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河南省駐馬店市新蔡縣2025屆高三一模試卷生物試題考生須知:1.全卷分選擇題和非選擇題兩部分,全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂;非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2.請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3.保持卡面清潔,不要折疊,不要弄破、弄皺,在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.假設(shè)T2噬菌體的DNA含1000個(gè)堿基對(duì),其中胞嘧啶占全部堿基的30%。1個(gè)32P標(biāo)記的T2噬菌體侵染細(xì)菌,釋放出50個(gè)子代噬菌體。下列敘述正確的是()A.子代噬菌體中最多有2個(gè)32P標(biāo)記的噬菌體B.噬菌體增殖過程所需的原料、模板、酶等全部由細(xì)菌提供C.用含32P的培養(yǎng)基可直接培養(yǎng)出32P標(biāo)記的T2噬菌體D.產(chǎn)生這些子代噬菌體共消耗了9800個(gè)胸腺嘧啶脫氧核苷酸2.稻瘟病是水稻生產(chǎn)上的毀滅性病害。研究發(fā)現(xiàn)水稻體內(nèi)的PsbS蛋白能激活葉綠體內(nèi)專門的抗病基因,使水稻免于患稻瘟病。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.水稻葉表皮細(xì)胞的葉綠體中含有核糖體,核糖體參與合成PsbS蛋白B.水稻細(xì)胞合成PsbS蛋白的過程中,有RNA聚合酶等多種酶的參與C.PsbS蛋白的生物活性與其空間結(jié)構(gòu)有關(guān),溫度過高會(huì)導(dǎo)致PsbS蛋白失活D.葉綠體內(nèi)的抗病基因復(fù)制的過程中,會(huì)出現(xiàn)DNA蛋白質(zhì)復(fù)合物3.細(xì)胞是生物體的結(jié)構(gòu)和功能單位。下列有關(guān)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能的敘述,正確的是()A.磷脂是構(gòu)成細(xì)胞膜的重要物質(zhì),但磷脂與物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸無(wú)關(guān)B.需氧生物的細(xì)胞都是以線粒體作為產(chǎn)能的“動(dòng)力車間”C.神經(jīng)干細(xì)胞分化成各種神經(jīng)細(xì)胞的過程體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性D.吞噬細(xì)胞對(duì)抗原一抗體復(fù)合物的處理離不開溶酶體的作用4.研究表明,植物頂端優(yōu)勢(shì)狀態(tài)下發(fā)現(xiàn)不同植物激素對(duì)側(cè)芽生長(zhǎng)的影響不同(如下表所示)。下列相關(guān)敘述正確的是()組別A組в組C組處理方式不作處理細(xì)胞分裂素處理側(cè)芽赤霉素處理頂芽側(cè)芽生長(zhǎng)情況生長(zhǎng)受抑制抑制作用解除抑制作用加強(qiáng)A.A、C組比較,用赤霉素處理頂芽能使頂端優(yōu)勢(shì)現(xiàn)象不明顯B.A組側(cè)芽生長(zhǎng)受抑制是因?yàn)閭?cè)芽細(xì)胞不能產(chǎn)生生長(zhǎng)素C.A、B組比較,表明細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的生理作用相反D.A組側(cè)芽受到抑制是因?yàn)轫斞慨a(chǎn)生的生長(zhǎng)素運(yùn)輸?shù)絺?cè)芽積累過多5.某同學(xué)將喝過一半的酸奶放置在暖氣上保溫一段時(shí)間后,發(fā)現(xiàn)酸奶表面出現(xiàn)許多氣泡,這些氣泡主要來自于()A.乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生的大量CO2B.暖氣使酸奶中原有氣體發(fā)生膨脹C.其他微生物進(jìn)入酸奶繁殖并產(chǎn)氣D.酸奶中某些化學(xué)物質(zhì)的產(chǎn)氣反應(yīng)6.下列有關(guān)細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)含量比值的關(guān)系,正確的是()A.細(xì)胞內(nèi)結(jié)合水/自由水的比值,種子萌發(fā)時(shí)比休眠時(shí)高B.人體細(xì)胞內(nèi)O2/CO2的比值,線粒體內(nèi)比細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)高C.神經(jīng)纖維膜內(nèi)K+/Na+的比值,動(dòng)作電位時(shí)比靜息電位時(shí)高D.適宜條件下光合作用過程中C5/C3的比值,停止供應(yīng)CO2后比停止前的高7.下列關(guān)于中心體的敘述,正確的是()A.存在于所有的動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞B.對(duì)染色體的平均分配起著重要作用C.主要組成成分是磷脂和蛋白質(zhì)D.每個(gè)中心粒均由兩個(gè)中心體組成8.(10分)下面關(guān)于激素、神經(jīng)遞質(zhì)、抗體的敘述正確的是()A.三者都是由核糖體合成,經(jīng)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體分泌到細(xì)胞外B.抗體是一種由B細(xì)胞分泌的具有特異性識(shí)別能力的免疫球蛋白C.激素的特點(diǎn)是微量、高效,對(duì)生命活動(dòng)起催化作用D.激素、神經(jīng)遞質(zhì)、抗體都可存在于內(nèi)環(huán)境并對(duì)人體內(nèi)的生理活動(dòng)起一定的作用二、非選擇題9.(10分)請(qǐng)回答下列與生物工程有關(guān)的問題:(1)基因工程中常利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,此過程需要在________酶的作用下進(jìn)行,主要利用了_________原理。此過程的前提是要有____________序列,以便根據(jù)這一序列合成_______。(2)在基因表達(dá)載體中,______是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出_______。(3)哺乳動(dòng)物核移植可以分為體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植。但實(shí)際操作中,利用體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度很大,其原因是_________________________________________。10.(14分)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫病,致殘性強(qiáng)。研究表明,該病的病理改變與腫瘤壞死因子-α(TNF-α)密切相關(guān),而一種人鼠嵌合的抗TNF-α單克隆抗體能有效治療RA。下圖為該單克隆抗體制備過程示意圖。(1)圖中的抗原A是______________,常用的促融劑是_______________。細(xì)胞融合完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞。體系中出現(xiàn)多種類型細(xì)胞的原因是________________。(2)HAT培養(yǎng)基的作用是經(jīng)選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細(xì)胞,之后還需要進(jìn)行__________培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。最后獲得的雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是___________________。(3)單克隆抗體的特點(diǎn)是__________________。單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和____________技術(shù)。(4)單克隆抗體主要的用途有:_______________________________(至少答兩點(diǎn))。11.(14分)某醫(yī)學(xué)工作者欲利用乳腺生物反應(yīng)器(轉(zhuǎn)基因動(dòng)物)生產(chǎn)藥用蛋白X。請(qǐng)回答問題:(1)培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí),須將藥用蛋白X基因與_________________的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,形成基因表達(dá)載體,然后導(dǎo)入受體細(xì)胞,選擇的受體細(xì)胞是___________,導(dǎo)入的方法是_______________。(2)基因表達(dá)載體中標(biāo)記基因的作用是_______________________________________,若檢測(cè)到受體細(xì)胞中標(biāo)記基因控制的性狀,______(填“能”或“不能”)確定藥用蛋白X基因一定導(dǎo)入受體細(xì)胞。檢測(cè)藥用蛋白X基因是否表達(dá)的方法是________________。(3)導(dǎo)入藥用蛋白X基因的受體細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)后形成早期胚胎,通過____________過程形成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,若欲培育多只遺傳物質(zhì)相同的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,可通過_____________技術(shù)。12.雙子葉植物甲含有抗旱基因而具有極強(qiáng)的抗早性,乙抗旱性低。若將該抗旱基因轉(zhuǎn)移至植物乙中,有可能提高后者的抗旱性。利用基因工程技術(shù)將甲的抗旱基因轉(zhuǎn)移至乙的體內(nèi),可提高植物乙的抗旱性?;卮鹣铝袉栴}:(1)為獲取抗早基因.可以先從植物甲中提取該基因mRNA然后經(jīng)___________________過程獲得cDNA?;蚬こ痰暮诵牟襟E是_____________________________。(2)使用PCR技術(shù)擴(kuò)增抗旱基因時(shí),可選擇圖中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中的___________________作為引物,此過程還需要____________酶,但不需要解旋酶,而是利用____________使DNA解旋。(3)獲得了抗旱基因的植物乙,種植時(shí)一般要與傳統(tǒng)作物間隔足夠遠(yuǎn)的距離,以免___________________。(4)人們擔(dān)心這種行為會(huì)打開“潘多拉魔盒”,驅(qū)使一些科研者開展人類基因編輯研究,出現(xiàn)“基因完美的定制人”。在這些研究中,外源基因能與受體細(xì)胞DNA成功重組的原因是______________,這種重組DNA技術(shù)若用于對(duì)人類基因進(jìn)行編輯,由于是隨機(jī)的,因此有非常大的風(fēng)險(xiǎn),甚至導(dǎo)致生命活動(dòng)必需的基因遭到破壞。
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】
根據(jù)題意分析,噬菌體增殖所需原料由細(xì)菌提供,模板由噬菌體DNA提供,所以子代噬菌體含32P的有2個(gè);由于T2噬菌體的DNA含1000個(gè)堿基對(duì),其中胞嘧啶占全部堿基的30%,則噬菌體的一個(gè)DNA分子中G=C=2000×30%=600個(gè),A=T=2000×(50%-30%)=400個(gè)?!驹斀狻緼、根據(jù)以上分析已知,子代噬菌體中最多有2個(gè)32P標(biāo)記的噬菌體,A正確;B、噬菌體增殖過程所需的原料、能量、酶等由細(xì)菌提供,而模板由其自身提供,B錯(cuò)誤;C、T2噬菌體是病毒,不能獨(dú)立生存,因此不能用含32P的培養(yǎng)基培養(yǎng),C錯(cuò)誤;D、產(chǎn)生這50個(gè)噬菌體共消耗胸腺嘧啶脫氧核苷是數(shù)量=400×49=19600個(gè),D錯(cuò)誤。故選A。2、A【解析】
基因通過轉(zhuǎn)錄、翻譯控制蛋白質(zhì)的生物合成,在核糖體上合成的肽鏈經(jīng)過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體的加工才能形成具有一定空間結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì),進(jìn)而表現(xiàn)出生物活性?!驹斀狻緼、水稻葉表皮細(xì)胞中不含葉綠體,A錯(cuò)誤;B、水稻細(xì)胞合成PsbS蛋白的過程中需要相關(guān)基因通過轉(zhuǎn)錄、翻譯指導(dǎo)進(jìn)行,因此,該過程中有RNA聚合酶等多種酶的參與,B正確;C、蛋白質(zhì)的活性與其空間結(jié)構(gòu)有關(guān),溫度過高會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)被破壞,因此,PsbS蛋白的生物活性與其空間結(jié)構(gòu)有關(guān),溫度過高會(huì)導(dǎo)致PsbS蛋白失活,C正確;D、DNA復(fù)制過程需要相關(guān)酶如DNA聚合酶的催化,因此,葉綠體內(nèi)的抗病基因復(fù)制的過程中,會(huì)出現(xiàn)DNA蛋白質(zhì)復(fù)合物,D正確。故選A。3、D【解析】
各種細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)、功能:細(xì)胞器分布形態(tài)結(jié)構(gòu)功能線粒體動(dòng)植物細(xì)胞雙層膜結(jié)構(gòu)有氧呼吸的主要場(chǎng)所,細(xì)胞的“動(dòng)力車間”葉綠體植物葉肉細(xì)胞雙層膜結(jié)構(gòu)植物細(xì)胞進(jìn)行光合作用的場(chǎng)所;植物細(xì)胞的“養(yǎng)料制造車間”和“能量轉(zhuǎn)換站”。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)動(dòng)植物細(xì)胞單層膜形成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成和加工,以及脂質(zhì)合成的“車間”高爾基體動(dòng)植物細(xì)胞單層膜構(gòu)成的囊狀結(jié)構(gòu)對(duì)來自內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的蛋白質(zhì)進(jìn)行加工、分類和包裝的“車間”及“發(fā)送站”(動(dòng)物細(xì)胞高爾基體與分泌有關(guān);植物則參與細(xì)胞壁形成)核糖體動(dòng)植物細(xì)胞無(wú)膜結(jié)構(gòu),有的附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,有的游離在細(xì)胞質(zhì)中合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所,“生產(chǎn)蛋白質(zhì)的機(jī)器”溶酶體動(dòng)植物細(xì)胞單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu)“消化車間”,內(nèi)含多種水解酶,能分解衰老、損傷的細(xì)胞器,吞噬并且殺死侵入細(xì)胞的病毒和細(xì)菌。液泡成熟植物細(xì)胞單層膜形成的泡狀結(jié)構(gòu);內(nèi)含細(xì)胞液(有機(jī)酸、糖類、無(wú)機(jī)鹽、色素和蛋白質(zhì)等)調(diào)節(jié)植物細(xì)胞內(nèi)的環(huán)境,充盈的液泡使植物細(xì)胞保持堅(jiān)挺中心體動(dòng)物或某些低等植物細(xì)胞無(wú)膜結(jié)構(gòu);由兩個(gè)互相垂直的中心粒及其周圍物質(zhì)組成與細(xì)胞的有絲分裂有關(guān)【詳解】A、磷脂是構(gòu)成細(xì)胞膜的重要物質(zhì),與物質(zhì)的跨膜運(yùn)輸有關(guān),A錯(cuò)誤;B、原核細(xì)胞沒有線粒體,也能進(jìn)行有氧呼吸供能,B錯(cuò)誤;C、神經(jīng)干細(xì)胞分化成各種神經(jīng)細(xì)胞的過程沒有體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,C錯(cuò)誤;D、吞噬細(xì)胞對(duì)抗原-抗體復(fù)合物的處理離不開溶酶體的作用,D正確。故選D。4、D【解析】
根據(jù)表格信息可知,植物在頂端優(yōu)勢(shì)狀態(tài)下側(cè)芽生長(zhǎng)受抑制,用細(xì)胞分裂素處理側(cè)芽后,側(cè)芽生長(zhǎng)的抑制作用被解除,說明細(xì)胞分裂素可解除生長(zhǎng)素對(duì)側(cè)芽的抑制作用,用赤霉素處理頂芽,側(cè)芽的抑制作用增強(qiáng),說明赤霉素能加強(qiáng)生長(zhǎng)素對(duì)側(cè)芽的抑制作用。【詳解】A、C組用赤霉素處理頂芽后,側(cè)芽被抑制作用加強(qiáng),頂端優(yōu)勢(shì)現(xiàn)象比A組更明顯,A錯(cuò)誤;BD、A組側(cè)芽生長(zhǎng)受抑制是由于頂芽產(chǎn)生的生長(zhǎng)素運(yùn)輸?shù)絺?cè)芽,在側(cè)芽處積累,使側(cè)芽處的生長(zhǎng)素濃度過高而抑制了側(cè)芽的生長(zhǎng),并不是側(cè)芽不產(chǎn)生生長(zhǎng)素,B錯(cuò)誤;D正確;C、A組和B組比較,可說明細(xì)胞分裂素能緩解生長(zhǎng)素對(duì)側(cè)芽的抑制作用,但不能說明細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的生理作用相反,C錯(cuò)誤。故選D。5、C【解析】
由題干可知,該題主要考查生物的呼吸作用,細(xì)胞呼吸可以分為有氧呼吸和無(wú)氧呼吸,其中有氧呼吸吸收的氧氣與釋放的二氧化碳相等,而無(wú)氧呼吸可以按產(chǎn)物分為兩類,一種是產(chǎn)生酒精和二氧化碳,另一種是產(chǎn)生乳酸。乳酸菌屬于發(fā)酵產(chǎn)生乳酸的微生物?!驹斀狻緼、乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)物是乳酸,不產(chǎn)生CO2,A錯(cuò)誤;BC、酸奶表面出現(xiàn)許多氣泡說明有產(chǎn)生氣體的微生物進(jìn)入,通過微生物的呼吸產(chǎn)生了大量CO2,而不是暖氣使酸奶中原有氣體發(fā)生膨脹,B錯(cuò)誤,C正確;D、化學(xué)物質(zhì)不會(huì)單純的反應(yīng),從根本上還是通過微生物的呼吸完成的,D錯(cuò)誤。故選C。6、D【解析】
A.種子萌發(fā)時(shí)細(xì)胞代謝旺盛,自由水含量多,細(xì)胞內(nèi)結(jié)合水/自由水的比值,比休眠時(shí)低,A項(xiàng)錯(cuò)誤;B.人體細(xì)胞在進(jìn)行有氧呼吸時(shí),每分解1摩爾的葡萄糖,則在線粒體基質(zhì)中產(chǎn)生6摩爾的CO2,在線粒體內(nèi)膜上消耗6摩爾的O2,人體細(xì)胞在進(jìn)行無(wú)氧呼吸時(shí),既無(wú)CO2的產(chǎn)生,也無(wú)O2的消耗,B項(xiàng)錯(cuò)誤;C.神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)K+濃度明顯高于膜外,而Na+濃度比膜外低,靜息電位的產(chǎn)生與維持主要是由于K+外流,動(dòng)作電位產(chǎn)生的機(jī)制是Na+內(nèi)流,所以K+/Na+的比值,動(dòng)作電位時(shí)比靜息電位時(shí)低,C項(xiàng)錯(cuò)誤;D.光合作用的暗反應(yīng)階段,首先發(fā)生CO2的固定,即CO2與C5化合物結(jié)合生成C3,隨后在光反應(yīng)產(chǎn)生的ATP提供能量的前提下,C3被光反應(yīng)的產(chǎn)物[H]還原,所以適宜條件下光合作用過程中C5/C3的比值,停止供應(yīng)CO2后比停止前的高,D項(xiàng)正確。故選D?!径ㄎ弧考?xì)胞內(nèi)水與代謝、細(xì)胞呼吸、神經(jīng)調(diào)節(jié)中電位的產(chǎn)生和光合作用7、B【解析】
中心體是動(dòng)物或低等植物細(xì)胞中一種重要的無(wú)膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器,每個(gè)中心體含有兩個(gè)中心粒,這兩個(gè)中心粒相互垂直排列;中心體與細(xì)胞分裂過程中紡錘體的形成有關(guān)?!驹斀狻緼、中心體存在于動(dòng)物細(xì)胞和低等植物細(xì)胞中,A錯(cuò)誤;B、中心體與細(xì)胞分裂過程中紡錘體的形成有關(guān),而紡錘體可以牽引染色體運(yùn)動(dòng),因此中心體對(duì)染色體的平均分配起著重要作用,B正確;C、中心體是無(wú)膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器,不含磷脂,C錯(cuò)誤;D、每個(gè)中心體由兩個(gè)中心粒組成,兩個(gè)中心?;ハ啻怪?,D錯(cuò)誤。故選B。8、D【解析】
激素和神經(jīng)遞質(zhì)是信息分子,需要與特定的受體分子結(jié)合,激素作用于靶細(xì)胞,調(diào)節(jié)靶細(xì)胞代謝,之后激素會(huì)被分解;神經(jīng)遞質(zhì)作用于突觸后神經(jīng)元,引起突觸后神經(jīng)元興奮或抑制,之后神經(jīng)遞質(zhì)被分解或重新利用;漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)能合成并分泌抗體,一種抗體只能結(jié)合一種抗原,主要分布在血清中,也分布于組織液及外分泌液中?!驹斀狻緼.有些激素和神經(jīng)遞質(zhì)不是蛋白質(zhì),不在核糖體中合成,A錯(cuò)誤;B.抗體是由漿細(xì)胞分泌的,漿細(xì)胞是由B細(xì)胞增值分化得到的,B錯(cuò)誤;C.激素的特點(diǎn)是微量、高效,對(duì)生命活動(dòng)起調(diào)節(jié)作用,C錯(cuò)誤;D.激素、神經(jīng)遞質(zhì)、抗體都可存在于內(nèi)環(huán)境并對(duì)人體內(nèi)發(fā)生的生理活動(dòng)起一定的作用,D正確。二、非選擇題9、熱穩(wěn)定DNA聚合(Taq)DNA雙鏈復(fù)制一段已知目的基因的核苷酸引物啟動(dòng)子mRNA動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高,恢復(fù)其全能性十分困難【解析】
PCR技術(shù):(1)概念:PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。(2)原理:DNA復(fù)制。(3)前提條件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。(4)條件:模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。(5)過程:①高溫變性:DNA解旋過程(PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶,高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開);低溫復(fù)性:引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上;③中溫延伸:合成子鏈?!驹斀狻浚?)基因工程中常利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,此過程需要在熱穩(wěn)定DNA聚合(Taq)酶的作用下進(jìn)行,主要利用了DNA雙鏈復(fù)制原理。此過程的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根據(jù)這一序列合成引物。(2)在基因表達(dá)載體中,啟動(dòng)子的作用是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,并驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。(3)由于體細(xì)胞分化程度高,不容易恢復(fù)全能性,因此體細(xì)胞核移植技術(shù)的難度大于胚胎細(xì)胞核移植。本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟,掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié);能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題,屬于考綱識(shí)記和理解層次考查。10、腫瘤壞死因子-α(或TNF-α)聚乙二醇(PEG)細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%克隆化培養(yǎng)每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)作為診斷試劑、用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物【解析】
單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來制備,雜交瘤抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體,又能無(wú)限增殖。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對(duì)一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。題圖分析,單抗制備過程為:將特定的抗原注射小鼠→篩選出產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞→誘導(dǎo)細(xì)胞融合→用HAT培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞→篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞→大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。單克隆抗體典型優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ),是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑,也可用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物,主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。【詳解】(1)要制備抗TNF-a單克隆抗體需要給小鼠注射腫瘤壞死因子a(TNF-a),即圖中的抗原A。常用物理或化學(xué)方法促融,最常用的化學(xué)促融劑是聚乙二醇(PEG),細(xì)胞融合完成后,由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%,所以細(xì)胞融合完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞。
(2)HAT培養(yǎng)基的作用是選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細(xì)胞,在抗體檢測(cè)之前需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng),以增加雜交瘤細(xì)胞數(shù)量。經(jīng)多次篩選,就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。(3)單克隆抗體典型優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ),單克隆抗體技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的應(yīng)用之一。故單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。(4)單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑,也可用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物,主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的。熟知單克隆抗體制備流程中各階段的原理和要點(diǎn)是解答本題的關(guān)鍵!熟知單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)及其應(yīng)用是解答本題的另一關(guān)鍵!11、乳腺蛋白基因受精卵(胚胎干細(xì)胞)顯微注射法檢測(cè)載體是否進(jìn)入受體細(xì)胞,同時(shí)篩選載體進(jìn)入的受體細(xì)胞不能抗原抗體雜交法胚胎移植胚胎分割(移植)【解析】
本題考查基因工程、胚胎工程等內(nèi)容?;虮磉_(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。進(jìn)行胚胎分割時(shí),應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。對(duì)囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割,否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。【詳解】(1)培育轉(zhuǎn)基因動(dòng)物時(shí),須將藥用蛋白X基因與乳腺蛋白基因的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,形成基因表達(dá)載體,通過顯微注射的方法,導(dǎo)入受精卵(胚胎干細(xì)胞)。(2)基因表達(dá)載體中,標(biāo)記基因用于檢測(cè)載體是否進(jìn)入受體細(xì)胞,同時(shí)篩選載體進(jìn)入的受體細(xì)胞,若檢測(cè)到標(biāo)記基因控制的性狀,可能是普通載體導(dǎo)入受體細(xì)胞,不能確定藥用蛋白X基因一定導(dǎo)入受體細(xì)胞。檢測(cè)藥用蛋白X基因是否表達(dá),應(yīng)選擇抗原抗體雜交法。(3)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的早期胚胎形成后,需通過胚胎移植在受體內(nèi)發(fā)育為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。胚胎分割(移植)可培育多只遺傳物質(zhì)相同的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物?;蚬こ碳夹g(shù)的基本步驟:
(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。
(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
(4)目的基因的檢測(cè)與鑒定:分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)
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