T-ZNZ 279-2024 土壤中唑蟲(chóng)酰胺殘留量的測(cè)定 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法

T/ZNZchromatography-tandemspectrometr浙江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全學(xué)會(huì)發(fā)布IT/ZNZ279—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。本文件由浙江省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全學(xué)會(huì)提出并歸口。本文件起草單位：綠城農(nóng)科檢測(cè)技術(shù)有限公司、金華市婺城區(qū)植物保護(hù)和耕肥管理站、浙江方圓檢測(cè)集團(tuán)股份有限公司。本文件主要起草人：孫文閃、吳思遠(yuǎn)、丁懿、段曉婷、胡陵、葉文容、周婷婷、周敏、章路、邢麗麗、鄭劍峰、董葉箐、余鵬飛、沈雄雅、倪娟楨。1T/ZNZ279—2024土壤中唑蟲(chóng)酰胺殘留量的測(cè)定液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法本文件規(guī)定了土壤中唑蟲(chóng)酰胺殘留量的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測(cè)方法。本文件適用于土壤中唑蟲(chóng)酰胺殘留量的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法NY/T52土壤水分測(cè)定法NY/T395農(nóng)田土壤環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)范3術(shù)語(yǔ)和定義本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。4原理試樣用乙腈提取，提取液經(jīng)分散固相萃取凈化，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀檢測(cè)，外標(biāo)法定量。5試劑與材料除另有說(shuō)明外，均使用分析純?cè)噭?，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。5.1試劑5.1.1乙腈（CH3CN，CAS號(hào)：75-05-8）:色譜純。5.1.2甲酸（HCOOH，CAS號(hào)：64-18-6）：色譜純。5.1.3無(wú)水硫酸鎂（MgSO4，CAS號(hào)：7487-88-9）。5.1.4檸檬酸鈉二水合物（C6H5Na3O7·2H2O，CAS號(hào)：6132-04-3）。5.1.5檸檬酸二鈉鹽倍半水合物（C6H6Na2O7·1.5H2O，CAS號(hào)：6132-05-4）。5.1.6氯化鈉（NaCl，CAS號(hào)：7647-14-5）。5.1.7甲酸銨（HCOONH4，CAS號(hào)：540-69-2）：色譜純。5.1.8提取劑：4g無(wú)水硫酸鎂、1g氯化鈉、1g檸檬酸鈉二水合物、0.5g檸檬酸二鈉鹽倍半水合物。5.1.9凈化劑：含有600mg硫酸鎂、100mgC18和100mgPSA。5.2溶液配制5.2.1流動(dòng)相A：稱取0.1261g甲酸銨，加水溶解，再加入1mL甲酸后用水稀釋至1000mL，混勻。5.2.2流動(dòng)相B：準(zhǔn)確量取1mL甲酸，用乙腈稀釋至1000mL，混勻。2T/ZNZ279—20245.3標(biāo)準(zhǔn)品唑蟲(chóng)酰胺（C21H22ClN3O2，CAS號(hào)：129558-76-5）純度≥98%。5.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制5.4.1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（1000mg/L）：準(zhǔn)確稱取約10mg（精確到0.01mg）的唑蟲(chóng)酰胺標(biāo)準(zhǔn)品，用乙腈溶解并定容至10mL，密封避光-18℃保存，有效期6個(gè)月。5.4.2中間標(biāo)準(zhǔn)溶液（10mg/L）：準(zhǔn)確吸取1mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（5.4.1），用乙腈定容至100mL，密封避光-18℃保存，有效期1個(gè)月。5.5材料5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）：粒徑40μm～60μm。5.5.2十八烷基硅烷鍵合硅膠（C18粒徑40μm～60μm。5.5.3微孔濾膜（有機(jī)相）：13mm×0.22μm。5.5.4陶瓷勻質(zhì)子：長(zhǎng)2cm，外徑1cm。6儀器設(shè)備6.1液相色譜—三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧離子源（ESI）。6.2分析天平：感量0.01mg和0.01g。6.3離心機(jī)：轉(zhuǎn)速≥4000r/min。6.4渦旋混勻儀。7樣品制備與保存按照NY/T395的要求進(jìn)行樣品制備，在晾干室將濕樣晾干，進(jìn)行樣品粗磨，全部過(guò)20目尼龍篩，將樣品混勻后，用四分法分成兩份，取其中一份進(jìn)行樣品細(xì)磨，全部過(guò)60目尼龍篩，將樣品混勻后分成兩份，其中一份為檢樣，一份為備樣，放置棕色玻璃瓶，15°C以下干燥保存。8分析步驟8.1試樣水分測(cè)定按照NY/T52的規(guī)定執(zhí)行。8.2提取稱取5g試樣（精確至0.01g）于50mL塑料離心管中，加入10mL水，渦旋混勻，靜置30min。加入10mL乙腈，放入一顆陶瓷勻質(zhì)子（5.5.4加入提取劑（5.1.8渦旋振蕩3min后4000r/min離心3min，取上清液備用。8.3凈化移取4.0mL上清液至15mL離心管，加入凈化劑（5.1.9）1份，渦旋混勻1min。4000r/min離心3min，吸取上清液過(guò)微孔濾膜（5.5.3），待測(cè)定。8.4測(cè)定8.4.1液相色譜參考條件3T/ZNZ279—2024a）色譜柱：T3柱，50mm×2.1mm（內(nèi)徑），1.8μm（粒徑），或相當(dāng)者；b）流動(dòng)相梯度條件見(jiàn)表1；c）流速：0.25mL/min;d）柱溫：40℃;e）進(jìn)樣量：2μL。表1流動(dòng)相及其梯度條件0228.4.2質(zhì)譜參考條件a）離子源類型：電噴霧離子源；b）掃描方式：正離子掃描；c）霧化氣流速：3.0L/min；d）加熱氣流速：10L/min；e）干燥氣流速：10L/min；f）檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM），監(jiān)測(cè)條件見(jiàn)表2。表2多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）的測(cè)定條件注：*為定量離子對(duì)8.4.3基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線選擇與被測(cè)樣品性質(zhì)相同或相似的空白樣品按照8.2～8.3部分進(jìn)行前處理，得到空白基質(zhì)溶液。精確吸取一定量的中間標(biāo)準(zhǔn)溶液，逐級(jí)用空白基質(zhì)溶液稀釋成質(zhì)量濃度為0.002mg/L、0.005mg/L、0.01mg/L、0.02mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，根據(jù)儀器性能和檢測(cè)需要不少于5個(gè)濃度點(diǎn)，供液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測(cè)定。以唑蟲(chóng)酰胺定量子離子的質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標(biāo)，相對(duì)應(yīng)的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。8.4.4定性測(cè)定被測(cè)試樣中唑蟲(chóng)酰胺色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時(shí)間相比較，相差應(yīng)在±0.1min之在相同實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，如果檢出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)樣品相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，唑蟲(chóng)酰胺選擇的子離子均出現(xiàn)，而且同一檢測(cè)批次，樣品中唑蟲(chóng)酰胺的離子豐4T/ZNZ279—2024度比與質(zhì)量濃度相當(dāng)?shù)幕|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液相比，其允許偏差不超過(guò)表3規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在唑蟲(chóng)酰胺殘留。表3定性時(shí)離子豐度比的最大允許偏差±20%±25%±50%8.4.5定量測(cè)定外標(biāo)法定量。將試樣溶液注入液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，測(cè)得定量子離子的色譜峰面積，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線（8.4.3）計(jì)算其濃度，待測(cè)樣液中唑蟲(chóng)酰胺的濃度應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線線性范圍之內(nèi)，超過(guò)線性范圍時(shí)應(yīng)根據(jù)測(cè)定濃度進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)樣分析。8.5空白試驗(yàn)除不加試料外，按照8.2、8.3的規(guī)定進(jìn)行操作。9結(jié)果計(jì)算試樣中唑蟲(chóng)酰胺殘留量以毫克每千克（mg/kg）表示，按下面公式進(jìn)行計(jì)算。式中：ω——試樣中被測(cè)唑蟲(chóng)酰胺殘留量的結(jié)果，單位為毫克每千克（mg/kg）;c——從基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作曲線中得到的試樣溶液中唑蟲(chóng)酰胺的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升（mg/L）；V——提取溶劑總體積，單位為毫升（mLm——土壤試樣的質(zhì)量，單位為克（g）；f——土壤試樣的質(zhì)量含水量，單位為（%）。計(jì)算結(jié)果以2次測(cè)定值的平均值表示，保留2位有效數(shù)字，當(dāng)結(jié)果大于1mg/kg時(shí)保留3位有效數(shù)字。10精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的15%。11準(zhǔn)確度本方法在0.005~0.05mg/kg添加濃度水平上的回收率在70%~100%之間