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DB41河南省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布I1太行菊組織培養(yǎng)技術(shù)規(guī)程有機(jī)母液按100倍配制。使用時(shí)再稀釋100倍,配好的母液放置于棕色瓶保分別溶解FeSO4·7H2O和Na2-EDTA,加熱并不斷攪拌,使完全溶解,冷卻后,將2種溶液混合,再用蒸溜水加至所需容積,按100倍配制。使用時(shí)再稀釋100倍,配好的母液放置于棕色瓶保存于4℃冰箱2),f)稍微冷卻后,用精密試紙或酸度計(jì)調(diào)整pH至5.7~5.8,分裝;4組織培養(yǎng)4.1培養(yǎng)材料及消毒4.1.1培養(yǎng)材料的選擇和確定4.1.2消毒滅菌將種子用自來(lái)水沖洗2h后,在超凈工作臺(tái)內(nèi)用75%酒精漂洗15s,后用2%的次氯酸鈉浸泡8min(加2),用無(wú)菌濾紙把種子表面附著的水分吸干凈,然后在在超凈工作臺(tái)內(nèi)用鑷子將種子接種到1/2MS培養(yǎng)基上,置入溫度為20℃~25℃光照培養(yǎng)室內(nèi)誘導(dǎo)種子萌發(fā),待種子發(fā)芽長(zhǎng)出2片真葉,進(jìn)行光照處理,光照強(qiáng)度2500lx,光照時(shí)間14h/d,培養(yǎng)30d4.3誘導(dǎo)及分化34.4增殖繼代培養(yǎng)4.5培養(yǎng)環(huán)境4.6生根培養(yǎng)4.6.1生根苗的選擇從組培苗中切取生長(zhǎng)健壯、葉色正常、葉片舒4.6.2誘導(dǎo)生根在超凈工作臺(tái)內(nèi),將無(wú)根苗上長(zhǎng)至4cm以上的再生芽從基部切下,接種到生根培養(yǎng)基上,誘導(dǎo)根原基的形成,黑暗培養(yǎng)3d~5d。后將其接種到無(wú)激素MS培養(yǎng)基誘導(dǎo)根的伸長(zhǎng),光照培養(yǎng)205.1煉苗3d,再打開(kāi)瓶蓋,加入3mL800倍多菌后逐漸降低濕度,每天葉面噴水2~3次,當(dāng)試管苗根4MS培養(yǎng)基成分見(jiàn)表A.1。硝酸鉀(KNO3)硝酸銨(NH4NO3)磷酸二氫鉀(KH2PO4)硼酸(H3BO3)乙二胺四乙酸二鈉(Na2-EDTA)2鹽酸硫胺素(VB1)鹽酸吡哆醇(V
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