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StandardOperatingProceduresforMICDetectionofMycoplasmainTraditionalChineseandWesI本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部1CLSIM100-S22抗生素敏感一種在特定環(huán)境下孵育24小時,可抑制某種微生物出現(xiàn)明顯增長的最低藥物濃度即最小抑菌濃度,胸膜肺炎樣微生物培養(yǎng)基pleuropnenmonia-likeorganismmed2支原體在PPLO培養(yǎng)基中生長產(chǎn)酸,將導(dǎo)致培養(yǎng)基顏色由紅色變?yōu)辄S色。當(dāng)藥物在培養(yǎng)基內(nèi)能夠?qū)χ舾行?。藥物完全抑制支原體生長的最高稀釋管1mL所含的藥量,即為最小抑菌濃度(MIC),亦即被測保存。使用前將儲存液使用去離子水稀釋至所需工作液濃度,0.22μm濾膜過濾,4℃保存?zhèn)溆谩2煌幬锸紫纫?0倍量水浸泡0.5h,大火沸騰后文火煎煮40min,過濾,保存將保存于-80℃含30%甘油的分離鑒定的支原體菌株的菌液吸取100μL接種于PPLO液體培養(yǎng)基中,37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)7d,以培養(yǎng)基由紅色變?yōu)槌赛S色時的最高稀釋度作為顏色改變單位CCU,菌液濃度以3對受試細(xì)菌按測得的MIC值水平從低往高計算累積分布頻數(shù)根據(jù)西藥和中藥的MIC值,將支原體對藥物的敏感性分為敏感(Susceptible,S)、中度敏感30min高壓滅菌處理。含抗生素的試驗廢棄物,按GB18597標(biāo)準(zhǔn)中的相關(guān)要求進行收4試劑配制a)鑒于多種抗菌藥均為復(fù)合鹽類,并有純度標(biāo)識,配制時,應(yīng)扣除雜質(zhì)部分和輔助基團質(zhì)量,只考慮純活性組分的實際濃度。如:含1個水的鹽酸卡納霉素純度為98%,分子量為582.58g/mol;而卡那霉素基b)不同抗菌藥需要不同的溶劑溶解。操作時,先用少量合適溶劑溶解,再用去離子水稀釋成貯存濃度為c)抗菌藥溶液定容前,將pH值調(diào)至7.8,以避免導(dǎo)致支原體培養(yǎng)物出現(xiàn)非特異性顏色變參照CLSIM100-S22配制,水水1是水水1是水1是水水1是水水1否5水5否水1否水1是水1否水1否水1是水1否水水1否水水1否水水1否水水1是水1否水3是水水1是水水1是水1是林可胺酰胺類水水1否水水1否水1是水1否6水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否水水1否78內(nèi)顏色的變化并記錄,不改變顏色的藥物最高稀釋倍數(shù)對應(yīng)管的抗菌藥濃度(μg/mL)即為MIC。根據(jù)MIC值將支原體對所測藥物的敏感性分為敏感(Susceptible,S)、中度敏感(Intermediate,I)和耐藥(Resistant,R)。各西藥的具藥物濃度(μg/mL)2>8a>8a444444888984888-
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