血栓與止血檢驗(yàn)課件

15血栓與止血試驗(yàn)

血栓與止血檢驗(yàn)15血栓與止血試驗(yàn)第一節(jié)血栓與止血的篩選檢驗(yàn)一、一期止血缺陷的篩選檢驗(yàn)二、二期止血缺陷的篩選檢驗(yàn)三、纖溶活性增強(qiáng)的的篩選檢驗(yàn)四、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)15血栓與止血試驗(yàn)

出血時間測定

血小板計數(shù)

束臂試驗(yàn)（毛細(xì)血管脆性實(shí)驗(yàn)）血塊收縮試驗(yàn)毛細(xì)血管抵抗力試驗(yàn)

第一節(jié)一期止血篩查試驗(yàn)15血栓與止血試驗(yàn)出血時間測定(bleedingtime，BT)

一、原理：

測定在皮膚受特定條件外傷后，出血自然停止所需的時間即為出血時間。此過程反映了毛細(xì)血管與血小板的相互作用，包括內(nèi)皮下組織與血小板粘附（通過vWF的作用）、血小板的聚集和釋放等反應(yīng)，以及PGI2與TXA2的動態(tài)平衡。15血栓與止血試驗(yàn)二、方法

Duke法、Ivy法、出血時間測定器法（TBT法）

（衛(wèi)生部推薦方法）三、試劑與器材：

1、血壓計，秒表，干凈濾紙

2、出血時間測定器

15血栓與止血試驗(yàn)四、操作：

1、血壓計袖帶縛于測定上肢的上臂，加壓并維持在40mmHg,兒童減半。2、在肘前窩下5cm處的尺側(cè)做局部消毒后，將測定器垂

直貼于皮膚表面，按下按鈕，同時啟動秒表，移開測

定器。

3、每隔30s,用干凈濾紙吸去流出的血液，直至流血自然停止，并記錄秒表讀數(shù)。

15血栓與止血試驗(yàn)五、參考值：

2.3-9.5min六、臨床意義：

延長：

1、

血小板數(shù)量異常，如ITP、TTP

2、血小板功能異常，如plt無力癥、巨大plt綜合征、

儲存池病

3、

血管壁異常血管性血友病、遺傳性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥

4、某些嚴(yán)重的凝血因子缺乏

縮短：高凝狀態(tài)和血栓性疾病15血栓與止血試驗(yàn)七、質(zhì)量控制

1、注意影響B(tài)T測定的因素

2、濾紙吸去血液時，避免與傷口接觸

3、注意藥物的影響（抗凝劑、Apc）15血栓與止血試驗(yàn)

血小板檢驗(yàn)一、血小板計數(shù)二、血小板生存時間檢測三、血小板相關(guān)抗體檢測四、血小板粘附試驗(yàn)五、血小板聚集試驗(yàn)六、血小板第3因子有效性檢測七、血小板膜糖蛋白檢測八、血小板活化指標(biāo)檢測（血漿β-TG、PF4、血

小板P選擇素檢測）15血栓與止血試驗(yàn)

血小板計數(shù)（plateletcount,PC或plt）

正常值：（100～300）×109/L危險PC＜20×109/L可引起自發(fā)性出血15血栓與止血試驗(yàn)

血小板粘附試驗(yàn)

(plateletadhensiontest,PAdT)原理：

受檢者血液一定速度通過一定量玻璃珠的塑料管，測定通過玻璃珠前后血液中血小板數(shù)的差值，即為粘附于玻珠和塑料管的血小板數(shù)，由此可計算出其占血小板總數(shù)的百分比，即為血小板粘附率。方法：玻球法、玻璃濾器法、玻珠法15血栓與止血試驗(yàn)臨床意義：

血管性血友病、巨大血小板綜合癥、血小板無力癥、肝硬化、MDS、急性白血病、服用抗血小板藥物等

血栓前狀態(tài)和血栓性疾病、妊高癥、口服避孕藥等粘附率減低粘附率增高15血栓與止血試驗(yàn)誘聚劑PPPPRP血小板聚集試驗(yàn)

plateletaggregationtset，PAgT比濁法：以PPP設(shè)最低濁度，PRP設(shè)最高濁度，在血漿中加入誘聚劑，測定血漿濁度的變化，繪制血小板聚集曲線。15血栓與止血試驗(yàn)15血栓與止血試驗(yàn)臨床意義：

血小板無力癥、血管性血友病、巨大血小板綜合癥、血小板貯存池病、低（無）纖維蛋白原血癥、肝硬化、使用血小板抑制劑等。

高凝狀態(tài)、血栓形成性疾病、動脈粥樣硬化、糖尿病、口服避孕藥、人工瓣膜移植術(shù)后、吸煙等。聚集率減低聚集率增高15血栓與止血試驗(yàn)質(zhì)量控制：

1.采血要順利，避免組織液混入，抗凝劑使用合理（不用EDTA抗凝）

2.采集后3h內(nèi)室溫下完成

3.試驗(yàn)前十天停用一切抑制血小板聚集的藥物；試驗(yàn)前禁食高脂類食物

4.注意PRP：1000r/min離心10min

PLT(100～300)×109/LPPP：3000r/min離心20min

PLT＜20×109/L15血栓與止血試驗(yàn)

全血凝固時間測定（CT）

活化部分凝血活酶時間測定（APTT）

血漿凝血酶原時間測定（PT）

第二節(jié)二期止血缺陷篩查檢驗(yàn)15血栓與止血試驗(yàn)全血凝固時間測定(coagulationtime,CT)

[原理]

觀察血液自離體后，到玻璃試管中凝固所需時間血液從血管中抽出與帶負(fù)電荷表面接觸內(nèi)源性凝血途徑啟動纖維蛋白形成（血液凝固）XIIXIIa15血栓與止血試驗(yàn)臨床意義

1.因子VIII、IX、XI活性減低；嚴(yán)重的因子Ⅴ、Ⅹ和纖維蛋白原缺乏

2.原發(fā)性纖溶亢進(jìn)；血循環(huán)中存在抗凝物質(zhì)

高凝狀態(tài)和血栓性疾病CT延長CT縮短肝素治療用量檢測指標(biāo)15血栓與止血試驗(yàn)活化部分凝血活酶時間測定

(activatedpartialthromboplastintime，APTT)一、原理15血栓與止血試驗(yàn)APTT

Ca2+腦磷脂白陶土

Ca2+腦磷脂部分凝血活酶15血栓與止血試驗(yàn)

二、操作

（一）APTT手工法(試管法）

血漿0.1ml＋APTT試劑各0.1ml+CaCl20.1ml

（混勻計時）

結(jié)果觀察：緩慢傾斜試管，觀察液體流動狀態(tài)，流動

停止停止計時

參考值25～45s(二）儀器法

37℃水浴5min37℃溫浴15血栓與止血試驗(yàn)

APTT延長縮短因子VIII、IX、XI活性減低高凝狀態(tài)三、臨床意義

肝素抗凝監(jiān)測15血栓與止血試驗(yàn)APTT糾正試驗(yàn)

于患者血漿中分別加入1/4的正常新鮮血漿、硫酸鋇吸附血漿、正常血清，再作APTT試驗(yàn)。

硫酸鋇吸附血漿VIII、XI、XII（不含IX）

正常血清IX、XI、XII（不含VIII）

新鮮血漿VIII、IX、XI、XII15血栓與止血試驗(yàn)血友病甲血友病乙FⅪ缺乏正常血漿硫酸鋇吸附血漿

（缺Ⅸ）正常血清(缺Ⅷ)APTT糾正試驗(yàn)----血友病糾正不糾正糾正糾正糾正糾正不糾正患者血漿糾正糾正15血栓與止血試驗(yàn)?zāi)冈瓡r間測定Prothrombintime，PT一、原理

Ca2+腦磷脂PT組織因子Ca2+

腦磷脂15血栓與止血試驗(yàn)二、報告方式

1.直接報告患者及正常對照的PT秒數(shù)

2.報告凝血酶原時間比值（PTR）

PTR=受檢者PT（秒）/正常對照PT（秒）

3.報告國際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）

INR=PTRISI15血栓與止血試驗(yàn)

組織凝血活酶的國際敏感指數(shù)（internationsensetivityindex,ISI）是用組織凝血活酶試劑與ISI已知的國際參比品或經(jīng)其標(biāo)定過的參比品之間敏感度相比較的一個參數(shù)。

測定方法：

用多份凝血因子水平不同的血漿（包括正常人和口服抗凝劑患者的血漿），用參比品測得它們的PT的對數(shù)（lgPT），再用待標(biāo)定的組織凝血活酶測得它們的lgPT，以前者為縱坐標(biāo)，后者為橫坐標(biāo)作圖，經(jīng)回歸求得直線斜率。

待標(biāo)定的組織凝血活酶的ISI=已知的ISI×斜率15血栓與止血試驗(yàn)

PT延長縮短因子VII、

II、V、X、Fg活性減低高凝狀態(tài)三、臨床意義

口服雙香豆素類抗凝藥物監(jiān)測15血栓與止血試驗(yàn)要保證止凝血檢驗(yàn)的質(zhì)量

必須做好以下十點(diǎn)：1.采血須順利，盡量用大號針頭，動作要輕柔；2.標(biāo)本用加蓋有刻度標(biāo)記的塑料試管或硅化管收

集；3.抗凝劑用109mmol/L的枸櫞酸鈉，抗凝劑與

血液的比例為1:9。15血栓與止血試驗(yàn)當(dāng)Hct增高>55%或<25%時，務(wù)必對抗凝劑用量或濃度進(jìn)行調(diào)整：抗凝劑用量(ml)=0.185×全血量(ml)×[1-Hct(%)]紅細(xì)胞壓積（%）枸櫞酸鈉溶液（%）＜105.6310-255.3225-553.1355-602.6960-702.19＞701.5715血栓與止血試驗(yàn)4.標(biāo)本采集至檢驗(yàn)時間PT＜4小時，APTT＜2

小時，一些因子活性檢測要求即刻試驗(yàn)；5.使用儀器推薦或配套的試劑，使用時嚴(yán)格按照說

明書，注意有效期和穩(wěn)定性；6.反應(yīng)溫度控制在（37±1）℃；7.手工操作必須做正常對照，復(fù)管檢測；8.正確使用正常對照血漿及參比血漿；9.每天堅(jiān)持室內(nèi)質(zhì)控，積極參加室間質(zhì)評；10.建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。15血栓與止血試驗(yàn)血清纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物檢測血漿D-二聚體檢測血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗(yàn)第三節(jié)纖溶活性篩查檢驗(yàn)15血栓與止血試驗(yàn)血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物測定

（fibrin/fibrinogenproduct，F(xiàn)DP）

一、原理：

膠乳凝集法：在受檢血漿中加入特異性抗纖維蛋白（原）D、E片段抗體標(biāo)記的膠乳顆粒懸液，如果血漿中含有纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDP），特別是D、E片段，即可發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，導(dǎo)致膠乳顆粒凝集。15血栓與止血試驗(yàn)二、參考值：血清﹤10mg/L，血漿﹤5mg/L三、臨床意義：

1.血清FDP輕度增高10-40mg/L，見于深靜脈血栓、急性心梗、嚴(yán)重肺炎、大手術(shù)后、惡性腫瘤、休克等。

2.血清FDP明顯增高>40mg/L，見于原發(fā)性纖溶癥、DIC、M3、應(yīng)用鏈激酶等溶栓治療時。15血栓與止血試驗(yàn)血漿D-二聚體測定

一、原理：

1.膠乳凝集法

2.ELISA法二、參考值：﹥0.5mg/L有臨床意義三、臨床意義：

1.DIC時呈陽性或明顯增高，另見深靜脈血栓、心梗、肺栓塞、重癥肝炎等

2.可作為原發(fā)纖溶和繼發(fā)纖溶鑒別的重要依據(jù)。15血栓與止血試驗(yàn)15血栓與止血試驗(yàn)

血漿硫酸魚精蛋白副凝試驗(yàn)（plasmaprotamineparacoagulationtest,3P）

結(jié)果判斷陰性也是鑒別繼發(fā)性纖溶與原發(fā)性纖溶的試驗(yàn)15血栓與止血試驗(yàn)血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗(yàn)

plasmaprotaminparcoagulationtest，3P15血栓與止血試驗(yàn)四、臨床意義

1.陰性正?；駾IC晚期，原發(fā)纖溶

2.陽性含細(xì)顆粒沉淀，粗顆粒沉淀、纖維蛋白絲網(wǎng)或膠凍樣物質(zhì)，見于DIC早期，中期，靜脈血栓、嚴(yán)重創(chuàng)傷，大手術(shù)，及久置冰箱的標(biāo)本

15血栓與止血試驗(yàn)

生理性抗凝蛋白檢驗(yàn)：一、抗凝血酶檢測

1、血漿抗凝