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第2講微生物的培育和利用(時間:30分鐘)一、選擇題1.(2021·東城區(qū)檢測)欲從土壤中分別出能分解尿素的細(xì)菌,下列試驗(yàn)操作中不正確的是 ()。A.將土壤用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋B.同一濃度的土壤稀釋液應(yīng)至少涂布三個平板C.可將未接種的培育基在相同條件下培育作為對比D.用加入剛果紅指示劑的培育基可篩選出分解尿素的細(xì)菌解析本題考查微生物的分別與培育,意在考查考生的試驗(yàn)分析力量。為了獲得單個菌落,應(yīng)將土壤用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋,A正確;為了使結(jié)果更加精確?????,同一濃度的土壤稀釋液至少要涂布3個平板進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn),然后計(jì)算平均值,B正確;加入剛果紅的培育基用來篩選纖維素分解菌,D錯誤。答案D2.(2021·廣東深圳一模,2)某學(xué)者欲爭辯被石油污染過的土壤中細(xì)菌數(shù)量,并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯誤的是 ()。A.利用平板劃線法對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)B.用以石油為唯一碳源的培育基篩選C.接受稀釋涂布平板法分別菌種D.稱取和稀釋土壤時應(yīng)在火焰旁解析平板劃線法能對細(xì)菌分別純化,但不能對細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù),稀釋涂布平板法可以分別菌種還可進(jìn)行計(jì)數(shù),A項(xiàng)錯誤。答案A3.(2021·成都???分別土壤中分解尿素的細(xì)菌,對培育基的要求是 ()。①加尿素②不加尿素③加瓊脂④不加瓊脂⑤加葡萄糖⑥不加葡萄糖⑦加硝酸鹽⑧不加硝酸鹽A.①③⑤⑦B.①③⑤⑧C.②④⑥⑧D.①④⑥⑦解析土壤中分解尿素的細(xì)菌能夠利用尿素作為氮源,因此若培育基中氮源只有尿素,分解尿素的細(xì)菌能生長,其他微生物不能生長;分別微生物要用固體培育基,必需加入瓊脂;土壤中分解尿素的細(xì)菌屬于異養(yǎng)型微生物,需要加葡萄糖作為碳源。答案B4.(2021·成都???關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的敘述錯誤的是()。A.操作挨次為計(jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.等培育基冷卻至50℃左右時進(jìn)行倒平板D.待平板冷卻凝固5~10min后將平板倒過來放置解析操作挨次為先滅菌再倒平板;牛肉膏會黏附在稱量紙上,應(yīng)當(dāng)將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯;培育基冷卻至50℃左右既沒有凝固,同時又不燙手,可以進(jìn)行倒平板;為了防止冷卻過程中培育皿蓋上凝集的水珠對平板的污染,培育基冷卻凝固后就要將平板倒過來放置。答案A5.(2021·淮陰期末質(zhì)量調(diào)研,14)如圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的挨次為12345。下列操作方法正確的是 ()。A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B.劃線操作應(yīng)在火焰上進(jìn)行C.在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D.在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌解析本題考查平板劃線操作方法。在每次劃線前后都要對接種環(huán)進(jìn)行滅菌,接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒,接種時劃線操作是在火焰旁進(jìn)行。在5個區(qū)域中,只要有單個活細(xì)菌,通過培育即可獲得所需菌落。答案D6.(2022·東城區(qū)檢測)下列關(guān)于微生物分別和培育的敘述,錯誤的是 ()。A.微生物培育前,需對培育基進(jìn)行消毒B.測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目,常用菌落計(jì)數(shù)法C.分別土壤中不同的微生物,要接受不同的稀釋度D.分別能分解尿素的細(xì)菌,要以尿素作為培育基中的唯一氮源解析微生物培育前,需對培育基進(jìn)行滅菌,而不是消毒;測定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目,常用菌落計(jì)數(shù)法;分別土壤中不同的微生物,要接受不同的稀釋度,由于不同的微生物在土壤中的含量不同;分別能分解尿素的細(xì)菌,要以尿素作為培育基中的唯一氮源。答案A7.(經(jīng)典高考)下列是關(guān)于“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”試驗(yàn)操作的敘述,其中錯誤的是 ()。A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上C.將試驗(yàn)組和對比組平板倒置,37℃恒溫培育24~48hD.確定對比組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的試驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)解析本題以“檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)”試驗(yàn)為命題點(diǎn),考查考生對基礎(chǔ)學(xué)問的識記狀況。在細(xì)菌計(jì)數(shù)時,為保證結(jié)果精確?????,一般選擇菌落數(shù)目在30~300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。答案D二、非選擇題8.(203·濰坊三模A卷)白僵菌高孢粉是國家林業(yè)局推廣的高效生物殺蟲劑之一,應(yīng)用于多種林木和農(nóng)作物害蟲的防治。白僵菌分生孢子在寄主表皮、氣孔或消化道上,遇適宜條件開頭萌發(fā),生出芽管。同時產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶、幾丁質(zhì)酶等溶解昆蟲的表皮,通過芽管入侵蟲體,在蟲體內(nèi)生長繁殖,消耗寄主體內(nèi)養(yǎng)分,產(chǎn)生各種毒素,形成大量菌絲和孢子,布滿蟲體全身。請回答下面的問題:(1)從自然菌樣中篩選較抱負(fù)的生產(chǎn)用菌種的一般步驟是:采集菌樣→富集培育→________→性能測定。白僵菌的菌樣應(yīng)從________采集。(2)分別白僵菌菌種的培育基屬于________培育基。在配制白僵菌培育基時常加入蔗糖、硫酸銨、硝酸鉀等成分,蔗糖屬于________養(yǎng)分物質(zhì)。(3)白僵菌純化培育常用的接種方法是________和________。(4)分別與培育過程中,培育基和接種工具都要進(jìn)行________處理,利用高溫可以使微生物的________等物質(zhì)發(fā)生變性。答案(1)純化分別感病昆蟲(2)選擇碳源(3)平板劃線法稀釋涂布平板法或稀釋混合平板法(4)滅菌蛋白質(zhì)和核酸9.(2021·山東濰坊一模,34)某試驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌,設(shè)計(jì)試驗(yàn)步驟如下,請賜予合理的補(bǔ)充。(1)采樣與培育:將采集的土樣混勻后稱取1g,置于經(jīng)過________法滅菌處理的________(填“固體”或“液體”)培育基中,28℃振蕩培育。(2)接種與選擇:為避開培育液中菌體濃度過高,需將培育液進(jìn)行________處理之后,將菌液涂布接種于以________為唯一碳源的固體培育基上,30℃條件下培育。為避開污染,需將培育皿呈________狀態(tài)放置。(3)篩選與純化:將適量的碘液滴加在平板中的菌落四周,假如菌落四周的現(xiàn)象是________,則說明此種菌能夠________。從平板中挑取試驗(yàn)效果明顯的目的菌株,接受________法接種于新的培育基平板,可對菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化。答案(1)高壓蒸汽滅菌液體(2)系列稀釋(或“梯度稀釋”)淀粉倒置(3)消滅透亮?????圈分泌淀粉酶使淀粉發(fā)生水解(平板)劃線10.(2021·棗莊一模)為驗(yàn)證某種中藥牙膏是否像其廣告宣揚(yáng)的一樣具有較強(qiáng)的抑菌功效,某生物愛好小組的同學(xué)設(shè)計(jì)了如下試驗(yàn)(符合無菌操作要求)。請分析下述試驗(yàn)過程并回答下列問題。①用無菌水漱口,向漱口液中加入適量的該中藥牙膏;②配制牛肉膏蛋白胨固體培育基;③將上述樣品接種到培育基上,在適宜條件下進(jìn)行培育;④一段時間后,對培育結(jié)果進(jìn)行觀看并進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的一般步驟是:計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、________;培育基在分裝前往往要進(jìn)行________。(2)本試驗(yàn)樣品接種時最好接受________法。培育一段時間后,培育基表面長出菌落,每一個標(biāo)準(zhǔn)菌落來源于樣品中的________。(3)食品平安檢測時通常接受大腸桿菌作為致病微生物的指示菌,為測定哪些菌屬于大腸桿菌,可選用________培育基對菌落進(jìn)行鑒定,大腸桿菌的菌落在該培育基上呈現(xiàn)黑色。(4)本試驗(yàn)設(shè)計(jì)中的一個明顯錯誤是________,請加以改正_________________________________________________________________。(5)證明所用培育基已經(jīng)徹底滅菌的方法是_____________________________。答案(1)倒平板高壓蒸汽滅菌(2)稀釋涂布平板一個活菌(3)伊紅—美藍(lán)(4)沒有設(shè)置對比試驗(yàn)應(yīng)將漱口液分為兩份,一份加牙膏,一份不加牙膏分別接種培育(5)對未接種的培育基進(jìn)行培育,如無菌落消滅,則證明培育基已徹底滅菌11.(2021·淄博二模)生物乙醇是以生物質(zhì)為原料生產(chǎn)的可再生能源,工業(yè)上利用微生物將木屑、廢紙(主要成分為木質(zhì)纖維)轉(zhuǎn)化為乙醇的基本工藝流程如圖所示,請回答:(1)篩選微生物X菌種的培育基中,應(yīng)以________為唯一碳源,在培育基中加入________,并依據(jù)水解圈的大小來篩選微生物X。(2)微生物篩選常用的接種方法有________和________。(3)下表為篩選時,同一培育基上的單細(xì)胞形成的菌落狀況:菌落編號菌落直徑/mm水解圈直徑/mm菌落特征27菌絲較粗而長,菌落干燥呈絨毛狀或棉絮狀,有霉味②12③25④313⑤311微生物X應(yīng)是______________,篩選時應(yīng)選擇________號菌落,理由是________________________________________________________________。(4)微生物Y主要是________。答案(1)纖維素剛果紅(2)平板劃線法稀釋涂布平板法(3)霉菌④生長速度快,纖維素酶產(chǎn)量(活性)高(4)酵母菌12.蘋果醋具有養(yǎng)分豐富,增加機(jī)體免疫力,護(hù)膚養(yǎng)肝等多種功效,以鮮蘋果汁為原料利用發(fā)酵瓶制作果酒和果醋的過程簡圖如下,請分析并回答:(1)過程甲中使用的微生物是________。將鮮蘋果汁裝入發(fā)酵瓶時,要留有大約________的空間,經(jīng)過10~12天后,在酸性條件下用重鉻酸鉀檢測樣液,假如顏色變?yōu)開_______色,說明產(chǎn)生了酒精。(2)過程乙中使用的微生物是________,可以從食醋中分別純化獲得,步驟如下:第一步:配制________(填“固體”或“液體”)培育基。其次步:對培育基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。第三步:接種。微生物常用的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法。第四步:培育。溫度把握在________℃范圍內(nèi)。第五步:選擇符合要求的___________________________________________。(3)在________________的條件下,假如缺少糖源,乙中的微生物將甲過程的產(chǎn)物變?yōu)開_______________,再將其變?yōu)榇姿帷=馕?1)制作果酒應(yīng)選用酵母菌。將鮮蘋果汁裝入發(fā)酵瓶時,要留有大約eq\f(1,3)的空間。重鉻酸鉀溶液與酒精反應(yīng)呈灰綠色。(2)制作果醋應(yīng)選用醋酸菌;分別純化菌種需要固體培育基;醋酸菌生長的最適溫度為30~35℃。(3)氧氣充分時,假如缺少糖源,醋酸菌會將乙醇變?yōu)橐胰?,再將其變?yōu)榇姿?。答?1)酵母菌eq\f(1,3)灰綠(2)醋酸菌固體30~35菌落(3)氧氣充分(有氧)乙醛13.(2021·西安統(tǒng)考)35%~40%的甲醛水溶液(福爾馬林)可作為防腐劑,其防腐的原理是使蛋白質(zhì)變性。自然界中有能分解甲醛的細(xì)菌和真菌。下圖為分別和純化分解甲醛細(xì)菌的試驗(yàn)過程。請分析回答:(1)②過程的目的是________________________________________________,③過程培育出的是_________________________________________________。(2)上述試驗(yàn)中,不需要進(jìn)行滅菌處理的是________,培育基滅菌的常用方法為_______________________________________________________________。(3)由③→④的接種可選用________法,通過培育能獲得________。經(jīng)過⑤過程后,取樣測定甲醛濃度,選出________,再分別、培育菌株。此菌種異化作用的類型是___________________________________________________。(4)為爭辯甲醛初始濃度對菌株降解甲醛力量的影響,進(jìn)行了相應(yīng)試驗(yàn)并得到如下結(jié)果。由圖可知,當(dāng)甲醛的初始濃度小于1200mg/L時,菌株________;當(dāng)甲醛的初始濃度增高至1600mg/L時,48h后菌株對甲醛的降解力量很弱,甚至失去降解力量,其緣由可能是_______________________________________________________
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