食品中蠟樣芽孢桿菌的檢驗(yàn)課件

第八章食品中其它致病菌的檢驗(yàn)第二節(jié)食品中蠟樣芽孢桿菌的檢驗(yàn)一、生物學(xué)特性〔一〕、形狀與染色革蘭氏陽(yáng)性大桿菌，芽胞不突出菌體，菌體兩端較平整，多數(shù)呈鏈狀陳列，周身鞭毛，有動(dòng)力。用孔雀綠染色的蠟樣芽孢桿菌芽孢熒光染色的銅綠假單胞桿菌和蠟樣芽孢桿菌一、生物學(xué)特性〔二〕、培育特性1、需氧，最適生長(zhǎng)30—32℃.2、在肉湯中混濁生長(zhǎng)，有菌膜或壁環(huán)，振搖易乳化。3、在普通瓊脂平板上，菌落灰白色,不透明，邊緣不整齊，外表粗糙，呈毛玻璃狀或白蠟狀。4、在血平板上，菌落呈淺灰色，不透明，似白色毛玻璃狀，有溶血環(huán)。5、在甘露醇卵黃多粘菌素平板上，菌落呈粉紅色〔表示不發(fā)酵甘露醇〕,周圍有粉紅色的暈〔表示產(chǎn)生卵磷脂酶〕一、生物學(xué)特性〔三〕、生化反響1、能分解GLU，麥芽糖，蔗糖，水楊苷，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。2、不分解乳糖，甘露醇，阿拉伯糖，山梨醇，木糖3、H2S〔-〕，尿素酶實(shí)驗(yàn)〔-〕卵磷脂酶〔+〕，V—P實(shí)驗(yàn)〔+〕，液化明膠，胨化中乳?！踩?、生化反響麥芽糖：陽(yáng)性〔三〕、生化反響甘露醇：陰性〔三〕、生化反響木糖：陰性〔三〕、生化反響尿素酶實(shí)驗(yàn)：陰性未接種接種〔四〕、抵抗力1、耐熱；2、對(duì)抗菌素的敏感性。二、流行病學(xué)〔一〕、細(xì)菌分布蠟樣芽胞桿菌在自然界分布廣泛，常存在于土壤、灰塵和污水中，植物和許多生熟食品中常見(jiàn)。已從多種食品中分別出該菌，包括肉、乳制品、蔬菜、魚、土豆、糊、醬油、布丁、炒米飯以及各種甜點(diǎn)等。在美國(guó)，炒米飯是引發(fā)蠟樣芽胞桿菌嘔吐型食物中毒的主要緣由；在歐洲大都由甜點(diǎn)、肉餅、色拉和奶、肉類食品引起；在我國(guó)主要與受污染的米飯或淀粉類制品有關(guān)。二、流行病學(xué)〔一〕、細(xì)菌分布以前調(diào)查各種食品514件，發(fā)現(xiàn)本菌：日本1641件中有193件陽(yáng)性，陽(yáng)性率11.8%；國(guó)內(nèi)480件中有221件陽(yáng)性，陽(yáng)性率46%；乳制品陽(yáng)性率77%；水果、干果陽(yáng)性率8.1%；肉制品陽(yáng)性率26%?！捕诚灅友堪麠U菌的食物中毒的普通情況1、季節(jié)性強(qiáng)：〔6—10月〕夏秋季為頂峰期2、中毒發(fā)病率高：60%—100%，集團(tuán)中迸發(fā)，與葡萄球菌類似3、中毒與性別、年齡無(wú)關(guān)：4、埋伏期長(zhǎng)短與中毒病癥相關(guān)：嘔吐癥0.5—5h，發(fā)病腹瀉8h后5、污染源：主要泥土，灰塵，經(jīng)過(guò)昆蟲，不潔器具，任務(wù)人員傳播，原料也有.6、常見(jiàn)中毒食品：乳類食品，肉類，米飯，淀粉類食品，甜點(diǎn)心，涼拌蔬菜，水果，色拉。國(guó)內(nèi)：與淀粉質(zhì)食品相關(guān)多，7、臨床病癥：〔1〕嘔吐型〔2〕腹瀉型〔二〕蠟樣芽胞桿菌的食物中毒的普通情況三、微生物檢驗(yàn)〔一〕檢驗(yàn)程序檢樣稀釋處置鏡檢平板分別菌落計(jì)數(shù)培育特性察看報(bào)告結(jié)果生化實(shí)驗(yàn)證明實(shí)驗(yàn)三、微生物檢驗(yàn)〔二〕操作步驟：1、菌數(shù)測(cè)定以無(wú)菌操作將檢樣25g(ml),用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液做成10-1—10-5的稀釋液。取各稀釋液0.1ml，接種在兩個(gè)選擇性培育基—甘露醇卵黃多孢菌素〔MYP〕瓊脂培育基上，用L形涂棒涂布于整個(gè)外表，置36±1℃恒溫箱培育12-20h后選取適當(dāng)菌落數(shù)的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)，蠟樣芽胞桿菌在此培育基上的菌落為粉紅色〔表示不發(fā)酵甘露醇〕，周圍有粉紅色的暈〔表示產(chǎn)生卵磷脂酶〕。計(jì)算后從中選取5個(gè)此種菌落做證明實(shí)驗(yàn)。三、微生物檢驗(yàn)操作步驟：2、分別實(shí)驗(yàn)取檢樣或稀釋液劃線分別培育于選擇性培育基〔MYP〕上，置37℃培育12-20h，挑取可疑的蠟狀芽胞桿菌菌落接種于肉湯和營(yíng)養(yǎng)瓊脂作成純培育，然后做證明實(shí)驗(yàn)。3證明實(shí)驗(yàn)〔1〕鏡檢察看形狀〔2〕培育特性〔3〕生化性狀及分型三、微生物檢驗(yàn)〔三〕結(jié)果報(bào)告根據(jù)證明為蠟狀芽胞桿菌的菌落數(shù)計(jì)算出該平板上的菌落數(shù)，然后乘以稀釋倍數(shù)，即得每g(ml)樣品中所含蠟狀芽孢桿菌數(shù)。如MYP平板上的可以菌落為25個(gè)，取5個(gè)鑒定，證明為四個(gè)，乘上稀釋倍數(shù)〔104〕，再乘上1g(ml)檢樣數(shù)〔取的是0.1ml樣)，那么N=25*4/5*104*10=2*106報(bào)告每個(gè)g(ml)檢樣中含蠟狀芽胞桿菌的數(shù)量〔個(gè)/個(gè)g(ml))結(jié)果報(bào)告或MYPMYP檢樣25克生化實(shí)驗(yàn)菌落計(jì)數(shù)0.1ml鏡檢挑可疑菌落血平板或營(yíng)養(yǎng)瓊脂或思索題1、引起蠟樣芽胞桿菌食物中毒的常見(jiàn)食物有哪些，什么條件下可引起蠟