動物細胞融合和單克隆抗體

考綱考情

2013海南2014新課標Ⅰ

高考指數(shù):★★★動物細胞融合與單克隆抗體Ⅱ知識回顧1.動物細胞融合過程：動物細胞A動物細胞B誘導(dǎo)，融合2個完整的雜交細胞AB有絲分裂（膜融合、質(zhì)融合）（核融合）突破了有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能。主要是應(yīng)用雜交瘤技術(shù)制造單克隆抗體2.意義：3.應(yīng)用：三、動物細胞融合方法？4.植物體細胞雜交和動物細胞融合比較比較項目植物體細胞雜交動物細胞融合原理融合前處理誘導(dǎo)方法用途意義細胞膜的流動性、植物細胞的全能性細胞膜的流動性用纖維素酶、果膠酶去壁用胰蛋白酶使細胞分散物理、化學方法物理、化學、生物方法獲得部分或完整植株主要用于制備單克隆抗體考點疑難分析克服遠源雜交不親和的障礙突破有性雜交方法的局限，使遠緣雜交成為可能（討論歸納）

高考仿真題練1.(2016·?？谀M)(1)動物細胞誘導(dǎo)融合運用的原理是____________，該過程中區(qū)別于原生質(zhì)體融合的方法是用__________處理。細胞膜具有流動性滅活病毒2.科學工作者用綠色和紅色熒光材料，分別標記人和鼠的細胞膜上的蛋白質(zhì)。當兩個標記細胞融合成一個細胞后，起初一半膜發(fā)出綠色熒光，另一半膜發(fā)出紅色熒光，一段時間后，兩種顏色的熒光點均勻分布，如圖所示。請分析回答：⑴該實驗結(jié)果說明了細胞膜

，這是因為⑵若在兩個細胞融合成一個細胞后，將融合細胞置于0℃條件下再保持40min，則融合細胞仍然是一半膜發(fā)綠色熒光，另一半膜發(fā)紅色熒光，這說明具有一定的流動性

構(gòu)成細胞膜的磷脂分子和蛋白質(zhì)大都是可以運動的膜的流動性受溫度影響，在低溫下分子的運動受抑制1.單克隆抗體的概念單個B細胞克隆產(chǎn)生的化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體將單個B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞分泌的四、單克隆抗體(1)單克隆抗體：(2)制備原理：知識回顧B-B

B-瘤

瘤-瘤（未融合的B、瘤）（一選）選擇性培養(yǎng)基：只有雜交瘤細胞才能存活獲得產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B細胞（二選）：選能產(chǎn)生所需專一抗體的雜交瘤細胞√體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細胞特點：既能產(chǎn)生特異性抗體，又能大量增殖。2.單克隆抗體制備過程B淋巴細胞骨髓瘤細胞誘導(dǎo)融合B-B細胞B-瘤細胞瘤-瘤細胞選擇培養(yǎng)基雜交瘤細胞（B-瘤細胞）克隆化培養(yǎng)抗體檢測產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞體外培養(yǎng)小鼠腹腔內(nèi)增殖單克隆抗體2.單克隆抗體制備過程圖解（用箭頭和文字寫出概念圖）知識自主構(gòu)建提純（討論歸納）共有幾種細胞？（1）為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合小鼠骨髓瘤細胞可大量增殖，B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體。（2）骨髓瘤細胞是癌細胞嗎

有無限增殖能力的細胞是腫瘤細胞，具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細胞，稱為癌細胞，所以說，瘤細胞不能等于癌細胞。感悟拓展（3）整個制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選第一次篩選得到雜交瘤細胞（多種）第二次需先在多孔培養(yǎng)板上，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養(yǎng)，然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。

3.單克隆抗體的應(yīng)用：（1）作為診斷試劑：準確識別各種抗原物質(zhì)，并與抗原特異性結(jié)合（2）用于運載藥物：制成“生物導(dǎo)彈”治療疾?。褐饕糜诎┌Y治療優(yōu)點：準確、高效、簡易、快速單克隆抗體的優(yōu)點：優(yōu)點:療效高、毒副作用小特異性強，靈敏度高，能大量制備。（2013年海南卷）31.(15分)單純皰疹病毒I型HSV-I)可引起水泡性口唇炎。利用雜交瘤技術(shù)制備出抗SV-1的單克隆抗體可快速檢測HSV-1?；卮鹣铝袉栴}：

(1)在制備抗HSV-I的單克隆抗體的過程中，先給小鼠注射一種純化的HSV-1蛋白，一段時間后，若小鼠血清中抗_

的抗體檢測呈陽性，說明小鼠體內(nèi)產(chǎn)生了___反應(yīng)，再從小鼠的___

_中獲取B淋巴細胞。將該B淋巴細胞與小鼠的___

_

細胞融合，再經(jīng)過篩選、檢測，最終可獲得所需的雜交瘤細胞，該細胞具有的特點是___。：HSV—1蛋白體液免疫脾臟無限增值且產(chǎn)生專一抗體骨髓瘤真題感悟(2)若要大量制備抗該蛋白的單克隆抗體，可將該雜交瘤細胞注射到小鼠的____

中使其增殖，再從___

_中提取、純化獲得。(3)通過上述方法得到的單克隆抗體可準確地識別這種HSV-I蛋白，其原因是該抗體具有

__和__

__等特性。腹腔腹水純度高特異性強2014新課標Ⅰ卷(第40題)（15分）某研究者用抗原（A）分別免疫3只同種小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測定各小鼠血清抗體的效價（能檢測出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù)），結(jié)果如下圖所示。

若要制備雜交瘤細胞，需取免疫后小鼠的B淋巴細胞（染色體數(shù)目40條），并將該細胞與體外培養(yǎng)的小鼠骨髓瘤細胞（染色體數(shù)目60條）按一定比例加入試管中，再加入聚乙二醇誘導(dǎo)細胞融合，經(jīng)篩選培養(yǎng)及抗體檢測，得到不斷分泌抗A抗體的雜交瘤細胞?；卮鹣铝袉栴}：：真題感悟（1）制備融合所需的B淋巴細胞時，所用免疫小鼠的血清抗體效價需達到16000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過____次免疫后才能有符合要求的。達到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細胞的是____小鼠，理由是___4Y（2）細胞融合完成后，融合體系中除含有未融合的細胞和雜交瘤細胞外，可能還有

，體系中出現(xiàn)多種類型細胞的原因是

。（3）雜交瘤細胞中有

個細胞核，染色體數(shù)目最多是

條。（4）未融合的B淋巴細胞經(jīng)多次傳代培養(yǎng)后都不能存活，原因是

。Y小鼠的血清抗體效價最高骨髓瘤細胞相互融合形成的細胞淋巴細胞相互融合形成的細胞細胞融合是隨機的且融合率達不到100%1100不能無限增殖1.(2016·河南名校測試）(1)單克隆抗體制備過程中涉及的細胞工程技術(shù)有______________________。(2)單克隆抗體的特點是：__________________。特異性強、靈敏度高、并可大量制備動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合高考仿真題練(1)若A細胞是小鼠骨髓瘤細胞，則B細胞是取自小鼠體內(nèi)的

細胞，從小鼠體內(nèi)提取分離該細胞之前，應(yīng)給小鼠注射_____________類物質(zhì)。（2）d過程是一個_____________過程，該過程的進行常用_____________或_____________的誘導(dǎo)。(3)假設(shè)僅考慮某兩個細胞的融合，則可形成

種類型的C細胞，因此需用__________培養(yǎng)基篩選出D細胞用于培養(yǎng)，D細胞的名稱是

，其特點是_________________________________________。效應(yīng)B

抗原

細胞融合

聚乙二醇滅活的病毒

選擇性3既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體

雜交瘤細胞2.(2015·甘肅模擬)根據(jù)圖解回答問題：(4)在培養(yǎng)時通過________分裂方式大量繁殖。D細胞體外培養(yǎng)需要注意的條件是（要求答5項）__________________________________。（5）單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預(yù)防方面，與常規(guī)抗體相比，其特點是_________________。特異性強、靈敏度高

有絲無菌、無毒的環(huán)境；充足的營養(yǎng)；適宜的溫度和pH；適宜的氣體環(huán)境

兩個過程動物細胞融合過程單克隆抗體制備過程三個“一”一個誘導(dǎo)細胞融合的新方法－－滅活病毒一個新細胞－－雜交瘤細胞一個優(yōu)勢－－單克隆抗體特異性強、靈敏度高的優(yōu)勢課堂小結(jié)重點課后作業(yè)：三維設(shè)計P104知命題熱點二、11、右圖為某同學根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計的生產(chǎn)破傷風桿菌抗體的實驗方案。據(jù)圖回答：

（1）該方案能達到預(yù)期效果嗎？。原因是

________________________________

______________。

（2）圖中②為

過程，常用

作為誘導(dǎo)劑。該細胞繼承了_____________________

，因此不僅能分泌

___________，還有

本領(lǐng)。

不能

沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生專一抗體的B淋巴細胞

細胞融合

滅活病毒

雙親細胞的遺傳物質(zhì)

特異性抗體

大量增殖制備單克隆抗體（3）該方案的目的是_________________________。能力提升1、字體安裝與設(shè)置如果您對PPT模板中的字體風格不滿意，可進行批量替換，一次性更改各頁面字體。在“開始”選項卡中，點擊“替換”按鈕右側(cè)箭頭，選擇“替換字體”。（如下圖）在圖“替換”下拉列表中選擇要更改