛋白的主要蛋白酶是3CLPro，研究者通過分子動力學模擬的方法發(fā)現(xiàn)洛匹那韋/利托那韋能與SARS病毒的3CLPro活性中心結合。而SARS病毒和新型冠狀病毒的3CLPro蛋白氨基酸序列一致性達96%。此前洛匹那韋/利托那韋在SARS治療中也表現(xiàn)出一定的有效性，但在新型冠狀病毒肺炎中使用洛匹那韋/利托那韋仍需謹慎樂觀，其療效和療效仍需更多的實驗研究和臨床數(shù)據(jù)支持。（1）根據(jù)HIV病毒和新型冠狀病毒的結構可判斷它們都可以在吸附后通過____方式進入宿主細胞，但兩種病毒侵染的宿主細胞不同，原因是________________。（2）盡管HIV病毒和新型冠狀病毒在進入宿主細胞后的生化過程差異很大，但其中卻有一個共同之處，即___________________________。（3）洛匹那韋/利托那韋可能通過_________治療新型冠狀病毒肺炎，但治療艾滋病的藥物用于治療新型冠狀病毒肺炎具有局限性，體現(xiàn)在________。（4）治療艾滋病還有其他幾種藥物，如AZT和雷特格韋，它們作用的對象分別是HIV的逆轉錄酶和整合酶，請問AZT和雷特格韋能否用于治療新型冠狀病毒肺炎，理由是________。（5）根據(jù)文中信息，新型冠狀病毒治療藥物還有哪些其他可能的研發(fā)思路?請寫出一種____。10．（14分）Prader–Willi綜合征（PWS）的患兒表現(xiàn)為運動神經發(fā)育延遲，兒童期后出現(xiàn)過度生長、顯著肥胖的癥狀。該病是由人類15號染色體上的一對等位基因（S/s）控制，S基因控制某些重要蛋白質的合成，s基因則不能。進一步研究發(fā)現(xiàn)，該基因的遺傳還表現(xiàn)出有趣的“基因印記”現(xiàn)象，即子代細胞內來自雙親的兩個等位基因中只有一方的能表達，另一方的被印記而不表達。請回答下列相關問題：（1）PWS屬于________染色體上的_______性遺傳病。（2）若雙親為SS（♂）×ss（♀）的后代均正常，雙親為SS（♀）×ss（♂）的后代均表現(xiàn)為PWS，則說明總是被印跡而不表達的基因來自________方，來自另一親本的基因可以表達，在這種情況下，一對表現(xiàn)正常的夫婦（基因型均為Ss）后代患病的概率是_____。（3）基因印記的原因之一是DNA分子中某些胞嘧啶經甲基化轉變成5–甲基胞嘧啶，從而影響RNA聚合酶與DNA分子的結合，據(jù)此分析，DNA分子的甲基化因影響中心法則中的________過程而影響了基因的表達。11．（14分）基因工程又稱基因拼接技術和DNA重組技術，是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代方法為手段。如圖是基因工程示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：（1）從基因文庫中提取的目的基因通過PCR技術進行擴增時，所用的酶與細胞內同類酶的差異在于該酶______________。（2）進行①過程時，需用______________酶切開載體以插入目的基因。若要使目的基因在受體細胞中表達，需要通過表達載體而不能直接將目的基因導人受體細胞，原因是應___________________（答出兩點即可）。（3）若圖中宿主細胞為大腸桿菌，一般情況下②過程不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞，原因是____________________________；已轉化的宿主細胞（大腸桿菌）指的是____________________________。（4）真核生物基因（目的基因）在大腸桿菌細胞內表達時，表達出的蛋白質可能會被降解。為防止蛋白質被降解，在實驗中應選用______________的大腸桿菌作為受體細胞，在蛋白質純化的過程中應添加______________的抑制劑。12．下圖為紅綠色盲、抗維生素D佝僂病的遺傳家系圖（不考慮基因突變與四分體中非姐妹染色單體間的交叉互換）。已知紅綠色盲是伴X染色體隱性遺傳?。ㄔO基因為A、a），抗維生素D佝僂病是伴X染色體顯性遺傳?。ㄔO基因為B、b），請據(jù)圖回答下列問題：（1）Ⅰ-1與Ⅰ-4的基因型分別為______________________________。（2）Ⅲ-2與一個只患紅綠色盲男性婚配，則他們生一兩病都不患的孩子的概率為___，他們所生的男孩中，患抗維生素D佝僂病的概率為_____。（3）經檢查發(fā)現(xiàn)，Ⅲ-1不攜帶任何致病基因，但卻患有遺傳病，請簡要說明兩種可能原因：_______________、__________________。（4）計算人群中的紅綠色盲的發(fā)病率時，所調查的群體應_______，以保證實驗數(shù)據(jù)和結論的準確性。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

根據(jù)題干信息，“將人類成熟的體細胞重新誘導回干細胞狀態(tài)”類似于脫分化過程，干細胞可再分化形成多種類型細胞，為器官移植提供了供體，由于供體來自自身細胞，不會發(fā)生免疫排斥反應；細胞的全能性是指已經分化的細胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能?！驹斀狻緼、“細胞核重編程”即將人類成熟的體細胞重新誘導回干細胞狀態(tài)，類似于植物組織培養(yǎng)過程的脫分化，與基因的選擇性表達密切相關，A正確；B、細胞分化是一種持久性變化，一般來說，分化了的細胞將一直保持分化后的狀態(tài)直到死亡，而題干中能將人類成熟的體細胞誘導回干細胞的狀態(tài)，所以“動物細胞的分化是一個不可逆的過程”將可能被改寫，B正確；C、細胞全能性的體現(xiàn)必須是由細胞發(fā)育成完整個體才能體現(xiàn)，而由細胞發(fā)育成組織或器官不能體現(xiàn)全能性，C錯誤；D、將人類成熟的體細胞重新誘導回干細胞狀態(tài)，并能再分化形成多種類型細胞，通過該技術獲得的器官進行移植屬于自體移植，沒有免疫排斥反應，D正確。故選C。2、D【解析】

根據(jù)題意分析可知：1.3g/mL蔗糖溶液濃度高于1.15g/mL蔗糖溶液，故1.15g/mL蔗糖溶液水分會流向1.3g/mL蔗糖溶液多，導致魚鰾內蔗糖溶液濃度越來越低，而魚鰾外蔗糖溶液濃度越來越高，當二者濃度達到相等時，水分出入達到平衡，二者濃度不再變化?！驹斀狻眶~鰾內盛有1.3g/mL的蔗糖溶液，而魚鰾外是1.15g/mL的蔗糖溶液，依據(jù)滲透作用原理，水分子總的滲透方向表現(xiàn)為低濃度運輸?shù)礁邼舛龋瑒t從鰾外向鰾內，從而導致鰾內濃度降低，重量增加，一段時間后，達到平衡。所以在進行實驗的1小時之內，魚鰾重量增加是因為外界水分進入魚鰾內；在進行實驗的1小時后，魚鰾重量不再增加是因為進出魚鰾的水分子處于相對平衡狀態(tài)。若實驗開始時，在魚鰾外的蔗糖溶液中加入蔗糖酶，則蔗糖被分解為葡萄糖和果糖，導致魚鰾外濃度比原來升高，那么魚鰾內外濃度差減小，因此魚鰾重量增加的速率減慢。綜上所述A、B、C正確，D錯誤。故選D。3、D【解析】

1、質壁分離中的”質“是指原生質層，”壁“是指細胞壁。

2、綠葉中色素的提取和分離實驗，提取色素時需要加入無水乙醇（溶解色素）、石英砂（使研磨更充分）和碳酸鈣（防止色素被破壞）；分離色素時采用紙層析法，原理是色素在層析液中的溶解度不同，隨著層析液擴散的速度不同，最后的結果是觀察到四條色素帶，從上到下依次是胡蘿卜素（橙黃色）、葉黃素（黃色）、葉綠素a（藍綠色）、葉綠素b（黃綠色）。

3、觀察細胞有絲分裂實驗的步驟：解離（解離液由鹽酸和酒精組成，目的是使細胞分散開來）、漂洗（洗去解離液，便于染色）、染色（用龍膽紫、醋酸洋紅等堿性染料）、制片（該過程中壓片是為了將根尖細胞壓成薄層，使之不相互重疊影響觀察）和觀察（先低倍鏡觀察，后高倍鏡觀察）。4、T2噬菌體侵染細菌的實驗步驟：分別用35S或32P標記噬菌體→噬菌體與大腸桿菌混合培養(yǎng)→噬菌體侵染未被標記的細菌→在攪拌器中攪拌，然后離心，檢測上清液和沉淀物中的放射性物質?！驹斀狻縏2噬菌體侵染細菌實驗中，離心的目的是使噬菌體的蛋白質外殼與被感染的細菌分離，A錯誤；植物細胞質壁分離實驗中，滴加蔗糖溶液的目的是使原生質層與細胞壁分離，其中原生質層是由細胞膜、液泡膜和兩層膜之間的細胞質構成的，B錯誤；觀察植物細胞有絲分裂實驗中，經過解離步驟后細胞已經死亡，因此不能觀察到姐妹染色單體彼此分離的動態(tài)過程，C錯誤；綠葉中色素的提取和分離實驗中，色素分離是因其在層析液中溶解度不同，溶解度越大的，隨著層析液擴散的速度快，D正確。故選D。本題考查葉綠體中色素的提取和分離實驗、觀察植物細胞的質壁分離及復原實驗、觀察細胞有絲分裂實驗、噬菌體侵染細菌實驗，對于此類試題，需要考生注意的細節(jié)較多，如實驗的原理、實驗采用的方法、實驗現(xiàn)象等，需要考生在平時的學習過程中注意積累。4、C【解析】A.在特異性免疫發(fā)生的時都有吞噬（巨噬）細胞處理和呈遞抗原，A不符合題意；B.產生針對該禽流感病毒蛋白的抗體，在疫苗注射后會發(fā)生，B不符合題意；C.禽流感病毒蛋白制備的疫苗只有抗原的特點沒有侵染細胞的特點，故效應T細胞消滅被疫苗感染的細胞不會發(fā)生，C符合題意；D.形成能識別禽流感病毒的記憶細胞，會在體內發(fā)生，D不符合題意。故選C。5、D【解析】衰老細胞內絕大多數(shù)酶的活性會下降，但是仍然有些酶活性會升高，如水解酶，A項錯誤；原癌基因主要負責調節(jié)細胞周期，控制細胞生長和分裂的進程，抑癌基因主要是阻止細胞不正常的增殖，B項錯誤；細胞核是細胞代謝和遺傳的控制中心，細胞生命活動的代謝中心是細胞質基質，C項錯誤；沒有膜結構的細胞器不含磷脂，如核糖體和中心體，但所有細胞器一定含有蛋白質，D項正確。【點睛】本題的易錯點在于：誤認為細胞衰老后所有的酶活性降低；混淆原癌基因和抑癌基因的作用；混淆細胞代謝的中心和細胞代謝的控制中心。熟記并理解教材中與細胞器、細胞核、細胞癌變和細胞衰老的基礎知識是解答此類問題的關鍵。6、D【解析】

分泌蛋白合成與分泌過程:核糖體合成蛋白質內質網進行粗加工內質網“出芽”形成囊泡高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質高爾基體“出芽”形成囊泡細胞膜。【詳解】A、有絲分裂中期不存在核膜和核仁，不存在細胞核結構，A錯誤；B、原核細胞有核糖體，但沒有核仁，其核糖體的形成與核仁無關，B錯誤；C、不增殖的真核細胞在生長過程中，核DNA含量不變，C錯誤；D、唾液淀粉酶的化學本質是蛋白質，核糖體是蛋白質的合成場所，線粒體能為蛋白質的合成提供能量，D正確。故選D。7、D【解析】

分泌蛋白的合成與分泌過程：附著在內質網上的核糖體合成蛋白質→內質網進行粗加工→內質網“出芽”形成囊泡→高爾基體進行再加工形成成熟的蛋白質→高爾基體“出芽”形成囊泡→細胞膜，整個過程還需要線粒體提供能量?！驹斀狻緼、內質網能對核糖體合成蛋白質進行粗加工，A正確；B、由題干信息可知，游離的核糖體可以結合到內質網上，合成結束后，附著的核糖體會與內質網脫離，故核糖體的“游離”狀態(tài)或“附著”狀態(tài)是相對的，B正確；C、核糖體與內質網的結合，需要mRNA中特定的密碼序列合成信號序列，C正確；D、附著在內質網上的核糖體合成的蛋白質不一定都是分泌蛋白，如膜蛋白，溶酶體里的蛋白質等，D錯誤。故選D。8、B【解析】

分析圖：動物組織切片顯微圖象表明細胞正在進行減數(shù)分裂；甲處于減數(shù)第一次分裂中期、乙處于減數(shù)第二次分裂后期、丙處于減數(shù)第二次分裂前期?！驹斀狻緼、據(jù)圖中乙細胞可知，細胞質不均等分裂，該動物為雌性動物，且進行減數(shù)分裂，該組織切片來源于卵巢，A正確；B、甲細胞中有2個染色體組，4套遺傳信息，B錯誤；C、丙細胞正在進行減數(shù)第二次分裂，所以其基因型為AABB或AAbb或aaBB或aabb，C正確；D、按分裂過程判斷，圖中標號的先后順序為甲→丙→乙，D正確。故選B。本題結合圖解，考查細胞的減數(shù)分裂，要求考生識記細胞減數(shù)分裂不同時期的特點，掌握減數(shù)分裂過程中染色體和DNA含量變化規(guī)律，能正確分析題圖，再結合所學的知識準確答題。二、非選擇題9、胞吞（膜融合）兩種病毒表面的配體蛋白不同，特異性結合的宿主細胞表面受體蛋白也不同，因此侵染的宿主細胞不同在翻譯時均先表達出多聚蛋白，然后通過蛋白酶催化剪切多聚蛋白獲得多個功能蛋白抑制新型冠狀病毒的3CLPro蛋白酶活性這兩種藥物并不是為新型冠狀病毒的3CLPro量身定做的抑制劑。在親和力和特異性上肯定不是最佳不能，因為新型冠狀病毒不是逆轉錄病毒，不具有逆轉錄酶和整合酶言之有理即可【解析】

根據(jù)題干信息分析，HIV病毒和新型冠狀病毒都具有包膜，包膜上有侵染宿主細胞所必需的蛋白質，其中新型冠狀病毒包膜上的S蛋白能識別并結合呼吸道上皮細胞表面的受體血管緊張素轉化酶2(ACE2)，HIV病毒包膜上的gp120在宿主的T細胞表面的受體則是C04蛋白。兩種病毒都是RNA病毒，遺傳物質都是RNA，但是遺傳信息的傳遞途徑不同，HIV病毒是逆轉錄病毒，期侵入宿主細胞后發(fā)生逆轉錄、轉錄、翻譯的過程，而新型冠狀病毒侵入宿主細胞后，其RNA可以直接作為模板進行翻譯，也可以自我復制。【詳解】（1）兩種病毒的主要成分中的蛋白質和RNA都屬于生物大分子，因此兩種病毒進入宿主細胞的方式都是胞吞；由于兩種病毒表面的配體蛋白不同，特異性結合的宿主細胞表面受體蛋白也不同，因此侵染的宿主細胞不同。（2）根據(jù)題干信息分析可知，兩種病毒進入宿主細胞的相同之處是在翻譯時均先表達出多聚蛋白，然后通過蛋白酶催化剪切多聚蛋白獲得多個功能蛋白。（3）根據(jù)題意分析，洛匹那韋和利托那韋能與SARS病毒的3CLPro活性中心結合，即通過抑制新型冠狀病毒的3CLPro蛋白酶活性治療新型冠狀病毒肺炎，但是這兩種藥物并不是為新型冠狀病毒的3CLPro量身定做的抑制劑，在親和力和特異性上肯定不是最佳。（4）已知AZT和雷特格韋作用的對象分別是HIV的逆轉錄酶和整合酶，而新型冠狀病毒不是逆轉錄病毒，不具有逆轉錄酶和整合酶，因此AZT和雷特格韋不能用于治療新型冠狀病毒肺炎。（5）根據(jù)題干信息分析，新型冠狀病毒治療藥物的研發(fā)思路還有：可以抑制病毒與細胞結合，或者抑制胞吞、抑制裝配或釋放等。解答本題的關鍵是掌握病毒的相關知識點，了解病毒的基本結構，明確不同的病毒含有的侵染宿主細胞所必需的蛋白質的種類不同，識別的受體細胞也不同，同時不同的病毒進入受體細胞發(fā)生的遺傳信息的傳遞過程也不同。10、常隱母1/2轉錄【解析】

基因是一段有功能的核酸，在大多數(shù)生物中是一段DNA，在少數(shù)生物（RNA病毒）中是一段RNA?；虮磉_是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產物的過程，基因表達產物通常是蛋白質?；虮磉_包括轉錄和翻譯。轉錄過程由RNA聚合酶進行，以DNA為模板，產物為RNA。RNA聚合酶沿著一段DNA移動，留下新合成的RNA鏈。翻譯過程是以信使RNA（mRNA）為模板，指導合成蛋白質的過程?！驹斀狻浚?）PWS病是由人類15號染色體上的一對等位基因（S/s）控制的疾病，人類15號染色體屬于常染色體，S基因控制某些重要蛋白質的合成，s基因則不能，因此屬于常染色體上的隱性遺傳病。（2）雙親為SS（♂）×ss（♀）的后代均正常，雙親為SS（♀）×ss（♂）的后代均表現(xiàn)為PWS，說明S基因沒表達，即說明總是被印跡而不表達的基因來自母方，來自另一親本的基因可以表達。在這種情況下，一對表現(xiàn)正常的夫婦（基因型均為Ss）后代的基因型為1SS、2Ss、1ss，ss患病，Ss中若S來自母方也患病，因此后代患病的概率是2/4=1/2。（3）RNA聚合酶與DNA分子的結合是轉錄過程，因此DNA分子的甲基化因影響中心法則中的轉錄過程而影響了基因的表達。熟悉基因的遺傳規(guī)律及基因的表達是解答本題的關鍵。11、耐高溫（或具有熱穩(wěn)定性）限制（或限制性核酸內切）目的基因無復制原點、目的基因無表達所需啟動子目的基因無表達所需的終止子未處理的大腸桿菌吸收質粒（外源DNA）的能力弱已導入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達的細胞蛋白酶缺陷型蛋白酶【解析】

基因工程技術的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。（3）將目的基因導入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因??DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA??分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質--抗原-抗體雜交技術。個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斀狻浚?）利用PCR技術擴增目的基因時，需要特殊的耐高溫的DNA聚合酶。（2）在構建基因表達載體時，需用限制酶將載體切開，以便目的基因的插入；若要使目的基因在受體細胞中表達，需要通過表達載體而不能直接將目的基因導入受體細