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新品上線!細(xì)胞周期檢測試劑盒——解鎖細(xì)胞生長奧秘細(xì)胞周期是指細(xì)胞自一次分裂完成至下一次分裂終了的全過程,其可分為間期與分裂期兩大階段。在正常的細(xì)胞周期中,分裂間期持續(xù)的時(shí)間遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于分裂期,幾乎占到細(xì)胞整個(gè)周期的90%左右。所以細(xì)胞周期分析中,主要是研究細(xì)胞的分裂間期的細(xì)胞生命活動(dòng),而細(xì)胞在周期活動(dòng)中,不同時(shí)期,其DNA的含量有所不同。利用這一特性,DNA含量成為了一項(xiàng)關(guān)鍵的分析指標(biāo),尤其是在一些癌變細(xì)胞,或者藥物干預(yù)后的細(xì)胞出現(xiàn)異常生物活動(dòng)的時(shí)候,被廣泛應(yīng)用于腫瘤,免疫等科學(xué)研究中。1細(xì)胞分裂間期DNA含量G0/G1期:DNA合成前期,為DNA合成做好物質(zhì)準(zhǔn)備,DNA含量為2NS期:DNA的合成期,此時(shí)期完成DNA的合成、合成與DNA組裝構(gòu)成染色質(zhì)等相關(guān)組蛋白,DNA的含量增加,在2N-4N范圍間G2/M期:DNA合成后期,DNA復(fù)制結(jié)束,開始分裂準(zhǔn)備,DNA含量為4N根據(jù)細(xì)胞不同周期時(shí)的DNA含量的不同,去檢測DNA含量,選擇一些能與DNA結(jié)合的熒光染料(如PI,DAPI等),讓其緊密嵌入雙鏈DNA結(jié)構(gòu)中,結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光信號(hào),其熒光信號(hào)的強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。染色后,利用流式細(xì)胞儀這一精密儀器,可以對(duì)細(xì)胞的DNA含量進(jìn)行定量測定,進(jìn)而根據(jù)DNA分布模式的差異,深入分析細(xì)胞周期的不同階段及凋亡狀態(tài)。2細(xì)胞周期檢測試劑盒特點(diǎn)>適用于多種貼壁、懸浮細(xì)胞樣本>區(qū)分不同時(shí)期細(xì)胞占比>方法簡單,操作簡便>無需額外使用其他昂貴試劑武漢尚恩生物細(xì)胞周期檢測試劑盒設(shè)計(jì)靈活,適用于貼壁培養(yǎng)及懸浮狀態(tài)下的細(xì)胞周期檢測。若需對(duì)組織樣本進(jìn)行細(xì)胞周期分析,則需先通過消化處理將組織解離成單細(xì)胞懸液,以便后續(xù)的檢測流程能夠順利進(jìn)行。3實(shí)驗(yàn)流程4實(shí)驗(yàn)案例▲Jurkat細(xì)胞70%乙醇固定過夜后細(xì)胞周期試劑盒(SNK-015)流式檢測結(jié)果5結(jié)果解讀假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1,那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2,正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1~2之間。如果樣品中有凋亡細(xì)胞存在,由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及DNA片段化(DNAfragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片段在染色過程中丟失,因此凋亡細(xì)胞在染色后呈現(xiàn)明顯的弱染,即熒光強(qiáng)
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