DB11T 375-2017 水生動(dòng)物檢疫名錄及病原檢測方法_第1頁
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文檔簡介

DB11北京市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布——修改了病原檢測方法(見4.2,2006年版的4水生動(dòng)物檢疫名錄及病原檢測方法件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本210℃~20℃20℃~30℃8℃~15℃20℃~30℃15℃~26℃10℃~14℃25℃~30℃15℃~25℃采集樣品時(shí)的水溫應(yīng)在15℃~26℃。采樣品種為金魚、鯽及其雜交種。優(yōu)先采集金魚,其次為鯽魚,及其它雜交需采集金魚、鯽及其雜交種發(fā)病情況、混養(yǎng)其它魚患金魚造血器官壞死病的金魚、鯽,特別是雜交——將病魚解剖后可見其肝發(fā)白,脾和腎腫大,脾上有白色患金魚造血器官壞死病的金魚、鯽,特別是雜交種,繼續(xù)上升至26℃以上時(shí),這種疾病發(fā)生率會(huì)大幅度下降;而當(dāng)秋季溫度開始下降,特別是降4低到26℃以下時(shí)會(huì)再次流行;A.4.3.2將所取樣品勻漿成糊狀,按入700μL抽提液Ⅱ,用力混合。12000r/min離心5min,取上層水相(約600μL)。再加入預(yù)冷的1.5倍將100μL懸液放入1.5ml的離心管,再加入1mlDNAzol,),A.4.5.2擴(kuò)增GFHNVDNAhelicase基因的反應(yīng)體液剛好淹沒膠面。將6μL樣品和2μL上樣緩沖液,按比例混勻后加入樣品孔。在電泳時(shí)使用核酸分子量A.4.9.1PCR后陽性對照會(huì)出現(xiàn)一條362bp的DNA片段(當(dāng)用CyHVpol基因引物時(shí))或者451bp的DNA_________________________________

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