陰道分泌物檢驗（臨床檢驗技術(shù)課件）

一般性狀檢驗陰道分泌物（vaginaldischarge）是女性生殖系統(tǒng)分泌的液體，主要由陰道黏膜、宮頸腺體、前庭大腺及子宮內(nèi)膜的分泌物混合而成，俗稱“白帶”。陰道分泌物檢查主要用于女性生殖系統(tǒng)炎癥、腫瘤的診斷及性傳播疾病檢查和雌激素水平的判斷。概述01標(biāo)本采集與運(yùn)送陰道分泌物由婦產(chǎn)科醫(yī)務(wù)人員采集，根據(jù)不同檢查目的可自不同部位取材。一般采用消毒刮板、吸管、棉拭子自陰道深部或陰道穹隆后部、子宮頸管口等處采集分泌物，（插生殖道圖）浸入盛有生理鹽水1～2ml的試管內(nèi)，立即送檢?；虿杉笸恐瞥杀∑?，以95%乙醇固定，根據(jù)檢查目的采用吉姆薩、革蘭或巴氏染色，進(jìn)行病原微生物或腫瘤細(xì)胞篩檢。01標(biāo)本采集與運(yùn)送標(biāo)本采集時要注意的事項：①月經(jīng)期不宜進(jìn)行檢查②標(biāo)本采集前，停用干擾檢查的藥物。③檢查前24小時內(nèi)禁止盆浴、性交、局部用藥及陰道灌洗等。④標(biāo)本采集容器和器材要清潔干燥，不含任何化學(xué)物質(zhì)和潤滑劑⑤標(biāo)本采集后要防止污染。⑥采集用于微生物學(xué)檢查標(biāo)本，應(yīng)無菌操作。02一般性狀檢查1、外觀正常陰道分泌物，為白色稀糊狀、無氣味、量多少不等。其性狀與雌激素水平及生殖器充血情況有關(guān)。臨近排卵期，（雌激素水平高）白帶量多，清澈透明，稀薄似蛋清；排卵期2～3天后，白帶渾濁黏稠、量少；行經(jīng)前，量又增加；妊娠期，白帶量較多。絕經(jīng)期后，因激素減少，生殖器官腺體萎縮，白帶量少。02一般性狀檢查2、標(biāo)本接收與拒收在接收被檢標(biāo)本時，應(yīng)先觀察標(biāo)本是否滿足檢驗要求。如標(biāo)本送檢不及時或未取到適合檢查的標(biāo)本等，拒絕接收被檢標(biāo)本，所有拒收或退回標(biāo)本均應(yīng)在登記本上登記，登記內(nèi)容包括：病人姓名、病區(qū)、床號、送檢醫(yī)師、送檢項目、拒收（退回）原因、拒收時間、經(jīng)手人等，并及時通知送檢科室重新取樣。02一般性狀檢查3、檢驗后標(biāo)本處理陰道分泌物標(biāo)本不做保存。將涂有標(biāo)本的載玻片或盛有標(biāo)本的試管投入10g/L漂白粉溶液中浸泡2小時后，廢液倒入水道排入廢水處理系統(tǒng)，玻片、試管需要洗滌、高壓消毒后才能重新使用，也可直接打包交給垃圾收集人員處理；一次性使用材料按生物安全規(guī)定分類回收處理。均做好交接登記。03臨床上常見的陰道分泌物性狀改變及意義7、抗凝劑03臨床上常見的陰道分泌物性狀改變及意義正常陰道分泌物呈酸性，pH4.0～4.5，pH升高見于各種陰道炎患者以及絕經(jīng)后的婦女。2、酸堿度顯微鏡檢驗01顯微鏡檢查辦法1、檢查方法濕片檢查：用生理鹽水直接涂片高倍鏡下觀察。涂片染色檢查：瑞氏或革蘭染色后，用油鏡觀察蟲體標(biāo)本。其他檢查方法：常見的有膠乳凝集試驗和培養(yǎng)法等。01顯微鏡檢查辦法2、質(zhì)量保證標(biāo)本：環(huán)境氣溫較低時，標(biāo)本采集后應(yīng)注意保溫（37℃），并立即送檢。涂片：涂片時應(yīng)充分混勻。顯微鏡檢查：環(huán)境溫度較低時，檢查時應(yīng)注意保溫，如因溫度或時間原因，標(biāo)本滴蟲已死，最好采用涂片染色檢查。3、參考區(qū)間

陰性。4、臨床意義

陽性見于滴蟲性陰道炎。02真菌真菌多為呈卵圓形、革蘭陽性孢子或與出芽細(xì)胞相連接的假菌絲，呈鏈狀及分枝狀。85%陰道真菌為白假絲酵母菌。當(dāng)陰道抵抗力減低或局部環(huán)境改變時，易引起真菌性陰道炎，并可通過性交傳染。診斷真菌性陰道炎以找到真菌為依據(jù)。02真菌濕片檢查：生理鹽水涂片→低、高倍鏡觀察。其中低倍鏡主要觀察白色假絲酵母菌的假菌絲，高倍鏡確認(rèn)假菌絲和觀察有無白色假絲酵母菌的孢子。高倍鏡下白色假絲酵母菌的孢子呈單個或成群，呈卵圓形、無色透明，常為芽生或多個連成鏈狀、分支狀。革蘭染色法：涂片、革蘭染色、油鏡檢查，可見到革蘭陽性孢子或與出芽細(xì)胞相連接的假菌絲，呈鏈狀及分支狀。1、檢查方法02真菌標(biāo)本處理：上皮細(xì)胞太多，干擾假菌絲和孢子的觀察，可加1滴2.5mol/LKOH溶液，混勻，破壞上皮細(xì)胞，再進(jìn)行檢查。顯微鏡檢查：濕片法檢查時必須先用低倍鏡多視野仔細(xì)查找真菌的菌絲，以防漏檢；真菌菌絲和孢子折光性較強(qiáng)，檢查時，光線應(yīng)偏暗，并不停來回調(diào)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋。發(fā)現(xiàn)假菌絲應(yīng)注意查找孢子。2、質(zhì)量保證02真菌陰道真菌多為白色念珠菌，當(dāng)機(jī)體抵抗力降低時可引起真菌性陰道炎。菌絲的致病性強(qiáng)于孢子，報告找到菌絲，對臨床診斷價值更大。同時，在臨床診斷中應(yīng)注意真菌帶菌者與感染者的區(qū)分，當(dāng)陰道分泌物中僅見少量真菌孢子，且清潔度正常，常為帶菌者。當(dāng)發(fā)現(xiàn)多量的孢子和菌絲，伴清潔度異常，即可診斷為真菌性陰道炎。3、參考區(qū)間

陰性4、臨床意義

03加德納菌與線索細(xì)胞陰道加德納菌（gardnerellavaginalis，GV）為革蘭染色陰性或染色不定（有時呈革蘭染色陽性）的小桿菌，正常情況下陰道內(nèi)不見或少見。陰道加德納菌可與各種厭氧菌、支原體等引起混合感染，共同引起細(xì)菌性陰道炎。線索細(xì)胞（cluecell）為陰道鱗狀上皮細(xì)胞黏附大量加德納菌及其他短小桿菌后形成。其主要特征是：生理鹽涂片高倍鏡下可見該細(xì)胞邊緣呈鋸齒狀，細(xì)胞已有溶解，核模糊不清，其上覆蓋有大量加德納菌及厭氧菌，使其表面毛糙，出現(xiàn)斑點和大量細(xì)小顆粒。涂片革蘭染色后，顯微鏡下顯示黏附于上皮細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌為革蘭陰性或染色不定的球桿菌。03加德納菌與線索細(xì)胞加德納菌檢查：陰道分泌物涂片→革蘭染色→油鏡觀察→見革蘭染色陰性或染色不定（有時呈革蘭染色陽性）的小桿菌，正常情況下陰道內(nèi)不見或少見。線索細(xì)胞檢查：取無菌生理鹽水中的子宮頸或陰道分泌物→直接涂片→見細(xì)胞邊緣呈鋸齒狀，細(xì)胞已有溶解，核模糊不清，其上覆蓋有大量加德納菌及厭氧菌，使其表面毛糙，出現(xiàn)斑點和大量細(xì)小顆粒涂片后革蘭染色→顯微鏡下顯示黏附于上皮細(xì)胞內(nèi)的細(xì)菌為革蘭陰性或染色不定的球桿菌，找到線索細(xì)胞。1、檢查方法03加德納菌與線索細(xì)胞2、參考區(qū)間3、臨床意義

加德納菌：正常陰道內(nèi)不見或少許。線索細(xì)胞：陰性。加德納菌可以引起細(xì)菌性陰道炎、早產(chǎn)、產(chǎn)后敗血癥等；在陰道分泌物中發(fā)現(xiàn)線索細(xì)胞是診斷加德納菌性陰道炎的重要指標(biāo)。04陰道分泌物的其他檢查淋病奈瑟菌、支原體、衣原體等具體方法及內(nèi)容見《微生物學(xué)檢驗》陰道分泌物的檢查顯微鏡檢查內(nèi)容包括清潔度的判斷、陰道毛滴蟲、真菌、線索細(xì)胞等形態(tài)的識別。概述01清潔度檢查陰道清潔度是指陰道清潔的等級程度。陰道清潔度是以陰道分泌物中乳酸桿菌、上皮細(xì)胞、白細(xì)胞和雜菌的多少來判斷，是陰道炎癥和生育期婦女卵巢功能的判斷指標(biāo)。檢查方法有濕片法和染色法，臨床中常用濕片法。01清潔度檢查1、檢查方法濕片檢查：載玻片→加生理鹽水→涂片→加蓋玻片→低、高倍鏡觀察。根據(jù)顯微鏡下所見的上皮細(xì)胞、白細(xì)胞（或膿細(xì)胞）、乳酸桿菌與雜菌的數(shù)量尤其是上皮細(xì)胞和白細(xì)胞的數(shù)量，判斷陰道分泌物清潔度，劃分為Ⅰ～Ⅳ度。01清潔度檢查1、檢查方法2.涂片染色檢查：涂片→吉姆薩或革蘭染色→油鏡檢查01清潔度檢查2、質(zhì)量保證涂片：前應(yīng)混勻標(biāo)本，涂片時均勻平鋪，不能聚集成滴狀。顯微鏡檢查：①高倍鏡下觀察雜菌難度較大，沒有經(jīng)驗檢驗人員可采用涂片后，

經(jīng)革蘭染色后再通過油鏡檢查。②觀察細(xì)菌時光線要偏暗，并來回調(diào)細(xì)螺旋；檢查時應(yīng)多觀察足夠多的視野，尤其對有形成分較少或標(biāo)本量較少的標(biāo)本，應(yīng)擴(kuò)大觀察視野。結(jié)果報告：結(jié)果判斷和報告標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)統(tǒng)一。結(jié)果審核：對可疑或與臨床診斷不符的標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行復(fù)查。01清潔度檢查3、參考區(qū)間

Ⅰ～Ⅱ度4、臨床意義陰道清潔度與女性激素的周期變化有關(guān)：排卵前期雌激素逐漸增高，陰道上皮增生，糖原增多，乳酸桿菌隨之繁殖，pH下降，雜菌消失，陰道趨于清潔。當(dāng)卵巢功能不足（如經(jīng)前及絕經(jīng)后）時，則出現(xiàn)與排卵前期相反的結(jié)果，易感染雜菌，導(dǎo)致陰道不清潔。非特異性陰道炎：單純陰道清潔度差而未發(fā)現(xiàn)病原體為非特異性陰道炎。陰道炎：陰道清潔度為Ⅲ、Ⅳ度時，常同時發(fā)現(xiàn)病原體，見于各種病原體所致的陰道炎。常見的病原菌02陰道毛滴蟲陰道毛滴蟲是一種可