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第第頁(yè)衣原體檢測(cè)的方法及優(yōu)缺點(diǎn)衣原體屬于原核生物,嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生,是一種比細(xì)菌小比病毒大的微生物,能通過(guò)細(xì)胞濾器,有特殊的兩相發(fā)育周期。它沒(méi)有合成高能化合物ATP、GTP的本領(lǐng),必需由宿主細(xì)胞供應(yīng),因而必需依靠寄生才略生存。衣原體的致病機(jī)理是抑制被感染細(xì)胞的代謝,溶解破壞細(xì)胞并導(dǎo)致溶解酶釋放,代謝產(chǎn)物的細(xì)胞毒作用引起變—態(tài)反應(yīng)和自身免疫。衣原體感染可引起子宮感染、早產(chǎn)、流產(chǎn)、尿道感染、肺炎、支氣管炎、胃腸炎、腦脊髓炎、結(jié)膜炎和關(guān)節(jié)炎等多種疾病。衣原體檢測(cè)的方法重要有以下幾種:1.PCR檢測(cè)法:利用PCR技術(shù)擴(kuò)增衣原體的DNA,再通過(guò)凝膠電泳或熒光定量PCR等方法檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物,從而確定樣品中是否存在衣原體。優(yōu)點(diǎn):(1)高度敏感,能夠檢測(cè)到極低濃度的衣原體DNA;(2)快速、簡(jiǎn)便,一般只需幾小時(shí)即可得到結(jié)果;(3)能夠檢測(cè)多種衣原體亞型。缺點(diǎn):(1)存在假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果的可能性;(2)對(duì)樣品的處理和提取DNA質(zhì)量要求較高;(3)需要特殊的試驗(yàn)室設(shè)備和技術(shù)。2.培養(yǎng)法:將樣品接種到含有適合營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基上,利用衣原體的生長(zhǎng)特性進(jìn)行培養(yǎng),察看培養(yǎng)基上是否顯現(xiàn)衣原體的生長(zhǎng)。優(yōu)點(diǎn):(1)能夠檢測(cè)到活的衣原體;(2)能夠進(jìn)行藥敏試驗(yàn),確定衣原體對(duì)不同抗生素的敏感性;(3)能夠分別和鑒定不同的衣原體亞型。缺點(diǎn):(1)需要較長(zhǎng)的培養(yǎng)時(shí)間,一般需要7—14天;(2)對(duì)樣品的處理和培養(yǎng)條件要求較高;(3)存在培養(yǎng)失敗和假陰性結(jié)果的可能性。3.免疫學(xué)檢測(cè)法:利用特異性抗衣原體抗體與衣原體抗原結(jié)合的原理,通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)或熒光抗體法等方法檢測(cè)樣品中的衣原體抗原或抗體。優(yōu)點(diǎn):(1)能夠檢測(cè)到衣原體的蛋白質(zhì)或抗原;(2)快速、簡(jiǎn)便,一般只需幾小時(shí)即可得到結(jié)果;(3)能夠進(jìn)行半定量或定量分析。缺點(diǎn):(1)對(duì)樣品的處理和抗原提取要求較高;(2)存在假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果的可能性;(3)不能區(qū)分不同的衣原體亞型。4.原位雜交法:利用特異性探針與衣原體DNA結(jié)合的原理,通過(guò)熒光或放射性標(biāo)記的探針檢測(cè)樣品中的衣原體。優(yōu)點(diǎn):(1)可以直接察看到細(xì)胞內(nèi)的病原體,可以確定其存在和數(shù)量;(2)可以在組織切片中進(jìn)行檢測(cè),可以確定病原體的位置和分布情況;(3)可以同時(shí)檢測(cè)多種病原體,可以提高檢測(cè)的靈敏度和特異性;(4)操作簡(jiǎn)單,不需要特殊的設(shè)備和技術(shù)。缺點(diǎn):(1)不能確定病原體的種類和亞型,需要進(jìn)一步的分子生物學(xué)檢測(cè);(2)可能會(huì)顯現(xiàn)假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,需要結(jié)合臨床表現(xiàn)和其他檢測(cè)結(jié)果綜合分析;(3)檢測(cè)結(jié)果受到樣本質(zhì)量和處理方法的影響,需要注意樣本手記和處理的標(biāo)準(zhǔn)化;(4)不能確定病原體的活性和毒力,需要結(jié)合其他檢測(cè)方法進(jìn)行綜合分析。5.細(xì)胞學(xué)檢測(cè)法:通過(guò)顯微鏡察看樣品中的細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu),檢測(cè)是否存在衣原體感染的細(xì)胞。衣原體的細(xì)胞學(xué)檢測(cè)法是通過(guò)顯微鏡察看細(xì)胞形態(tài)和結(jié)構(gòu)來(lái)檢測(cè)衣原體的存在。優(yōu)點(diǎn):(1)操作簡(jiǎn)單,不需要多而雜的設(shè)備和技術(shù);(2)可以直接察看到細(xì)胞內(nèi)的衣原體,可以確定其存在和數(shù)量;(3)可以在組織切片中進(jìn)行檢測(cè),可以確定衣原體的位置和分布情況;(4)可以同時(shí)檢測(cè)多種病原體,可以提高檢測(cè)的靈敏度和特異性。缺點(diǎn):(1)檢測(cè)結(jié)果受到樣本質(zhì)量和處理方法的影響,可能存在假陰性或假陽(yáng)性結(jié)果;(2)檢測(cè)結(jié)果需要經(jīng)過(guò)專業(yè)人員的推斷
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