血栓與止血檢驗(yàn)及其相關(guān)疾?。ㄑ簩W(xué)檢驗(yàn)課件）

血管壁的止血作用與檢驗(yàn)一、基礎(chǔ)理論（一）血管壁的結(jié)構(gòu)血管壁的正常結(jié)構(gòu)包括三層：內(nèi)層、中層和外層。內(nèi)層：內(nèi)皮細(xì)胞+基底膜；中層：平滑肌細(xì)胞（毛細(xì)血管無(wú)此層）；外層：結(jié)締組織。一、基礎(chǔ)理論一、基礎(chǔ)理論（二）血管壁的止血作用血管在止血過(guò)程中的作用示意圖二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（一）毛細(xì)血管脆性試驗(yàn)（見《臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)》）（二）出血時(shí)間測(cè)定（見《臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)》）二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（三）血管性血友病因子測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】火箭電泳法含vWF抗體的瓊脂板受檢血漿（抗原）電場(chǎng)＋火箭樣沉淀線二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（三）血管性血友病因子測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】酶聯(lián)免疫吸附法vWF抗體包被板待測(cè)血漿（抗原）＋加底物顯色酶標(biāo)記二抗算出vWF：Ag含量二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（三）血管性血友病因子測(cè)定【參考區(qū)間】火箭電泳法94.09%±32.46%。酶聯(lián)免疫吸附法（1.02±0.56）U/ml。

二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（三）血管性血友病因子測(cè)定【臨床意義】1.減低見于血管性血友?。╲WD），是診斷vWD及其分型的重要依據(jù)。2.增高見于血栓性疾病，如急性冠脈綜合征、心肌梗死、腦血管病變、妊娠高血壓綜合征、腎小球疾病等，也可見于劇烈運(yùn)動(dòng)后腎上腺受體被興奮等。二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（四）凝血酶調(diào)節(jié)蛋白測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】放射免疫法TM單克隆抗體包被小杯待測(cè)血漿（抗原）＋125I-抗人TM單抗算出樣品中TM的含量二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（四）凝血酶調(diào)節(jié)蛋白測(cè)定【參考區(qū)間】25～52μg/L。【臨床意義】

正常情況下，血漿中的TM含量很低，但當(dāng)血管內(nèi)皮受損后，血漿中的TM含量明顯升高且與內(nèi)皮的損傷程度相關(guān)。TM:Ag的檢測(cè)是了解血管內(nèi)皮損傷最好的指標(biāo)。TM:Ag水平升高見于血栓性疾病，如糖尿病、心肌梗死、腦血栓等。二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（五）血漿6酮-前列腺素F1a測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】ELISA競(jìng)爭(zhēng)法抗原6酮-PGF1a包被固相載體

待測(cè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品

＋抗血漿6酮-PGF1a抗體

包被抗原與游離抗原競(jìng)爭(zhēng)性地與抗體結(jié)合酶標(biāo)記二抗加底物顯色算出待檢血漿中6酮-PGF1a的含量二、血管壁（內(nèi)皮）檢驗(yàn)（五）血漿6酮-前列腺素F1a測(cè)定【參考區(qū)間】（17.9±7.2）ng/L?！九R床意義】

血漿6酮-PGF1a減低見于血栓性疾病，如急性心肌梗死、心絞痛、腦血管病變、動(dòng)脈粥樣硬化、周圍血管血栓形成及血栓性血小板減少性紫癜等。第二節(jié)血小板止血作用與檢驗(yàn)一、基礎(chǔ)理論（一）血小板的結(jié)構(gòu)光學(xué)顯微鏡直徑1～4微米，具有運(yùn)動(dòng)和變形能力。瑞氏染色后見血小板胞質(zhì)呈灰藍(lán)色或淡紅色。電子顯微鏡血小板結(jié)構(gòu)可分為表面結(jié)構(gòu)、溶膠質(zhì)層結(jié)構(gòu)、細(xì)胞器內(nèi)含物。一、基礎(chǔ)理論（一）血小板的結(jié)構(gòu)血小板超微結(jié)構(gòu)示意圖左圖：血小板赤道面右圖：血小板垂直面一、基礎(chǔ)理論（一）血小板的結(jié)構(gòu)1.血小板表面結(jié)構(gòu)

由血小板膜和開放管道系統(tǒng)（opencanalicularsystem，OCS）組成。重要成分：血小板膜糖蛋白/磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine，PS）/血小板第3因子（lateletfactor3，PF3）等。一、基礎(chǔ)理論（一）血小板的結(jié)構(gòu)1.血小板表面結(jié)構(gòu)名稱CD名稱分子量功能特性GPⅠaCD49b150000與GPⅡa形成復(fù)合物，是膠原的受體GPⅠbCD42c170000與GPⅨ、GPV形成復(fù)合物，是vWF的受體，參與血小板黏附反應(yīng)，缺乏或減少時(shí)血小板黏附功能減低，見于巨大血小板綜合征。GPⅠcCD49f140000與GPⅡ形成復(fù)合物，是層素（laminin）的受體GPⅡaCD29138000與GPⅠa和GPⅠc形成復(fù)合物，是膠原和層素的受體主要血小板膜糖蛋白及其功能一、基礎(chǔ)理論（一）血小板的結(jié)構(gòu)1.血小板表面結(jié)構(gòu)名稱CD名稱分子量功能特性GPⅡb和ⅢaCD41aⅡb145000Ⅲa90000GPⅡb與Ⅲa形成復(fù)合物，是纖維蛋白原（Fg）的受體，參與血小板聚集反應(yīng)，缺乏或減少時(shí)血小板聚集功能減低，見于血小板無(wú)力癥。GPⅣCD3688000是TSP的受體GPⅤ82000和GPⅠb、GPⅨ構(gòu)成vWF受體GPⅠb-Ⅴ-ⅨGPⅨCD42a17000和GPⅠb、GPⅤ形成復(fù)合物，構(gòu)成vWF受體P-selectin140000即α顆粒膜糖蛋白（GMP140）。血小板活化時(shí)，可移行至血小板漿膜上，為血小板活化的標(biāo)志。一、基礎(chǔ)理論（一）血小板的結(jié)構(gòu)2.溶膠質(zhì)層結(jié)構(gòu)由微管、微絲、致密管道系統(tǒng)等組成。3.細(xì)胞器內(nèi)容物結(jié)構(gòu)主要由α-顆粒、δ-顆粒（致密顆粒）和γ-顆粒（溶酶體）組成。一、基礎(chǔ)理論（二）血小板的花生四烯酸代謝血小板代謝是維持血小板正常結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)，包括能量代謝和膜磷脂代謝。其中與血小板活化最為密切相關(guān)的是花生四烯酸代謝。一、基礎(chǔ)理論（二）血小板的花生四烯酸代謝花生四烯酸代謝示意圖一、基礎(chǔ)理論（三）血小板的止血功能血小板黏附促凝反應(yīng)血小板聚集釋放反應(yīng)血塊收縮一、基礎(chǔ)理論（三）血小板的止血功能ADP血小板進(jìn)一步激活、釋放血塊收縮內(nèi)皮損傷（內(nèi)皮下組織暴露）血小板黏附血小板初期釋放ADP等血小板聚集纖維蛋白形成堅(jiān)固的凝血塊血小板促凝作用5-HT血小板血栓一、基礎(chǔ)理論（三）血小板的止血功能類別成分活性胺5-HT，組胺，腎上腺素，去甲腎上腺素腺嘌呤核苷酸ADP,ATP,cAMP陽(yáng)離子Ca2+,K+血小板因子PF3,PF4等凝血因子凝血因子I，V，VIII，XIII血小板蛋白β-TG，血小板糖蛋白等血栓烷TXA2血小板的主要釋放產(chǎn)物二、血小板檢驗(yàn)（一）血小板計(jì)數(shù)（臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)）（二）血塊退縮試驗(yàn)（臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)）二、血小板檢驗(yàn)（三）血小板黏附試驗(yàn)（PAdT）【實(shí)驗(yàn)原理】

用一定量的抗凝血與一定表面積的玻璃表面接觸一定時(shí)間，血小板可黏附于帶負(fù)電荷的玻璃表面，根據(jù)黏附前后血小板數(shù)量之差，即可計(jì)算出血小板的黏附百分率。二、血小板檢驗(yàn)（三）血小板黏附試驗(yàn)（PAdT）【參考區(qū)間】玻璃珠柱法：62.5%±8.6%。旋轉(zhuǎn)玻球法（12ml玻瓶）：男性28.9%～40.9%；女性34.2%～44.6%。

二、血小板檢驗(yàn)（三）血小板黏附試驗(yàn)（PAdT）【臨床意義】

血小板黏附率減低可見于一些遺傳性與獲得性血小板功能缺陷病，如巨血小板綜合征、血小板無(wú)力癥、肝硬化、尿毒癥、骨髓增生異常綜合癥（MDS）、單克隆高球蛋白血癥等，也可見于服用抗血小板藥物等。二、血小板檢驗(yàn)（三）血小板黏附試驗(yàn)（PAdT）【臨床意義】血小板黏附率增高常見于血栓前狀態(tài)與血栓性疾病，如急性心肌梗死、腦血栓形成、心絞痛、動(dòng)脈硬化、糖尿病、高脂蛋白血癥等疾患。二、血小板檢驗(yàn)（四）血小板聚集試驗(yàn)（PAgT）【實(shí)驗(yàn)原理】1.光學(xué)比濁法在富血小板血漿（PRP）中加入致聚劑，使血小板發(fā)生聚集，血漿濁度減低，透光度增加，血小板聚集儀可將血小板聚集過(guò)程記錄于圖紙上，形成血小板聚集曲線。根據(jù)曲線變化反映血小板的聚集程度和速度。二、血小板檢驗(yàn)（四）血小板聚集試驗(yàn)（PAgT）【實(shí)驗(yàn)原理】2.全血電阻抗法在枸櫞酸鈉抗凝的全血中加入血小板激活劑，血小板聚集后導(dǎo)致浸在血液中的兩電極間電阻抗增加，血小板聚集儀可以連續(xù)記錄血小板聚集過(guò)程中的電阻抗變化并以聚集曲線顯示。二、血小板檢驗(yàn)（四）血小板聚集試驗(yàn)（PAgT）【參考區(qū)間】

不同儀器及誘聚劑或者不同濃度、劑量的同種誘聚劑有不同的參考值。以MG-196型血小板聚集儀為例，幾種常用的體外誘聚劑測(cè)得的參考值：ADP(1.0μmol/ml)ADP(0.5μmol/ml)腎上腺素(4.0μg/ml)膠原(4.0μg/ml)瑞斯托霉素(1.5μmg/ml)最大幅度（%）48.6～78.825～5050.2～85.654～9076.1～98.9達(dá)到最大幅度時(shí)間（S）150～29068～230220～360220～290200～2802min時(shí)幅度（%）38～6820～4225～5022～6155～90單峰或雙峰曲線雙峰雙峰雙峰單峰雙峰二、血小板檢驗(yàn)（四）血小板聚集試驗(yàn)（PAgT）【參考區(qū)間】

血小板聚集曲線二、血小板檢驗(yàn)（四）血小板聚集試驗(yàn)（PAgT）【臨床意義】1.PAgT減低反映血小板聚集功能減低。見于血小板無(wú)力癥、巨大血小板綜合征、低（無(wú)）纖維蛋白原血癥、肝硬化、尿毒癥、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、急性白血病、骨髓增生異常綜合征、骨髓增殖性疾病、特發(fā)性血小板減少性紫癜、服用抗血小板藥物等。二、血小板檢驗(yàn)（四）血小板聚集試驗(yàn)（PAgT）【臨床意義】2.PAgT增高反映血小板聚集功能增強(qiáng)。見于血液高凝狀態(tài)和（或）血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，如心肌梗死、心絞痛、動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、糖尿病、腎病綜合征、心臟瓣膜置換術(shù)后、深靜脈血栓形成、高脂飲食、口服避孕藥和吸煙等。二、血小板檢驗(yàn)（五）血小板第三因子有效性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】

將健康人與受檢者的富血小板血漿（PRP）和乏血小板血漿（PPP）交叉混合，以白陶土作為活化劑，氯化鈣作為凝血反應(yīng)啟動(dòng)劑，促使PF3形成。通過(guò)測(cè)定各組標(biāo)本的凝固時(shí)間，比較各組凝血時(shí)間的差異，從而判斷受檢者PF3是否有缺陷。二、血小板檢驗(yàn)（五）血小板第三因子有效性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】組別患者血漿（ml）正常血漿（ml）PRPPPPPRPPPP10.10.120.10.130.10.140.10.1PF3aT測(cè)定分組二、血小板檢驗(yàn)（五）血小板第三因子有效性測(cè)定【參考區(qū)間】第1組較第2組的結(jié)果延長(zhǎng)不超過(guò)5秒，若延長(zhǎng)5秒以上，則視為PF3有效性減低。第3組與第4組分別為患者和正常人（作為對(duì)照管），患者PF3有缺陷或內(nèi)源凝血因子有缺陷（如血友病），第3組凝固時(shí)間亦會(huì)延長(zhǎng)。二、血小板檢驗(yàn)（五）血小板第三因子有效性測(cè)定【臨床意義】1.PF3有效性減低見于先天性血小板PF3缺乏癥、血小板無(wú)力癥、巨大血小板綜合征、肝硬化、尿毒癥、彌散性血管內(nèi)凝血、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、特發(fā)性血小板減少性紫癜、骨髓增生異常綜合征及一些藥物的影響。二、血小板檢驗(yàn)（五）血小板第三因子有效性測(cè)定【臨床意義】2.PF3有效性增加見于高脂血癥、動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、糖尿病伴血管病變等。二、血小板檢驗(yàn)（六）血小板膜糖蛋白測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】

用熒光素標(biāo)記的抗血小板膜糖蛋白的單克隆抗體作分子探針，與全血或富含血小板的血漿反應(yīng)，通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)標(biāo)記于抗體的熒光素發(fā)出的熒光信號(hào)，計(jì)算出陽(yáng)性血小板的百分率。用定量流式分析技術(shù)還可以定量檢測(cè)血小板膜糖蛋白分子的數(shù)量。二、血小板檢驗(yàn)（六）血小板膜糖蛋白測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】CD編號(hào)識(shí)別的膜糖蛋白CD36GPⅣCD41GPⅡb/Ⅲa和GPⅡbCD42aGPⅨCD42bGPⅠCD42dGPⅤCD61GPⅢaCD62PP-selectin或MP140FCM常用的血小板膜糖蛋白單克隆抗體二、血小板檢驗(yàn)（六）血小板膜糖蛋白測(cè)定【參考區(qū)間】1.FCM分析

糖蛋白GPⅠb（CD42b）、GPⅡb(CD41)、GPⅢa（CD61）、GPⅨ（CD42a）陽(yáng)性血小板百分率為95%～98%。CD62P（GMP-140）<2%，CD63<2%，F(xiàn)IB-R<5%。二、血小板檢驗(yàn)（六）血小板膜糖蛋白測(cè)定【參考區(qū)間】2.定量流式細(xì)胞分析GPⅢa（CD61）：（53±12）×103分子數(shù)/血小板。GPⅠb（CD42b）：（38±11）×103分子數(shù)/血小板。GPⅠa（CD49b）：（5±2.8）×103分子數(shù)/血小板。二、血小板檢驗(yàn)（六）血小板膜糖蛋白測(cè)定【臨床意義】1.血小板功能缺陷病①巨大血小板綜合征：血小板膜GPⅠb-Ⅸ-Ⅴ含量顯著減少或缺乏；②血小板無(wú)力癥：血小板膜GPⅡb-Ⅲa含量顯著減少或缺乏，輕型患者可有部分殘留（5%～25%）；二、血小板檢驗(yàn)（六）血小板膜糖蛋白測(cè)定【臨床意義】1.血小板功能缺陷病③血小板貯存池缺陷?。褐旅茴w粒缺乏（Ⅰ型）患者，活化血小板膜CD62P表達(dá)正常；α顆粒缺乏（Ⅱ型）或α顆粒與致密顆粒聯(lián)合缺陷（Ⅲ型）患者，活化血小板膜CD62P表達(dá)減低或缺乏，但GPⅠb、GPⅡb、GPⅢa、GPⅤ和GPⅨ表達(dá)正常。二、血小板檢驗(yàn)（六）血小板膜糖蛋白測(cè)定【臨床意義】2.血栓前狀態(tài)與血栓性疾病

循環(huán)血小板膜GPⅡb-Ⅲa分子數(shù)量增加、（FIB-R）表達(dá)量增加、CD62P或CD63表達(dá)增加是血小板活化的特異性分子標(biāo)志，尤其是FIB-R高表達(dá)時(shí)，表明血小板的聚集性顯著增高，易導(dǎo)致血栓形成。二、血小板檢驗(yàn)（七）血小板相關(guān)抗體測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】將抗人血小板抗體包被在酶標(biāo)反應(yīng)板孔內(nèi)，加受檢血小板溶解液，如果此液中存在有相關(guān)抗體則可與包被的抗體結(jié)合，再加入酶聯(lián)二抗，最后加入底物顯色，其深淺與血小板溶解液中的抗體含量成正相關(guān)。二、血小板檢驗(yàn)（七）血小板相關(guān)抗體測(cè)定【參考區(qū)間】ELISA法PAIgG：（0～78.8）ng/107血小板；

PAIgA：（0～2）ng/107血小板；

PAIgM：（0～7）ng/107血小板；

PAC3：（0～18）ng/107血小板。二、血小板檢驗(yàn)（七）血小板相關(guān)抗體測(cè)定【臨床意義】90%以上的特發(fā)性血小板減少性紫癜（ITP）患者PAIgG增加，同時(shí)測(cè)定PAIgA、PAIgM及PAC3陽(yáng)性率達(dá)100%。且隨治療好轉(zhuǎn)PAIg水平下降，復(fù)發(fā)則增加。二、血小板檢驗(yàn)（七）血小板相關(guān)抗體測(cè)定【臨床意義】其他疾病如同種免疫性血小板減少性紫癜（多次輸血后）、Evans綜合征、慢性活動(dòng)性肝炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、惡性淋巴瘤、慢性淋巴細(xì)胞白血病、多發(fā)性骨髓瘤等PAIg也可增加。特異性抗血小板膜糖蛋白的自身抗體陽(yáng)性對(duì)診斷ITP有較高的特異性，其中以抗GPⅡb/Ⅲa，GPⅠb/Ⅸ復(fù)合物的抗體為主。二、血小板檢驗(yàn)（八）血小板壽命測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】觀察單次劑量服用阿司匹林后血小板MDA和TXB2生成恢復(fù)至服藥前水平的時(shí)間，可以反映血小板生存時(shí)間。用ELISA法或RIA可測(cè)定TXB2或MDA的含量。二、血小板檢驗(yàn)（八）血小板壽命測(cè)定【參考區(qū)間】MDA法6.6～15天TXB2法7.6～11天二、血小板檢驗(yàn)（八）血小板壽命測(cè)定【臨床意義】血小板生存期縮短見于①血小板破壞增多性疾病：如特發(fā)性血小板減少性紫癜、藥物性血小板減少、脾功能亢進(jìn)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡；②血小板消耗過(guò)多性疾?。喝鏒IC、血栓性血小板減少性紫癜、溶血尿毒癥綜合征；③各種血栓性疾?。喝缧募」Ｋ馈⑻悄虿“檠懿∽?、深靜脈血栓形成、肺梗死、惡性腫瘤等。第三節(jié)血液凝固與檢驗(yàn)一、基礎(chǔ)理論（一）凝血因子包括12個(gè)經(jīng)典的凝血因子以及激肽系統(tǒng)的激肽釋放酶原和高分子量激肽原，以羅馬數(shù)字命名的凝血因子為Ⅰ～ⅩⅢ。除因子Ⅲ為組織因子，其余均存在于新鮮血漿中。除因子IV為鈣離子外,其余均為蛋白質(zhì)。因子蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)酶活性生物半衰期生成部位是否依賴維生素K血漿中濃度(mg/L)BaSO4吸附血漿中是否存在血清中有無(wú)Ⅰ3對(duì)肽鏈90h肝否2000~4000是無(wú)Ⅱ單鏈S*60h肝是200否很少Ⅲ單鏈輔因子—組織細(xì)胞內(nèi)皮細(xì)胞單核細(xì)胞否———Ⅴ單鏈輔因子12h肝否5~10是無(wú)Ⅶ單鏈S4~6h肝是2否有Ⅷ單鏈輔因子12h不明否<10是無(wú)Ⅸ單鏈S24h肝是3~4否有Ⅹ雙鏈S30~40h肝是6~8否有Ⅺ雙鏈S48~84h肝否4存在，但減少1/3有Ⅻ單鏈S48~52h肝否2.9是有PK單鏈S6.5天肝否5.0~15存在有HMWK單鏈輔因子3~5天肝否7.0存在有ⅩⅢ雙鏈轉(zhuǎn)谷氨酰酶10天肝否2.5存在有注：S*表示絲氨酸蛋白酶，因?yàn)槊傅幕罨行暮z氨酸凝血因子的一般特點(diǎn)一、基礎(chǔ)理論（一）凝血因子1.依賴維生素K的凝血因子（1）因子Ⅱ（凝血酶原,prothrombin）（2）因子Ⅶ（穩(wěn)定因子，stablefactor）（3）因子Ⅸ（血漿凝血活酶成分，plasmathromboplastincomponent，PTC）（4）因子Ⅹ（Stuart-Prower因子）

一、基礎(chǔ)理論（一）凝血因子2.接觸凝血因子（1）因子Ⅺ（2）因子Ⅻ（3）激肽釋放酶原（prokallikrein，PK）（4）高分子量激肽原（highmolecularweightkininogen,HMWK）一、基礎(chǔ)理論（一）凝血因子3.凝血酶敏感因子（1）因子Ⅰ（纖維蛋白原，fibrinogen，F(xiàn)g）（2）因子Ⅴ（易變因子，labilefactors）（3）因子Ⅷ（抗血友病球蛋白,antiemophiliaglobulin，AHG）（4）因子ⅩⅢ（纖維蛋白穩(wěn)定因子,fribrinstabilizingfactor）一、基礎(chǔ)理論（一）凝血因子4.其他凝血因子（1）組織因子（tissuefactor，TF）（2）因子Ⅳ（鈣離子,Ca2+）一、基礎(chǔ)理論（二）凝血機(jī)制1.內(nèi)源凝血途徑（1）因子Ⅻ的激活①固相激活；②液相激活。（2）因子Ⅺ的激活（3）因子Ⅸ的激活（4）因子Ⅷ的作用

一、基礎(chǔ)理論（二）凝血機(jī)制2.外源凝血途徑（1）因子Ⅲ(TF)：?jiǎn)?dòng)外源凝血途徑（2）因子Ⅶ的激活一、基礎(chǔ)理論（二）凝血機(jī)制3.共同凝血途徑（1）凝血酶原酶生成①因子Ⅹ的激活；②因子Ⅴ的激活；③磷脂的作用。（2）凝血酶生成（3）纖維蛋白的形成

一、基礎(chǔ)理論（二）凝血機(jī)制3.共同凝血途徑

血液凝固機(jī)制二、凝血因子檢驗(yàn)（一）全血凝固時(shí)間測(cè)定（CT）（二）活化凝血時(shí)間測(cè)定（ACT）（三）活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定（APTT）（四）血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定（PT）

二、凝血因子檢驗(yàn)（五）血漿纖維蛋白原測(cè)定血漿纖維蛋白原由肝臟合成，是血漿中含量最高的凝血因子。【實(shí)驗(yàn)原理】1.凝血酶（Clauss）法2.PT衍生法【參考區(qū)間】成人：2.00～4.00g/L；新生兒：1.25～3.00g/L。

二、凝血因子檢驗(yàn)（五）血漿纖維蛋白原測(cè)定【臨床意義】Fg可做為溶栓治療檢測(cè)的指標(biāo)。Fg一般不應(yīng)低于1.2～1.5g/L1.Fg增高①感染；②無(wú)菌性炎癥；③血栓前狀態(tài)與血栓性疾?。虎軔盒阅[瘤；⑤外傷、燒傷、外科手術(shù)或放射治療后；⑥其他。

二、凝血因子檢驗(yàn)（五）血漿纖維蛋白原測(cè)定【臨床意義】Fg可做為溶栓治療檢測(cè)的指標(biāo)。Fg一般不應(yīng)低于1.2～1.5g/L2.Fg降低①原發(fā)性纖維蛋白原減少或結(jié)構(gòu)異常；②繼發(fā)性纖維蛋白原減少。

二、凝血因子檢驗(yàn)（六）血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】將受檢血漿分別與乏凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ基質(zhì)血漿混合，做血漿凝血酶原時(shí)間測(cè)定【參考區(qū)間】

FⅡ:C：97.7％±16.7％；

新生兒：FⅤ:C：102.4％±30.9％；FⅦ:C：103％±17.3％；FX:C：103％±19.0％。

二、凝血因子檢驗(yàn)（六）血漿因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ促凝活性測(cè)定【臨床意義】1.活性增高①血栓前狀態(tài)；②血栓性疾病。2.活性減低①先天性因子缺乏；②獲得性因子減低。

二、凝血因子檢驗(yàn)（七）血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】在受檢血漿中分別加入乏凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的基質(zhì)血漿、白陶土-腦磷脂懸液和Ca2+溶液，進(jìn)行APTT測(cè)定。【參考區(qū)間】

FⅧ:C：103％±25.7％；FⅨ:C：98.1％±30.4％；FⅪ:C：100％±18.4％；FⅫ:C：92.4％±20.7％

二、凝血因子檢驗(yàn)（七）血漿因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ和Ⅻ的促凝活性測(cè)定【臨床意義】1.增高①高凝狀態(tài)；②血栓前狀態(tài)；③血栓性疾病。2.減低①因子Ⅷ：C減低見于血友病甲、血管性血友病等；②因子Ⅸ：C減低見于血友病乙、肝臟疾病等；③因子Ⅺ:C減低見于Ⅺ因子缺乏癥、DIC等；④因子Ⅻ:C減低見于先天性因子Ⅻ缺乏癥、DIC等。

二、凝血因子檢驗(yàn)（八）凝血因子ⅩⅢ定性試驗(yàn)和亞基抗原測(cè)定1.凝血因子ⅩⅢ定性試驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)原理】激活的因子ⅩⅢ可以使纖維蛋白單體間交聯(lián)后形成不可溶的纖維蛋白凝塊。【參考區(qū)間】24小時(shí)內(nèi)纖維蛋白凝塊不溶解。【臨床意義】①先天性因子ⅩⅢ缺乏癥②獲得性因子ⅩⅢ減少癥：肝病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、DIC等。

二、凝血因子檢驗(yàn)（八）凝血因子ⅩⅢ定性試驗(yàn)和亞基抗原測(cè)定2.凝血因子ⅩⅢ亞基抗原檢測(cè)【實(shí)驗(yàn)原理】免疫火箭電泳法：在含有FⅩⅢα亞基和β亞基抗血清的瓊脂凝膠板中，加入受檢血漿在電場(chǎng)作用下，出現(xiàn)抗原-抗體反應(yīng)形成的火箭樣沉淀峰，此峰的高度與受檢血漿中FⅩⅢ亞基的濃度成正比。

二、凝血因子檢驗(yàn)（八）凝血因子ⅩⅢ定性試驗(yàn)和亞基抗原測(cè)定2.凝血因子ⅩⅢ亞基抗原檢測(cè)【參考區(qū)間】免疫火箭電泳法：FⅩⅢα：100.4％±12.9％；FⅩⅢβ：98.8％±12.5％。

二、凝血因子檢驗(yàn)（八）凝血因子ⅩⅢ定性試驗(yàn)和亞基抗原測(cè)定2.凝血因子ⅩⅢ亞基抗原檢測(cè)【臨床意義】

先天性因子ⅩⅢ缺乏癥：純合子型者的FⅩⅢα：Ag明顯減低（≤1％），F(xiàn)ⅩⅢβ：Ag輕度減低；雜合子型的FⅩⅢα：Ag（常≤50％），F(xiàn)ⅩⅢβ：Ag正常。獲得性因子ⅩⅢ減少癥：見于肝臟疾病、DIC等

第四節(jié)抗凝物質(zhì)與檢驗(yàn)學(xué)習(xí)目標(biāo)

掌握常用抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（復(fù)鈣交叉試驗(yàn)、凝血酶時(shí)間測(cè)定及糾正試驗(yàn)）原理、注意事項(xiàng)及臨床意義；熟悉主要抗凝物質(zhì)的作用原理；了解抗凝物質(zhì)如抗凝血酶、蛋白C系統(tǒng)、組織因子途徑抑制物等的基本理論。一、基本理論（一）抗凝血酶抗凝血酶（antithrombin，AT）是一種單鏈糖蛋白，由肝、血管內(nèi)皮細(xì)胞和巨核細(xì)胞合成，屬于α2球蛋白。AT作用：AT是肝素依賴的絲氨酸蛋白酶抑制物，抑酶譜很廣，能抑制FⅡa、FVⅡa、FIXa、Fxa、FXⅡa以及纖溶酶、胰蛋白酶和激肽釋放酶等，作用機(jī)制相同。

一、基本理論（一）抗凝血酶AT作用機(jī)制：肝素與AT結(jié)合后，導(dǎo)致AT構(gòu)型發(fā)生改變，后者可與這些酶活性中心的絲氨酸殘基結(jié)合，“封閉”了這些酶的活性中心而使之失活。此時(shí)肝素可從復(fù)合物中重新釋出，再與其他游離的AT結(jié)合，繼續(xù)發(fā)揮肝素增強(qiáng)AT抗凝功能的作用。

一、基本理論（二）蛋白C系統(tǒng)蛋白C系統(tǒng)包括蛋白C（PC）、凝血酶調(diào)節(jié)蛋白（TM）、蛋白S（PS）、活性蛋白C抑制物（APCI）和內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體（EPCR）蛋白C、蛋白S、APCI由肝臟產(chǎn)生。TM和EPCR由內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生和表達(dá)。

一、基本理論（二）蛋白C系統(tǒng)APC作用機(jī)制蛋白C被凝血酶與凝血酶調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物激活形成活化的蛋白C（APC），這一過(guò)程在EPCR輔助下完成。APC在蛋白S的協(xié)同下，發(fā)揮抗凝作用，主要表現(xiàn)在裂解因子Va、Ⅷa，抑制因子X(jué)a與血小板膜磷脂的結(jié)合。

一、基本理論（二）蛋白C系統(tǒng)APCI作用機(jī)制APCI通過(guò)和APC結(jié)合使之失去滅活因子Va、Ⅷa的作用。如果蛋白C或蛋白S有缺陷，與AT缺陷一樣（它們均有遺傳性缺陷），可引起機(jī)體凝血和抗凝平衡失調(diào)，導(dǎo)致血栓形成。

一、基本理論（三）組織因子途徑抑制物組織因子途徑抑制物（TFPI）是一種單鏈糖蛋白，主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞、血小板、單核細(xì)胞等合成和分泌。TFPI在血漿中以與脂蛋白結(jié)合和游離兩種形在存在。TFPI作用機(jī)制：TFPI存在于Ⅶa和Ⅹa的結(jié)合部位，通過(guò)和TF-Ⅶa復(fù)合物結(jié)合抑制其活性，從而對(duì)組織因子凝血途徑發(fā)揮重要調(diào)控作用。

一、基本理論（四）生理性和病理性抗凝物質(zhì)生理性抗凝物質(zhì)肝素輔因子Ⅱ（HCⅡ）a2-巨球蛋白（a2-MG）a1-抗胰蛋白酶（a1-AT）一、基本理論（四）生理性和病理性抗凝物質(zhì)病理性抗凝物質(zhì)主要包括肝素類肝素物質(zhì)狼瘡抗凝物（LAC）凝血因子抑制物

二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（一）抗凝血酶活性及抗原測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】1.血漿抗凝血酶活性（AT:A）檢測(cè)發(fā)色底物法：受檢血漿中加入過(guò)量肝素和FⅩa，使AT與FⅩa形成無(wú)活性復(fù)合物，剩余的FⅩa水解發(fā)色底物，釋出發(fā)色基團(tuán)而顯色，色澤的深淺與剩余FⅩa的量呈正相關(guān)，而與待測(cè)血漿中AT:A呈負(fù)相關(guān)。

二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（一）抗凝血酶活性及抗原測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】2.血漿抗凝血酶抗原（AT:Ag）檢測(cè)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）或免疫火箭電泳法均可檢測(cè)。免疫火箭電泳法：以抗凝血酶的抗血清制備瓊脂糖凝膠板，將受檢血漿加入其中一起電泳，抗原和抗體相互作用形成火箭樣沉淀峰，沉淀峰的高度與血漿中AT的含量呈正相關(guān)。

二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（一）抗凝血酶活性及抗原測(cè)定【參考區(qū)間】血漿AT:A108.5%±5.3%；血漿AT:Ag（0.29±0.06）g/L

二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（二）蛋白C活性及抗原測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】1.蛋白C活性（PC:A）檢測(cè)①血漿凝固法：在待檢血漿中加入PC激活劑、FⅫ活化劑、磷脂和鈣離子，在活化內(nèi)源凝血途徑的同時(shí)也激活PC系統(tǒng)，測(cè)定血漿的凝固時(shí)間（APTT）,其APTT比不加PC激活劑的APTT延長(zhǎng)，而且APTT延長(zhǎng)的程度與血漿PC:A呈正相關(guān)，由此可計(jì)算出相當(dāng)于正常血漿PC:A的百分率。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（二）蛋白C活性及抗原測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】1.蛋白C活性（PC:A）檢測(cè)②發(fā)色底物法：受檢血漿加入PC，PC被激活為活化蛋白C（APC），APC作用于特異性發(fā)色底物，釋出顯色基團(tuán)，色澤的深淺與受檢血漿PC的活性成正相關(guān)。

二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（二）蛋白C活性及抗原測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】2.蛋白C抗原（PC:Ag）測(cè)定火箭電泳法：在含抗人PC抗體的瓊脂板中，加入一定量的受檢血漿（抗原）于檢測(cè)孔中，定量抗原在電場(chǎng)作用下由負(fù)極向正極泳動(dòng)，在一定時(shí)間內(nèi)形成火箭樣沉淀峰，峰高與抗原濃度成正比。

二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（二）蛋白C活性及抗原測(cè)定【參考區(qū)間】PC:A100.24%±13.18%；PC:Ag102.5%±20.1%

二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（二）蛋白C活性及抗原測(cè)定【臨床意義】人體內(nèi)血漿PC含量隨年齡而增加，每10年約增加4%。1.PC抗原水平減低見于先天性蛋白C缺陷和獲得性蛋白C缺陷，如肝臟疾病、手術(shù)后、彌散性血管內(nèi)凝血、成人型呼吸窘迫綜合征等。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（二）蛋白C活性及抗原測(cè)定【臨床意義】2.PC抗原水平增高見于血栓性疾病和血栓前狀態(tài)，如彌散性血管內(nèi)凝血、深部靜脈血栓形成、缺血性心臟病、急性心肌梗死、心絞痛、糖尿病、腎病綜合征、妊娠后期等。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（三）蛋白S抗原測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】火箭電泳法：血漿總PS（TPS）包括游離PS（FPS）和與補(bǔ)體C4結(jié)合的PS（C4bP-PS），火箭電泳法可在瓊脂板上同時(shí)測(cè)定TPS和FPS。在待測(cè)血漿中加一定量聚乙二醇6000，可沉淀C4b-PS，上清部分即為FPS。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（三）蛋白S抗原測(cè)定【參考區(qū)間】TPS：96.6%±9.8%FPS：100.9%±11.6%二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（三）蛋白S抗原測(cè)定【臨床意義】1.PS缺陷患者易出現(xiàn)血液高凝狀態(tài)，先天性PS缺陷患者常伴發(fā)嚴(yán)重的深靜脈血栓栓塞。2.獲得性PS缺陷常見肝臟疾病，如急性肝炎、慢性活動(dòng)性肝炎、肝硬化、VitK缺乏癥、急性呼吸窘迫綜合征等。口服抗凝藥、口服避孕藥時(shí)，PS降低。妊娠及新生兒PS偏低。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（四）組織因子途徑抑制物活性及抗原檢測(cè)【實(shí)驗(yàn)原理】1.組織因子途徑抑制物活性（TFPI:A）檢測(cè)待測(cè)血漿與過(guò)量的TF/FⅦa和FⅩ作用，剩余的TF/FⅦa水解發(fā)色底物，釋放出發(fā)色基團(tuán)，其顏色的深淺與血漿中TFPI:A呈負(fù)相關(guān)。2.組織因子途徑抑制物抗原（TFPI:Ag）檢測(cè)用ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)血漿TFPI:Ag含量。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（四）組織因子途徑抑制物活性及抗原檢測(cè)【參考區(qū)間】TFPI:A99.96%±5.0%；TFPI:Ag97.5μg/L±26.6μg/L二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（四）組織因子途徑抑制物活性及抗原檢測(cè)【臨床意義】1.老年人血漿中TFPI含量較高。妊娠時(shí)血漿TFPI也增高，但胎兒血漿TFPI含量降低。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（四）組織因子途徑抑制物活性及抗原檢測(cè)【臨床意義】2.先天性TFPI缺乏易形成血栓，然而常見的TFPI減少大多數(shù)是獲得性的。大手術(shù)、膿毒血癥與DIC時(shí)往往血漿中TFPI減少，主要是過(guò)度消耗所致。致死性敗血癥時(shí)往往血漿中TFPI增多，可能與廣泛性血管內(nèi)皮受損使之釋放增加有關(guān)。此外，慢性腎衰竭時(shí)血中TFPI也增多。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（五）凝血酶時(shí)間測(cè)定（TT）及其糾正實(shí)驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)原理】

受檢血漿加入“標(biāo)準(zhǔn)化”的凝血酶溶液后，測(cè)定其凝固所需的時(shí)間為凝血酶時(shí)間（TT）。如血漿中纖維蛋白原的量或質(zhì)有異常或存在循環(huán)抗凝血酶類抗凝物質(zhì)，則凝血時(shí)間延長(zhǎng)。因甲苯胺藍(lán)可中和肝素和類肝素抗凝物質(zhì)，故凝血酶時(shí)間延長(zhǎng)被甲苯胺藍(lán)糾正，可認(rèn)為存在肝素或類肝素物質(zhì)。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（五）凝血酶時(shí)間測(cè)定（TT）及其糾正實(shí)驗(yàn)【參考區(qū)間】

凝固法：16～18秒，若超過(guò)正常對(duì)照3秒以上者為異常。加甲苯胺藍(lán)后TT明顯縮短，與未加甲苯胺藍(lán)的TT比較相差5s以上，視為糾正。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（五）凝血酶時(shí)間測(cè)定（TT）及其糾正實(shí)驗(yàn)【臨床意義】

1.凝血酶時(shí)間延長(zhǎng)以DIC時(shí)纖維蛋白原消耗過(guò)多多見，也有部分屬于先天性低（無(wú)）纖維蛋白原血癥、原發(fā)性纖溶及肝病病變，也可見于肝素增多或類肝素抗凝物質(zhì)增多及FDP增多。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（五）凝血酶時(shí)間測(cè)定（TT）及其糾正實(shí)驗(yàn)【臨床意義】

2.凝血酶時(shí)間縮短主要見于某些異常蛋白血癥或巨球蛋白血癥。此外，較多的是技術(shù)原因，如標(biāo)本在4℃環(huán)境中放置過(guò)久，組織液混入血漿等。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（五）凝血酶時(shí)間測(cè)定（TT）及其糾正實(shí)驗(yàn)【臨床意義】

3.TT延長(zhǎng)能被糾正血中類肝素物質(zhì)增多，多見于過(guò)敏性休克、嚴(yán)重肝病、肝葉切除、肝移植、DIC，也可見于使用氮芥以及放療后的患者。4.TT延長(zhǎng)不能被糾正為其他類抗凝物質(zhì)或纖維蛋白原缺陷。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（六）普通肝素和低分子量肝素測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】抗凝血酶（AT）可抑制凝血酶及Xa，但在正常情況下，其抑制作用較慢。當(dāng)肝素與AT結(jié)合形成1：1的復(fù)合物，該復(fù)合物滅活因子X(jué)a的作用大大加強(qiáng)；低分子量肝素對(duì)AT和Fxa間反應(yīng)的催化作用較其對(duì)AT和凝血酶間反應(yīng)的催化更容易，而標(biāo)準(zhǔn)肝素對(duì)兩者的催化作用相同。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（六）普通肝素和低分子量肝素測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】在AT和FXa均過(guò)量的反應(yīng)中，肝素對(duì)FXa的抑制速率直接與其濃度成正比，用特異性FXa發(fā)色底物法檢測(cè)剩余FXa的活性，發(fā)色強(qiáng)度與肝素濃度呈負(fù)相關(guān)。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（六）普通肝素和低分子量肝素測(cè)定【參考區(qū)間】發(fā)色底物法：正常人檢測(cè)血漿肝素為0U/ml。本法檢測(cè)肝素的范圍是0～0.8U/ml。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（六）普通肝素和低分子量肝素測(cè)定【臨床意義】在過(guò)敏性休克、使用氮芥化療或放療后、嚴(yán)重肝病或DIC、肝葉切除或肝移植等患者的血漿中肝素樣抗凝物亦增多。某些腫瘤細(xì)胞可分泌肝素樣物質(zhì)，如腎上腺皮質(zhì)腫瘤、多發(fā)性骨髓瘤等。肝臟損傷導(dǎo)致肝素在肝臟內(nèi)的降解作用減弱，也可導(dǎo)致肝素樣抗凝物增多。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（七）復(fù)鈣交叉試驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)原理】延長(zhǎng)的復(fù)鈣時(shí)間，如能被1/10量的正常血漿所糾正，表示受檢血漿中缺乏凝血因子；如果不能被等量的正常血漿所糾正，表示受檢血漿中有抗凝物質(zhì)。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（七）復(fù)鈣交叉試驗(yàn)【參考區(qū)間】受檢血漿與1/10量正常血漿混合，血漿復(fù)鈣時(shí)間不在正常范圍內(nèi)（2.2～3.8分鐘），則認(rèn)為受檢血漿中存在異?？鼓镔|(zhì)?！九R床意義】血漿中存在異常的抗凝物質(zhì)，見于反復(fù)輸血的血友病患者、肝病患者、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及胰腺疾病等。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（八）凝血因子VIII抑制物測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】混合血漿法測(cè)定：將受檢血漿與已知量的正常人Ⅷ因子血漿混合，溫浴一定時(shí)間后測(cè)定剩余Ⅷ因子的活性，以Bethesda單位來(lái)計(jì)算抑制物的含量，一個(gè)Bethesda單位相當(dāng)于滅活50%因子Ⅷ活性。二、抗凝物質(zhì)檢驗(yàn)（八）凝血因子VIII抑制物測(cè)定【參考區(qū)間】陰性【臨床意義】以Bethesda單位來(lái)計(jì)算抑制物的含量，不僅可用于因子VIII抑制物檢測(cè)，還可用于其他因子（IX、X、XI）抑制物的檢測(cè)。臨床常見于反復(fù)輸血或因子VIII濃縮制劑的血友病患者，也見于某些自身免疫病患者或妊娠期間。第五節(jié)纖維蛋白（原）溶解系統(tǒng)與檢驗(yàn)學(xué)習(xí)目標(biāo)

掌握纖溶物質(zhì)檢驗(yàn)（3P試驗(yàn)、t-PA、FDP和D-二聚體）原理、注意事項(xiàng)及臨床意義；2.熟悉纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的作用。纖維蛋白溶解系統(tǒng)簡(jiǎn)稱纖溶系統(tǒng)；其主要作用是將沉積在血管內(nèi)外的纖維蛋白溶解，起到修復(fù)、祛除和防止血管內(nèi)由于纖維蛋白沉著(如血栓形成)引起的阻塞作用。纖溶系統(tǒng)功能亢進(jìn)可引起出血，功能減低則可導(dǎo)致血栓形成，因而纖溶系統(tǒng)具有重要的生理和病理意義。一、基礎(chǔ)理論（一）纖溶系統(tǒng)的組成及其特點(diǎn)1.纖溶酶原激活物（1）組織纖溶酶原激活物(t-PA)是一種由血管內(nèi)皮細(xì)胞合成的單鏈糖蛋白，屬于絲氨酸蛋白酶。在胰腺、肺、子宮、腎上腺、前列腺和甲狀腺等組織中含量高。t-PA與纖維蛋白具有很強(qiáng)的親和力，t-PA激活纖溶酶原主要在纖維蛋白上進(jìn)行，是體內(nèi)最強(qiáng)的纖溶酶原激活物。一、基礎(chǔ)理論（一）纖溶系統(tǒng)的組成及其特點(diǎn)1.纖溶酶原激活物（2）尿激酶樣纖溶酶原激活物(u-PA)是來(lái)源于腎小管上皮細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的單鏈糖蛋白，血中含量極低。u-PA有單鏈和雙鏈二種形式，少量的纖溶酶和激肽釋放酶可使單鏈u-PA裂解成雙鏈u-PA。u-PA激活纖溶過(guò)程迅速，不依賴于纖維蛋白。一、基礎(chǔ)理論（一）纖溶系統(tǒng)的組成及其特點(diǎn)2.纖溶酶原(PLG)和纖溶酶(PL)PLG由肝合成的一種單鏈糖蛋白，以無(wú)纖溶活性的酶原形式存在于血液中。纖溶酶原在其激活物t-PA或u-PA作用下轉(zhuǎn)變成有纖溶活性的雙鏈結(jié)構(gòu)絲氨酸蛋白水解酶，它除了能裂解纖維蛋白原和纖維蛋白外，還參與分解凝血因子Ⅱ、Ⅴ、Ⅷ、Ⅹ、Ⅺ和因子Ⅻa等。一、基礎(chǔ)理論（一）纖溶系統(tǒng)的組成及其特點(diǎn)3.纖溶抑制物（1）纖溶酶原激活物抑制物(PAI）能特異性抑制t-PA和u-PA激活纖溶酶原，主要有二種：①纖溶酶原抑制物-1(PAI-1)；②纖溶酶原抑制物-2(PAI-2)。一、基礎(chǔ)理論（一）纖溶系統(tǒng)的組成及其特點(diǎn)3.纖溶抑制物（2）纖溶酶抑制物正常血漿中有多種非特異性纖溶酶抑制物，其中以α2抗纖溶酶(α2-AP)最為重要，它與纖溶酶形成1：1復(fù)合物(PAP)使其失去蛋白水解活性。一、基礎(chǔ)理論（一）纖溶系統(tǒng)的組成及其特點(diǎn)3.纖溶抑制物（2）纖溶酶抑制物一、基礎(chǔ)理論（一）纖溶系統(tǒng)的組成及其特點(diǎn)3.纖溶抑制物（3）凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)凝血酶激活的纖溶抑制物是一種血漿蛋白質(zhì)，以酶原的形式存在。一、基礎(chǔ)理論（二）纖維蛋白的溶解機(jī)制纖溶過(guò)程是一系列蛋白酶催化的連鎖反應(yīng)，一般分為二個(gè)階段：

1.纖溶酶原被激活為纖溶酶

2.纖溶酶水解纖維蛋白(原)及其他蛋白質(zhì)一、基礎(chǔ)理論（二）纖維蛋白的溶解機(jī)制1.纖溶酶原激活途徑（1）內(nèi)激活途徑：主要指血循環(huán)中內(nèi)源凝血途徑中某些因子，如因子Ⅻa、K等能激活纖溶酶原形成纖溶酶。（2）外激活途徑：主要指體內(nèi)合成的某些激活物，如t-PA、u-PA等進(jìn)入循環(huán)，激活纖溶酶原形成纖溶酶。一、基礎(chǔ)理論（二）纖維蛋白的溶解機(jī)制1.纖溶酶原激活途徑（3）外源激活途徑：主要指外界進(jìn)入體內(nèi)的某些藥物，如鏈激酶(SK)、尿激酶(UK)等激活纖溶酶原形成纖溶酶，這是溶栓治療的基礎(chǔ)。一、基礎(chǔ)理論（二）纖維蛋白的溶解機(jī)制1.纖溶酶原激活途徑一、基礎(chǔ)理論（二）纖維蛋白的溶解機(jī)制2.纖維蛋白(原)降解機(jī)制（1）纖維蛋白原的降解：纖溶酶首先作用于纖維蛋白原Bβ鏈，釋放出纖維蛋白Bβ1-42肽；又作用于Aα鏈，釋放出其附屬物A、B、C、H，即Aα羧基端的四個(gè)小片段，剩下的部分稱為X片段，然后X片段再依次被纖溶酶裂解出Y、D、E片段。纖溶酶對(duì)纖維蛋白原的裂解見于原發(fā)性纖溶。一、基礎(chǔ)理論（二）纖維蛋白的溶解機(jī)制2.纖維蛋白(原)降解機(jī)制（2）可溶性纖維蛋白的降解可溶性纖維蛋白是纖維蛋白原被凝血酶降解釋放出肽A(Aα1-16)和肽B(Bβ1-14)后形成的產(chǎn)物。纖溶酶作用于可溶性纖維蛋白后釋放出Bβ1-14肽，不含F(xiàn)PA的裂解片段分別用X’、Y’、D’、E’命名。一、基礎(chǔ)理論（二）纖維蛋白的溶解機(jī)制2.纖維蛋白(原)降解機(jī)制（3）交聯(lián)纖維蛋白的降解在纖溶酶的作用下交聯(lián)纖維蛋白除降解出碎片X’、Y’、D’、E’外，還生成D-D二聚體和DD/E、DY/YD、YY/DXD等復(fù)合物。一、基礎(chǔ)理論（二）纖維蛋白的溶解機(jī)制2.纖維蛋白(原)降解機(jī)制一、基礎(chǔ)理論（三）纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的作用纖溶酶對(duì)纖維蛋白和纖維蛋白原的裂解產(chǎn)物統(tǒng)稱為纖維蛋白(原)降解產(chǎn)物(FDP)。FDP可與纖維蛋白原競(jìng)爭(zhēng)凝血酶，阻止纖維蛋白單體(FM)形成，并可與FM結(jié)合形成可溶性復(fù)合物，抑制FM聚合和交聯(lián)成不溶性纖維蛋白，發(fā)揮抗凝作用。而交聯(lián)纖維蛋白的裂解產(chǎn)物D二聚體發(fā)生在繼發(fā)性纖溶之后，對(duì)于區(qū)別原發(fā)性與繼發(fā)性纖溶有較高的價(jià)值。一、基礎(chǔ)理論（三）纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的作用一、基礎(chǔ)理論（三）纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的作用纖溶活性的檢測(cè)及臨床意義

1.優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間測(cè)定

2.血漿組織纖溶酶原激活物測(cè)定

3.血漿纖溶酶原測(cè)定

4.血漿組織纖溶酶原激活物抑制物測(cè)定

5.血漿a2-抗纖溶酶活性測(cè)定

6.血漿硫酸魚精蛋白副凝固試驗(yàn)二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（一）優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】血漿優(yōu)球蛋白組分中含纖維蛋白原、纖溶酶原和纖溶酶原激活物等，但不含纖溶酶抑制物。用低離子強(qiáng)度和Ph4.5的溶液沉淀和分離優(yōu)球蛋白，再溶于緩沖液中，加鈣或凝血酶使其凝固，測(cè)定凝塊完全溶解的時(shí)間，即優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（一）優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間測(cè)定【參考區(qū)間】

加鈣法:129min48s±4min6s加凝血酶法:123±24min二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（一）優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間測(cè)定【臨床意義】

ELT縮短（＜70min）表明纖溶活性增強(qiáng)，見于原發(fā)性和繼發(fā)性（DIC）纖溶亢進(jìn)。但在DIC早期尚未發(fā)生繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)時(shí)，或當(dāng)纖溶極度亢進(jìn)，纖溶酶絕大部分已被消化時(shí)，可為陰性。ELT延長(zhǎng)表明纖溶活性減低，見于血栓形成前期和血栓形成性疾病。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測(cè)定（ELISA法）【實(shí)驗(yàn)原理】

根據(jù)雙抗體夾心法原理，將純化的組織纖溶酶原激活物（t-PA）或纖溶酶原激活物抑制劑（PAI）單克隆抗體包被在反應(yīng)板上，加入待測(cè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品，加過(guò)氧化物酶標(biāo)記的t-PA或PAI抗體，再加鄰苯二胺（OPD）顯色后讀取A值，計(jì)算出各自的血漿濃度。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測(cè)定（ELISA法）【參考區(qū)間】

t-PA：1～12μg/LPAI：2～10μg/L二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測(cè)定（ELISA法）【臨床意義】

血漿t-PA的影響因素較多，可隨年齡的增加而升高；在劇烈運(yùn)動(dòng)，機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)時(shí)增高。PAI的釋放有明顯的晝夜節(jié)律性，早晨較高，下午較低。一般在上午8～10時(shí)采血較為適宜。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測(cè)定（ELISA法）【臨床意義】

t-PA增高見于應(yīng)激反應(yīng)、劇烈運(yùn)動(dòng)、先天性增高以及纖溶亢進(jìn)時(shí)。降低往往見于高凝狀態(tài)和血栓性疾病、口服避孕藥、肥胖癥等。PAI增高見于血栓性疾病和高凝狀態(tài)，減低見于原發(fā)性或繼發(fā)性纖溶癥。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)(二）血漿組織纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑的測(cè)定（ELISA法）【臨床意義】

t-PA和PAI的檢測(cè)不僅是為了了解纖溶系統(tǒng)激活狀態(tài)，目前在動(dòng)靜脈血栓形成性疾病的診斷、預(yù)后和治療評(píng)價(jià)中也被廣泛應(yīng)用。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（三）血漿纖溶酶原活性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】免疫擴(kuò)散法：受檢血漿（含抗原）加到含抗纖溶酶原（PLG）血清的瓊脂糖擴(kuò)散板中，自然擴(kuò)散一定時(shí)間后，通過(guò)測(cè)定抗原抗體反應(yīng)沉淀弧的直徑來(lái)計(jì)算受檢者血漿纖溶酶原（PLG抗原）含量。其直徑與PLG含量呈正相關(guān)。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（三）血漿纖溶酶原活性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】發(fā)色底物法：受檢血漿中加鏈激酶（SK)和發(fā)色底物（S-2251)，受檢血漿中的PLG在SK的作用下，轉(zhuǎn)變成PL，后者作用于發(fā)色底物，釋出對(duì)硝基苯胺（PNA）而顯色。顯色的深淺與纖溶酶的水平呈正相關(guān)，通過(guò)計(jì)算求得血漿中PLG的活性。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（三）血漿纖溶酶原活性測(cè)定【參考區(qū)間】

免疫擴(kuò)散法：230～340mg/L；發(fā)色底物法：75%～150%。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（三）血漿纖溶酶原活性測(cè)定【臨床意義】1.減低見于先天性纖溶酶原缺乏癥，但更常見于纖溶酶原激活物活性增強(qiáng)的情況，如原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶亢進(jìn)、溶栓治療后、重癥肝炎、肝硬化、肝葉切除術(shù)、大手術(shù)后、腫瘤播散、嚴(yán)重感染等。2.增高見于纖溶活性的降低，如高凝狀態(tài)和血栓性疾病。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（四）血漿a2-抗纖溶酶活性(α2-AP)測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】α2-抗纖溶酶活性（α2-AP:A）發(fā)色底物法：受檢血漿中加入過(guò)量的纖溶酶，使α2-AP與纖溶酶形成復(fù)合物，剩余的纖溶酶作用于發(fā)色底物（HD-Nva-CHA-Lys-PNA)釋出對(duì)硝基苯胺（PNA）而顯色。顯色的深淺與α2-AP呈負(fù)相關(guān)。α2-抗纖溶酶抗原（α2-AP:Ag）,常用雙抗體夾心ELISA檢測(cè)，也可通過(guò)凝膠電泳或免疫比濁法測(cè)定。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（四）血漿a2-抗纖溶酶活性(α2-AP)測(cè)定【參考區(qū)間】

α2-AP:A95.6%±12.8%α2-AP:Ag0.06g～0.10g/L【臨床意義】1.增高見于靜脈、動(dòng)脈血栓形成、惡性腫瘤、分娩后等。2.減低見于有肝病、DIC、手術(shù)后、先天性α2-AP缺乏癥。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（五）血漿硫酸魚精蛋白副凝固(3P)試驗(yàn)【實(shí)驗(yàn)原理】纖維蛋白原在凝血酶作用下釋放出A肽和B肽后轉(zhuǎn)變成纖維蛋白單體(FM)。FM具有自行聚合呈肉眼可見的纖維、絮狀或膠凍裝的特性。如發(fā)生繼發(fā)性纖溶，存在纖維蛋白降解產(chǎn)物，尤其X’片段可和FM形成可溶性復(fù)合物，而硫酸魚精蛋白具有分離這種復(fù)合物的能力，可使FM游離出來(lái)，形成肉眼可見的纖維素樣物質(zhì)，稱為血漿魚精蛋白副凝固試驗(yàn),也稱3P試驗(yàn)。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（五）血漿硫酸魚精蛋白副凝固(3P)試驗(yàn)【參考區(qū)間】陰性。【臨床意義】1.陽(yáng)性見于DIC早期、中期、嚴(yán)重創(chuàng)傷，大手術(shù)，咯血、嘔血以及久置冰箱的樣品。2.DIC晚期和原發(fā)性纖溶（因血中無(wú)FM）時(shí)也表現(xiàn)為陰性，故在區(qū)別原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶時(shí)有一定意義。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（六）血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的檢測(cè)【實(shí)驗(yàn)原理】

膠乳凝集試驗(yàn)（Fi試驗(yàn)）：用特異性抗纖維蛋白（原）D、E片段抗體標(biāo)記的膠乳顆粒與受檢血清混合，如血清中含有纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDP），特別是D、E片段，可發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，導(dǎo)致膠乳顆粒凝集。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（六）血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的檢測(cè)【實(shí)驗(yàn)原理】

膠乳增強(qiáng)散射比濁法：將FDP抗體包被在膠乳顆粒上，然后與FDP結(jié)合，形成FDP抗原抗體復(fù)合物的膠乳凝集顆粒，體積增大，根據(jù)散射光的變化計(jì)算出其含量。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（六）血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的檢測(cè)【實(shí)驗(yàn)原理】

ELISA法：將抗FDP抗體（多克隆或單克隆抗體）包被于固相載體上（酶標(biāo)反應(yīng)板），加入待測(cè)血清或尿液。如存在FDP即發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，形成的復(fù)合物再與酶聯(lián)抗體(過(guò)氧化物酶標(biāo)記的相同抗體）反應(yīng)，以O(shè)PD顯色，讀取的A值與FDP含量呈正比，參照用標(biāo)準(zhǔn)品制成的標(biāo)準(zhǔn)曲線可算出待測(cè)樣品的FDP量。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（六）血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的檢測(cè)【參考區(qū)間】

膠乳凝集法陰性；膠乳增強(qiáng)散射比濁法0～5μg/ml；ELISA法血清（28±17）mg/L。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（六）血漿纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物的檢測(cè)【臨床意義】

血漿FDP增高常見于DIC、急性靜脈血栓、原發(fā)性纖溶癥、鏈激酶等溶栓治療、急性心肌梗死、嚴(yán)重的肺炎、大手術(shù)后、惡性腫瘤和休克等。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】膠乳凝集法：受檢血漿中加入標(biāo)有D-二聚體（DD）單克隆抗體的膠乳顆粒懸液，若血漿中的D-二聚體含量高于0.5mg/L，則與膠乳顆粒標(biāo)記的單抗發(fā)生凝集反應(yīng)。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】膠乳增強(qiáng)散射比濁法：將D-二聚體抗體包被在乳膠顆粒上，然后與D-二聚體結(jié)合，形成D-二聚體抗原抗體復(fù)合物的膠乳凝集顆粒，體積增大，根據(jù)散射光的變化計(jì)算出其含量。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】

ELISA法：將D-二聚體單抗包被于酶標(biāo)反應(yīng)板，加入受檢血漿，血漿中的D-二聚體與包被在反應(yīng)板中的D-二聚體單抗相結(jié)合。然后再加入酶標(biāo)記的D-二聚體抗體，與被包被的D-二聚體結(jié)合。最后加入底物顯色，顯色的深淺與血漿中的D-二聚體含量呈正相關(guān)，所測(cè)吸光度值可從標(biāo)準(zhǔn)曲線中計(jì)算出血漿中D-二聚體的含量。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測(cè)定【參考區(qū)間】

膠乳凝集法陰性；膠乳增強(qiáng)散射比濁法0～256μg/L；ELISA法0～200μg/L。二、纖維蛋白溶解系統(tǒng)檢驗(yàn)（七）血漿D-二聚體（D-dimer，DD）測(cè)定【臨床意義】在繼發(fā)性纖溶、深靜脈血栓、肺栓塞、彌漫性血管內(nèi)凝血、重癥肝炎、肺栓塞等疾病中升高。而在原發(fā)性纖溶時(shí)不增高，是鑒別原發(fā)性纖溶和繼發(fā)性纖溶的重要指標(biāo)，也可作為溶栓治療是否有效的觀察指標(biāo)。陳舊性血栓患者D-二聚體并不升高。第六節(jié)血栓形成與檢驗(yàn)學(xué)習(xí)目標(biāo)

掌握血栓前狀態(tài)實(shí)驗(yàn)室檢查的原理、臨床應(yīng)用及評(píng)價(jià)；了解血栓的分類，血栓的形成機(jī)制及血栓對(duì)機(jī)體的影響。一、基本理論（一）血栓分類1.白色血栓血小板+少量纖維蛋白，動(dòng)脈內(nèi)2.混合血栓頭+體+尾3.紅色血栓RBC+WBC，靜脈內(nèi)4.透明血栓微血栓，微循環(huán)內(nèi)DIC、休克一、基本理論（二）血栓形成機(jī)制1.心血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷2.血小板數(shù)量和活性增高3.血液凝固性增加4.血流狀態(tài)的改變一、基本理論（三）血栓對(duì)機(jī)體的影響1.阻塞血管2.栓塞3.心瓣膜變形4.廣泛性出血二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（一）血漿血栓烷B2檢測(cè)血小板激活后，膜磷脂花生四烯酸代謝亢進(jìn)，生成血栓烷A2，后者極不穩(wěn)定，很快轉(zhuǎn)化為無(wú)生物活性的血栓烷B2（TXB2)。少量血小板在體外活化就可使血漿中TXB2含量可反映花生四烯酸的代謝水平，從而反映血小板是否被激活。二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（一）血漿血栓烷B2檢測(cè)【實(shí)驗(yàn)原理】用血栓烷B2（TXB2）-牛血清白蛋白包被酶標(biāo)反應(yīng)板，加入受檢血漿或TXB2標(biāo)準(zhǔn)品和抗TXB2抗體。包被的TXB2與受檢血漿中或標(biāo)準(zhǔn)品中TXB2競(jìng)爭(zhēng)性與抗TXB2抗體結(jié)合，包被的TXB2與抗體結(jié)合的量與受檢血漿中TXB2的含量成負(fù)相關(guān)。加酶標(biāo)第二抗體及底物，根據(jù)顯色程度推算出樣品的TXB2的含量。二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（一）血漿血栓烷B2檢測(cè)【參考區(qū)間】28.2～124.4ng/L【臨床意義】本實(shí)驗(yàn)受血小板影響因素較大，因此采血后應(yīng)立即試驗(yàn)，并避免一些激活或影響血小板活性的藥物及物品。二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（一）血漿血栓烷B2檢測(cè)【臨床意義】1.TXB2增高見于血栓性疾病和血栓前狀態(tài)，如動(dòng)脈粥樣硬化、心肌梗死、肺梗死、糖尿病、高脂血癥、妊高癥、DVT、惡性腫瘤、大手術(shù)后等。2.TXB2

減低見于先天性血小板花生四烯酸代謝障礙性疾病或服用阿司匹林、磺吡酮、咪唑及其衍生物等藥物后。二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（三）血漿凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物檢測(cè),TAT【實(shí)驗(yàn)原理】

固相包被的兔抗人凝血酶抗體與受測(cè)樣品中的凝血酶AT復(fù)合物結(jié)合，再加入酶標(biāo)鼠抗人AT與固相上的TAT結(jié)合，加入顯色底物顯色，色澤深淺與TAT含量正相關(guān)。【參考區(qū)間】ELISA法：1.0～4.1μg/L二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（三）血漿凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物檢測(cè),TAT【臨床意義】血漿水平在DIC前期即升高，所以TAT可作為DIC及Pre-DIC的診斷指標(biāo)，其特異性和敏感性達(dá)80%～90%。二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（三）血漿凝血酶-抗凝血酶復(fù)合物檢測(cè),TAT【臨床意義】1.TAT含量增高代表FXa增高和凝血活性亢進(jìn)，見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，如DIC、急性心肌梗死、不穩(wěn)定型心絞痛、深靜脈血栓形成、腦梗死、急性白血病等。2.典型DIC時(shí)明顯升高，抗凝治療有效后，TAT下降。在急性心肌梗死的患者接受溶栓治療后，如血漿TAT水平仍高于6μg/L，則有再梗死可能。二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（四）血漿纖溶酶-α2-抗纖溶酶復(fù)合物檢測(cè)【實(shí)驗(yàn)原理】血漿纖溶酶-α2-抗纖溶酶復(fù)合物（PAP）檢測(cè)：用抗纖溶酶原抗體包被微孔板，加入受檢血漿，血漿中纖溶酶原和PAP中纖溶酶原部分與包被抗體結(jié)合于固相載體上。加入過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗α2-抗纖溶酶抗體，它只與已結(jié)合在包被抗體上的PAP中的α2-抗纖溶酶部分結(jié)合。加入鄰苯二胺顯色，顏色的深淺和樣品中的PAP含量呈正相關(guān)。二、血栓前狀態(tài)檢驗(yàn)（四）血漿纖溶酶-α2-抗纖溶酶復(fù)合物檢測(cè)【參考區(qū)間】0.12～0.7mg/L【臨床意義】1.PAP增高見于血栓前狀態(tài)和血栓性疾病，如急性心肌梗死、腦梗死、腦血栓形成、深靜脈血栓形成、腎病綜合癥等。2.PAP水平的增高與DIC的發(fā)展平行，PAP水平的降低與DIC的緩解相關(guān)，在DIC的診斷中具有重要的價(jià)值。第七節(jié)血液流變學(xué)及檢驗(yàn)學(xué)習(xí)目標(biāo)

掌握血液流變學(xué)檢驗(yàn)的原理、注意事項(xiàng)及臨床意義。一、基礎(chǔ)理論（一）血液流動(dòng)性和黏滯性血液流變學(xué)是研究血液的流動(dòng)性和黏滯性、血液中的紅細(xì)胞和血小板的聚集性、血漿的流動(dòng)性、血液和血漿的黏滯性等方面的一門分支科學(xué)。在血管疾病中有重要意義。血液的流動(dòng)性和黏滯性是血液的基本物理特性，它決定血液沿著血管不停地流動(dòng)，以保證人體各器官的血液供應(yīng)，是各個(gè)器官和組織保持正常生理功能的重要因素。

一、基礎(chǔ)理論（一）血液流動(dòng)性和黏滯性血液的流動(dòng)性和黏滯性發(fā)生異常時(shí)，將引起血液流動(dòng)緩慢，使器官和組織缺血、缺氧。嚴(yán)重時(shí)，導(dǎo)致血栓形成，從而阻斷血流，使器官和組織發(fā)生嚴(yán)重缺血、缺氧，繼而水腫、變性，甚至壞死。血液流變學(xué)的研究，有助于對(duì)疾病的病因診斷，以便于利用對(duì)血液流變學(xué)有影響的藥物進(jìn)行干預(yù)，以達(dá)到治療或預(yù)防的目的。一、基礎(chǔ)理論（二）影響血液黏度的因素1.心臟的泵力2.血管的狀態(tài)3.血液的狀態(tài)①血細(xì)胞容積；②紅細(xì)胞的變形性；③紅細(xì)胞聚集性④血漿黏度。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（一）全血黏度測(cè)定血液流動(dòng)時(shí)，其內(nèi)摩擦力阻礙血液的流動(dòng)，這種阻礙血液流動(dòng)的內(nèi)摩擦力就是血液的黏性。度量這種血液黏性的物理量，就是血液黏度，血液黏度的單位用國(guó)際單位制表示，就是毫帕.秒（mPa﹒s）。血黏度是衡量血液流動(dòng)性的指標(biāo)，黏度愈高流動(dòng)性愈差，黏度愈低流動(dòng)性愈好。臨床常用毛細(xì)管黏度計(jì)或旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)進(jìn)行測(cè)量。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（一）全血黏度測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】1.圓筒式黏度計(jì)檢測(cè)法2.錐板式黏度計(jì)檢測(cè)法二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（一）全血黏度測(cè)定【參考區(qū)間】旋轉(zhuǎn)式黏度計(jì)法。男：230s-1時(shí)為(4.53±0.46)mPa.s；11.5s-1時(shí)為(9.31±1.48)mPa.s女：230s-1時(shí)為(4.22±0.41)mPa.s；11.5s-1時(shí)為(8.37±1.22)mPa.s二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（一）全血黏度測(cè)定【臨床意義】1.血液黏度增高：①血管性疾?。焊哐獕骸⒛X卒中（一過(guò)性腦缺血發(fā)作、腦血栓、腦出血）、冠心病（心絞痛、急性心肌梗死）、周圍血管?。ㄏ轮铎o脈血栓、脈管炎、眼視網(wǎng)膜血管病等）；②代謝性疾病：糖尿病、高脂蛋白血癥、高纖維蛋白血癥、高球蛋白血癥；二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（一）全血黏度測(cè)定【臨床意義】1.血液黏度增高：③血液病：原發(fā)性和繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥、原發(fā)性和繼發(fā)性血小板增多癥、白血病、多發(fā)性骨髓瘤；④其他：休克、臟器衰竭、器官移植、肺心病、慢性肝炎、抑郁性精神病、中醫(yī)范圍中的血瘀癥等。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（一）全血黏度測(cè)定【臨床意義】2.血液黏度降低：各種原因所致的貧血和低蛋白血癥。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（二）血漿黏度測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】根據(jù)哈根-泊肅葉定律，在一定體積、壓差、毛細(xì)管管徑條件下，液體的黏度與流過(guò)一定毛細(xì)管管長(zhǎng)所需的時(shí)間成正比。實(shí)際測(cè)量時(shí)，可分別測(cè)定純水和血漿通過(guò)黏度計(jì)毛細(xì)管所用的時(shí)間TW和TP，已知純水的黏度為μw，可按公式（μp=Tp×μw/Tw）計(jì)算出血漿黏度（μp）。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（二）血漿黏度測(cè)定【參考區(qū)間】男性(1.76±0.04)mPa.s

女性(1.78±0.06)mPa.s二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（二）血漿黏度測(cè)定【臨床意義】1.血漿黏度升高最大的可能是纖維蛋白原等鏈狀蛋白升高，高血糖、血脂高引起的血漿黏度一般只是略有升高。血漿黏度增高主要見于多發(fā)性骨髓瘤，原發(fā)性巨球蛋白血癥、冷球蛋白血癥、高脂血癥、高血壓、高纖維蛋白原血癥、DIC等。2.血漿黏度減低見于各種原因引起的血液稀釋及低蛋白血癥等。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（三）紅細(xì)胞聚集性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】紅細(xì)胞沉降率在一定程度上反應(yīng)紅細(xì)胞的聚集性，但受血細(xì)胞比容、血漿黏度、紅細(xì)胞表面電荷、溫度以及血漿與細(xì)胞之間密度差等因素的影響。因此可利用血沉方程求出K值，由K值估計(jì)紅細(xì)胞的聚集性。也可通過(guò)低切變率下血液的相對(duì)黏度(ηr)反映紅細(xì)胞聚集性。【參考區(qū)間】K值為53±20。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（三）紅細(xì)胞聚集性測(cè)定【臨床意義】低切變率下的紅細(xì)胞聚集使血液黏度升高；其升高程度與聚集程度之間呈正相關(guān)。①某種病理原因使紅細(xì)胞表面產(chǎn)生黏著性物質(zhì)；②紅細(xì)胞表面電荷的減少或消失；③基于某種物質(zhì)分子的媒介作用，紅細(xì)胞結(jié)合而發(fā)生聚集；④紅細(xì)胞膜的性質(zhì)發(fā)生變化；二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（三）紅細(xì)胞聚集性測(cè)定【臨床意義】⑤介于紅細(xì)胞之間的長(zhǎng)鏈高分子如：纖維蛋白原，凝血酶原，高分子右旋糖酐，羥基纖維素，聚乙烯氮環(huán)等，都能使紅細(xì)胞發(fā)生強(qiáng)烈的聚集。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（四）紅細(xì)胞變形性測(cè)定紅細(xì)胞變形性是指紅細(xì)胞在外力作用下其形態(tài)變化的能力。紅細(xì)胞的變形性在血液微循環(huán)以及保證組織和器官的代謝活動(dòng)中具有重要作用。血液在高切變率下的黏度低于中、低切變率下的黏度，在高切變率下，紅細(xì)胞沿剪切力的方向發(fā)生變形。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（四）紅細(xì)胞變形性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】1.激光衍射法在不同切變率下，用激光衍射儀測(cè)定在一定的懸浮介質(zhì)中紅細(xì)胞被拉長(zhǎng)的百分比，即紅細(xì)胞變形指數(shù)（DI），DI值越小，紅細(xì)胞變形性越差。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（四）紅細(xì)胞變形性測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】2.微孔濾膜法用緩沖液將待測(cè)紅細(xì)胞配成一定濃度懸液，測(cè)定緩沖紅細(xì)胞懸液通過(guò)一定直徑微孔膜所需要的時(shí)間，并與對(duì)照緩沖液比較，計(jì)算出紅細(xì)胞濾過(guò)指數(shù)（IF）,可反映紅細(xì)胞的變形性，IF越大，紅細(xì)胞變形性越差。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（四）紅細(xì)胞變形性測(cè)定【參考區(qū)間】DI:500sˉ1＞49%，500sˉ1＞56%(15%聚乙烯吡咯烷酮為懸浮介質(zhì))；IF:0.19～0.39。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（四）紅細(xì)胞變形性測(cè)定【臨床意義】溶血性貧血、急性心梗、腦血栓形成、高脂血癥、肝硬化、糖尿病、休克等患者的紅細(xì)胞變形能力都有不同程度的減退。二、血液流變學(xué)檢驗(yàn)（五）紅細(xì)胞電泳時(shí)間測(cè)定【實(shí)驗(yàn)原理】紅細(xì)胞表面帶負(fù)電