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尿液化學(xué)成分檢驗(yàn)(一)尿液酸堿度測(cè)定(pH)反映腎臟調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)環(huán)境體液酸堿平衡能力的重要指標(biāo)之一。【方法原理及評(píng)價(jià)】試帶法:pH精密試紙法優(yōu)于廣泛試紙法,使用方便,但試紙易受潮變質(zhì)。在此基礎(chǔ)上改進(jìn)的干化學(xué)試帶法,采用雙指示劑原理,模塊中含甲基紅(pH4.6~6.2)和溴麝香草酚藍(lán)(pH6.0~7.6),檢測(cè)范圍增大,為pH5.0~9.0,對(duì)應(yīng)變色范圍黃色(pH5.0)到綠色(pH7.0)到藍(lán)色(pH9.0)。pH計(jì)法、指示劑法、滴定法【參考區(qū)間】晨尿:pH5.5~6.5,平均pH6.0隨機(jī)尿:pH4.5~8.0【質(zhì)量控制】1.標(biāo)本應(yīng)及時(shí)測(cè)定,長(zhǎng)期放置會(huì)因細(xì)菌生長(zhǎng)分解尿素產(chǎn)生氨,使pH偏高或因喪失揮發(fā)性酸而影響測(cè)定的準(zhǔn)確性。2.試紙應(yīng)使用嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化的試帶和儀器配套試帶。避光、干燥保存及注意有效期,避免被其他化學(xué)物質(zhì)污染。定期用弱酸或弱堿測(cè)試其靈敏度。3.操作準(zhǔn)確,在規(guī)定時(shí)間內(nèi)判斷結(jié)果。4.若pH<3或>9均會(huì)影響尿液的其他檢測(cè)結(jié)果,如蛋白、比密等,應(yīng)按規(guī)定對(duì)結(jié)果進(jìn)行調(diào)整。(一)尿液酸堿度測(cè)定(pH)【臨床意義】因素酸性堿性食物肉類、高蛋白食物蔬菜、水果藥物氯化銨、氯化鉀、VitC碳酸氫鈉、利尿劑生理活動(dòng)劇烈運(yùn)動(dòng)、大量出汗用餐后堿潮疾病酸中毒、高熱堿中毒:呼吸性堿中毒代謝性疾?。禾悄虿?、痛風(fēng)腎小管性酸中毒、尿路感染(一)尿液酸堿度測(cè)定(pH)(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)正常人腎小球?yàn)V液中每日排出的蛋白質(zhì)在2-4克,但大部分被重吸收,終尿中蛋白質(zhì)為30-130mg/24h,隨機(jī)尿中為0-80mg/L,尿蛋白定性試驗(yàn)陰性。蛋白尿(proteinuria):當(dāng)尿液中蛋白質(zhì)含量大于150mg/24h或大于100mg/L時(shí),尿蛋白定性試驗(yàn)陽性。(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【方法原理及評(píng)價(jià)】方法原理敏感度評(píng)價(jià)加熱乙酸法加熱使蛋白質(zhì)變性凝固,加酸可使蛋白質(zhì)接近等電點(diǎn),使變性的蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀。150mg/L經(jīng)典方法干擾因素少特異性強(qiáng)磺基水楊酸法酸性環(huán)境下,磺酸根陰離子與蛋白質(zhì)氨基酸陽離子結(jié)合為不溶性蛋白鹽沉淀50~100mg/L操作簡(jiǎn)便反應(yīng)靈敏確證試驗(yàn)干化學(xué)試帶法指示劑的蛋白質(zhì)誤差只對(duì)白蛋白敏感操作簡(jiǎn)便快速健康普查++++絮狀混濁,有大凝塊下沉+++乳樣混濁,有粗顆粒狀或絮片狀出現(xiàn)++乳樣混濁,有細(xì)顆粒狀出現(xiàn)+白色混濁,呈薄霧狀±微混,蛋白隱約可見陰性不顯混濁,尿液外觀仍清晰、透明(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【參考區(qū)間】陰性【質(zhì)量控制】1.方法的選擇取決于檢查的目的2.干擾因素的控制與分析(1)尿pH(2)離子強(qiáng)度(3)藥物(4)標(biāo)本質(zhì)量3.操作注意事項(xiàng)(1)加熱醋酸法(2)磺基水楊酸法(3)干化學(xué)試帶法(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【臨床意義】1、生理性蛋白尿功能性蛋白尿:機(jī)體在劇烈運(yùn)動(dòng)、發(fā)熱、低溫刺激、精神緊張、交感神經(jīng)興奮等所致暫時(shí)性、輕度的蛋白尿。<1+或<0.5g/24h,多見于青少年。體位性蛋白尿:直立性體位或腰部前突引起的蛋白尿。臥床時(shí)尿蛋白陰性,直立或活動(dòng)時(shí)2+~3+。攝人性蛋白尿(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【臨床意義】1、生理性蛋白尿老年性蛋白尿:與年齡低于60歲的人相比,老年人蛋白尿的發(fā)生率增高。這些人每隔6個(gè)月應(yīng)隨訪檢查血壓等,但總體預(yù)后良好。妊娠性蛋白尿:妊娠時(shí)可有蛋白尿,但應(yīng)注意隨訪。若無癥狀者,尿蛋白持續(xù)1~2g/d或伴血尿時(shí),則預(yù)后比暫時(shí)性或體位性蛋白尿者差。偶然性蛋白尿:又稱假性蛋白尿。(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【臨床意義】2、病理性蛋白尿腎前性蛋白尿(溢出性蛋白尿):血液循環(huán)中,出現(xiàn)了大量以中、小相對(duì)分子質(zhì)量為主的異常蛋白質(zhì),如游離血紅蛋白、肌紅蛋白、溶菌酶等增多,經(jīng)腎小球?yàn)V出后,原尿中的含量超過了腎小管重吸收最大能力,而大量出現(xiàn)在尿液中形成的蛋白尿。見于:①漿細(xì)胞?、谘軆?nèi)溶血性疾病③大面積肌肉損傷④酶類增高等。(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【臨床意義】2、病理性蛋白尿腎性蛋白尿腎小球性蛋白尿:多因腎小球受到感染、毒素、免疫、代謝等因素的損害后,引起腎小球通透性增強(qiáng)或電荷屏障作用受損,使血液中的血漿蛋白(以清蛋白為主)濾出原尿中。根據(jù)腎小球?yàn)V過膜損傷程度選擇性蛋白尿:損傷較輕,主要成分為白蛋白非選擇性蛋白尿:損傷較重,大中分子量蛋白同時(shí)存在(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【臨床意義】2、病理性蛋白尿腎小管性蛋白尿:腎小管受到感染或中毒損傷后,腎小管近曲小管段對(duì)腎小球?yàn)V過液中的小相對(duì)分子質(zhì)量蛋白質(zhì)重吸收能力減低,而出現(xiàn)以小相對(duì)分子質(zhì)量蛋白為主的蛋白尿,稱為腎小管性蛋白尿。單純性腎小管性蛋白尿,尿蛋白含量較低,一般<2g/24h,定性半定量試驗(yàn)+~++。見于:①腎小管間質(zhì)病變:如間質(zhì)性腎炎、腎小管性酸中毒等。②重金屬中毒:如汞、鎘、鉍、砷、鈾等,重金屬類引起中毒性腎間質(zhì)疾病。藥物中毒:某些抗生素如慶大霉素、卡那霉素等。④器官移植。(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【臨床意義】2、病理性蛋白尿混合性蛋白尿:病變同時(shí)或相繼累及腎小球和腎小管而產(chǎn)生的蛋白尿。兼有上述兩種蛋白尿的特點(diǎn)。常見于慢性腎炎、慢性腎盂腎炎、高血壓、糖尿病、紅斑狼瘡性腎炎、腎淀粉樣變性等。(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)【臨床意義】2、病理性蛋白尿腎后性蛋白尿:①泌尿、生殖系炎癥反應(yīng):如膀胱炎、尿道炎、前列腺炎、精囊炎等。②泌尿系結(jié)石、結(jié)核、腫瘤等。③泌尿系鄰近器官疾?。喝缂毙躁@尾炎、慢性盆腔炎、宮頸炎、盆腔腫瘤等,泌尿系鄰近器官炎癥或腫瘤刺激。(二)尿液蛋白質(zhì)檢查(Pro)(三)尿糖檢驗(yàn)(Glu)尿中糖來源于血中葡萄糖;原尿中的糖幾乎全部被腎小管重吸收;正常人尿中可有微量葡萄糖(<2.8mmol/24h),定性檢測(cè)為陰性。尿糖定性陽性,即為糖尿(glucosuria)決定因素:血糖濃度腎血流量腎糖閾8.88mmol/L【方法原理及評(píng)價(jià)】測(cè)定方法原理敏感度VItC影響評(píng)價(jià)班氏法葡萄糖還原性醛基CuSO4Cu(OH)2

熱,堿性5.5mmol/L假陽性特異性差干化學(xué)試帶法葡萄糖葡萄糖氧化酶H2O2色原顯色2.0~5.0mmol/L假陰性特異性高

(三)尿糖檢驗(yàn)(Glu)【參考區(qū)間】空腹尿及餐后2h尿:陰性【質(zhì)量控制】1.容器要清潔2.及時(shí)送檢3.留取時(shí)段4.防止其他物質(zhì)的干擾(三)尿糖檢驗(yàn)(Glu)【臨床意義】血糖增高性糖尿:1、攝入性糖尿;2、應(yīng)激性糖尿;3、代謝性糖尿:糖尿??;4、內(nèi)分泌性糖尿:甲亢、垂體前葉功能亢進(jìn)、嗜鉻細(xì)胞瘤、Cushing綜合征等血糖正常性糖尿(腎性糖尿):家族性或獲得性腎性糖尿、新生兒糖尿、妊娠期或哺乳期婦女等其他糖尿:乳糖尿、半乳糖尿、果糖尿等(三)尿糖檢驗(yàn)(Glu)(四)尿液酮體定性檢驗(yàn)(KET)【定義】尿酮體是尿液中乙酰乙酸(占20%)、β-羥丁酸(占78%)及丙酮(占2%)的總稱。酮體是機(jī)體脂肪氧化代謝產(chǎn)生的中間代謝產(chǎn)物,當(dāng)糖代謝發(fā)生障礙、脂肪分解增高,酮體產(chǎn)生速度超過機(jī)體組織利用速度時(shí),可出現(xiàn)酮血癥,酮體血濃度一旦越過腎閾值,就產(chǎn)生酮尿。參考值:陰性【方法原理及評(píng)價(jià)】測(cè)定方法原理靈敏度評(píng)價(jià)Lange法(朗格法)亞硝基鐵氰化鈉在堿性條件下與乙酰乙酸或丙酮生成紫紅色化合物。本法對(duì)乙酰乙酸的敏感度為50mg/L,對(duì)丙酮200mg/L改良Rothera法(酮體粉法)原理與Lange法相同本法對(duì)乙酰乙酸的敏感度為80mg/L,對(duì)丙酮為100mg/L。與朗格法一樣優(yōu)點(diǎn)是減少了干粉試劑的用量并且省去氨水,反應(yīng)試劑全部為干粉,便于儲(chǔ)存和攜帶,也使操作更加簡(jiǎn)便。

Gerhardt法(乙酰乙酸測(cè)定法)尿中乙酰乙酸與高鐵離子(Fe3+)形成酒紅色的乙酰乙酸鐵復(fù)合物。本方法只對(duì)乙酰乙酸反應(yīng),靈敏度低(250~700mg/L)一般不用于常規(guī)檢查干化學(xué)試帶法

原理與Lange法相同臨床上有兩類試帶,一類只與乙酰乙酸反應(yīng),與其他酮體成分都不發(fā)生反應(yīng);另一類與乙酰乙酸和丙酮都起反應(yīng),但對(duì)乙酰乙酸的靈敏度高于丙酮,前者為50~100mg/L,而后者僅為400~700mg/L。由于試帶法敏感、方便、快速,已逐步取代了化學(xué)法。(四)尿液酮體定性檢驗(yàn)(KET)【質(zhì)量控制】細(xì)菌在體內(nèi)外可導(dǎo)致乙酰乙酸的丟失;室溫保存,丙酮易丟失,密閉冷藏可避免揮發(fā),但試驗(yàn)時(shí)標(biāo)本應(yīng)置于室溫中恢復(fù)溫度后再檢測(cè)。(四)尿液酮體定性檢驗(yàn)(KET)【臨床意義】糖尿病酮癥酸中毒:早期診斷非糖尿病酮癥:如應(yīng)激狀態(tài)、劇烈運(yùn)動(dòng)、饑餓、禁食過久、飲食缺乏糖類或?yàn)楦咧?,感染性疾病如肺炎、傷寒、敗血癥、結(jié)核等發(fā)熱期等。中毒:如氯仿、乙醚麻醉后、磷中毒等。服用雙胍類降糖藥:由于藥物抑制細(xì)胞呼吸,可出現(xiàn)血糖減低而尿酮體陽性的現(xiàn)象。(四)尿液酮體定性檢驗(yàn)(KET)(五)尿液膽紅素檢驗(yàn)(BIL)血漿中有3種膽紅素:未結(jié)合膽紅素(UCB)、結(jié)合膽紅素(CB)、δ-膽紅素來源:成人每日產(chǎn)生的膽紅素約75%來自衰老紅細(xì)胞中血紅蛋白的分解,25%主要來自骨髓內(nèi)未成熟紅細(xì)胞的分解及其他非血紅蛋白的血紅素分解產(chǎn)物。

血紅蛋白珠蛋白血紅素

COOFeNADPH

膽綠素

NADPH

膽紅素

膽紅素胞液Y蛋白膽紅素-Y蛋白

Z蛋白膽紅素-Z蛋白

UDPGA內(nèi)質(zhì)網(wǎng)

UDP葡萄糖醛酸膽紅素腎小部分大部分膽素原膽紅素-清蛋白復(fù)合物膽素原膽素

尿

少量腸道膽素膽素原葡萄糖醛酸膽紅素糞便膽紅素葡萄糖醛酸單核-吞噬細(xì)胞肝細(xì)胞血液清蛋白【方法原理及評(píng)價(jià)】測(cè)定方法原理敏感度評(píng)價(jià)Harrison法氯化鐵膽紅素+氯化鋇膽綠素

酸性0.9umol/L

操作復(fù)雜,準(zhǔn)確性高,可作為化學(xué)試帶篩檢后的確證試驗(yàn)

。干化學(xué)試帶法膽紅素+2,4-二氯苯胺重氮鹽生成紫紅色偶氮化合物7-14umol/L操作簡(jiǎn)便、快速及半定量(五)尿液膽紅素檢驗(yàn)(BIL)【參考區(qū)間】陰性【質(zhì)量控制】膽紅素在陽光照射下易轉(zhuǎn)變?yōu)槟懢G素,因此檢測(cè)時(shí)應(yīng)使用新鮮尿液標(biāo)本。為避光,宜用棕色容器收集標(biāo)本。維生素C、亞硝酸鹽和某些藥物,可引起假陰性結(jié)果。(五)尿液膽紅素檢驗(yàn)(BIL)【臨床意義】主要用于黃疸的診斷和黃疸類型的鑒別診斷。肝細(xì)胞性黃疸如黃疸性肝炎,肝硬化等。阻塞性黃疸如肝內(nèi)膽汁淤積和膽管占位性病變。先天性高膽紅素血癥是由于肝細(xì)胞對(duì)膽紅素的攝取、結(jié)合和排泄缺陷所致的黃疸,其中Roter綜合征、Dubin-Johnson綜合征可出現(xiàn)膽紅素尿。(五)尿液膽紅素檢驗(yàn)(BIL)(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)?zāi)蚰懠t素、尿膽原及尿膽素,俗稱尿三膽。由于送檢的標(biāo)本多為新鮮尿標(biāo)本,尿膽原尚未氧化成尿膽素,故一般檢查膽紅素和尿膽原,俗稱尿二膽?!痉椒ㄔ砑霸u(píng)價(jià)】項(xiàng)目測(cè)定方法原理評(píng)價(jià)尿膽原

Ehrlich法

尿膽原在酸性溶液中,與對(duì)二甲氨基苯甲醛(Ehrlich試劑)反應(yīng),生成櫻紅色化合物操作簡(jiǎn)便易受干擾干化學(xué)試帶法基于Ehrlich法操作簡(jiǎn)便易受干擾簡(jiǎn)單快速,可以半定量尿膽素Schleisinger法在尿液中加碘液,尿膽原氧化成尿膽素,再加入飽和乙酸鋅,尿膽素與鋅離子結(jié)合,觀察綠色熒光(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)【參考區(qū)間】尿膽原定性:陰性或弱陽性(1:20稀釋后陰性)。尿膽素定性:陰性?!九R床意義】1、尿膽原是反映肝細(xì)胞損傷的敏感指標(biāo)急性黃疸型肝炎時(shí),尿膽原排泄量首先增加,早于黃疸癥狀出現(xiàn)之前。2、長(zhǎng)時(shí)間大劑量應(yīng)用抗生素可抑制腸道菌群,使尿膽原不能合成,造成尿膽原陰性;而長(zhǎng)時(shí)間便秘則容易使尿膽原陽性程度增加。(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)【臨床意義】3、尿膽原檢查結(jié)合血清膽紅素、尿膽紅素和糞膽原等檢查,主要用于黃疸的診斷和鑒別診斷。溶血性黃疸:因體內(nèi)有大量紅細(xì)胞破壞,使血中UCB含量增高,導(dǎo)致肝細(xì)胞代償性產(chǎn)生更多的CB,從膽道排入腸道也增高,致UBG增高,糞膽原隨之增高,糞色加深。尿液UBG呈明顯強(qiáng)陽性,尿膽素陽性。(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)【臨床意義】肝細(xì)胞性黃疸:因肝功能障礙,使膽素原腸-肝循環(huán)受損,UBG可輕度或明顯增高,尿膽素陽性。在反映肝細(xì)胞損傷方面,UBG比尿膽紅素更靈敏,是早期發(fā)現(xiàn)肝炎的簡(jiǎn)易有效的方法。梗阻性黃疸:因無膽紅素排入腸腔,糞便呈白陶土色,尿膽原陰性,尿膽素亦陰性。(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)【臨床意義】項(xiàng)目參考值溶血性黃疸肝細(xì)胞性黃疸梗阻性黃疸顏色lightlyyellowdarkyellowdarkyellowdarkyellow尿膽原1:20or陰性強(qiáng)++--尿膽素--++--尿膽紅素----++口訣:紅素阻黃肝黃陽,溶血黃疸為陰性膽原膽素肝黃溶黃陽,阻塞黃疸為陰性(六)尿膽原和尿膽素檢驗(yàn)(七)尿液亞硝酸鹽定性檢查(NIT)亞硝酸鹽定性試驗(yàn)可作為泌尿系感染的篩選指標(biāo)之一,NIT陰性不能排除感染。尿亞硝酸鹽試驗(yàn)陽性結(jié)果的三個(gè)條件:尿液中的致病菌須含有硝酸鹽還原酶體內(nèi)有適量硝酸鹽的存在尿液在膀胱內(nèi)有足夠的停留時(shí)間(4h以上)【方法原理及評(píng)價(jià)】Griss法:NIT+對(duì)氨基苯磺酸重氮鹽+α-萘胺紅色偶氮化合物【參考區(qū)間】陰性(七)尿液亞硝酸鹽定性檢查(NIT)【質(zhì)量控制】1.防止假陽性標(biāo)本應(yīng)新鮮測(cè)定。2.控制假陰性(1)最好使用晨尿,以便尿液在膀胱內(nèi)有足夠的存留時(shí)間使細(xì)菌完成還原作用。另外,大劑量維生素C使結(jié)果呈假陰性。(2)患者服用利尿藥后會(huì)使結(jié)果呈假陰性。使用抗生素后使反應(yīng)轉(zhuǎn)為陰性。(3)其他:高比密尿,當(dāng)NIT含量<lmg/L時(shí),結(jié)果會(huì)呈陰性;飲食中攝入含硝酸鹽或亞硝酸鹽的食物(如蔬菜、水果)過少,也會(huì)使結(jié)果呈陰性。(七)尿液亞硝酸鹽定性檢查(NIT)(八)尿液血紅蛋白定性檢查正常人血漿中僅含微量血紅蛋白(20-50mg/L),不能從尿中排出。血管內(nèi)溶血時(shí),血紅蛋白釋放入血漿中;腎及上尿路出血,RBC在非等滲或酸性環(huán)境中溶血。當(dāng)血紅蛋白大于1000mg/L時(shí),可隨尿液排出,隱血試驗(yàn)(OBT)陽性,甚至尿外觀呈濃茶色或醬油色?!痉椒ㄔ砑霸u(píng)價(jià)】測(cè)定方法原理評(píng)價(jià)濕化學(xué)法氧化還原法簡(jiǎn)便、快速,敏感度高,但受VitC等氧化物干擾,特異性差,為過篩檢查干化學(xué)試帶法氧化還原法同上單克隆抗體免疫膠體金法抗原抗體結(jié)合法特異性強(qiáng)操作簡(jiǎn)便、快速(八)尿液血紅蛋白定性檢查【參考區(qū)間】陰性【質(zhì)量控制】1、試帶要妥善保存,注意有效期并避免污染。濕化學(xué)試劑(尤其是H2O2)要保證質(zhì)量,檢測(cè)過程中應(yīng)有陽性對(duì)照。2、尿液必須新鮮,留尿后立即檢查,以免因紅細(xì)胞破壞導(dǎo)致干化學(xué)試帶法與顯微鏡檢查不符的人為誤差。3、肌紅蛋白尿也引起化學(xué)法呈陽性反應(yīng)。(八)尿液血紅蛋白定性檢查【質(zhì)量控制】4、尿路感染時(shí)細(xì)菌產(chǎn)生過氧化物酶引起化學(xué)法假陽性,可將尿液煮沸2min,使其破壞。某些氧化藥物,如漂白粉也可導(dǎo)致假陽性。5、維生素C導(dǎo)致假陰性。濃縮尿、高蛋白尿可降低試帶反應(yīng)的靈敏度。6、尿中有鐵鹽、銅、鋅、碘化物等,易引起化學(xué)法假陽性。免疫法檢測(cè)時(shí),尿液標(biāo)本中游離血紅蛋白過高,可因抗原過剩而出現(xiàn)假陰性。(八)尿液血紅蛋白定性檢查【臨床意義】1.輔助診斷泌尿系統(tǒng)疾?。好谀蛳到y(tǒng)疾病引起出血都可導(dǎo)致隱血試驗(yàn)陽性。尤其是隱匿性腎炎,當(dāng)尿中紅細(xì)胞被破壞時(shí),可能表現(xiàn)為紅細(xì)胞鏡檢與隱血試驗(yàn)結(jié)果不一致,應(yīng)注意分析。2.輔助診斷血管內(nèi)溶血:各種血管內(nèi)溶血性疾病,如陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、行軍性血紅蛋白尿、自身免疫性溶血性貧血、輸血反應(yīng)等,均可出現(xiàn)尿隱血試驗(yàn)陽性。(八

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