Lp-PLA2(人血漿脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2)定量檢測(cè)試劑盒

人血漿脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)

定量(dìngliàng)測(cè)定試劑盒

中美合資(hézī)·天津康爾克生物科技有限公司共四十八頁125,000+受試者在國際主流專業(yè)雜志和會(huì)議報(bào)告中，已有超過(chāoguò)100項(xiàng)臨床研究和綜述分析的結(jié)果支持Lp-PLA2

作為一個(gè)心血管疾病的標(biāo)志物在傳統(tǒng)危險(xiǎn)標(biāo)志物的基礎(chǔ)上提供了新的信息國際研究一致(yīzhì)結(jié)果共四十八頁國際權(quán)威指南(zhǐnán)一致推薦2010ACCF/AHA無癥狀成人心血管風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指南可考慮(kǎolǜ)對(duì)中等風(fēng)險(xiǎn)的無癥狀成人進(jìn)行Lp-PLA2

檢測(cè)以進(jìn)一步評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)。2011AHA/ASA卒中一級(jí)預(yù)防指南在未有心血管疾病的患者中檢測(cè)炎癥指標(biāo)如hs-CRP或Lp-PLA2可以鑒別出有較高卒中風(fēng)險(xiǎn)的患者。2012AACE高脂血癥管理與動(dòng)脈粥樣硬化預(yù)防指南一些研究證明，在有必要進(jìn)一步對(duì)患者進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)級(jí)時(shí)，Lp-PLA2檢測(cè)比hs-CRP具有更高的特異性。2012ESC歐洲心血管疾病預(yù)防臨床實(shí)踐指南對(duì)有復(fù)發(fā)急性血栓事件的高風(fēng)險(xiǎn)患者可以檢測(cè)

Lp-PLA2

以進(jìn)一步評(píng)估風(fēng)險(xiǎn)。共四十八頁國內(nèi)專家一致(yīzhì)認(rèn)可——“脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2)是血管內(nèi)皮炎癥的獨(dú)立危險(xiǎn)因子，也是目前檢測(cè)血管內(nèi)皮炎癥的新指標(biāo)。對(duì)心腦血管栓塞性疾病的預(yù)測(cè)(yùcè)、治療和預(yù)后的判斷具有重要意義?！敝腥A醫(yī)學(xué)會(huì)心血管病學(xué)分會(huì)主任委員，著名心血管專家胡大一教授中國工程院院士，美國心臟病學(xué)院院士，著名心血管專家張運(yùn)教授——“脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lp-PLA2)已成為AS抗炎治療的新靶點(diǎn)，初步研究發(fā)現(xiàn)通過抑制磷脂酶A2，可以減少血管壁脂質(zhì)的沉積和巨噬細(xì)胞的浸潤。”摘自《動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊的研究進(jìn)展》摘自2012中國腦卒中大會(huì)主題論壇報(bào)告共四十八頁臨床(línchuánɡ)一線期待已久“心血管醫(yī)生最關(guān)心的一點(diǎn)就是高?；颊咝难苁录l(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。如果能夠早期預(yù)防(yùfáng)，在發(fā)生重大事件之前把危險(xiǎn)控制住，那就可以減少病死率。但目前臨床常用的檢測(cè)指標(biāo)如肌苷激酶等出現(xiàn)時(shí)為時(shí)已晚，而脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2定量檢測(cè)為臨床提供了一個(gè)預(yù)警及風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的有力工具?！薄本┐髮W(xué)第三醫(yī)院心內(nèi)科主任高煒“現(xiàn)有的檢驗(yàn)指標(biāo)如膽固醇、LDL、HDL確實(shí)在心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方面發(fā)揮一定作用，但并不全面。甚至有些方法如血小板活化檢測(cè)還不夠穩(wěn)定。因此實(shí)驗(yàn)室迫切需要一個(gè)方法穩(wěn)定、特異性強(qiáng)又獨(dú)立于膽固醇之外的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方法，而脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2定量檢測(cè)就提供了這樣一個(gè)方法?！薄?/p>

中國醫(yī)師協(xié)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)師分會(huì)會(huì)長(zhǎng)叢玉隆

“我國一年心外科手術(shù)量已達(dá)到18.5萬例，但還遠(yuǎn)不能滿足我國患者需要，原因就在于我國心血管疾病發(fā)病率太高，每年新增冠心病患者300萬。因此預(yù)防的作用比治療更重要，并且其社會(huì)效益要遠(yuǎn)高于手術(shù)。而脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2定量檢測(cè)為心血管疾病預(yù)防提供了一個(gè)有力武器。”——中國醫(yī)師協(xié)會(huì)心臟外科醫(yī)師分會(huì)副會(huì)長(zhǎng)

孫立忠共四十八頁2011.7.16

北京(běijīnɡ)釣魚臺(tái)國賓館共四十八頁國家863高科技成果中國(zhōnɡɡuó)首家和唯一上市產(chǎn)品

中國首家和唯一上市產(chǎn)品

國家863科技攻關(guān)項(xiàng)目高科技成果快速監(jiān)控和預(yù)測(cè)心腦血管栓塞性疾病

填補(bǔ)中國心腦血管疾病快速預(yù)警檢測(cè)的空白

與會(huì)專家：

中國人民解放軍總后衛(wèi)生部原副部長(zhǎng)(bùchánɡ)陳新年廣東省衛(wèi)生廳副廳長(zhǎng)耿慶山中國醫(yī)藥生物技術(shù)協(xié)會(huì)副會(huì)長(zhǎng)于修成

科技部火炬高技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)中心處長(zhǎng)雷慶西中國醫(yī)師協(xié)會(huì)心臟外科醫(yī)師分會(huì)副會(huì)長(zhǎng)

孫立忠中國醫(yī)師協(xié)會(huì)檢驗(yàn)醫(yī)師分會(huì)會(huì)長(zhǎng)叢玉隆北京大學(xué)第三醫(yī)院心內(nèi)科主任高煒北京大學(xué)首鋼醫(yī)院心血管醫(yī)學(xué)中心主任王宏宇衛(wèi)生部北京醫(yī)院心內(nèi)科主任許峰共四十八頁心腦血管疾病是造成人類死亡的主要(zhǔyào)病因男性女性惡性腫瘤心臟病腦血管病呼吸系統(tǒng)疾病惡性腫瘤(èxìngzhǒngliú)心臟病腦血管病呼吸系統(tǒng)疾病來源：《2012中國衛(wèi)生統(tǒng)計(jì)年鑒》來源:美國國家健康中心2012年統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)共四十八頁心臟猝死：經(jīng)常(jīngcháng)是首次心臟病爆發(fā)

MyerburgRJetal.Circulation.2012;125:1043-1052共四十八頁研發(fā)(yánfā)背景

動(dòng)脈粥樣硬化（AS)是造成心腦血管疾病的主要原因

AS是一種炎癥反應(yīng)性疾病在粥樣斑塊形成、進(jìn)展和最終破裂的過程中均有炎性介質(zhì)的參與

尋找一個(gè)能夠反映這種動(dòng)態(tài)變化過程的炎性介質(zhì)就能

夠檢測(cè)并跟蹤動(dòng)脈粥樣硬化的嚴(yán)重程度目前脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2（Lipoprotein-AssociatedPhospholipaseA2，Lp-PLA2)已被國際(guójì)專家公認(rèn)為一種新

的炎性反應(yīng)標(biāo)志物共四十八頁內(nèi)容(nèiróng)心腦血管疾病現(xiàn)狀及研發(fā)背景(bèijǐng)Lp-PLA2與動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系臨床研究臨床意義康爾克Lp-PLA2定量檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介產(chǎn)品詳解與注意事項(xiàng)

共四十八頁

Lp-PLA2

脂蛋白相關(guān)磷脂酶A2，英文縮寫Lp-PLA2。又稱血小板活化因子乙酰水解酶（PAF-AH）。分子量為45KDa

。由成熟的巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞合成和分泌，并受炎性介質(zhì)的調(diào)節(jié)。水解(shuǐjiě)ox-LDL-C上的磷脂，生成促炎物質(zhì)lyso-PC和ox-FA，因此具有促炎癥和促動(dòng)脈粥樣硬化的作用。共四十八頁Lp-PLA2在粥樣斑塊形成(xíngchéng)中的作用粥樣斑塊形成血管(xuèguǎn)腔氧化型LDL內(nèi)膜中膜Lp-PLA2溶血卵磷脂氧化脂肪酸泡沫細(xì)胞單核細(xì)胞粘附分子巨噬細(xì)胞細(xì)胞因子共四十八頁穩(wěn)定斑塊vs易損斑塊組織學(xué)特征(tèzhēng)對(duì)比薄纖維帽厚纖維帽小型(xiǎoxíng)壞死脂質(zhì)池Lp-PLA2Lp-PLA2血管腔血管腔血栓大型壞死脂質(zhì)池

穩(wěn)定斑塊Lp-PLA2

含量較低(深色染色)纖維帽厚，膠原含量高小型壞死脂質(zhì)池炎癥程度較輕

易損斑塊Lp-PLA2

含量較高(深色染色)纖維帽薄，膠原含量低大型壞死脂質(zhì)池炎癥程度較重CorsonMAetal,AmJCardSuppl2008:101(41F-50F)共四十八頁斑塊易損性與其(yǔqí)Lp-PLA2含量成正比疾病進(jìn)展Lp-PLA2

染成棕紅色早期(zǎoqī)斑塊出現(xiàn)脂質(zhì)池穩(wěn)定斑塊纖維帽變薄，出現(xiàn)小型壞死脂質(zhì)核易損斑塊薄纖維帽破裂斑塊血管中出現(xiàn)血栓KolodgieF,etal.ArteriosclerThrombVascBiol2006血栓共四十八頁>25已發(fā)表研究結(jié)果顯示:Lp-PLA2升高導(dǎo)致(dǎozhì)心血管事件風(fēng)險(xiǎn)加倍Packard(WOSCOPS),NEnglJMed2000–CHDBlake(WHS),JAmCollCardiol2001–CHDBlankenberg(AtheroGENE),JLipidRes2003-CADBallantyne(ARIC),Circulation2004-CHDLDL<130Winkler,J

ClinEndocrinologyandMetabolism2004–CHDOei(Rotterdam),Circulation2005–CHD

Brilakis(MayoHeart),EurHeartJ2005–CHDBallantyne(ARIC),ArchInternMed2005–StrokeOei(Rotterdam),Circulation2005–StrokeWinkler(LURIC),Circulation2005–CHDKhuseyinova(HELICOR),Atherosclerosis2005–CHDKoenig(KAROLA),ArteriosclerThrombVascBiol2005–CVDMay(IntermountainHeart),AmHeartJ-CHDJenny(CHS),AHA-EPIAbstract2006–MIElkind(NOMAS),ArchInternMed2006–StrokeO’Donoghue(PROVEIT),Circulation2006–CVDCorsetti(THROMBO),ClinicalChemistry2006-CHDGerber(OlmstedCounty),ATVB2006-DeathS/PMIOldgren(GUSTO/FRISC),EurHeartJ2007-AcuteACSSabatine(PEACE),AHA-ScientificSessions2006-CVDPersson(Malmo),ArteriosclerThrombVascBiol2007-CVDMockel(NOBIS-II),ClinResCardiol2007–CVDHatoum(Nurse’sHealthStudy),CircSuppl2007–MIDaniels(RanchoBernardo),JACC2008–CHD0.51.52.52.01.03.03.54.04.5CorsonMAetal,AmJCardSuppl2008:101(41F-50F)共四十八頁Lp-PLA2前瞻性研究(yánjiū)匯總分析

Lancet（柳葉刀）2010

32項(xiàng)前瞻性研究

79,036

名受試者

每年新增474,976

名患者存在(cúnzài)心腦血管風(fēng)險(xiǎn)17,346次血管與非血管事件TheLp-PLA2StudiesCollaboration,Lancet2010;375:1536–44.共四十八頁Lp-PLA2前瞻性研究匯總(huìzǒng)分析

Lancet(柳葉刀）2010

Lp-PLA2

水平與心血管疾病呈顯著線性相關(guān)。相對(duì)基線，Lp-PLA2每提高一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差所導(dǎo)致冠心病風(fēng)險(xiǎn)比的增加值與傳統(tǒng)風(fēng)險(xiǎn)因子血壓和非HDL-C相當(dāng)(xiāngdāng)。

Lp-PLA2是獨(dú)立的心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)指標(biāo)，不受其他生物指標(biāo)的影響，也為炎癥、動(dòng)脈粥樣硬化與心血管疾病之間的聯(lián)系提供了新的佐證。TheLp-PLA2StudiesCollaboration,Lancet2010;375:1536–44.共四十八頁Lp-PLA2vshs-CRPLp-PLA2hs-CRP

血管內(nèi)皮炎癥的標(biāo)記物由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生在血管炎癥過程的早期階段啟動(dòng)不受其他炎癥性疾病影響是一個(gè)可用于冠心病藥物干預(yù)治療的特異靶點(diǎn)全身性炎癥的標(biāo)記物全身炎癥急性期由肝臟產(chǎn)生在心血管疾病中的具體作用不清楚

在所有炎癥性疾病患者中均升高在干預(yù)治療中不是一個(gè)特異靶點(diǎn)共四十八頁Lp-PLA2vsHCYLp-PLA2HCY

血管內(nèi)皮炎癥的標(biāo)記物當(dāng)血管內(nèi)皮受損時(shí)，由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生在血管炎癥過程的早期階段啟動(dòng)，具有促進(jìn)炎癥和動(dòng)脈粥樣硬化的作用血管內(nèi)皮炎癥的特異性指標(biāo)，不受年齡、性別、飲食影響是一個(gè)可用于冠心病藥物干預(yù)治療的特異靶點(diǎn)人體蛋氨酸代謝的中間產(chǎn)物與體內(nèi)一碳單位代謝有著密切關(guān)系在心血管疾病中的具體作用不清楚，會(huì)影響體內(nèi)許多物質(zhì)的甲基化過程，從而影響機(jī)體正常代謝受遺傳、飲食、性別、年齡、腎功能等多種因素影響在干預(yù)治療中不是一個(gè)特異靶點(diǎn)共四十八頁Lp-PLA2生物(shēngwù)變異性低0%10%20%30%40%50%0%10%20%30%40%50%%

withElevatedBiomarker%

Intra-IndividualCVLp-PLA2

>250ng/mLhsCRP

>3mg/LLp-PLA2

CRP

LDLHDLTG4%46%10%7.4%4.7%42.6%22.8%90份未患心臟病健康(jiànkāng)人群的血樣43份健康成人4周7次抽血血樣LermanA,McConnellJP.AmJCardSupplement2008.共四十八頁冠心病患者(huànzhě)LDL-C水平：72%的患者低于130mg/dL<130LDL-C(mg/dL)>130LDL-C(mg/dL)GetWiththeGuidelinesdatabase,levelsatadmissionSachdevaetal.AmHeartJ2009;157:111-7.e2共四十八頁總膽固醇及LDL-C在冠心病預(yù)測(cè)(yùcè)中的局限性

Framingham心臟研究(yánjiū)——26年隨訪數(shù)據(jù)顯示：35%冠心病患者的總膽固醇水平<200mg/dL180%發(fā)生MI患者與未發(fā)生MI患者含有相似的膽固醇水平冠心病患者LDL-C水平的中值為150mg/dL1僅有25%的早發(fā)性冠心病患者的發(fā)病與LDL-C水平升高有關(guān)2

1CastelliW,Atherosclerosis19962GenestJJr,etal.JAmCollCardiol1992共四十八頁膽固醇并非卒中的可靠(kěkào)預(yù)測(cè)指標(biāo)LDL膽固醇ARIC1PROCAM2BIPREGISTRY3P=0.20P=NSP>0.05

未患卒中

卒中患者(huànzhě)P=0.44P=NSP>0.05BallantyneCM,etal.AHA2004BergerK,etal.Stroke1998TanneD,etal.Circ.20014.BowmanTS,etal.Stroke1998OeiHH,etal.Circ.2005WannametheeSG,etal.Stroke2000共四十八頁傳統(tǒng)(chuántǒng)風(fēng)險(xiǎn)因子在冠心病患者中的流行程度0RiskFactors19.4%1RiskFactor43%2RiskFactors27.8%3RiskFactors8.9%%4RiskFactors0.9%N=87,869分析的四個(gè)傳統(tǒng)風(fēng)險(xiǎn)因子:高血壓，吸煙，高血脂癥，糖尿病KhotUM,etal.JAMA2003.62.4%

冠心病患者僅含有0-1個(gè)傳統(tǒng)(chuántǒng)風(fēng)險(xiǎn)因子共四十八頁Mayo研究:利用(lìyòng)Lp-PLA2預(yù)測(cè)心梗后生存期0.03.04.05.06.01.02.05.4*2.21.0≤166

ng/mL167-218

ng/mL≥219

ng/mL*p<0.001aftermultivariateadjustmentforage,

sex,hypertension,BMI,diabetes,smoking,LDL-CGerberY,etal.ArteriosclerThrombVascBiol2006

HazardRatio發(fā)生(fāshēng)MI后，高水平Lp-PLA2患者1年內(nèi)死亡風(fēng)險(xiǎn)是低水平患者的5倍共四十八頁Mayo研究：利用Lp-PLA2

預(yù)測(cè)(yùcè)冠心病患者主要心血管事件發(fā)生率95%

的Lp-PLA2<200ng/ml患者(huànzhě)4年內(nèi)未發(fā)生心血管事件BrilakisESetal.MayoHeartStudy.EuroHeartJ2005共四十八頁北曼哈頓卒中研究(NOMAS)：

利用Lp-PLA2

預(yù)測(cè)(yùcè)卒中復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)0.00.51.01.52.02.5HighLp-PLA2Highhs-CRPRiskRatio(Highestvs.LowestQuartile)0.71.02.1(95%CI1.04-4.18)1.9(95%CI1.01-3.42)復(fù)發(fā)性卒中事件(shìjiàn)

N=80,其他心血管事件N=122Adjustedfordemographics,traditionalriskfactors,strokeseverity,andbothmarkers復(fù)發(fā)性卒中首發(fā)卒中后任何心血管事件ElkindMS,etal.ArchIntMed2006.Lp-PLA2

升高，卒中復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)加倍共四十八頁一級(jí)預(yù)防——對(duì)急性(jíxìng)冠脈綜合征的預(yù)測(cè)評(píng)價(jià)

經(jīng)冠脈造影證實(shí)無冠脈狹窄者(對(duì)照)28例、急性冠脈綜合征(ACS)27例、穩(wěn)定型心絞痛(SAP)28例。檢測(cè)血漿Lp-PLA2

水平(shuǐpíng)。組別 例數(shù) Lp-PLA2(ng/ml)急性冠脈綜合征(ACS) 27 706.00±149.91*

穩(wěn)定型心絞痛(SAP) 2

427.75±44.58*

無冠脈狹窄者(對(duì)照組)

28

267.69±92.67

注:與對(duì)照組比較*P＜0.001陳錦峰,等.廣東醫(yī)學(xué)2011;32(10):1263共四十八頁二級(jí)預(yù)防——對(duì)進(jìn)展(jìnzhǎn)性腦梗死的預(yù)測(cè)評(píng)價(jià)

168

例急性腦梗死(ACI)患者每天進(jìn)行NIH卒中量表(NIHSS)評(píng)分，其中進(jìn)展性腦梗死40例，穩(wěn)定性腦梗死128例。檢測(cè)血漿(xuèjiāng)Lp-PLA2

水平。

組別 例數(shù) Lp-PLA2(μg/L)ACI組 168 12.058±7.104*進(jìn)展性腦梗死組 40 17.304±10.630*Δ穩(wěn)定性腦梗死組 128 10.419±4.576正常對(duì)照組 72 7.268±3.112

注:與正常對(duì)照組比較*P＜0.01;與穩(wěn)定性腦梗死組比較△P＜0.01王磊,等.臨床神經(jīng)病學(xué)雜志2011;24(4):309.共四十八頁病情評(píng)估——對(duì)神經(jīng)功能損傷(sǔnshāng)程度的評(píng)價(jià)

選擇動(dòng)脈硬化性腦梗死(ACI)患者128例和未卒中對(duì)照者88例為研究對(duì)象，檢測(cè)血漿Lp-PLA2的水平。按NIH中風(fēng)(zhòngfēng)量表(NIHSS

評(píng)分)進(jìn)行神經(jīng)功能缺損程度評(píng)估。分析神經(jīng)功能缺損程度與血漿Lp-PLA2水平相關(guān)性。結(jié)果r=0.829，P=0.001。組別 例數(shù) Lp-PLA2(μg/L)輕型梗死組 32 53.45±5.47*中型梗死組

66 65.68±6.07*重型梗死組

30 77.11±5.12

注:與重型梗死組比較*P<0.05

梁江紅,等.實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志2009;25(14):2264.共四十八頁

療效評(píng)價(jià)(píngjià)不同劑量阿托伐他汀治療急性腦梗死

選擇急性腦梗死患者86例，隨機(jī)分為2組：阿托伐他汀常規(guī)劑量組43例：20mg/天，大劑量組43例：40mg/天，分別于治療前及治療14天后測(cè)量(cèliáng)患者血漿Lp-PLA2

水平。另選擇43例健康體檢者為對(duì)照組，不予阿托伐他汀治療。阿托伐他汀治療前后血漿Lp-PLA2(μg/L)變化的比較常規(guī)治療組 大劑量組對(duì)照組急性腦梗死組治療前治療后治療前治療

30.52±2.9143.95±5.70#44.22±6.2537.63±4.53*43.69±5.1635.63±4.16*

注:治療前和治療后比較*P<0.05；與對(duì)照組比較#P<0.05陳軍,等.臨床醫(yī)學(xué)工程2011;18(7):982共四十八頁康爾克Lp-PLA2定量檢測(cè)(jiǎncè)試劑盒特點(diǎn)

準(zhǔn)確、可靠、重復(fù)性好靈敏度高簡(jiǎn)易、快捷，靜脈取血2-5ml送檢，1.5小時(shí)出結(jié)果

無需空腹，任何時(shí)間均可取血性能達(dá)到美國同類產(chǎn)品水平性價(jià)比高：美國同類產(chǎn)品臨床檢測(cè)收費(fèi)(shōufèi)250美元左右，約合

人民幣1500元，本產(chǎn)品僅為

350元人民幣，醫(yī)保、新農(nóng)合、公費(fèi)醫(yī)療均能報(bào)銷。共四十八頁臨床檢測(cè)(jiǎncè)人群

傳統(tǒng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)級(jí)已經(jīng)確定為中危的人群患者——增強(qiáng)危險(xiǎn)級(jí)別

接受他汀類抗炎治療(zhìliáo)的患者——評(píng)估—調(diào)整—效果

高血壓患者

——評(píng)估—調(diào)整—效果

發(fā)生過中風(fēng)、ACS、AMI等急性不良事件的患者——預(yù)測(cè)二次事件-強(qiáng)化治療方案共四十八頁臨床實(shí)踐舉例(jǔlì)評(píng)估通過傳統(tǒng)危險(xiǎn)(wēixiǎn)因素檢測(cè)的患者>175ng/ml≤175ng/ml≤175ng/ml>175ng/ml<4.0mmol/L<3.3mmol/L<2.5mmol/L<1.8mmol/L測(cè)試測(cè)量中高?；颊叩腖p-PLA2

水平治療達(dá)到合適LDL-C水平共四十八頁名

稱規(guī)格主要組成成份96人份48人份24人份1．Lp-PLA2酶聯(lián)反應(yīng)板1塊（96孔）1塊（48孔）1塊（24孔）Lp-PLA2包被抗體2．標(biāo)準(zhǔn)品11瓶，70ul，濃度：1000ng/ml1瓶，50ul，濃度：1000ng/ml1瓶，50ul，濃度：1000ng/mlLp-PLA2抗原，牛血清白蛋白,磷酸緩沖液3．標(biāo)準(zhǔn)品21瓶，70ul,濃度：500ng/ml1瓶，50ul,濃度：500ng/ml1瓶，50ul,濃度：500ng/mlLp-PLA2抗原，牛血清白蛋白,磷酸緩沖液4．標(biāo)準(zhǔn)品31瓶，70ul,濃度：250ng/ml1瓶，50ul，濃度：250ng/ml1瓶，50ul，濃度：250ng/mlLp-PLA2抗原，牛血清白蛋白,磷酸緩沖液5．標(biāo)準(zhǔn)品41瓶，70ul,濃度：100ng/ml1瓶，50ul,濃度：100ng/ml1瓶，50ul,濃度：100ng/mlLp-PLA2抗原，牛血清白蛋白,磷酸緩沖液6．標(biāo)準(zhǔn)品51瓶，70ul,濃度：50ng/ml1瓶，50ul，濃度：50ng/ml1瓶，50ul，濃度：50ng/mlLp-PLA2抗原，牛血清白蛋白,磷酸緩沖液7．標(biāo)準(zhǔn)品（空白）1瓶，70ul,濃度：0ng/ml1瓶，50ul,濃度：0ng/ml1瓶，50ul,濃度：0ng/ml牛血清白蛋白,磷酸緩沖液8．稀釋液（10倍）1瓶,1.5ml

1瓶,1.0ml

1瓶,0.5ml牛血清白蛋白,磷酸緩沖液9．酶標(biāo)記物1瓶，15ml

1瓶，7.5ml

1瓶，4ml辣根過氧化酶標(biāo)記抗體，牛血清白蛋白,磷酸緩沖液10．洗滌液（20倍）1瓶，30ml

1瓶，15ml1瓶，8ml

磷酸緩沖液，吐溫11．顯色液1瓶，10ml

1瓶，5ml

1瓶，2.5ml四甲基聯(lián)苯胺12．終止液1瓶,6ml

1瓶，3ml

1瓶，2ml硫酸13．說明書一份一份一份

產(chǎn)品(chǎnpǐn)組成及安全性

本試劑盒中采用的試劑都不具有(jùyǒu)毒性、致畸致突變性，也不含有人血液制品，因此不具有(jùyǒu)生物學(xué)危害，但仍需作為一般生物試劑加以防護(hù)。共四十八頁檢驗(yàn)(jiǎnyàn)原理——ELISA共四十八頁樣品(yàngpǐn)處理樣品收集、處理和保存：血漿：用EDTA抗凝管取血2ml，1500r/min離心10分鐘，收集上清液。血清：用普通(pǔtōng)管或促凝管取血2ml，4℃下放置30分鐘后，1500r/min離心10分鐘，收集上清液。保存:血漿（清）如不即時(shí)檢測(cè)，則須于-20℃保存，并避免反復(fù)凍融。共四十八頁操作方法1）

從冰箱中取出試劑盒，室溫(shìwēn)平衡20min，將標(biāo)準(zhǔn)品離心，1000r/min，1min2）分別加入80ul稀釋液（1倍)和20ul待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品于反應(yīng)孔內(nèi),混勻,37℃溫育20min3）棄去孔內(nèi)液體，每孔加300ul洗液(1倍），振蕩20-30sec后棄去洗液，重復(fù)4次，拍干殘液4）加入100ul酶標(biāo)記物，混勻，37℃溫育30min

5）重復(fù)步驟3）

6）每孔加入顯色液100ul，混勻，37℃溫育20min，避光7）加入50ul終止液8）立即用酶標(biāo)儀在450nm條件下測(cè)定各孔OD值9）以O(shè)D值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)Lp-PLA2標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），制作標(biāo)準(zhǔn)曲線10）根據(jù)樣品的OD值計(jì)算得出樣品的Lp-PLA2含量共四十八頁檢驗(yàn)結(jié)果(jiēguǒ)的解釋對(duì)臨床的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析之后，175ng/ml以下正常,

175ng/ml以上為危險(xiǎn)。如樣本的Lp-PLA2的含量低于臨界值，則視為正常；如高于臨界值則提示(tíshì)為其動(dòng)脈可能有粥樣硬化炎癥，且炎癥與Lp-PLA2的含量成正比。共四十八頁產(chǎn)品(chǎnpǐn)性能指標(biāo)

劑量-反應(yīng)曲線(qūxiàn)的線性

用logistic數(shù)學(xué)模型或其他數(shù)學(xué)模型擬合，劑量-反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)（r）應(yīng)不低于0.9900。r2=0.99998r2=0.97917共四十八頁