動物細(xì)胞培養(yǎng)課件-高二下學(xué)期生物人教版選擇性必修3

選擇性必修三第二章細(xì)胞工程第2節(jié)動物細(xì)胞工程（第一課時）-動物細(xì)胞培養(yǎng)新課導(dǎo)入

在治療大面積燒傷時，通常采用的方法是取燒傷病人的健康皮膚進(jìn)行自體移植。但對這樣的病人來說，自體健康皮膚非常有限，使用他人皮膚來源又不足，而且會產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。請同學(xué)們想一想怎樣獲得大量的自體健康皮膚呢？

取該患者的皮膚進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),獲得足量的細(xì)胞后再移植。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)——從動物機(jī)體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個細(xì)胞，然后，放在適宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。1.原理——細(xì)胞增殖（有絲分裂）2.目的：獲得細(xì)胞或者細(xì)胞產(chǎn)物，不能獲得完整動物個體。例1.一般來說,動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下哪些條件?(

)①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血清④溫度與動物體溫相近⑤需要O2,不需要CO2

⑥CO2培養(yǎng)箱A.①②③④⑤⑥

B.①②③④C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥例2．下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除細(xì)胞代謝物B．為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的干擾素C．培養(yǎng)過程中，添加CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pHD．通常需要在合成培養(yǎng)基中加入血清等天然成分例3．關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，下列敘述正確的是(

)A．動物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入血清的主要目的是補(bǔ)充細(xì)胞所需的未知成分B．動物細(xì)胞培養(yǎng)可以在液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基中進(jìn)行C．動物細(xì)胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒環(huán)境中進(jìn)行，該條件只受環(huán)境因素的影響D．動物細(xì)胞培養(yǎng)無需考慮滲透壓問題閱讀課本P43-44內(nèi)容，總結(jié)動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，并完成例題一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（一）條件DBA閱讀課本P43-44內(nèi)容，總結(jié)動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，并完成例題一、動物細(xì)胞培養(yǎng)DBA氣體環(huán)境95%空氣和5%

CO2的混合氣體抗生素例1.一般來說,動物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足以下哪些條件?(

)①無毒的環(huán)境②無菌的環(huán)境③合成培養(yǎng)基需加血清④溫度與動物體溫相近⑤需要O2,不需要CO2

⑥CO2培養(yǎng)箱A.①②③④⑤⑥

B.①②③④C.①③④⑤⑥ D.①②③④⑥例2．下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便清除細(xì)胞代謝物B．為了防止培養(yǎng)過程中雜菌的污染，可向培養(yǎng)液中加入適量的C．培養(yǎng)過程中，添加CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pHD．通常需要在合成培養(yǎng)基中加入血清等天然成分例3．關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件，下列敘述正確的是(

)A．動物細(xì)胞培養(yǎng)基中加入血清的主要目的是補(bǔ)充細(xì)胞所需的未知成分B．動物細(xì)胞培養(yǎng)可以在液體培養(yǎng)基或固體培養(yǎng)基中進(jìn)行C．動物細(xì)胞培養(yǎng)需要在無菌、無毒環(huán)境中進(jìn)行，該條件只受環(huán)境因素的影響D．動物細(xì)胞培養(yǎng)無需考慮滲透壓問題一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（一）條件一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（二）過程取動物組織分散成單個細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)分瓶培養(yǎng)加培養(yǎng)液放入CO2培養(yǎng)箱放入CO2培養(yǎng)箱例題分析1．下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B．選用胰蛋白酶處理細(xì)胞時，可能會對動物細(xì)胞造成損傷C．傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，無須再用酶處理D．體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長又能懸浮生長，都會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象D一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（二）過程①組織一般取自動物胚胎或幼齡動物，為什么？細(xì)胞分化程度低，增殖能力強(qiáng)，容易培養(yǎng)。②如何將動物組織分散成單個細(xì)胞？

剪碎，用胰蛋白酶或膠原蛋白酶等處理，去掉組織間蛋白，將組織分散成單個細(xì)胞?？偨Y(jié)1．下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B．選用胰蛋白酶處理細(xì)胞時，可能會對動物細(xì)胞造成損傷C．傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，無須再用酶處理D．體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長又能懸浮生長，都會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象例題分析一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（二）過程③

胰蛋白酶、膠原蛋白酶的作用？

將動物組織細(xì)胞間的蛋白質(zhì)成分酶解，使細(xì)胞分散開，獲得單個細(xì)胞。說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。④

可以用胃蛋白酶處理嗎？為什么？

不可以；胃蛋白酶作用的適宜pH約為2，當(dāng)pH大于6時，胃蛋白酶就會失去活性，多數(shù)動物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2-7.4，胃蛋白酶在此環(huán)境中沒有活性?？偨Y(jié)1．下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B．選用胰蛋白酶處理細(xì)胞時，可能會對動物細(xì)胞造成損傷C．傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，無須再用酶處理D．體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長又能懸浮生長，都會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象例題分析一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（二）過程⑥

體外培養(yǎng)的動物細(xì)胞可分為哪兩類？a、分散不會限制彼此的生長與增殖。b、分散有利于與培養(yǎng)液充分接觸，有利于細(xì)胞吸收O2與營養(yǎng)和排出代謝廢物。⑤

培養(yǎng)前為什么分散成單個細(xì)胞？第1類：懸浮生長細(xì)胞第2類：貼壁生長細(xì)胞（大多數(shù)）總結(jié)1．下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B．選用胰蛋白酶處理細(xì)胞時，可能會對動物細(xì)胞造成損傷C．傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，無須再用酶處理D．體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長又能懸浮生長，都會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象例題分析一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（二）過程這些細(xì)胞往往貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞貼壁。接觸抑制

細(xì)胞在貼壁生長過程中，隨著細(xì)胞分裂，數(shù)量不斷增加，最后形成一個單層，此時細(xì)胞間相互接觸，細(xì)胞分裂和生長停止，數(shù)量不再增加。細(xì)胞貼壁一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（二）過程⑦為什么要分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)？①營養(yǎng)物質(zhì)缺乏②有害代謝物積累③細(xì)胞密度過大④接觸抑制導(dǎo)致細(xì)胞分裂受阻⑧

不同培養(yǎng)類型的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)時，如何處理？懸浮生長類細(xì)胞：直接用離心法收集貼壁生長類細(xì)胞：重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個細(xì)胞，然后再用離心法收集例題分析1．下列關(guān)于動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，錯誤的是(

)A．用于培養(yǎng)的細(xì)胞大都取自胚胎或幼齡動物的器官或組織B．選用胰蛋白酶處理細(xì)胞時，可能會對動物細(xì)胞造成損傷C．傳代培養(yǎng)時，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，無須再用酶處理D．體外培養(yǎng)的細(xì)胞既能貼壁生長又能懸浮生長，都會發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（二）過程⑨目前使用的或冷凍保存的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)？為什么？

通常為10代以內(nèi)，以保持細(xì)胞正常的二倍體核型。2.下列有關(guān)動物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述,正確的是(

)A.原代培養(yǎng)通常是指對親代細(xì)胞的培養(yǎng)B.傳代培養(yǎng)是指親代細(xì)胞通過分裂產(chǎn)生子代細(xì)胞后的繼續(xù)培養(yǎng)C.細(xì)胞貼壁是指某些細(xì)胞貼附在培養(yǎng)瓶的瓶壁上生長、增殖的現(xiàn)象D.細(xì)胞的接觸抑制是指細(xì)胞通過接觸抑制其他細(xì)胞分裂增殖的現(xiàn)象例題分析可以通過胰蛋白酶處理的對象來區(qū)分兩種“培養(yǎng)”第一次：用胰蛋白酶對剪碎的動物組織進(jìn)行處理，使其分散成單個細(xì)胞后進(jìn)行培養(yǎng)，為原代培養(yǎng)。第二次：細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)接觸抑制，用胰蛋白酶使其從瓶壁上脫離下來，然后，將其分散到多個培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，為傳代培養(yǎng)。C一、動物細(xì)胞培養(yǎng)（四）應(yīng)用1、生產(chǎn)有重要價值的生物制品2、用于基因工程3、檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性4、用于生理、病理、藥理等方面的研究一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（三）干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用3．下列有關(guān)干細(xì)胞的敘述，錯誤的是(

)A．干細(xì)胞可來源于早期胚胎、骨髓和臍帶血等B．胚胎干細(xì)胞在體外培養(yǎng)能增殖但不能被誘導(dǎo)分化C．造血干細(xì)胞具有分化出多種血細(xì)胞的能力，可用于治療白血病D．iPS細(xì)胞可用于阿爾茨海默病、心血管疾病治療的研究例題分析

動物和人體內(nèi)仍保留著少數(shù)具有分裂和分化能力的細(xì)胞，這些細(xì)胞叫做干細(xì)胞。在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。1.概念：2.來源：3.類型：早期胚胎骨髓臍帶血包括胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞等。存在于

、

和

等多種組織和器官中。B一、動物細(xì)胞培養(yǎng)一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（三）干細(xì)胞（1）胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)早期胚胎中具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個體的潛能。胚胎干細(xì)胞分布特點(diǎn)應(yīng)用實(shí)例在體外分化成心肌細(xì)胞、神經(jīng)元細(xì)胞和造血干細(xì)胞等必須從胚胎中獲取，涉及倫理問題；因而限制了在醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用。局限性ES細(xì)胞成體組織或器官內(nèi)造血干細(xì)胞（骨髓、外周血和臍帶血中）神經(jīng)干細(xì)胞（神經(jīng)系統(tǒng)中）精原干細(xì)胞（睪丸中）具有組織特異性，只能分化成特定的細(xì)胞或組織，不具有發(fā)育成完整個體的能力成體干細(xì)胞分布舉例特點(diǎn)應(yīng)用實(shí)例治療神經(jīng)組織損傷、神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾?。ㄈ缗两鹕　柎暮Ｄ〉龋┲委煱籽〖耙恍盒阅[瘤放療或化療后引起的造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)功能障礙等疾病造血干細(xì)胞→神經(jīng)干細(xì)胞→治療細(xì)胞損傷造成的疾病發(fā)現(xiàn)最早、研究最多、應(yīng)用最為成熟一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（三）干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用一、動物細(xì)胞培養(yǎng)一、動物細(xì)胞培養(yǎng)

（三）干細(xì)胞4．如圖為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)用于治療糖尿病的示意圖，下列相關(guān)敘述錯誤的是(

)A．干細(xì)胞存在于多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等B．誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是動物細(xì)胞核具有發(fā)育的全能性C．除圖中的成纖維細(xì)胞外，已分化的T細(xì)胞和B細(xì)胞等均能被誘導(dǎo)為iPS細(xì)胞D．將分化得到的胰島細(xì)胞移植回病人體內(nèi)治療，理論上可避免免疫排斥反應(yīng)（3）誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞）①誘導(dǎo)過程無須破壞胚胎；②iPS細(xì)胞可以來源于病人自身的體細(xì)胞，將它移植回病人體內(nèi)后，理論上可以避免免疫排斥反應(yīng)?？芍委熺牋罴?xì)胞貧血癥；在治療阿爾茲海默病、心血管疾病等的研究也取得新進(jìn)展因此，普遍認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞通過體外誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞獲得的類似胚胎干細(xì)胞的一種細(xì)胞①將特定基因或特定蛋白導(dǎo)入細(xì)胞誘導(dǎo)多能干細(xì)胞概念制備方法應(yīng)用優(yōu)點(diǎn)②用小分子化合物誘導(dǎo)形成。（成纖維細(xì)胞、已分化的T細(xì)胞、B細(xì)胞）iPS細(xì)胞