T-SFLA 012-2024 中國農(nóng)墾乳制品產(chǎn)品標準 低溫巴氏殺菌乳

ICS67.100.10CCSX16團體標準Low-temperaturepasteurizedm中國農(nóng)墾經(jīng)貿(mào)流通協(xié)會發(fā)布T/SFLA012—2024本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由中國農(nóng)墾乳業(yè)聯(lián)盟提出。本文件由中國農(nóng)墾經(jīng)貿(mào)流通協(xié)會歸口。本文件起草單位：光明乳業(yè)股份有限公司、北京三元食品股份有限公司、天津海河乳品有限公司、中墾牧乳業(yè)（集團）股份有限公司、廣東燕塘乳業(yè)股份有限公司、新疆天潤生物科技股份有限公司、廣州風行乳業(yè)股份有限公司、遼寧越秀輝山控股股份有限公司、中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)信息研究所、上海韜林機械有限公司、上海數(shù)郜機電有限公司。本文件主要起草人：陳歷俊、劉振民、鄒旸、胡剛、馮立科、尤宏、李海、陳娜、馮曉、張國鈺、臣。T/SFLA012—2024低溫巴氏殺菌乳本文件規(guī)定了低溫巴氏殺菌乳的術(shù)語和定義、原料要求、生產(chǎn)工藝、產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)品標簽、貯運和銷售。本文件適用于低溫巴氏殺菌乳及其生產(chǎn)加工過程。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5009.5食品安全國家標準食品中蛋白質(zhì)的測定GB5009.6食品安全國家標準食品中脂肪的測定GB5009.299食品安全國家標準食品中乳鐵蛋白的測定GB19645食品安全國家標準巴氏殺菌乳GB31605食品安全國家標準食品冷鏈物流衛(wèi)生規(guī)范NY/T3799生乳及其制品中堿性磷酸酶活性的測定發(fā)光法T/SFLA001中國農(nóng)墾乳業(yè)聯(lián)盟產(chǎn)品標準生鮮乳T/SFLA006中國農(nóng)墾乳業(yè)聯(lián)盟標桿牧場通用要求奶牛T/SFLA008中國農(nóng)墾高寒生態(tài)牧場通用要求奶牛3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。3.1低溫巴氏殺菌乳low-temperaturepasteurizedmilk僅以生牛乳為原料，經(jīng)72℃~76℃、保持15s～20s殺菌等工序制得的液體產(chǎn)品。4原料要求生乳應(yīng)來源于符合T/SFLA006或T/SFLA008要求的牧場。生乳應(yīng)符合T/SFLA001的要求。5生產(chǎn)工藝應(yīng)符合附錄A的規(guī)定。6產(chǎn)品質(zhì)量T/SFLA012—20246.1感官要求感官要求應(yīng)符合GB19645的規(guī)定，具有低溫巴氏殺菌乳典型的滋味和氣味。6.2理化指標理化指標應(yīng)符合GB19645的規(guī)定，其中脂肪、蛋白質(zhì)、堿性磷酸酶、乳鐵蛋白、免疫球蛋白、乳過氧化物酶應(yīng)符合表1的規(guī)定。表1理化指標項目指標檢測方法c脂肪a/（g/100g）≥3.4GB5009.6蛋白質(zhì)/（g/100g）≥3.0GB5009.5堿性磷酸酶bNY/T3799乳鐵蛋白/（mg/L）≥GB5009.299免疫球蛋白/（mg/L）≥附錄B中B.2乳過氧化物酶/（U/L）≥附錄B中B.3a僅適用于全脂產(chǎn)品。b應(yīng)在加工過程在線采樣并測定。c可以使用其他經(jīng)有效驗證的檢驗方法進行檢驗。6.3污染物限量污染物限量應(yīng)符合GB2762的規(guī)定。6.4真菌毒素限量真菌毒素限量應(yīng)符合GB2761的規(guī)定。6.5微生物限量微生物限量應(yīng)符合GB19645的規(guī)定。7產(chǎn)品標簽7.2可在標簽上標示“低溫巴氏殺菌乳/奶”、“低溫鮮牛乳/奶”。8貯運和銷售T/SFLA012—2024A.1工藝流程A.1.1基本工藝流程包括以下步驟凈乳灌裝生乳驗收凈乳灌裝生乳驗收冷藏冷藏標準化一均質(zhì)冷卻--巴氏殺菌圖1基本工藝流程圖A.1.2企業(yè)可以根據(jù)產(chǎn)品類型、生產(chǎn)設(shè)備、生產(chǎn)場所等實際情況調(diào)整工藝順序或適當增減工藝環(huán)節(jié)，以提升產(chǎn)品品質(zhì)、實現(xiàn)節(jié)能減排、提高生產(chǎn)效率等。A.2基本工藝A.2.1凈乳利用物理方法除去生乳中肉眼可見雜質(zhì)?？墒褂眠^濾設(shè)備、凈乳機或其它分離設(shè)備。A.2.2標準化通過物理方法對乳脂肪、乳蛋白等成分含量進行適度改善與校正，實現(xiàn)不同批次產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定的過程。標準化一般可包括離心、分離等，根據(jù)產(chǎn)品需要可選用其中一種或多種組合。在滿足工藝要求的前提下，標準化應(yīng)優(yōu)先選用節(jié)能降耗、低碳環(huán)保的方法。A.2.3均質(zhì)對乳脂肪球進行機械處理，使其分散成較小的脂肪球均勻地分散在乳中。生乳經(jīng)均質(zhì)機處理時，溫度一般為40℃~65℃,均質(zhì)壓力一般為10MPa~25MPa。A.2.4巴氏殺菌使用殺菌設(shè)備對生乳進行加熱殺菌，應(yīng)采用72℃~76℃、保持15s～20s的低溫巴氏殺菌工藝。可在巴氏殺菌工藝基礎(chǔ)上增加其他物理除菌工藝以提高產(chǎn)品安全性。A.2.5冷卻為抑制微生物繁殖，生乳經(jīng)低溫巴氏殺菌后應(yīng)迅速冷卻至0℃~6℃。A.2.6灌裝對冷卻后的乳液進行灌裝。A.2.7冷藏灌裝完成后的產(chǎn)品放入冷藏庫貯存。產(chǎn)品冷藏貯存溫度應(yīng)為0℃~6℃。A.3可選擇工藝T/SFLA012—2024A.3.1除菌一般采用微濾或離心工藝，去除生乳中的細菌、微粒、芽孢、體細胞等。微濾除菌一般選用微濾膜，孔徑一般不超過1.4μm。生乳通過微濾膜分離成脫脂乳和稀奶油兩部分，脫脂乳采用微濾除菌、稀奶油采用單獨殺菌，脫脂乳和稀奶油混合后進行低溫巴氏殺菌。離心除菌一般將生乳預熱到40℃~60℃后進行。A.3.2脫氣一般采用真空脫氣裝置來脫除生乳中細小分散氣體和溶解氧，去除異味。A.3.3濃縮一般采用閃蒸去除生乳中部分水分。通過調(diào)整閃蒸器的溫度和真空度等參數(shù)控制水分含量，溫度一般不超過70℃。A.4企業(yè)應(yīng)嚴格執(zhí)行危害分析與關(guān)鍵控制點（HACCP）體系。T/SFLA012—2024檢驗方法B.1一般規(guī)定本標準所用試劑和水在沒有注明其他要求時，均指分析純試劑和GB/T6682規(guī)定的三級水。實驗中所用標準溶液、試劑和制品，在沒有注明其他要求時均按GB/T601、GB/T602、GB/T603的規(guī)定制備。實驗中所用溶液在未注明用何種溶劑配制時，均指水溶液。B.2免疫球蛋白（IgG）的測定B.2.1試劑和材料實驗室用水應(yīng)符合GB/T6682規(guī)定的二級水標準。B.2.1.1試劑無水磷酸氫二鈉（Na2HPO4）。磷酸二氫鉀（KH2PO4）。甘氨酸。鹽酸（HCl濃度≥36%。B.2.1.2試劑配制鹽酸溶液（6mol/L取500mL鹽酸加水稀釋至1L，混勻。pH=6.5，0.05mol/L磷酸鹽緩沖液：稱取無水磷酸氫二鈉5.6765g，磷酸二氫鉀4.6478g，加水定容至pH=2.5，0.05mol/L甘氨酸鹽酸緩沖液：稱取甘氨酸3.7535g，加800mL水溶解，再加入6mol/L鹽酸4.75mL，用水定容至1L，混勻。B.2.1.3標準品免疫球蛋白IgG標準品（純度≥95%）。B.2.1.4標準溶液配制IgG標準儲備液：稱取免疫球蛋白IgG標準品10mg（精確至0.1mg加10mL水溶解，溶液濃度為1000μg/mL，放置4℃密封貯藏，保存期3個月。IgG標準工作液：吸取標準儲備液，用磷酸鹽緩沖液稀釋至IgG濃度為50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL、300μg/mL、400μg/mL的標準溶液，現(xiàn)配現(xiàn)用。B.2.2儀器和設(shè)備高效液相色譜儀，帶紫外檢測器和梯度洗脫裝置；電子天平（感量0.1mg冷凍離心機，轉(zhuǎn)速≥10000r/min。B.2.3試樣處理吸取2.5mL牛奶樣品，置于10ml離心管中，加入2.5mL磷酸鹽緩沖液溶解稀釋，震蕩搖勻，在4℃、8000r/min條件下離心20min，吸取3mL上清液，置于另一10mL離心管中。用乙酸調(diào)節(jié)pH至4.6，使用磷酸鹽緩沖液定容至5mL，在4℃、8000r/min條件下離心20min，將上清液通過0.22μm濾膜過濾，收集濾液于進樣瓶中，待高效液相色譜儀測定。B.2.4色譜條件T/SFLA012—2024色譜柱：Hi-TrapproteinGHP1mL親和柱。親和柱先用5倍柱體積的重蒸餾水或去離子水洗柱，再用10倍柱體積的流動相A平衡柱，進樣，按照洗脫程序進行洗脫。流速：0.4mL/min。檢測器：紫外檢測器（UV），檢測波長280nm。進樣量：20μL。流動相：A：pH=6.5，0.05mol/L磷酸鹽緩沖液，B：pH=2.5，0.05mol/L甘氨酸鹽酸緩沖液。時間（min）A（%）B（%）0.0004.5005.5000028.000B.2.5結(jié)果計算樣品中免疫球蛋白IgG含量按公式（1）計算：...................................式中：X——試樣中免疫球蛋白IgG的含量，單位為微克每毫升(μg/mL）；ρ——根據(jù)標準工作曲線計算得到的試樣溶液中免疫球蛋白IgG的濃度，單位為微克每毫升V——試樣體積，單位為毫升（mLV1——試樣稀釋后體積，單位為毫升（mLV2——吸取上清液體積，單位為毫升（mLV3——定容液體積，單位為毫升（mL）；計算結(jié)果以重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，結(jié)果保留小數(shù)點后兩位有效數(shù)字。B.2.6精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。B.3乳過氧化物酶（LPO）活性檢測試劑盒的測定B.3.1試劑和材料B.3.1.1乳過氧化物酶活性檢測試劑盒，2℃-8℃保存。B.3.1.2定性濾紙1#。B.3.1.3所用檢測試劑盒應(yīng)有廠家提供的合格質(zhì)控報告，方可使用。B.3.2儀器和設(shè)備B.3.2.1裝載450nm/630nm濾光片的酶標儀。B.3.2.2渦旋儀。T/SFLA012—2024B.3.2.3離心管：50mL。B.3.2.4離心機(≥4000r/min）及離心管。B.3.2.5移液槍及槍頭：100μL-1000μL，10mL。B.3.2.6多通道移液器：30μL-300μL。B.3.2.7恒溫培養(yǎng)箱。B.3.2.8計時器。B.3.3試劑盒提供的材料與試劑組份名稱微孔板乳過氧化物酶標準品0.6mL，12000U/L，黑蓋，棕色玻璃瓶標品稀釋液LPO底物液終止液12mL，黃色蓋樣本濃縮提取試劑A（20×)40mL樣本濃縮提取試劑B（20×)40mL帶帽離心管1.5mL蓋板膜2張B.3.4樣本提取液的配制用去離子水將樣本濃縮提取試劑A和試劑B按1：1：18體積比進行稀釋，即1份樣本濃縮提取試劑A（20×)、試劑B（20×)加18份去離子水，用于樣本提取。該試劑配制好后2℃-8℃可保存12個月，無需現(xiàn)用現(xiàn)配。B.3.5樣本前處理B.3.5.1樣品稀釋試劑盒可直接檢測的乳過氧化物酶的活性范圍是0-600U/L，生乳中乳過氧化物酶的含量高，按1:20-1:80的比例稀釋，巴氏殺菌乳中依據(jù)巴氏殺菌工藝的不同，乳過氧化物酶的含量有差異，按1:1-1:10比例稀釋。用B.3.4樣本提取液進行稀釋。稀釋倍數(shù)=2（提取稀釋倍數(shù)）×提取后樣品的稀釋倍數(shù)B.3.5.2樣品制備吸取5mL牛奶樣品，置于50mL離心管中，恢復至室溫，加入5mLB.3.4樣本提取液，振蕩混勻，4000r/min離心5min，用定性濾紙（1#濾紙）過濾上清液，收集濾液待測。B.3.6檢測步驟B.3.6.1配制標準曲線B.3.6.1.1將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，置于室溫（20℃-25℃)平衡1h以上。B.3.6.1.2標準曲線是根據(jù)標準品連續(xù)稀釋5次后得出的數(shù)據(jù)繪制的，可通過標準曲線計算樣品的LPO活性，建議對標準品進行平行檢測，標準品現(xiàn)配現(xiàn)用。B.3.6.1.3取6支帶帽的1.5mL離心管并分別加入標準品稀釋液，其中1號管中加入570μL，其他5管均加入300μL。吸取30μL標準品（濃度為12000U/L置于1號管中與其中的標準品稀釋液混合，T/SFLA012—2024混合后濃度為600U/L。取1號管中的標準品稀釋液300μL，置于2號管中與其中的檢測稀釋液混合，混合后濃度為300U/L。繼續(xù)上述操作，配置150U/L，75U/L，37.5U/L的標品。標準品稀釋液的標品濃度為0U/L。B.3.6.2檢測B.3.6.2.1建議對標準品及待檢樣品的檢測均進行雙平行檢測。B.3.6.2.2編號：取相應(yīng)數(shù)量的微孔置于微孔架上，記錄標準品和樣品位置。B.3.6.2.3加標準品/樣本：向微孔中加入100μL標準品或樣品，注意更換槍頭。B.3.6.2.4顯色：向每個微孔中加入50μLLPO底物，在水平面輕輕振蕩混勻，加蓋蓋板膜，在37℃恒溫培養(yǎng)箱中避光孵育10min。B.3.6.2.5測定：向每個微孔中加入