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文檔簡介

一、選擇題(每小題3分,共45分)1.(浙江高考)將ada(腺苷酸脫氨酶基因)通過質(zhì)粒pET28b導(dǎo)入大腸桿菌并成功表達腺苷酸脫氨酶。下列敘述錯誤的是()A.每個大腸桿菌細胞至少含一個重組質(zhì)粒B.每個重組質(zhì)粒至少含一個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點C.每個限制性核酸內(nèi)切酶識別位點至少插入一個adaD.每個插入的ada至少表達一個腺苷酸脫氨酶分子解析:選C受體大腸桿菌成功表達腺苷酸脫氨酶,說明每個大腸桿菌細胞至少含有一個重組質(zhì)粒,且每個ada至少指導(dǎo)合成一個腺苷酸脫氨酶分子。重組質(zhì)粒的形成需先用限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒形成相同的黏性末端,再在DNA連接酶的作用下連接起來,連接起來的序列中會含有限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點。不同的限制性核酸內(nèi)切酶識別位點不同,不是每個限制性核酸內(nèi)切酶的識別位點都能插入ada。2.與“限制性核酸內(nèi)切酶”作用部位完全相同的酶是()A.逆轉(zhuǎn)錄酶B.RNA聚合酶C.DNA連接酶D.解旋酶解析:選C限制性核酸內(nèi)切酶作用部位是DNA特定部位的兩個脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵,并將其斷開;DNA連接酶的作用是恢復(fù)被限制性核酸內(nèi)切酶斷開的磷酸二酯鍵,將兩條DNA鏈連接起來,故二者作用部位相同。3.蛋白質(zhì)工程的基本流程是()①蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)設(shè)計②DNA合成③預(yù)期蛋白質(zhì)功能④依據(jù)氨基酸序列推出脫氧核苷酸序列A.①→②→③→④B.④→②→①→③C.③→①→④→②D.③→④→①→②解析:選C蛋白質(zhì)工程的原理是中心法則的逆推。它的基本途徑是:預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推想應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→合成DNA。4.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是()A.限制酶只在獵取目的基因時才用B.重組質(zhì)粒的形成是在細胞內(nèi)完成的C.只要目的基因進入細胞就能成功實現(xiàn)表達D.蛋白質(zhì)的氨基酸排列挨次可能為合成目的基因供應(yīng)線索解析:選D在基因工程中,不僅要用限制酶切割目的基因,還要用同一種限制酶在質(zhì)粒上切割出一個切口,使目的基因與質(zhì)粒切口的黏性末端能進行堿基互補配對;重組質(zhì)粒是在細胞外進行的;目的基因?qū)胧荏w細胞但不肯定能成功表達;在人工合成目的基因的方法中,有一種方法是依據(jù)已知蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推想出相應(yīng)的mRNA序列,然后依據(jù)堿基互補配對原則,推想出它的結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列,最終通過化學方法,以脫氧核苷酸為原料合成目的基因。5.金茶花是中國特有的觀賞品種,但易得枯萎病。科學家在某種植物中找到了抗枯萎病的基因,通過如圖所示的方法培育出了抗枯萎病的金茶花新品種。相關(guān)敘述正確的是()A.圖中①②在基因工程中依次叫做基因表達載體、目的基因B.形成③的操作中使用的酶有限制酶、DNA聚合酶和DNA連接酶C.由④培育至⑤過程中,體現(xiàn)了植物細胞的全能性D.在⑤幼苗中檢測到抗枯萎病基因標志著成功培育新品種解析:選C圖中①②分別是質(zhì)粒、目的基因,A錯誤;形成③的操作中使用的酶有限制酶、DNA連接酶,沒有DNA聚合酶,B錯誤;由④培育至⑤過程中,重組后的金茶花細胞發(fā)育為一個完整的植株,體現(xiàn)了植物細胞的全能性,C正確;在⑤幼苗中檢測到抗枯萎病基因只能說明其含有重組DNA,若要證明成功培育出新品種,必需檢測到目的基因表達的產(chǎn)物,D錯誤。6.(廣東高考)從某海洋動物中獲得一基因,其表達產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強的多肽P1。目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物,首先要做的是()A.合成編碼目的肽的DNA片段B.構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達載體C.依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽D.篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽解析:選C該基因的表達產(chǎn)物多肽P1的抗菌性和溶血性均很強,要研發(fā)出抗菌性強但溶血性弱的多肽藥物,首先應(yīng)依據(jù)P1的氨基酸序列設(shè)計模擬肽,再構(gòu)建相應(yīng)的DNA片段。7.如圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化,圖中依次表示限制性核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶、解旋酶作用的正確挨次是()A.①②③④B.①②④③C.①④②③D.①④③②解析:選C限制性核酸內(nèi)切酶、DNA聚合酶、DNA連接酶三者均作用于磷酸二酯鍵處,限制性核酸內(nèi)切酶使該鍵斷開;DNA聚合酶連接的是單個脫氧核苷酸;DNA連接酶作用于DNA片段;解旋酶作用于氫鍵,使DNA雙鏈打開,形成DNA單鏈。8.甲、乙兩圖表示從細菌細胞中獵取目的基因的兩種方法,以下說法錯誤的是()A.甲方法可建立該細菌的基因組文庫B.乙方法可建立該細菌的cDNA文庫C.甲方法要以脫氧核苷酸為原料D.乙方法需要逆轉(zhuǎn)錄酶參與解析:選C甲方法是以細菌中的DNA為基礎(chǔ),用限制酶進行切割,它包括了細胞全部的基因,可以建立基因組文庫,并且可以從中選出所需的目的基因,而乙方法是用逆轉(zhuǎn)錄的方法人工合成目的基因,它只能得到生物的部分基因,基因中只有編碼區(qū),所以組成的是該細菌的cDNA文庫。9.目的基因?qū)胧荏w細胞后,是否可以穩(wěn)定維持和表達其遺傳特性,只有通過鑒定和檢測才能知道。下列屬于目的基因檢測和鑒定的是()①檢測受體細胞是否有目的基因②檢測受體細胞是否有致病基因③檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA④檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)A.①②③B.②③④C.①③④D.①②④解析:選C目的基因的檢測包括:檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是用DNA探針與基因組DNA雜交;檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,方法是用基因探針與mRNA雜交;檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是進行抗原—抗體雜交。10.科學家為提高玉米中的賴氨酸含量,方案將天冬氨酸激酶的第352位的蘇氨酸變成異亮氨酸,將二氫吡啶二羧酸合成酶的第104位的氨基酸由天冬氨酸變成異亮氨酸,就可以使玉米葉片和種子中的游離賴氨酸含量分別提高5倍和2倍。下列對蛋白質(zhì)的改造,操作正確的是()A.直接通過分子水平改造蛋白質(zhì)B.直接改造相應(yīng)的mRNAC.對相應(yīng)的基因進行操作D.重新合成新的基因解析:選C蛋白質(zhì)工程的目的是對蛋白質(zhì)進行改造,從而使蛋白質(zhì)功能可以滿足人們的需求。而蛋白質(zhì)是由基因把握合成的,對基因進行操作要簡潔得多。另外,改造后的基因可以遺傳,如對蛋白質(zhì)直接改造,即使成功也不能遺傳。11.轉(zhuǎn)基因技術(shù)在植物品種改良方面應(yīng)用廣泛,其中一項基因工程就是改造CO2固定酶。其目的是()A.提高光合作用效率B.延長果實的貯存期C.培育新作物品種D.提高植物的抗性解析:選A光合作用是植物利用光能將CO2和H2O合成可以貯存能量的有機物。改造CO2固定酶,其目的是為了提高光合作用效率。12.科學家已能運用基因工程技術(shù),讓羊的乳腺合成并分泌人體某些種類的抗體,以下敘述不正確的是()A.該技術(shù)可導(dǎo)致定向變異B.表達載體中需加入乳腺蛋白的特異性啟動子C.目的基因是抗原合成基因D.受精卵是抱負的受體細胞解析:選C目的基因應(yīng)當是把握合成相應(yīng)抗體的基因,不是抗原合成基因。13.目前醫(yī)學上,蛋白質(zhì)工程藥物正逐步取代第一代基因工程多肽蛋白質(zhì)類替代治療劑,則基因工程藥物與蛋白質(zhì)工程藥物的區(qū)分是()A.都與自然?產(chǎn)物完全相同B.都與自然?產(chǎn)物不相同C.基因工程藥物與自然?產(chǎn)物完全相同,蛋白質(zhì)工程藥物與自然?產(chǎn)物不相同D.基因工程藥物與自然?產(chǎn)物不相同,蛋白質(zhì)工程藥物與自然?產(chǎn)物完全相同解析:選C基因工程合成的是自然界已存在的蛋白質(zhì),與相應(yīng)自然?產(chǎn)物完全相同。蛋白質(zhì)工程可以合成自然界不存在的蛋白質(zhì),與自然?產(chǎn)物不相同。14.聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)是一種體外快速擴增DNA片段的技術(shù)。PCR過程一般經(jīng)受下述30多次循環(huán):95℃下使模板DNA變性、解鏈→55℃下復(fù)性(引物與DNA模板鏈結(jié)合)→A.變性過程中破壞的是DNA分子內(nèi)堿基對之間的氫鍵,也可利用解旋酶實現(xiàn)B.復(fù)性過程中引物與DNA模板鏈的結(jié)合是依靠堿基互補配對原則完成C.延長過程中需要DNA聚合酶、ATP、四種核糖核苷酸D.PCR與細胞內(nèi)DNA復(fù)制相比所需酶的最適溫度較高解析:選CDNA分子被破壞是指DNA分子被解旋成兩條長鏈,破壞的部位是連接兩條長鏈之間的氫鍵,方法有多種,用解旋酶、高溫等都可使DNA解旋。引物有兩種,分別與模板DNA鏈3′端的序列互補配對。合成DNA的原料是四種脫氧核苷酸。15.某爭辯小組為了研制預(yù)防甲型H1N1流感病毒的疫苗,開展了前期爭辯工作。其簡要的操作流程如圖所示,則下列有關(guān)敘述錯誤的是()甲型H1N1流感病毒eq\o(→,\s\up7(提取))RNAeq\o(→,\s\up7(①))DNAeq\o(→,\s\up7(擴增))H基因eq\o(→,\s\up7(②))eq\x(\a\al(攜帶H基因的,重組表達載體))eq\o(→,\s\up7(③))導(dǎo)入大腸桿菌eq\o(→,\s\up7(④))表達H基因A.步驟①所代表的過程是逆轉(zhuǎn)錄B.步驟②需使用限制性核酸內(nèi)切酶和RNA連接酶C.步驟③可用CaCl2溶液處理大腸桿菌,使其處于感受態(tài)D.檢驗S蛋白的免疫反應(yīng)特性,可用S蛋白與甲型H1N1流感康復(fù)病人的血清進行抗原—抗體特異性反應(yīng)解析:選B步驟②是重組DNA分子的構(gòu)建,需要限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。二、非選擇題(共55分)16.(10分)(海南高考)如圖是將某細菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi),制備“工程菌”的示意圖。據(jù)圖回答:(1)獲得A有兩條途徑:一是以A的mRNA為模板,在________酶的催化下,合成互補的單鏈DNA,然后在________的作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所需基因;二是依據(jù)目標蛋白質(zhì)的________序列,推想出相應(yīng)的mRNA序列,然后依據(jù)堿基互補配對原則,推想其DNA的________序列,再通過化學方法合成所需基因。(2)利用PCR技術(shù)擴增DNA時,需要在反應(yīng)體系中添加的有機物質(zhì)有________、________、4種脫氧核糖核苷三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶,擴增過程可以在PCR擴增儀中完成。(3)由A和載體B拼接形成的C通常稱為________。(4)在基因工程中,常用Ca2+處理D,其目的是__________________________________。解析:(1)利用逆轉(zhuǎn)錄法合成目的基因的過程是:以mRNA為模板,在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下合成單鏈DNA,然后在DNA聚合酶作用下,合成雙鏈DNA分子;依據(jù)蛋白質(zhì)工程合成目的基因的過程是:依據(jù)目標蛋白質(zhì)的氨基酸序列,推想出相應(yīng)的mRNA序列,然后依據(jù)堿基互補配對原則,推想DNA中脫氧核苷酸的排列挨次,通過化學方法合成。(2)PCR過程中需要酶、底物、模板、引物和能量等條件。(3)目的基因和運載體結(jié)合,形成基因表達載體。(4)大腸桿菌作受體細胞時,需要先用Ca2+處理,使之成為感受態(tài)細胞,有利于其吸取重組DNA分子。答案:(1)逆轉(zhuǎn)錄酶DNA聚合酶氨基酸脫氧核苷酸(2)引物模板(A基因)(3)基因表達載體(4)使其成為感受態(tài)細胞,有利于吸取重組DNA分子17.(12分)糖尿病是一種常見病,且發(fā)病率有逐年增加的趨勢,以致西方發(fā)達國家把它列為第三號“殺手”。治療該病的胰島素過去主要從動物(如豬、牛)中獲得,自20世紀70年月遺傳工程(又稱基因工程)進展起來以后,人們開頭接受這種高新技術(shù)生產(chǎn)胰島素,其操作基本過程如圖所示。(1)圖中基因工程的基本過程可概括為“四步曲”,即______________。(2)圖中的質(zhì)粒存在于細菌細胞內(nèi),在基因工程中通常被用作______________,從其分子結(jié)構(gòu)可確定它是一種______________________。(3)依據(jù)堿基互補配對的規(guī)律,在________酶的作用下,把圖中甲與乙拼接起來(即重組),若a段與d段的堿基序列分別是AATTC和CTTAA,則b段與c段分別是________________________________________________________________________。(4)細胞進行分裂后,其中被拼接起來的質(zhì)粒也是由一個變成兩個,兩個變成四個……質(zhì)粒的這種增加方式在遺傳學上稱為________________。目的基因通過活動(即表達)后,能使細菌產(chǎn)生治療糖尿病的激素,這是由于基因具有把握____________合成的功能,它的過程包括____________。解析:人胰島素的大量生產(chǎn),首先利用基因工程把人胰島素基因拼接到大腸桿菌的質(zhì)粒上,培育成“工程菌”,然后利用發(fā)酵工程讓“工程菌”大量繁殖,通過發(fā)酵生產(chǎn)人胰島素。答案:(1)獵取目的基因、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定(2)運載體環(huán)狀DNA分子(3)DNA連接TTAAG、GAATT(4)DNA擴增蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄和翻譯18.(11分)(新課標全國卷)依據(jù)基因工程的有關(guān)學問,回答下列問題:(1)限制酶切割DNA分子后產(chǎn)生的片段,其末端類型有________和________。(2)質(zhì)粒運載體用EcoRⅠ切割后產(chǎn)生的片段如下:AATTC……GG……CTTAA為使運載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制酶切割,該酶必需具有的特點是__________________________。(3)按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即________DNA連接酶和________DNA連接酶。(4)反轉(zhuǎn)錄作用的模板是________,產(chǎn)物是________。若要在體外獲得大量反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,常接受________技術(shù)。(5)基因工程中除質(zhì)粒外,________和________也可作為運載體。(6)若用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌,一般狀況下,不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細胞,緣由是__________________________________。解析:(1)DNA分子經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有黏性末端和平末端兩種類型。(2)為使運載體與目的基因相連,應(yīng)使二者被切割后產(chǎn)生的末端相同,故用另一種限制酶切割產(chǎn)生的末端必需與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的末端相同。(3)依據(jù)酶的來源不同,DNA連接酶分為大腸桿菌(E·coli)DNA連接酶和T4DNA連接酶。(4)以RNA為模板,合成DNA的過程稱為反轉(zhuǎn)錄,若要在體外獲得大量DNA分子,可以使用PCR技術(shù)。(5)在基因工程中,通常利用質(zhì)粒作為運載體,另外噬菌體和動植物病毒也可作為運載體。(6)大腸桿菌作為受體細胞時,常用Ca2+處理,使之成為能吸取四周環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)細胞。答案:(1)黏性末端平末端(2)切割產(chǎn)生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產(chǎn)生的末端相同(其他合理答案也可)(3)大腸桿菌T4(4)mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR(5)噬菌體動植物病毒(其他合理答案也可)(6)未處理的大腸桿菌吸取質(zhì)粒(外源DNA)的力量極弱(其他合理答案也可)19.(12分)“黃金大米”是一種通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)改良的富含β-胡蘿卜素的大米,其合成β-胡蘿卜素的基因來自黃水仙和歐文氏菌,培育流程如圖所示。請回答:(1)過程②構(gòu)建基因表達載體是基因工程的核心步驟,基因表達載體的組成除了復(fù)制原點、目的基因外,還必需有________________以及標記基因等。(2)農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上T-DNA具有______________的特點。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入農(nóng)桿菌之前,常用__________處理該細菌,使細菌處于感受態(tài)。(3)目的基因?qū)胨炯毎姆椒ǔ龍D示外,還有________________、________________。(4)目的基因能否在植株體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是__________________。檢測時常接受的方法是________________________________________________________________________。解析:(1)基因表達載體應(yīng)包含啟動子、終止子、目的基因、標記基因等。(2)T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體的DNA上。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入細菌細胞,應(yīng)先用Ca2+處理細菌細胞,使其成為感受態(tài)細胞。(3)將目的基因?qū)胫参锛毎畛S玫姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,此外還有基因槍法和花粉管通道法等。(4)目的基因能否在植株體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因能否整合到受體細胞染色體的DNA上,檢測方法是DNA分子雜交技術(shù)。答案:(1)啟動子、終止子(2)可轉(zhuǎn)移至受體細胞并且整合到受體細胞染色體的DNA上Ca2+(3)基因槍法花粉管通道法(4)目的基因能否整合到受體細胞染色體的DNA上DNA分子雜交技術(shù)20.(10分)降鈣素是一種多肽類激素,臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低,半衰期較短。某科學機構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素,從預(yù)期新型降鈣素的功能動身,推想相應(yīng)的脫氧核苷酸序列,并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈,兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段,再利用Klenow酶補平,獲得雙鏈D

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