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PAGEPAGE7第36講微生物的培育與應(yīng)用測(cè)控導(dǎo)航表學(xué)問(wèn)點(diǎn)題號(hào)1.無(wú)菌技術(shù)1,2,32.微生物的分別與培育4,5,6,7,93.微生物的篩選與計(jì)數(shù)8,124.綜合考查10,11,13,14一、選擇題1.下列操作與消毒或滅菌無(wú)關(guān)的是(C)A.接種前用火焰灼燒接種環(huán)B.接種前用酒精擦拭雙手C.將平板倒置,放入培育箱中培育D.接種在酒精燈的火焰旁完成解析:接種用具、器皿上以及空氣中都有微生物,都有導(dǎo)致污染的可能,必需嚴(yán)格消毒、滅菌。A、B、D三項(xiàng)都屬于試驗(yàn)操作過(guò)程中的消毒或滅菌。將平板倒置,放入培育箱中培育是為了防止雜菌污染,不屬于消毒或滅菌。2.在微生物培育過(guò)程中,須要對(duì)培育基等進(jìn)行滅菌,其標(biāo)準(zhǔn)是(C)A.殺死全部的病原微生物B.殺死全部的微生物的細(xì)胞C.殺死全部微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生長(zhǎng)解析:滅菌是指利用劇烈的理化因素殺死物體內(nèi)外全部的微生物,包括芽孢和孢子。3.下列有關(guān)倒平板的敘述,錯(cuò)誤的是(C)A.在酒精燈的火焰旁進(jìn)行操作B.將打開(kāi)的錐形瓶瓶口快速通過(guò)酒精燈的火焰C.將培育皿打開(kāi),培育皿蓋倒放在桌面上D.待平板冷卻凝固后須要倒過(guò)來(lái)放置解析:整個(gè)倒平板過(guò)程要防止外來(lái)雜菌的入侵,因此,應(yīng)在酒精燈的火焰旁進(jìn)行操作,打開(kāi)的錐形瓶瓶口應(yīng)快速通過(guò)酒精燈的火焰。培育皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙進(jìn)行操作,不能將培育皿蓋完全打開(kāi)。平板冷卻凝固后須要倒過(guò)來(lái)放置。4.微生物培育是微生物工程中的基礎(chǔ)技術(shù)。下列相關(guān)敘述正確的是(C)A.病毒和細(xì)菌的培育基成分相同B.平板劃線法中的劃線是連續(xù)進(jìn)行的C.微生物培育基中并不都必需添加碳源或氮源D.在培育的過(guò)程中,細(xì)胞種類(lèi)、數(shù)目都不斷地增加解析:病毒是寄生生物,在活細(xì)胞中才能進(jìn)行生命活動(dòng);平板劃線法是為了稀釋菌種,劃線間斷進(jìn)行;微生物培育基依據(jù)須要添加相應(yīng)的碳源和氮源;在培育的過(guò)程中,細(xì)胞的數(shù)目不斷地增加,種類(lèi)不增加。5.下列有關(guān)用平板劃線法和稀釋涂布平板法純化大腸桿菌的敘述,正確的是(B)①都須要用固體培育基②都須要運(yùn)用接種針進(jìn)行接種③都須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種④都可以用菌落數(shù)來(lái)計(jì)數(shù)活菌A.①② B.①③ C.②④ D.③④解析:平板劃線法和稀釋涂布平板法都是為了在培育基表面形成單個(gè)菌落,所以都須要用固體培育基,①正確;稀釋涂布平板法不須要運(yùn)用接種針進(jìn)行接種,②錯(cuò)誤;為防止雜菌污染,操作時(shí)都須要在酒精燈火焰旁進(jìn)行接種,③正確;平板劃線法不能用于計(jì)數(shù)活菌,只能用于分別菌種,稀釋涂布平板法可以用來(lái)計(jì)數(shù)活菌,④錯(cuò)誤。6.下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分別及運(yùn)用的敘述,不合理的是(A)A.篩選培育基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖供應(yīng)生長(zhǎng)養(yǎng)分B.可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌C.在分別平板上長(zhǎng)出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的實(shí)力D.用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價(jià)值解析:分別產(chǎn)纖維素酶菌時(shí),篩選培育基中應(yīng)以纖維素作為唯一碳源;富含腐殖質(zhì)的林下土壤中纖維素多,故含有能分解纖維素的產(chǎn)纖維素酶菌;用篩選培育基分別得到的菌落只是初步篩選,還需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的實(shí)力;用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈,可將纖維素分解為小分子物質(zhì),動(dòng)物食用后易消化汲取,故可提高其飼用價(jià)值。7.下列關(guān)于微生物的試驗(yàn)室培育技術(shù)的表述,正確的是(D)A.溶化時(shí)將稱(chēng)好的牛肉膏從稱(chēng)量紙上干脆倒入燒杯B.常見(jiàn)的消毒方法包括灼燒、煮沸、紫外線和噴灑化學(xué)試劑等C.配制固體培育基時(shí)加入瓊脂,其目的是為微生物生長(zhǎng)供應(yīng)碳源D.用移液管稀釋菌液時(shí),吹吸三次的目的是使菌液與水充分混勻解析:稱(chēng)好的牛肉膏要連同稱(chēng)量紙一起放入燒杯,待牛肉膏與稱(chēng)量紙分別后,用玻璃棒取出稱(chēng)量紙;灼燒屬于滅菌方法,不屬于消毒方法;瓊脂可以作為固體培育基的凝固劑,而不能為微生物供應(yīng)碳源;吹吸三次可以使菌液混合勻稱(chēng),使試驗(yàn)結(jié)果更加精確。8.下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”試驗(yàn)操作的敘述,其中錯(cuò)誤的是(D)A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B.取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上C.將試驗(yàn)組和比照組平板倒置,37℃恒溫培育24~48hD.確定比照組無(wú)菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的試驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)解析:檢測(cè)細(xì)菌總數(shù),用蒸餾水配制培育基,常用高壓蒸汽滅菌法滅菌后,取104、105、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1mL,分別涂布于各組平板上,將試驗(yàn)組和比照組放置在相宜條件下培育,在確定比照組無(wú)菌后,選擇菌落數(shù)在30~300的平板為代表進(jìn)行計(jì)數(shù)。9.要將能分解纖維素的細(xì)菌從土壤中分別出來(lái),應(yīng)將它們接種在(C)A.加入指示劑的鑒別培育基上B.含有蛋白胨的固體培育基上C.只含纖維素粉而無(wú)其他碳源的選擇培育基上D.含四大養(yǎng)分要素的培育基上解析:選擇纖維素分解菌的培育基中應(yīng)含有該種菌生長(zhǎng)發(fā)育所需的養(yǎng)分條件,其他菌種在這種培育基中不能生存。10.下列關(guān)于微生物培育和利用的敘述不正確的是(A)A.利用稀釋涂布平板法只能分別微生物不能對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)B.接種時(shí)連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋獲得單菌落C.以尿素為唯一氮源且含酚紅的培育基可選擇和鑒別尿素分解菌D.用大白菜腌制泡菜的過(guò)程中亞硝酸鹽含量改變是先增加后削減解析:用稀釋涂布平板法可以分別微生物也可以對(duì)微生物進(jìn)行計(jì)數(shù);接種時(shí)劃線可以將菌體分散,最終得到單個(gè)菌體細(xì)胞,經(jīng)過(guò)培育可以得到單個(gè)菌落;以尿素為唯一氮源且含酚紅的培育基可選擇和鑒別尿素分解菌;在泡菜的腌制過(guò)程中,起先亞硝酸鹽含量增加,10天后含量起先下降。二、非選擇題11.牛奶中富含蛋白質(zhì),長(zhǎng)期飲用有助于增加體質(zhì),但牛奶同時(shí)也是多種疾病的傳播載體。國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)是每毫升牛奶中細(xì)菌數(shù)小于30000個(gè)。以下是牛奶消毒及細(xì)菌檢測(cè)試驗(yàn)。分析回答:(1)圖中步驟①稱(chēng)為消毒法。步驟②是。
(2)培育基中的蛋白胨可以為微生物供應(yīng)。進(jìn)行步驟③操作時(shí),應(yīng)選用下列中的哪種工具?(填字母)。為了避開(kāi)雜菌污染,此步驟應(yīng)在旁邊進(jìn)行。
(3)將接種后的培育基和作為比照的同時(shí)放入37℃恒溫培育箱中,培育36小時(shí)。取出后統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù),結(jié)果如下表所示。應(yīng)當(dāng)選擇其中稀釋倍數(shù)為的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),經(jīng)過(guò)消毒后的牛奶中,細(xì)菌數(shù)大約是個(gè)/mL。
牛奶稀釋倍數(shù)102103104平板1菌落數(shù)87101平板2菌落數(shù)83121平板3菌落數(shù)85100解析:(1)80℃恒溫水浴15min是巴氏消毒法,步驟②是進(jìn)行系列稀釋(或梯度稀釋)。(2)培育基中的蛋白胨可以為微生物供應(yīng)碳源、氮源(和維生素),③是接種,因?yàn)轫氁?jì)數(shù),需用稀釋涂布平板法,接種工具是B涂布器;為了避開(kāi)雜菌污染,此步驟應(yīng)在酒精燈火焰旁邊進(jìn)行。(3)統(tǒng)計(jì)各平板的菌落數(shù)時(shí),應(yīng)選擇菌落數(shù)在30~300的計(jì)數(shù),經(jīng)過(guò)消毒后的牛奶中,細(xì)菌數(shù)大約是(87+83+85)÷3×102=8500(個(gè))。答案:(1)巴氏系列稀釋(或梯度稀釋)(2)碳源、氮源(和維生素)B酒精燈火焰(3)一個(gè)未接種的培育基102850012.已知一種有機(jī)物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會(huì)造成環(huán)境污染。某小組用三種培育基篩選土壤中能高效降解X的細(xì)菌(目標(biāo)菌)。Ⅰ號(hào)培育基:在牛肉膏蛋白胨培育基中加入X(5g/L)。Ⅱ號(hào)培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無(wú)機(jī)鹽(適量),X(15g/L)。Ⅲ號(hào)培育基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無(wú)機(jī)鹽(適量),X(45g/L)。回答下列問(wèn)題:(1)在Ⅰ號(hào)培育基中,為微生物供應(yīng)氮源的是,Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基中為微生物供應(yīng)碳源的有機(jī)物是。
(2)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號(hào)液體培育基中,培育一段時(shí)間后,不能降解X的細(xì)菌比例會(huì),其緣由是。
(3)Ⅱ號(hào)培育基加入瓊脂后可以制成固體培育基,若要以該固體培育基培育目標(biāo)菌并對(duì)菌落進(jìn)行計(jì)數(shù),接種時(shí),應(yīng)采納的方法是。
(4)假設(shè)從Ⅲ號(hào)培育基中得到了能高效降解X的細(xì)菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長(zhǎng)供應(yīng)和。
解析:(1)氮源是微生物生長(zhǎng)須要的一類(lèi)養(yǎng)分物質(zhì),牛肉膏、蛋白胨來(lái)源于動(dòng)物原料,含有糖、維生素和有機(jī)氮等養(yǎng)分物質(zhì),因此在Ⅰ號(hào)培育基中,可為微生物供應(yīng)氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生長(zhǎng)所須要的一類(lèi)養(yǎng)分物質(zhì),可為微生物的生長(zhǎng)供應(yīng)碳元素,而有機(jī)物均含碳元素,Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基均含有有機(jī)物X,因此,Ⅱ、Ⅲ號(hào)培育基為微生物的生長(zhǎng)供應(yīng)碳源的均為有機(jī)物X。(2)由于Ⅱ號(hào)培育基含有的碳源只有有機(jī)物X,因此若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號(hào)液體培育基中,培育一段時(shí)間后,能降解X的細(xì)菌能夠增殖,不能降解X的細(xì)菌由于無(wú)法獲得碳源而無(wú)法增殖導(dǎo)致其比例削減。(3)微生物的接種常用的有平板劃線法與稀釋涂布平板法,由于稀釋涂布平板法中,稀釋度足夠高的菌液經(jīng)涂布培育后,在培育基表面形成的一個(gè)菌落是由菌液中的一個(gè)活菌繁殖而來(lái),所以常用來(lái)進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)。(4)丙酮酸參加有氧呼吸的其次階段,能被分解產(chǎn)生能量,且丙酮酸可作為很多物質(zhì)合成的中間產(chǎn)物,因此其可為微生物的生長(zhǎng)供應(yīng)能量和合成其他物質(zhì)的原料。答案:(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細(xì)菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細(xì)菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料13.下面表格是某公司研發(fā)的一種培育大腸桿菌的培育基配方,請(qǐng)結(jié)合所學(xué)學(xué)問(wèn),回答下列相關(guān)問(wèn)題:成分含量蛋白胨10.0g乳糖5.0g蔗糖5.0gK2HPO42.0g顯色劑(伊紅美藍(lán))0.2g瓊脂12.0g將上述物質(zhì)溶解后,用蒸餾水定容到1000mL(1)依據(jù)用途劃分,該培育基屬于培育基,若要分別能分解尿素的細(xì)菌,需對(duì)培育基作出的最關(guān)鍵的調(diào)整是,若還需鑒定分解尿素的細(xì)菌,需作出的調(diào)整是。
(2)從培育基的成分上看,大腸桿菌的同化類(lèi)型為。該培育基能否分別篩選出大腸桿菌?為什么?
。
(3)在試驗(yàn)室培育微生物時(shí),獲得純凈培育物的關(guān)鍵是,紫外線可對(duì)空氣進(jìn)行滅菌的緣由是。
(4)某同學(xué)嘗試純化大腸桿菌,其中一個(gè)平板的菌落分布如上圖,推想該同學(xué)接種時(shí)可能的操作失誤是。
解析:(1)伊紅美藍(lán)是鑒定大腸桿菌的試劑,因此該培育基從用途上屬于鑒別培育基;若要分別能分解尿素的細(xì)菌,則須要保證培育基中以尿素為唯一氮源,即將蛋白胨換成尿素;鑒定分解尿素的細(xì)菌,須要運(yùn)用酚紅作為指示劑。(2)大腸桿菌須要從培育基中獲得碳源,因此其同化作用類(lèi)型是異養(yǎng)型;據(jù)表可知,此培育基中的碳源種類(lèi)很多,可供多種微生物生存,因此該培育基不能分別篩選出大腸桿菌。(3)微生物培育時(shí),關(guān)鍵是防止外來(lái)雜菌的感染;空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅,其緣由是紫外線能讓蛋白質(zhì)變性,同時(shí)還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)。(4)由圖可知,該同學(xué)采納的是稀釋涂布平板法,但菌落比較集中,沒(méi)有很好的分散開(kāi)來(lái),可能是涂布不勻稱(chēng)導(dǎo)致的。答案:(1)鑒別將蛋白胨換成尿素將伊紅美藍(lán)換成酚紅(2)異養(yǎng)型不能,緣由是培育基中的碳源種類(lèi)很多,可供多種微生物生存(3)防止外來(lái)雜菌的入侵紫外線能使蛋白質(zhì)變性,還能破壞DNA的結(jié)構(gòu)(4)涂布不勻稱(chēng)14.菠蘿酒養(yǎng)分豐富,具有肯定的保健功能。為探討甲、乙、丙、丁四種酵母菌釀制菠蘿酒的效果,探討人員進(jìn)行了有關(guān)試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果如下圖所示:回答下列問(wèn)題:(1)接種酵母菌前,需對(duì)菠蘿汁用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌,為保證達(dá)到滅菌效果,在鍋內(nèi)的水加熱煮沸后,必需將,滅菌時(shí)間應(yīng)從時(shí)起先計(jì)時(shí)。菠蘿汁不用干熱滅菌法滅菌的緣由是
。
(2)甲、乙、丙、丁四種酵母菌釀制菠蘿酒效果最差的是。6~7d,丁組酒精度不再上升的緣由有(答1點(diǎn))。
(3)利用菠蘿果酒制作菠蘿果醋,發(fā)酵過(guò)程要始終保持有氧狀態(tài),緣由是。
解析:(1)接種酵母菌前,需對(duì)菠蘿汁用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌,為保證達(dá)到滅菌效果,在鍋內(nèi)的水加熱煮沸后,必需將鍋內(nèi)冷空氣徹底解除,滅菌時(shí)間應(yīng)從達(dá)到設(shè)定的溫度或壓力值時(shí)起先計(jì)時(shí)。干熱滅菌法針對(duì)耐高溫且須要保持干燥的物品,若選干熱滅菌法
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