2025年浙教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年浙教版選擇性必修3生物下冊(cè)階段測試試卷287考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、將馬鈴薯胰蛋白酶抑制劑基因Pin-Ⅱ?qū)霔顦浼?xì)胞，培育成了抗蟲楊樹。下圖表示含目的基因的DNA分子和農(nóng)桿菌質(zhì)粒，圖中Apr表示氨芐青霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因；箭頭表示識(shí)別序列完全不同的4種限制酶的酶切位點(diǎn)。下列敘述不正確的是（）

A.目的基因插入到質(zhì)粒的T-DNA上，才能整合到受體細(xì)胞染色體中B.為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRI和PstIC.成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)為不抗氨芐青霉素、抗新霉素D.可用DNA分子雜交或抗原-抗體雜交技術(shù)檢測目的基因是否表達(dá)2、培養(yǎng)人細(xì)胞與小鼠細(xì)胞的融合細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞會(huì)隨機(jī)丟失來自人細(xì)胞的染色體，在僅含有人的1號(hào)染色體的融合細(xì)胞中，合成出人的尿苷單磷酸激酶。下列有關(guān)敘述中，不合理的是A.與人或小鼠細(xì)胞相比，融合細(xì)胞發(fā)生了遺傳物質(zhì)的改變B.研究方法中需要選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和細(xì)胞融合誘導(dǎo)技術(shù)C.在融合細(xì)胞中，人的1號(hào)染色體DNA與小鼠DNA發(fā)生了重組D.這種研究可能發(fā)現(xiàn)人的某一特定基因與特定染色體的關(guān)系3、新型冠狀病毒可通過表面的刺突蛋白（S蛋白）與人呼吸道黏膜上皮細(xì)胞的ACE2受體結(jié)合；侵入人體，引起肺炎。單克隆抗體可阻斷病毒對(duì)細(xì)胞的粘附或入侵，故抗體藥物的研發(fā)已成為治療新冠肺炎的研究熱點(diǎn)之一。圖為篩選；制備抗S蛋白單克隆抗體的示意圖。下列相關(guān)敘述，不正確的是（）

A.給圖中小鼠注射S蛋白，一段時(shí)間后從小鼠的脾臟中提取B細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞融合B.經(jīng)HAT培養(yǎng)篩選出來的雜交瘤細(xì)胞在體外擴(kuò)大培養(yǎng)，便可大量生產(chǎn)出抗S蛋白單克隆抗體C.單克隆抗體可以制成診斷盒，用于疾病的診斷D.與血清抗體相比，該方法制備的單克隆抗體靈敏度更高4、下圖表示利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人抗凝血酶Ⅲ的過程，①②③為相關(guān)操作步驟，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.①需要將人抗凝血酶Ⅲ基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等重組在一起B(yǎng).早期胚胎與代孕羊子宮建立的生理和組織聯(lián)系不影響移入胚胎的遺傳特性C.在③前最好取處于囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定D.通過該操作步驟得到的轉(zhuǎn)基因羊只有乳腺細(xì)胞含有人抗凝血酶Ⅲ基因5、人的血清白蛋白（HAS）在臨床上需求量很大，通常從血液中提取，成本較高。如果將人的血清白蛋白基因?qū)肽膛＜?xì)胞中，利用奶牛乳汁來生產(chǎn)血清白蛋白，能夠極大地降低成本，且安全高效。下圖是利用奶牛乳汁生產(chǎn)HAS的過程圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.①進(jìn)入③之前，必須構(gòu)建基因表達(dá)載體，⑥進(jìn)入⑦之前，必須取滋養(yǎng)層做性別鑒定B.在⑥階段移植的胚胎為桑葚胚或囊胚C.該過程綜合利用了核移植、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和胚胎移植等工程技術(shù)D.血清蛋白基因只在牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)與特定的啟動(dòng)子有關(guān)6、大腸桿菌經(jīng)溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA就會(huì)纏繞在細(xì)胞壁碎片上，靜置一段時(shí)間，質(zhì)粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質(zhì)粒DNA。用三種限制酶處理提取的產(chǎn)物，電泳結(jié)果如圖所示。下列關(guān)于質(zhì)粒的粗提取和鑒定的敘述不正確的是（）

A.提取DNA時(shí)可加入酒精，使溶于酒精的蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解B.將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑進(jìn)行鑒定C.電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理D.根據(jù)電泳結(jié)果，質(zhì)粒上一定沒有限制酶I和II的切割位點(diǎn)，而有限制酶III的切割位點(diǎn)7、實(shí)踐表明，普通的單克隆抗體易被人體的免疫系統(tǒng)識(shí)別為異源蛋白而被清除。為解決這一問題，科研工作者對(duì)人源性單克隆抗體進(jìn)行了研究，具體的操作過程如下：先用人的抗體基因取代小鼠的抗體基因，獲得轉(zhuǎn)基因小鼠；然后從接受抗原刺激的轉(zhuǎn)基因小鼠體內(nèi)獲取B淋巴細(xì)胞，使這些B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)過篩選之后獲得雜交瘤細(xì)胞用于單克隆抗體的制備。以下敘述錯(cuò)誤的是（）A.獲取轉(zhuǎn)基因小鼠時(shí)，常用顯微注射法將目的基因?qū)胄∈笫芫袯.B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合時(shí)，可以利用滅活的病毒進(jìn)行誘導(dǎo)C.對(duì)融合后獲得的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)即可獲得大量的單克隆抗體D.人源性單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、抗原性低等特點(diǎn)8、為探究抗生素對(duì)細(xì)菌的選擇作用，將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養(yǎng)基上（如下圖），一段時(shí)間后測量并記錄抑菌圈的直徑。從抑菌圈邊緣的菌落上挑取細(xì)菌擴(kuò)大培養(yǎng)，重復(fù)實(shí)驗(yàn)2~5次。下列敘述不正確的是（）

A.接種時(shí)，將高濃度菌液涂布在平板培養(yǎng)基上B.①處濾紙片上不含抗生素，起對(duì)照作用C.重復(fù)2~5次實(shí)驗(yàn)后，抑菌圈的直徑會(huì)變大D.抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細(xì)菌抗藥性較強(qiáng)9、科學(xué)家將相關(guān)基因?qū)塍w細(xì)胞，使其成為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）。將iPSC與心肌細(xì)胞融合，獲得雜交細(xì)胞（Hybridcell）。一定條件下分別誘導(dǎo)iPSC和雜交細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化，統(tǒng)計(jì)其分化率，結(jié)果如圖。相關(guān)說法不正確的是（）

A.向心肌細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果B.誘導(dǎo)多能干細(xì)胞和雜交細(xì)胞都具有分化能力C.誘導(dǎo)20d后iPSC和雜交細(xì)胞都不再分化D.臨床使用前需評(píng)估兩種細(xì)胞致癌的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)卷人得分二、多選題(共5題，共10分)10、大多數(shù)哺乳動(dòng)物的早期胚胎具有調(diào)節(jié)發(fā)育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以發(fā)育成一個(gè)完整的胎兒，調(diào)節(jié)能力隨著發(fā)育進(jìn)程逐漸減弱甚至消失。晚期桑椹胚分割后分離的卵裂球仍具有調(diào)整發(fā)育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而發(fā)育至囊胚。下列說法正確的是（）A.桑椹胚的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能B.桑椹胚不同部位的細(xì)胞致密化程度不同C.胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇D.胚胎發(fā)育到原腸胚階段，可將其取出向受體移植11、2022年6月10日；世界首例體細(xì)胞克隆北極狼在北京呱呱墜地?？寺”睒O狼的供體細(xì)胞來自哈爾濱極地公園引進(jìn)的一只野生北極狼的皮膚樣本，卵母細(xì)胞來自一只處于發(fā)情期的母犬，代孕母體則是一只比格犬?？寺∵^程如圖所示，下列有關(guān)敘述正確的是（）

A.體細(xì)胞核移植技術(shù)比胚胎干細(xì)胞核移植技術(shù)更易成功B.用電刺激、Ca2+載體等方法激活重構(gòu)胚，促進(jìn)其分裂發(fā)育C.圖中細(xì)胞分裂、分化形成克隆胚胎的過程中發(fā)生了基因重組D.體細(xì)胞核移植技術(shù)有望用于增加瀕危動(dòng)物的種群數(shù)量12、高溫淀粉酶在大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)中有很大的實(shí)用性。研究者從熱泉中篩選高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌；其篩選過程如下圖1所示。將得到的菌懸液轉(zhuǎn)接于同時(shí)含有葡萄糖和淀粉作碳源的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，得到若干菌落后用碘液作顯色處理，看到如下圖2所示情況。下列選項(xiàng)正確的是（）

A.過程①②合稱為稀釋涂布平板法B.甲乙試管中的液體均為選擇培養(yǎng)基C.Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上的接種方法為平板劃線法D.圖2中周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種13、下列關(guān)于限制酶和DNA連接酶的理解，錯(cuò)誤的是（）A.限制酶能在特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的氫鍵，將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來C.在基因工程操作中，可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶D.限制酶廣泛存在于動(dòng)植物體內(nèi)，微生物內(nèi)很少分布14、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素評(píng)卷人得分三、填空題(共5題，共10分)15、人們按照微生物對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）16、本課題對(duì)能分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行了初步的篩選。但是，這只是分離純化菌種的第一步。對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定，還需要借助生物化學(xué)的方法。在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中，細(xì)菌合成的___________將尿素分解成了_____________。氨會(huì)使培養(yǎng)基的________________，pH______________。因此，我們可以通過檢測培養(yǎng)基______________來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生。在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_____________，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變________________。17、原核基因采取______獲得，真核基因是______。人工合成目的基因的常用方法有______和______。18、去除DNA中的雜質(zhì)，可以直接在DNA粗提取液中加入___________，反應(yīng)10—15分鐘，嫩肉粉中的________________能夠分解_______________。19、我國中科院神經(jīng)科學(xué)研究所團(tuán)隊(duì)率先攻克了體細(xì)胞克隆靈長類動(dòng)物這一世界難題?他們首次成功培育出體細(xì)胞克隆猴，分別叫中中和華華（下圖）?猴子與人類同屬靈長類，此前克隆靈長類動(dòng)物在技術(shù)上存在著不可逾越的障礙?克隆猴的誕生打破了這個(gè)障礙，也再次引起人們對(duì)于克隆人的擔(dān)憂和猜測?

從1997年宣布克隆羊多莉（上圖）的出生，到2018年克隆猴中中?華華的誕生，這期間一些科學(xué)家試圖克隆人?舉例說出克隆人面臨哪些倫理問題?_____評(píng)卷人得分四、綜合題(共4題，共8分)20、圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因（tetr)和氨芐青霉素抗性基因（ampr）。請(qǐng)回答下列問題：

（1）EcoRV酶切位點(diǎn)為EcoRV酶切出來的線性載體P1為___________末端。

（2）用TaqDNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段；其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理，在兩端各添加了一個(gè)堿基為___________的脫氧核苷酸，形成P2；P2和目的基因片段在__________酶作用下，形成重組質(zhì)粒P3。

（3）為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落；采用含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選，得到A；B、C三類菌落，其生長情況如下表（“+”代表生長，“﹣”代表不生長）。根據(jù)表中結(jié)果判斷，應(yīng)選擇的菌落是__________（填表中字母）類，另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是_____、________________。

（4）為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒，擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置，PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是__________。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp片段，原因是_______________。21、乳酸菌中的谷氨酸脫羧酶（GAD）能消耗H+將谷氨酸轉(zhuǎn)化為y-氨基丁酸（GABA）；GABA在制藥；食品等方面具有較大應(yīng)用。研究人員從泡菜樣品中篩選高產(chǎn)GABA的乳酸菌株，并優(yōu)化其發(fā)酵條件?；卮鹣铝袉栴}：

（1）已知MRS固體培養(yǎng)基因含有碳酸鈣而不透明，乳酸菌所產(chǎn)的酸可與碳酸鈣發(fā)生反應(yīng)，從而在培養(yǎng)基上形成____________。從功能上判斷，MRS培養(yǎng)基可作為乳酸菌的___________培養(yǎng)基。

（2）利用MRS培養(yǎng)基分離純化乳酸菌時(shí)，首先需用_________對(duì)泡菜濾液進(jìn)行梯度稀釋，然后再結(jié)合其他方法篩選出具高產(chǎn)GABA特性的乳酸菌。進(jìn)行梯度稀釋的目的是__________________。

（3）研究人員對(duì)高產(chǎn)菌株產(chǎn)GABA的發(fā)酵時(shí)間和溫度分別進(jìn)行了研究；結(jié)果顯示，發(fā)酵時(shí)間在48～60h范圍內(nèi)，GABA的相對(duì)產(chǎn)量較高；發(fā)酵溫度在35～39℃范圍內(nèi)，GABA的相對(duì)產(chǎn)量較高。研究人員認(rèn)為，要進(jìn)一步提高GABA相對(duì)產(chǎn)量，以達(dá)到最佳生產(chǎn)效果，還需同時(shí)對(duì)發(fā)酵時(shí)間和發(fā)酵溫度進(jìn)行優(yōu)化。請(qǐng)為該優(yōu)化實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄表。

______22、下圖為雞血細(xì)胞中DNA的粗提取和鑒定實(shí)驗(yàn)過程中的部分操作示意圖；請(qǐng)據(jù)圖分析，回答下列問題：

（1）上述圖示中，該實(shí)驗(yàn)的正確操作順序是__________________（用序號(hào)與箭頭表示）。

（2）在提取過程中使用不同濃度的NaCl溶液的目的是______________。

（3）步驟①的目的是____________，其依據(jù)原理是__________________。

（4）實(shí)驗(yàn)室還可以利用香蕉等植物樣品提取DNA，利用植物組織提取DNA時(shí)，須先破碎細(xì)胞，破碎細(xì)朐時(shí)需添加食鹽和_____________進(jìn)行研磨，添加后者的目的是_____________。

（5）由于雞血較難找到，某學(xué)生試圖用豬血代替，結(jié)果沒有成功，其原因最可能是________________。23、現(xiàn)代人追求高效率；高品質(zhì)的健康生活；因此市場上果汁飲料、果酒、果醋越來越受到人們的青睞。請(qǐng)回答：

(1)在果酒釀造過程中，發(fā)酵罐先____________，促進(jìn)酵母菌大量繁殖，然后密閉，有利于獲得更多的酒精產(chǎn)物。若產(chǎn)物中生成了酒精，使用酸性重鉻酸鉀試劑檢驗(yàn)呈現(xiàn)____________色。

(2)在果酒釀造過程中，如果果汁滅菌不嚴(yán)格，含有醋酸菌，在酒精發(fā)酵旺盛時(shí)，醋酸菌能否將果汁中的糖發(fā)酵為酸并說明理由？_____________________。

(3)當(dāng)缺少糖源時(shí)仍可進(jìn)行醋酸發(fā)酵，其反應(yīng)式為_______________。

(4)為了進(jìn)一步提高果酒的品質(zhì)，我們?cè)诶冒l(fā)酵工程生產(chǎn)果酒時(shí)要向發(fā)酵罐內(nèi)接種優(yōu)良品種的酵母菌，某生物興趣小組在用平板劃線法分離優(yōu)良品種的酵母菌時(shí)，進(jìn)行了如圖操作：其中較明顯的一處錯(cuò)誤是不要____________，在第二次劃線前灼燒接種環(huán)，目的是_________。

參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、D【分析】【分析】

1；基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

2；分析圖示可知；為保證目的基因的完整性，不能選用BamHⅠ酶；為了防止目的基因自身環(huán)化，應(yīng)選用目的基因兩側(cè)的兩種不同的限制酶；重組質(zhì)粒中至少要保留一個(gè)抗生素的抗性基因，PstI和TthⅢ1只能選其中一個(gè)；綜上所述，可選用EcoRI和PstI或者EcoRI和TthⅢ1，為保留重組質(zhì)粒中的復(fù)制原點(diǎn)，最好選用EcoRI和PstI同時(shí)切割目的基因和質(zhì)粒。

【詳解】

A；農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞；并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上，根據(jù)這一特點(diǎn)，將目的基因插入到質(zhì)粒的T-DNA上，才能整合到受體細(xì)胞染色體中，A正確；

B；由分析可知；為使目的基因與質(zhì)粒高效重組，最好選用EcoRI和PstI同時(shí)切割目的基因和質(zhì)粒，B正確；

C；由分析可知；應(yīng)選用EcoRI和PstI切割質(zhì)粒，氨芐青霉素抗性基因被破壞，故成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)為不抗氨芐青霉素、抗新霉素，C正確；

D；檢測目的基因是否表達(dá)應(yīng)檢測是否成功產(chǎn)生蛋白質(zhì)；可用抗原-抗體雜交技術(shù)，D錯(cuò)誤。

故選D。2、C【分析】【分析】

【詳解】

A；融合細(xì)胞細(xì)胞會(huì)隨機(jī)丟失來自人細(xì)胞的染色體；這就發(fā)生遺傳物質(zhì)的改變，A正確；

B；適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基用來選擇融合細(xì)胞；常用PEG,滅活病毒和電激來誘導(dǎo)細(xì)胞融合，B正確；

C；在僅含有人的l號(hào)染色體的融合細(xì)胞中；合成出人的尿苷單磷酸激酶，表明人的l號(hào)染色體有人的尿苷單磷酸激酶基因，并無證據(jù)說明人的1號(hào)染色體DNA與小鼠DNA發(fā)生了重組，C錯(cuò)；

D；因?yàn)槿诤霞?xì)胞會(huì)隨機(jī)丟失來自人細(xì)胞的染色體；可以借助此方法來研究某個(gè)細(xì)胞的特定性狀與特定染色體的關(guān)系，D正確。

故選C

【點(diǎn)睛】3、B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用之一；此過程中需要先注射抗原，使生物體產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞，再將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，并篩選出能產(chǎn)生特異性抗體和大量增殖的雜交瘤細(xì)胞，最后經(jīng)過體內(nèi)和體外培養(yǎng)獲取單克隆抗體。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)；靈敏度高，并可能大量制備的優(yōu)點(diǎn)。

【詳解】

A；給圖中小鼠注射S蛋白；檢測到小鼠血清出現(xiàn)S蛋白抗體之后，說明小鼠已經(jīng)產(chǎn)生了相應(yīng)的體液免疫過程，這時(shí)從脾臟中獲得相應(yīng)B淋巴細(xì)胞，并誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合，A正確；

B；經(jīng)HAT培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞經(jīng)克隆化培養(yǎng)后還需進(jìn)行抗體檢測才能用于單克隆抗體的生產(chǎn)；B錯(cuò)誤；

C；根據(jù)抗原-抗體特異性結(jié)合的原理；將單克隆抗體制成診斷盒，用于疾病的診斷，C正確；

D；一般抗血清中的抗體是一群識(shí)別不同抗原部位的抗體混合物；而單克隆抗體識(shí)別抗原部位具有專一性，所以單克隆抗體比血清抗體的靈敏度更高，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】4、D【分析】【分析】

動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器是基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)平臺(tái)；使外源基因?qū)雱?dòng)物基因組中并定位表達(dá)于動(dòng)物乳腺，利用動(dòng)物乳腺天然；高效合成并分泌蛋白的能力，在動(dòng)物的乳汁中生產(chǎn)一些具有重要價(jià)值產(chǎn)品的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的總稱。據(jù)圖分析，圖中人抗凝血酶Ⅲ屬于目的基因，過程①表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（供體羊的受精卵），常用的方法是顯微注射法；過程②表示早期胚胎培養(yǎng)；過程③表示胚胎移植技術(shù)。

【詳解】

A；過程①表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（供體羊的受精卵）；因此，需要將人抗凝血酶Ⅲ基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等重組在一起，A正確；

B；早期胚胎與代孕羊子宮建立的生理和組織聯(lián)系后；受體只是為胚胎的發(fā)育提供相應(yīng)的環(huán)境和發(fā)育過程所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，對(duì)胚胎不會(huì)造成影響，B正確；

C；用囊胚期胚胎進(jìn)行性別鑒定時(shí)；可用分割針分割部分滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定，C正確；

D；通過乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)得到的轉(zhuǎn)基因羊每個(gè)有核細(xì)胞都含有人抗凝血酶Ⅲ基因；但只有乳腺細(xì)胞表達(dá)了人抗凝血酶Ⅲ基因，D錯(cuò)誤。

故選D。5、A【分析】【分析】

分析題圖：①是目的基因（血清白蛋白基因）；②～③表示采用轉(zhuǎn)基因技術(shù)；將目的基因（血清白蛋白基因）導(dǎo)入受體細(xì)胞的過程；④是重組細(xì)胞；⑤是早期胚胎；⑤～⑥采用了胚胎分割技術(shù)，對(duì)囊胚進(jìn)行胚胎分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割；⑥～⑦表示胚胎移植過程；⑧是轉(zhuǎn)基因生物（乳腺生物反應(yīng)器）。

【詳解】

A；在⑤的囊胚階段DNA分析；進(jìn)行性別鑒定，取樣部位為滋養(yǎng)層細(xì)胞，A錯(cuò)誤；

B；⑥階段移植的胚胎為桑葚胚或囊胚；B正確；

C；以上過程涉及的現(xiàn)代生物學(xué)技術(shù)中；屬于細(xì)胞工程的有核移植技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；屬于胚胎工程的是早期胚胎培養(yǎng)、胚胎分割、胚胎移植，C正確；

D；啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合和識(shí)別的位點(diǎn)；用于驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，血清白蛋白基因只在奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)與是否有啟動(dòng)子有關(guān)，故要使人血清白蛋白基因在轉(zhuǎn)基因奶牛的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)將其與（牛）乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組，D正確。

故選A。6、D【分析】【分析】

DNA的粗提取和鑒定：利用DNA不溶于酒精；某些蛋白質(zhì)溶于酒精，以及DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同，可以將DNA與蛋白質(zhì)分離開；在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，因此二苯胺試劑可以作為鑒定DNA的試劑。

【詳解】

A；DNA在冷酒精中溶解度很低；提取DNA時(shí)加入酒精，是為了讓DNA析出，蛋白質(zhì)等物質(zhì)溶解，A正確；

B；將提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液后；可用二苯胺試劑在沸水條件進(jìn)行鑒定，DNA遇二苯胺試劑會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色，B正確；

C；DNA帶負(fù)電；電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會(huì)向著它所帶電荷相反的電極移動(dòng)的原理，C正確；

D；因?yàn)橘|(zhì)粒的本質(zhì)是環(huán)狀的DNA；限制酶Ⅰ和Ⅱ處理后電泳只有一條條帶，可能是該質(zhì)粒上有一個(gè)切割位點(diǎn)，也可能沒有切割位點(diǎn)，D錯(cuò)誤。

故選D。7、C【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；在動(dòng)物轉(zhuǎn)基因技術(shù)中；常采用顯微注射法將目的基因?qū)雱?dòng)物的受精卵，A正確；

B；常用滅活病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合；其原理是病毒表面的糖蛋白和一些酶能夠與細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生作用，使細(xì)胞相互凝聚，細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布，細(xì)胞膜打開，細(xì)胞發(fā)生融合，B正確；

C；用特定的選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)之后；篩選得到的雜交瘤細(xì)胞需經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，多次篩選才能獲得分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，C錯(cuò)誤；

D；經(jīng)過轉(zhuǎn)基因技術(shù)改造小鼠之后；獲得的抗體是由人的抗體基因編碼的，所以稱為人源性單克隆抗體，能夠有效解決鼠源性單克隆抗體被人體識(shí)別為異源蛋白的問題，即具有特異性強(qiáng)、靈敏度高、抗原性低等特點(diǎn)，D正確。

故選C。8、C【分析】【分析】

本實(shí)驗(yàn)的思路為：將含抗生素的濾紙片放到接種了大腸桿菌的平板培養(yǎng)基上；濾紙片周圍會(huì)出現(xiàn)抑菌圈，在抑菌圈邊緣生長的細(xì)菌可能是耐藥菌；若抗生素對(duì)細(xì)菌起選擇作用，則隨著培養(yǎng)次數(shù)增多，耐藥菌的比例增大，在連續(xù)培養(yǎng)幾代后，抑菌圈的平均直徑變小。

【詳解】

A；將高濃度菌液涂布在平板培養(yǎng)基上；使平板上長出密集菌落，利于觀察抑菌圈，A正確；

B；①處濾紙片周圍未出現(xiàn)抑菌圈；濾紙片上不含抗生素，起對(duì)照作用，B正確；

C；隨重復(fù)次數(shù)增加；抗藥菌株的比例增加，抑菌圈的直徑會(huì)變小，C錯(cuò)誤；

D；抑菌圈邊緣的菌落可能是耐藥菌；所以，抑菌圈邊緣的菌落上挑取的細(xì)菌抗藥性較強(qiáng)，D正確。

故選C。9、C【分析】【分析】

1；基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù)；是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ)，以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段，將不同來源的基因按預(yù)先設(shè)計(jì)的藍(lán)圖，在體外構(gòu)建雜種DNA分子，然后導(dǎo)入活細(xì)胞，以改變生物原有的遺傳特性、獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品。2、細(xì)胞分化是指同一起源的細(xì)胞逐漸產(chǎn)生具有不同形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能特征細(xì)胞群的過程。細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因組在時(shí)間和空間上的選擇性表達(dá)，通過開啟或關(guān)閉不同基因的表達(dá)，產(chǎn)生最終的特征蛋白。

【詳解】

A；多能干細(xì)胞（iPSC）向心肌細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果；遺傳物質(zhì)不變，基因進(jìn)行選擇性表達(dá)，從而使細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能、形態(tài)發(fā)生變化，A正確；

B、結(jié)合圖示iPSC和Hybridcells的分化率可知；誘導(dǎo)多能干細(xì)胞和雜交細(xì)胞都具有分化能力，且iPSC的分化率較高，B正確；

C；誘導(dǎo)20d后iPSC和雜交細(xì)胞都具有較高的分化率；還可以再分化，C錯(cuò)誤；

D；iPSC是將相關(guān)基因?qū)塍w細(xì)胞而獲得；雜交細(xì)胞是iPSC與心肌細(xì)胞的融合細(xì)胞，引入機(jī)體都具有一定的風(fēng)險(xiǎn)，臨床使用前需評(píng)估兩種細(xì)胞致癌的風(fēng)險(xiǎn)，D正確。

故選C。二、多選題(共5題，共10分)10、A:C【分析】【分析】

當(dāng)胚胎細(xì)胞數(shù)目達(dá)到32個(gè)左右時(shí)；胚胎形成致密的細(xì)胞團(tuán)，形似桑椹，叫做桑椹胚；實(shí)驗(yàn)證實(shí)，這一階段前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，屬于全能細(xì)胞，這些細(xì)胞都是由受精卵經(jīng)有絲分裂產(chǎn)生的。

【詳解】

A；桑椹胚前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬于全能細(xì)胞，A正確；

B；囊胚期細(xì)胞可分化內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層兩部分；不同部位的細(xì)胞致密化程度有差異，桑椹胚不同部位的細(xì)胞致密化程度相同，B錯(cuò)誤；

C；胚胎分割是指采用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2等分、4等分或8等分等；經(jīng)移植獲得同卵雙胚或多胚的技術(shù)，胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇，C正確；

D；胚胎移植一般選擇桑椹胚或囊胚期進(jìn)行；D錯(cuò)誤。

故選AC。11、B:D【分析】【分析】

克隆是指生物體通過體細(xì)胞進(jìn)行的無性繁殖；以及由無性繁殖形成的基因型完全相同的后代個(gè)體。通常是利用生物技術(shù)由無性生殖產(chǎn)生與原個(gè)體有完全相同基因的個(gè)體或種群。

【詳解】

A；體細(xì)胞的分化程度比胚胎干細(xì)胞的分化程度高；與體細(xì)胞核移植技術(shù)相比，胚胎干細(xì)胞核移植技術(shù)更易成功，A錯(cuò)誤；

B；在體細(xì)胞核移植過程中；用物理方法或化學(xué)方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白質(zhì)合成酶抑制劑等）激活受體細(xì)胞，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，B正確；

C；基因重組發(fā)生在有性生殖的生物進(jìn)行減數(shù)分裂產(chǎn)生配子的過程中(狹義上的基因重組)以及基因工程技術(shù)中（包含在廣義的基因重組內(nèi)）；而細(xì)胞分裂、分化的過程一般不會(huì)發(fā)生基因重組，C錯(cuò)誤；

D；體細(xì)胞核移植技術(shù)是無性繁殖；有望用于增加瀕危動(dòng)物的種群數(shù)量，D正確。

故選BD。12、A:C:D【分析】【分析】

接種微生物的方法主要是稀釋涂布平板法和平板劃線法；

稀釋涂布線法：逐步稀釋菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)；

平板劃線法由接種環(huán)沾取少許待分離的材料；在無菌平板表面進(jìn)行平行劃線；扇形劃線或其他形式的連續(xù)劃線，微生物細(xì)胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少，并逐步分散開來，如果劃線適宜的話，微生物能一一分散，經(jīng)培養(yǎng)后，可在平板表面得到單菌落。

【詳解】

A；根據(jù)I號(hào)培養(yǎng)基上菌落分布均勻；可知①②過程為稀釋涂布平板法，A正確；

B；甲乙試管中的液體是用于樣品稀釋；應(yīng)為無菌水，B錯(cuò)誤；

C；由Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基上上的劃線區(qū)域可知從I號(hào)培養(yǎng)基上挑選的菌落進(jìn)行接種的方法是平板劃線法；C正確；

D；淀粉與碘液反應(yīng)呈藍(lán)色；但如果淀粉分解菌中的淀粉酶將淀粉水解后就不能呈藍(lán)色，因此周圍不顯藍(lán)色的菌落含有所需菌種，D正確。

故選ACD。13、B:C:D【分析】【分析】

限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。

DNA連接酶是鏈接兩個(gè)DNA的片段；形成磷酸二酯鍵。

【詳解】

A；限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列；能在特定部位的兩個(gè)核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵，A正確；

B；DNA連接酶可以恢復(fù)DNA分子中的磷酸二酯鍵；將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來，B錯(cuò)誤；

C；DNA聚合酶將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端；形成磷酸二酯鍵，DNA連接酶是鏈接兩個(gè)DNA的片段，形成磷酸二酯鍵。在基因工程操作中，不可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶，C錯(cuò)誤；

D；限制酶主要來源于微生物；D錯(cuò)誤。

故選BCD。14、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長素和細(xì)胞分裂素時(shí)；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯(cuò)誤；

D；生長素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。三、填空題(共5題，共10分)15、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖16、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】脲酶氨堿性增強(qiáng)升高pH的變化酚紅指示劑紅17、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】直接分離人工合成反轉(zhuǎn)錄法化學(xué)合成法18、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】嫩肉粉木瓜蛋白酶蛋白質(zhì)19、略

【分析】【詳解】

①克隆人是對(duì)人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)：

人不僅是自然人；在生物進(jìn)化中人自從脫離了動(dòng)物界，還成為有價(jià)值觀念的社會(huì)的人，因此人是具有雙重屬性的，是生物；心理和社會(huì)的集合體?？寺∪艘簿褪侨斯o性生殖的人，只在遺傳性狀上與原型人一致，而人的心理、行為、社會(huì)特征和特定人格是不能克隆的，因此克隆人是不完整的人，是一個(gè)喪失自我的人，嚴(yán)重違反了人權(quán)，危害人類尊嚴(yán)；

②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念：

克隆人的出現(xiàn)將徹底攪亂代際關(guān)系和家庭倫理定位；克隆人過程中可以出現(xiàn)體細(xì)胞核供者；卵細(xì)胞供者以及孕育者三位生物學(xué)父母，以及撫養(yǎng)者的社會(huì)學(xué)父母的多種選擇，被克隆者只是生物學(xué)上復(fù)制，人類世代的傳承也將被打破，家庭倫理關(guān)系含混不清；

③克隆人是制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人；

④克隆人違反生物進(jìn)化的自然發(fā)展規(guī)律：

人類所以發(fā)展到如此高的進(jìn)化文明程度，是由其自然發(fā)展規(guī)律形成的。而克隆人要把有性生殖倒退到無性生殖，這種行為如不加阻止，必將給人類種下無窮的災(zāi)難?！窘馕觥竣倏寺∪耸菍?duì)人權(quán)和人的尊嚴(yán)的挑戰(zhàn)；②克隆人沖擊了現(xiàn)有的婚姻家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)的倫理道德觀念；③克隆人是制造在心理上和社會(huì)地位上都不健全的人；④克隆人違反生物進(jìn)化的自然發(fā)展規(guī)律等。四、綜合題(共4題，共8分)20、略

【分析】【分析】

基因表達(dá)載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等。根據(jù)題干信息和圖形分析，P0是載體質(zhì)粒，其含有的氨芐青霉素抗性基因（ampr）和四環(huán)素抗性基因（tetr）都屬于標(biāo)記基因，可用于檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞；EcoRV酶為限制酶，其切割質(zhì)粒后會(huì)破壞四環(huán)素抗性基因（tetr）。

【詳解】

（1）根據(jù)題意分析；EcoRV酶識(shí)別的序列是-GATATC-，并且兩條鏈都在中間的T與A之間進(jìn)行切割，因此其切出來的線性載體P1為平末端。

（2）依題意并據(jù)圖分析；目的基因兩側(cè)為黏性末端，且露出的堿基為A，則在載體P1的兩端需要各加一個(gè)含有堿基T的脫氧核苷酸，以便形成具有黏性末端的載體P2，再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質(zhì)粒P3。

（3）根據(jù)以上分析已知；限制酶（EcoRV酶）切割后破壞了四環(huán)素抗性基因，但是沒有破壞氨芐青霉素抗性基因，因此含有重組質(zhì)粒P3的菌落在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中應(yīng)該不能生長，而在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長，結(jié)合表格分析可知，應(yīng)該選擇B類菌落。根據(jù)表格分析，A類菌落在氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能夠生長，說明其導(dǎo)入的是P0；C類菌落在任何抗生素的培養(yǎng)基中都不能生長，說明其沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒。

（4）據(jù)圖分析，根據(jù)目的基因插入的位置和PCR技術(shù)的原理分析，PCR鑒定時(shí)應(yīng)該選擇的一對(duì)引物是乙和丙；根據(jù)題意和圖形分析，某同學(xué)用圖中的另外一對(duì)引物（甲、乙）從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp的片段；說明其目的基因發(fā)生了反向連接。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解基因工程的四個(gè)基本步驟，尤其是對(duì)核心步驟——構(gòu)建基因表達(dá)載體步驟的理解，明確基因表達(dá)載體的幾個(gè)必須的成分及其作用，進(jìn)而結(jié)合題干要求分析答題?！窘馕觥浚?）平。

（2）胸腺嘧啶（T）DNA連接。

（3）BA類菌落含有P0C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒。

（4）乙丙目的基因反向連接21、略

【分析】

【分析】

微生物常見的接種的方法。

①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)，在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

【詳解】

（1）MRS固體培養(yǎng)基因含有碳酸鈣而不透明；乳酸菌所產(chǎn)的酸可與碳酸鈣發(fā)生反應(yīng)，從而在培養(yǎng)基上形成溶解圈（透明圈），即形成以乳酸菌為中心的透明圈，從功能上判斷，MRS培養(yǎng)基可作為乳酸菌的鑒別培養(yǎng)基。

（2）微生物分離純化培養(yǎng)時(shí)；關(guān)鍵做到防止雜菌污染，則使用無菌水對(duì)樣品濾液進(jìn)行梯度稀釋。進(jìn)行梯度稀釋的目的是選擇合適濃度的乳酸菌在培養(yǎng)基上觀察，保證獲得菌落數(shù)在30～300之間；適于計(jì)數(shù)的平板。

（3）要優(yōu)化發(fā)酵時(shí)間和發(fā)酵溫度從而使GABA相對(duì)產(chǎn)量進(jìn)一步提高；可在發(fā)酵時(shí)間在48～60h范圍內(nèi)；發(fā)酵溫度在35～39℃范圍內(nèi)進(jìn)行等時(shí)間、溫度梯度的實(shí)驗(yàn)，根據(jù)表格記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，從而分析比較出最佳的發(fā)酵條件，具體表格如下：

【點(diǎn)睛】

本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記接種微生物常用的兩種方法，能根據(jù)題干信息推斷篩選高產(chǎn)GABA的乳酸菌株的原理，能設(shè)計(jì)簡單實(shí)驗(yàn)優(yōu)化其發(fā)酵條件，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題?！窘馕觥客该魅﹁b別無菌水通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)；以保證獲得菌落數(shù)在30～300之間；適于計(jì)數(shù)的平板不同溫度、不同發(fā)酵時(shí)間GABA的相對(duì)產(chǎn)量。

。48小時(shí)49小時(shí)50小時(shí)51小時(shí)5