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DB52DB52/T955—2014辣椒品種抗青枯病溫室接種鑒定技術(shù)規(guī)程Ruleforidentificationofpepperforresistancetopepperbacterialwilt2014-10-30發(fā)布2014-11-30實施貴州省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局貴州省農(nóng)業(yè)委員會I 1 1 1 2 2 5 612工作臺、恒溫生物培養(yǎng)箱、恒溫搖床、孔徑規(guī)格為25mm×25mm×50mm的塑料泡沫漂浮育苗盤、外科用清水洗凈,置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中催芽,待種子發(fā)芽后播于裝有育苗基質(zhì)的育苗盤內(nèi)。育苗盤為塑合,各成分所占比例分別為60%~70%、15%~20%和15%~20%(體積比),基質(zhì)經(jīng)高溫蒸汽滅菌營養(yǎng)液配方為:每100kg清水加入50g硝酸銨、50g硫酸銨、15g尿素、100g普通過磷酸鈣、50g硫3酸鉀;配制營養(yǎng)液使用的清水應(yīng)符合GB5084的蔬菜類灌溉水質(zhì)要求。在18℃~25℃的自然條件下育在接種前需要進行病原物接種體的繁殖。繁殖方法:將保存的菌種搖勻,挑取一環(huán)菌液在TZC培養(yǎng)基平板上劃線,在30℃下培養(yǎng)36h~48h后,選取較大、白邊較寬、中央粉紅色、似有流動感的致病力較強的菌落,移至青枯菌液體培養(yǎng)基(葡萄糖5g,蛋白胨10g,水解酪蛋白1g,蒸餾水1000ml,水量,培養(yǎng)室內(nèi)溫度白天為26℃~30℃,夜間為18℃~22接種后將漂浮盤放入培養(yǎng)室的營養(yǎng)液內(nèi),培養(yǎng)室溫度白天為28℃~32℃,夜間為20℃~24℃,每天光照12h~14h,強度為12000Lux~17000Lux4):56___
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