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DB32Qualityofsemi-glutinousjaponicaricewithgoodtaste江蘇省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布I宋錦花、魏海燕、趙春芳、魏曉東、陳濤、趙慶勇、趙凌、姚姝、周麗慧、路凱、梁文12規(guī)范性引用文件GB/T5491糧食、油料檢驗(yàn)扦樣GB/T21719稻谷整精米GB/T22294糧油檢驗(yàn)大米膠稠度NY/T593食用稻品種品質(zhì)NY/T2639稻米直鏈淀粉的測(cè)定分光光度法半糯粳稻semi-glutinousjaponicarice優(yōu)良食味半糯粳稻semi-glutinousjaponicaricewithgoodtaste2鑒別標(biāo)記identificationmolecular4質(zhì)量要求4.1基本質(zhì)量要求4.2定等質(zhì)量指標(biāo)一二三整精米率/%123膠稠度/mm5.5透明度檢驗(yàn):按照NY/T831(規(guī)范性)變(圖A.1)。僅在第4外顯子第53位堿基發(fā)生G-A突變的為Wx"基因,生G-A突變和第5外顯子第52位堿基發(fā)生T-C突變的為Wx"基因,僅在第6外顯子第62位堿基發(fā)生A/C突變的為Wx"基因。利用四引物擴(kuò)增受阻突變體系PCR技術(shù)可針對(duì)第4和第6外顯子的變異位點(diǎn)進(jìn)行分子標(biāo)記檢測(cè);利用成對(duì)引物可針對(duì)第5外顯子的變異位點(diǎn)進(jìn)行PCR擴(kuò)增和序列分析,根據(jù)突變位點(diǎn)的有無(wú)和類型,來(lái)判斷是否含有突變基因Wx"、Wx"Q和WxCAGTTT1A.2儀器設(shè)備成像系統(tǒng)、微量可調(diào)移液器(2uL、10uL、100uL、1000uL)。A.3.2PCR擴(kuò)增試劑A.3.3電泳試劑2A.3.4DNA回收試劑A.5分子標(biāo)記序列正向外引物(Wxmq/Wxmp-O-F)序列為5A.5.2用于鑒定Wxmw的分子標(biāo)記序列3A.8.1瓊脂糖凝膠制備A.8.2上樣樣品制備A.8.4凝膠成像將電泳后的瓊脂糖凝膠放于凝膠成像系統(tǒng)的紫外光源下進(jìn)行PCR擴(kuò)增產(chǎn)物觀察,拍照備用。對(duì)引物Wxmq-F/R擴(kuò)增得到的PCR條A.9結(jié)果分析A.9.1分子標(biāo)記檢測(cè)結(jié)果分析利用四引物Wxmq/Wxmp-O-F/O-R/I-F/I-R分4第5外顯子1:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATTACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCCTTCTTTGCCAG2:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATcACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCC3:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATTACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCCTTCTTTGCCAG4:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATcACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCCT5:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCCTTCT6:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATTACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCCTTCTTTGCCAG7:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATTACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCCTTCTTTGCCAG8:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATTACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCCT9:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATTACAAAGACAACCAGATGCGTTTCAGCCTTCTTTGCCAG10:GTTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGACACTGGAGTTGATTACAAAGACAACCAGATG11:GTTTGGGGAAAGACCOGTGAGAAGATCTACOGACCTGACACTGGAGTTGATridACAAAGACAACCAGATGCG12:GTTGGGGAAAGACCGGTGAGAAGATCTACGGACCTGAC

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