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紫外分光光度法測定苯甲酸一實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)運用標(biāo)準(zhǔn)對比法求樣品含量掌握752型紫外分光光度計的使用方法1精選完整ppt課件二實驗原理在堿性條件下,苯甲酸形成苯甲酸鹽,對紫外光有選擇性吸收,其吸收光譜的最大吸收波長在225nm??刹捎米贤夥止夤舛扔嫓y定物質(zhì)在紫外光區(qū)的吸收光譜并進行定量分析。2精選完整ppt課件三實驗步驟1.苯甲酸吸收曲線的繪制吸取苯甲酸貯備液4.00ml,放入50ml容量瓶中,用0.01mol/L的NaOH溶液定容,搖勻得標(biāo)準(zhǔn)苯甲酸溶液S(此溶液1ml含8μg苯甲酸)。測量條件參比液:0.01mol/L的NaOH溶液;測量波長:210、215、218、220、222、224、225、226、228、230、235、240nm。以波長為橫坐標(biāo),吸光度為縱坐標(biāo),繪制苯甲酸的紫外吸收曲線。3精選完整ppt課件2.標(biāo)準(zhǔn)對比法測定樣品液苯甲酸的含量取10.00ml樣品液,放入50ml容量瓶中,用0.01mol/L的NaOH溶液定容,搖勻得稀釋好的樣品液X。在上述曲線中找出最大吸收波長,以此作測定波長。以0.01mol/L的NaOH溶液為參比液。在完全相同的條件下測出稀釋好的樣品液X的吸光度值。3、按下式計算樣品液中苯甲酸的濃度:
4精選完整ppt課件四、實驗數(shù)據(jù)與結(jié)果1.苯甲酸吸收曲線的繪制2.標(biāo)準(zhǔn)對比法測定樣品液苯甲酸的含量λ(nm)210215218220222224225226228230235240A
AsAxCsCx5精選完整ppt課件五、結(jié)果與討論結(jié)果如何?是否符合預(yù)期?分析失敗的原因:儀器因素?溶液因素?人為因素?環(huán)境因素?6精選完整ppt課件紫外分光光度計的使用方法1.打開電源,預(yù)熱20分鐘2.按MODE鍵設(shè)為吸光度方式
顯示器顯示“---nm,----Abs”3.設(shè)定波長,如220nm
顯示器顯示“220nm,----Abs”4.打開樣品室蓋,將參比液比色皿和待測液比色皿放入樣品室蓋上樣品室蓋5.將參比液比色皿拉入光路中,按100%T鍵調(diào)零
調(diào)零完成時顯示器顯示“220nm,0.000Abs”6.將待測溶液拉入光路中,直接讀數(shù)注意:每改變波長,必須重新調(diào)零注意倒溶液時遠(yuǎn)離儀器,避免濺濕儀器7精選完整ppt課件比色皿使用注意事項1、拿取比色皿時,只能用手指接觸毛玻璃面,避免接觸光學(xué)面,注意保護,防止摔破。
2、盛裝溶液時,高度為比色皿的2/3處即可,光學(xué)面如有殘液可先用濾紙輕輕吸附,然后再用擦鏡紙擦拭。3、不可隨時調(diào)換參比用的比色皿和承載樣品比色皿,也就是說參比比色皿應(yīng)該固定。
4、使用比色皿時,還應(yīng)特別注意通光方向。一般比色皿的毛玻璃面上都刻有箭頭,或在透光面上蝕刻有標(biāo)記,以供使用者辨認(rèn)通光方向。
5、不能把裝有溶液的比色皿放在儀器上以防止濺濕儀器。
6、比色皿在使用后,應(yīng)立即用水沖洗干凈,收好。8精選完整ppt課件實驗課要求穿白大褂,帶筆記本記錄數(shù)據(jù)嚴(yán)肅認(rèn)真操作實驗,嚴(yán)禁大聲喧嘩實驗前后把儀器清洗干凈并放回原位置試劑瓶用完后放回原位置;講臺上的試劑瓶不能拿走;注意避免滴管和瓶蓋的交叉污染桌面保持整潔,小心避免損壞儀器每次做完實驗簽名,值日生打掃干凈,經(jīng)老師檢查通過后才能離開實驗報告下次課前交9精選
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