2024年高考生物一輪復(fù)習(xí)第11單元生物技術(shù)實踐第38講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用學(xué)案含解析選修1_第1頁
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PAGEPAGE19第38講微生物的培育與應(yīng)用[考綱明細(xì)]1.微生物的分別和培育2.某種微生物數(shù)量的測定3.培育基對微生物的選擇作用4.微生物在其他方面的應(yīng)用考點1培育基及微生物的純化培育技術(shù)1.培育基(1)概念:人們依據(jù)微生物對eq\o(□,\s\up5(01))養(yǎng)分物質(zhì)的不同需求,配制出供其eq\o(□,\s\up5(02))生長繁殖的養(yǎng)分基質(zhì)。(2)養(yǎng)分組成:一般都含有eq\o(□,\s\up5(03))水、碳源、氮源和無機鹽。此外,還須要滿意微生物生長對eq\o(□,\s\up5(04))pH、氧氣以及eq\o(□,\s\up5(05))特別養(yǎng)分物質(zhì)的要求。(3)種類①依據(jù)物理性質(zhì)可分為eq\o(□,\s\up5(06))液體培育基、eq\o(□,\s\up5(07))固體培育基、eq\o(□,\s\up5(08))半固體培育基。②依據(jù)成分的來源可分為自然培育基和eq\o(□,\s\up5(09))合成培育基。③依據(jù)功能用途可分為eq\o(□,\s\up5(10))選擇培育基、eq\o(□,\s\up5(11))鑒別培育基等。1.(選修1P14資料卡片)瓊脂是一種從紅藻中提取的多糖。瓊脂在98℃以上熔化,在44℃以下凝固,在常規(guī)培育條件下呈現(xiàn)固態(tài)。2.(選修1P15資料卡片)牛肉膏和蛋白胨來源于動物原料,含有糖、維生素和有機氮等養(yǎng)分物質(zhì)。2.無菌技術(shù)(1)含義:指在培育微生物的操作中,全部防止eq\o(□,\s\up5(01))雜菌污染的方法。(2)關(guān)鍵:防止eq\o(□,\s\up5(02))外來雜菌的入侵。(3)不同對象的無菌操作方法(連線)答案①、②、⑥—b—Ⅰ、Ⅱ③、④、⑤—a—Ⅲ、Ⅳ3.大腸桿菌的純化培育(1)制備牛肉膏蛋白胨固體培育基①操作步驟②倒平板的方法及留意事項a.請用文字和箭頭寫出正確的倒平板操作流程:eq\o(□,\s\up5(04))丙→乙→甲→丁。b.乙中的滅菌方法是eq\o(□,\s\up5(05))灼燒滅菌。c.丁中的操作須要等待eq\o(□,\s\up5(06))平板冷卻凝固后才能進行。(2)純化大腸桿菌的兩種方法1)平板劃線法①概念:是通過eq\o(□,\s\up5(07))接種環(huán)在瓊脂固體培育基表面eq\o(□,\s\up5(08))連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培育基的表面。②留意事項:b.灼燒接種環(huán),待其冷卻后才能伸入菌液,以免溫度太高殺死菌種。c.其次次及其以后的劃線操作總是從上一次劃線末端起先,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而漸漸削減,最終得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。d.劃線時最終一區(qū)不要與第一區(qū)相連。e.劃線用力大小要適當(dāng),防止用力過大將培育基劃破。2)eq\o(□,\s\up5(09))稀釋涂布平板法①概念:是將菌液進行一系列的eq\o(□,\s\up5(10))梯度稀釋,然后將eq\o(□,\s\up5(11))不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培育基的表面,進行培育。②操作過程(3)菌種的保存方法①對于頻繁運用的菌種,可以采納eq\o(□,\s\up5(12))臨時保藏的方法。②對于須要長期保存的菌種,可以采納eq\o(□,\s\up5(13))甘油管藏的方法。1.(選修1P15旁欄思索)無菌技術(shù)除了用來防止試驗室的培育物被其他外來微生物污染外,還有什么目的?提示無菌技術(shù)還能有效避開操作者自身被微生物感染。2.(選修1P18旁欄小資料改編)微生物的接種方法只有平板劃線法和稀釋涂布平板法嗎?微生物接種的核心是什么?提示不是。微生物的接種技術(shù)還包括斜面接種、穿刺接種等方法,其核心是防止雜菌污染,保證培育物的純度。3.(選修1P17探討T2)倒平板操作時為什么須要使錐形瓶的瓶口通過火焰?提示通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培育基。4.(選修1P17探討T3)平板冷凝后,為什么要將平板倒置?提示平板冷凝后,皿蓋上會凝聚水珠,凝固后的培育基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培育基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培育基造成污染。5.(選修1P17探討T4)在倒平板的過程中,假如不當(dāng)心將培育基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個平板還能用來培育微生物嗎?為什么?提示不能。因為空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培育基上滋生,可能會造成污染。題組eq\a\vs4\al(一)培育基及其制備方法分析1.下列關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的敘述,錯誤的是()A.操作的依次為計算→稱量→溶化→倒平板→滅菌B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C.待培育基冷卻到50℃左右時倒平板D.待平板冷卻凝固后將平板倒置答案A解析制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的步驟是計算→稱量→溶化→滅菌→倒平板,不能顛倒,A錯誤;牛肉膏比較黏稠,所以將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯,待牛肉膏溶化并與稱量紙分別后用玻璃棒取出稱量紙,B正確;待培育基冷卻到50℃左右時倒平板,此時不燙手且為液體狀態(tài),C正確;平板冷卻凝固后才能將平板倒置,D正確。2.下表為某培育基的配方,下列敘述正確的是()A.從物理性質(zhì)看該培育基屬于液體培育基,從用途看該培育基屬于選擇培育基B.該培育基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨C.該培育基缺少供應(yīng)生長因子的物質(zhì)D.該培育基調(diào)整合適的pH后就可以接種運用答案B解析從物理性質(zhì)看該培育基屬于液體培育基,從用途看該培育基屬于鑒別培育基,A錯誤;微生物的養(yǎng)分物質(zhì)主要包括氮源、碳源、水和無機鹽等,培育基中屬于碳源的物質(zhì)主要是葡萄糖,屬于氮源的物質(zhì)是蛋白胨,B正確;生長因子主要包括維生素、氨基酸和堿基等,它們一般是酶和核酸的組成成分,蛋白胨可以供應(yīng)生長因子,C錯誤;該培育基調(diào)整合適的pH后經(jīng)滅菌后才可以接種運用,D錯誤。學(xué)問拓展1.培育基的配制原則(1)目的要明確:配制時應(yīng)依據(jù)微生物的種類、培育目的等確定配制的培育基種類。(2)養(yǎng)分要協(xié)調(diào):留意各種養(yǎng)分物質(zhì)的濃度和比例。(3)pH要相宜:細(xì)菌為6.5~7.5,放線菌為7.5~8.5,真菌為5.0~6.0,培育不同微生物所需的pH不同。2.不同微生物對主要養(yǎng)分物質(zhì)的需求特點(1)自養(yǎng)型微生物所需的主要養(yǎng)分物質(zhì)是無機鹽,碳源可來自大氣中的CO2,氮源可由含氮無機鹽供應(yīng)。(2)異養(yǎng)型微生物所需的養(yǎng)分物質(zhì)主要是有機物,即碳源必需由含碳有機物供應(yīng),氮源也主要是由有機物供應(yīng),部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無機氮源。題組eq\a\vs4\al(二)無菌技術(shù)的操作3.下列對滅菌和消毒的理解不正確的是()A.滅菌是指殺滅環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子B.消毒和滅菌實質(zhì)上是完全相同的C.接種環(huán)用灼燒法滅菌D.常用滅菌方法有灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法答案B解析消毒是運用較為溫柔的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子),滅菌則是運用劇烈的理化因素殺死物體內(nèi)外全部的微生物,包括芽孢和孢子,B錯誤。4.(2014·江蘇高考)為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品,某小組開展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與色素提取試驗。請回答下列問題:(1)試驗用的培育皿常用的兩種滅菌方法是________________________________________;為了削減滅菌后器皿被污染,滅菌前應(yīng)當(dāng)__________________________________________________。(2)為了篩選出酵母菌,培育基中添加了青霉素,其目的是______________________________。(3)如圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是________(填序號)。①平安閥、放氣閥、壓力表②放氣閥、平安閥、壓力表③平安閥、放氣閥、溫度表④放氣閥、平安閥、溫度表(4)為了將分別到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結(jié)果其中一塊平板的各劃線區(qū)均未見菌生長,最可能的緣由是______________________________。答案(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)用牛皮紙(報紙)包扎器皿(2)抑制細(xì)菌(放線菌)的生長(3)①(4)接種環(huán)溫度過高,菌種被殺死解析(1)試驗用的培育皿常用的滅菌方法是干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌),在試驗前應(yīng)用牛皮紙或干凈的報紙包扎器皿。(2)酵母菌是真菌,對青霉素具有反抗實力,青霉素主要抑制細(xì)菌、放線菌的生長。(3)圖中甲為平安閥,乙為放氣閥,丙為壓力表。(4)該接種過程中的3塊平板相同,菌種來源相同,只有一塊平板接種培育后無菌落,對比知,問題最可能出現(xiàn)在接種過程中,最可能的緣由是接種環(huán)灼燒后未充分冷卻,菌種被殺死。題后歸納全面比較消毒和滅菌題組eq\a\vs4\al(三)微生物的培育與純化5.用平板劃線法或稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時()①可以用相同的培育基②都須要運用接種針進行接種③都須要在火焰旁進行接種④都可以用來計數(shù)活菌A.①②B.③④C.①③D.②④答案C解析平板劃線法或稀釋涂布平板法都運用固體培育基,①正確;平板劃線法采納接種環(huán)進行操作,而稀釋涂布平板法采納涂布器進行操作,②錯誤;純化時,要進行無菌操作,須要在火焰旁接種,避開空氣中的微生物污染培育基,③正確;平板劃線法一般用于分別而不能用于計數(shù),④錯誤。6.為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某探討小組測定了該河流水樣中的細(xì)菌含量,并進行了細(xì)菌分別等工作?;卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采納稀釋涂布平板法檢測水樣中的細(xì)菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的空白平板先行培育了一段時間,這樣做的目的是______________________;然后,將1mL水樣稀釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培育后,3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。(2)該小組采納平板劃線法分別水樣中的細(xì)菌。操作時,接種環(huán)通過________滅菌,在其次次及以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端起先劃線,這樣做的目的是________________________________________。(3)示意圖A和B中,________表示的是用稀釋涂布平板法接種培育后得到的結(jié)果。答案(1)檢測培育基平板滅菌是否合格3.8×107(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B解析(1)涂布接種前,滅菌后的空白平板先培育一段時間,若空白平板上無菌落形成,則說明培育基平板滅菌合格;平均每個平板上的菌落數(shù)目為38,稀釋了100倍,取樣為0.1mL,則每毫升水中的活菌數(shù)目為38×100÷0.1=38000個,則每升水中的活菌數(shù)目為38000×1000=3.8×107個。(2)用平板劃線法分別微生物的過程中,應(yīng)對接種環(huán)進行灼燒滅菌;每次劃線都要從上一次劃線的末端起先,這樣做可將聚集的菌體逐步稀釋以便最終得到單個菌落。(3)示意圖A是用平板劃線法接種培育后得到的結(jié)果;示意圖B是用稀釋涂布平板法接種培育后得到的結(jié)果。題后歸納兩種純化細(xì)菌方法的比較考點2微生物的篩選和計數(shù)1.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)選修1P26資料卡片細(xì)菌的數(shù)目還可以通過濾膜法來測定以測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目為例。將已知體積的水過濾后,將濾膜放在伊紅美藍(lán)培育基上培育。在該培育基上,大腸桿菌的菌落呈現(xiàn)黑色。可以依據(jù)培育基上黑色菌落的數(shù)目,計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量。2.分解纖維素的微生物的分別②篩選方法:eq\o(□,\s\up5(06))剛果紅染色法,即通過是否產(chǎn)生eq\o(□,\s\up5(07))透亮圈來篩選纖維素分解菌。③培育基:以eq\o(□,\s\up5(08))纖維素為唯一碳源的選擇培育基。④試驗流程(3)分別纖維素分解菌所用的兩種培育基比較分別纖維素分解菌的試驗中先用eq\o(□,\s\up5(14))選擇培育基,再用eq\o(□,\s\up5(15))鑒別培育基。①選擇培育基為eq\o(□,\s\up5(16))液體培育基,以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長,而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長。②鑒別培育基含瓊脂,為eq\o(□,\s\up5(17))固體培育基,細(xì)菌可在培育基上形成肉眼可見的菌落。剛果紅染色法應(yīng)用的就是鑒別培育基。3.結(jié)果分析與評價深挖教材在進行微生物計數(shù)試驗時除設(shè)置比照組外,設(shè)置重復(fù)組的作用是什么?應(yīng)如何設(shè)置重復(fù)組?提示設(shè)置重復(fù)組的作用是為解除偶然因素對試驗結(jié)果的干擾;在每一稀釋度下宜設(shè)置3個平板作重復(fù)組,選擇菌落數(shù)均在30~300且數(shù)目相差不大的三個平板,用“平均值”代入計數(shù)公式予以計算菌落數(shù)。1.(選修1P22旁欄思索)想一想,如何從平板上的菌落數(shù)推想出每克樣品中的菌落數(shù)?提示統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計3個平板,計算出平板上的菌落數(shù)的平均值,然后按教材旁欄的公式即每克樣品中的菌株數(shù)=(C÷V)×M進行計算。2.(選修1P28旁欄思索)為什么要在富含纖維素的環(huán)境中找尋纖維素分解菌?提示由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于一般環(huán)境。3.(選修1P29旁欄思索T1)常用的剛果紅染色法有兩種,一種是先培育微生物,再加入剛果紅進行顏色反應(yīng),另一種是在倒平板時就加入剛果紅,這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足?提示方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點是顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺點是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透亮圈較為模糊,因為培育基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透亮圈相區(qū)分;方法二的另一缺點是:有些微生物具有降解色素的實力,它們在長時間培育過程中會降解剛果紅形成明顯的透亮圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。4.(選修1P29旁欄思索T2)為什么選擇培育能夠“濃縮”所需的微生物?提示在選擇培育的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種養(yǎng)分條件的微生物得到快速繁殖,而那些不適應(yīng)這種養(yǎng)分條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。題組eq\a\vs4\al(一)土壤中分解尿素細(xì)菌的分別與計數(shù)1.下面關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計數(shù)的敘述中正確的是()A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B.篩選分解尿素的細(xì)菌時應(yīng)以尿素作為培育基中的唯一養(yǎng)分物質(zhì)C.統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目時一般用平板劃線法D.在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑,若指示劑變藍(lán),則表明篩選到了分解尿素的細(xì)菌答案A解析酶具有專一性,故只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素,A正確;篩選分解尿素的細(xì)菌的試驗中,采納的是以尿素為唯一氮源的培育基,B錯誤;統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目時一般采納稀釋涂布平板法,平板劃線法不能用于統(tǒng)計樣品中的細(xì)菌數(shù),C錯誤;在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑,培育某種細(xì)菌后,假如pH上升,指示劑將變紅,這樣就能初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素,D錯誤。2.人和哺乳動物的尿液中含有尿素,大量尿素的存在會對環(huán)境造成污染,土壤中有些細(xì)菌含有脲酶,可通過降解尿素作為其生長的氮源。某探討小組開展土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別和培育試驗,請回答下列問題:(1)該試驗中,在以________為唯一氮源的培育基中加入________指示劑,能產(chǎn)生脲酶的細(xì)菌在該培育基上生長一段時間后,其菌落四周的指示劑將變成________色。(2)在接種前須要添加空白比照組以檢測培育基是否被污染,該空白比照組應(yīng)實行的操作要求和視察指標(biāo)是________________________________________________________________________。(3)某同學(xué)在五個培育基平板下均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0.1mL,培育一段時間后,平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程實行的接種方法是______________,每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為______________個。答案(1)尿素酚紅紅(2)將已滅菌、未接種的培育基在相宜溫度下放置相應(yīng)的時間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生(3)稀釋涂布平板法1.75×108解析(1)分解尿素的細(xì)菌能合成脲酶將尿素分解成氨,氨會使培育基的堿性增加,在以尿素為唯一氮源的培育基中加入酚紅指示劑培育細(xì)菌,若指示劑變紅,可確定該種細(xì)菌能夠分解尿素。(2)在接種前須要添加空白比照組以檢測培育基是否被污染,該空白比照組應(yīng)實行的操作要求和視察指標(biāo)是將已滅菌、未接種的培育基在相宜溫度下放置相應(yīng)的時間,視察培育基上是否有菌落產(chǎn)生。(3)某同學(xué)在五個培育基平板上均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品液0.1mL,培育一段時間后,平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程實行的接種方法是稀釋涂布平板法,統(tǒng)計的菌落數(shù)應(yīng)介于30~300之間,故選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計數(shù),所以每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為eq\f(156+178+191,3)÷0.1×105=1.75×108個。學(xué)問拓展統(tǒng)計菌落數(shù)目的兩種方法(1)顯微鏡干脆計數(shù)法(2)間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法)題組eq\a\vs4\al(二)分解纖維素的微生物的分別3.分別纖維素分解菌的試驗過程中操作有誤的是()A.經(jīng)選擇培育后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上B.富集培育這一步可省略,但培育的纖維素分解菌少C.經(jīng)稀釋培育后,用剛果紅染色D.比照組可用同樣量的培育液涂布到不含纖維素的培育基上答案A解析經(jīng)選擇培育后,再經(jīng)稀釋,才能將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基上,A錯誤;富集培育可省略,B正確;經(jīng)稀釋培育后,用剛果紅染色,C正確;設(shè)置比照能證明經(jīng)富集培育的確得到了欲分別的微生物,D正確。4.(2024·重慶市一中月考)纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì),植物產(chǎn)生的纖維素能被土壤中某些微生物分解利用,因為它們能產(chǎn)生纖維素酶。依據(jù)相關(guān)學(xué)問回答問題:(1)在微生物培育時,要獲得純凈培育物的關(guān)鍵是__________________;試驗室中常用的滅菌方法有灼燒滅菌、________和________。(2)纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括三種組分,其中________酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(3)在將樣品稀釋涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基之前可以通過________增加纖維素分解菌的濃度。(4)在含纖維素的培育基中加入剛果紅時,剛果紅可以與纖維素形成________復(fù)合物。當(dāng)纖維素被分解后,剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成,用含剛果紅的該培育基培育纖維素分解菌時,培育基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的________。常用的剛果紅染色法有兩種,其中一種是先培育微生物,再加入剛果紅進行顏色反應(yīng),這種方法的缺點之一是加入剛果紅溶液會使________。答案(1)防止外來雜菌的入侵干熱滅菌高壓蒸汽滅菌(2)葡萄糖苷(3)選擇培育(4)紅色透亮圈菌落之間發(fā)生混雜解析(1)在微生物培育時,要獲得純凈培育物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵;試驗室中常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。(2)纖維素酶是一種復(fù)合酶,至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶,其中葡萄糖苷酶能將纖維二糖分解成葡萄糖。(3)在將樣品稀釋涂布到鑒別纖維素分解菌的培育基之前可以通過選擇培育增加纖維素分解菌的濃度。(4)在含纖維素的培育基中加入剛果紅時,剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被分解后,剛果紅—纖維素的復(fù)合物就無法形成,用含剛果紅的該培育基培育纖維素分解菌時,培育基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透亮圈。常用的剛果紅染色法有兩種,其中一種是先培育微生物,再加入剛果紅進行顏色反應(yīng),這種方法的缺點之一是加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜。技法提升微生物的篩選與鑒別方法(1)微生物的篩選方法(2)微生物的鑒別方法高考熱點突破1.(2024·全國卷Ⅱ)在生產(chǎn)、生活和科研實踐中,常常通過消毒和滅菌來避開雜菌的污染。回答下列問題:(1)在試驗室中,玻璃和金屬材質(zhì)的試驗器具________(填“可以”或“不行以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)牛奶的消毒常采納巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是________________________________。(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采納紫外線照耀消毒,其緣由是紫外線能__________________,在照耀前,適量噴灑____________,可強化消毒效果。(4)水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過________(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。(5)某同學(xué)在運用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度,最可能的緣由是____________________。答案(1)可以(2)在達到消毒目的的同時,養(yǎng)分物質(zhì)損失較少(3)破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液(4)氯氣(5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡解析(1)能耐高溫的、須要保持干燥的物品,如玻璃器皿(吸管、培育皿)和金屬用具等可以放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。(2)煮沸消毒法即在100℃煮沸5~6min可以殺死微生物細(xì)胞和一部分芽孢;巴氏消毒法即在70~75℃煮30min或在80℃煮15min,可以殺死微生物,并且保證養(yǎng)分物質(zhì)不被破壞。因此,與煮沸消毒法相比,牛奶消毒常采納的巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法的優(yōu)點是在達到消毒目的的同時,養(yǎng)分物質(zhì)損失較少。(3)因紫外線能破壞DNA結(jié)構(gòu),所以密閉空間內(nèi)的空氣可采納紫外線照耀消毒。在照耀前,適量噴灑消毒液,可強化消毒效果。(4)通常乙醇消毒有氣味,影響水質(zhì),不相宜消毒自來水;高錳酸鉀本身有顏色,消毒后溶液呈紫紅色,無法運用;因此水廠供應(yīng)的自來水通常是經(jīng)過氯氣消毒的。(5)采納高壓蒸汽滅菌時,鍋內(nèi)的水加熱煮沸,將其中原有的冷空氣徹底解除后才能將鍋密閉。假如未將鍋內(nèi)冷空氣排盡,則會出現(xiàn)壓力達到設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應(yīng)溫度的現(xiàn)象。2.(2024·全國卷Ⅲ)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題:(1)分別培育酵母菌通常運用______________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培育基,該培育基應(yīng)采納________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培育一段時間后會視察到菌落,菌落的含義是____________________________________________。(2)酵母菌液體培育時,若通入氧氣,可促進______________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進行厭氧培育,可促進________________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加肯定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的緣由是____________________________________。答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體(2)菌體快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟解析(1)麥芽汁瓊脂培育基的碳氮比較高,而且含糖量高,更適合培育酵母菌,該培育基應(yīng)采納高壓蒸汽滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培育一段時間后可視察到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。(2)酵母菌液體培育時,若通入氧氣,進行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2,釋放能量多,細(xì)胞增殖快;若進行厭氧培育,進行無氧呼吸,產(chǎn)生酒精和CO2,釋放能量少,增殖慢。(3)制作面包時,在面粉中添加肯定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,產(chǎn)生二氧化碳,二氧化碳是氣體,遇熱膨脹而形成小孔,使得面包松軟多孔。3.(2024·全國卷Ⅰ)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸肯定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入肯定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培育基?;卮鹣铝袉栴}:(1)M培育基若用于真菌的篩選,則培育基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制________的生長,加入了鏈霉素的培育基屬于__________培育基。(2)M培育基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長供應(yīng)了多種養(yǎng)分物質(zhì),養(yǎng)分物質(zhì)類型除氮源外還有________________(答出兩點即可)。氮源進入細(xì)胞后,可參加合成的生物大分子有________________(答出兩點即可)。(3)若在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培育,平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是________,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是______________________________________。(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:甲同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其緣由是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)細(xì)菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈(4)乙同學(xué)的結(jié)果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差解析(1)M培育基若用于真菌的篩選,說明M培育基能滿意真菌的生長并抑制其他微生物的生長,鏈霉素是一種抗生素,可抑制細(xì)菌的生長;加入鏈霉素的培育基能篩選出真菌,該培育基屬于選擇培育基。(2)微生物生長所須要的養(yǎng)分成分除氮源外,還須要碳源、水、無機鹽及特別養(yǎng)分物質(zhì);氮元素是蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的組成元素,因此氮源進入細(xì)胞后,可參加蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的合成。(3)淀粉遇碘液會變成藍(lán)色,篩選產(chǎn)淀粉酶的微生物,依據(jù)淀粉遇碘液變藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈,依據(jù)透亮圈篩選產(chǎn)生淀粉酶的微生物。(4)設(shè)計試驗時肯定要涂布至少3個平板作為重復(fù)組,才能增加試驗的勸服力和精確性,在分析試驗結(jié)果時,肯定要考慮所設(shè)置的重復(fù)組的結(jié)果是否相當(dāng),結(jié)果差距太大,意味著操作有誤,乙結(jié)果不合理。4.(2024·全國卷Ⅰ)空氣中的微生物在重力等作用下,可以肯定程度地沉降。某探討小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布狀況。試驗步驟如下:①配制培育基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作無菌平板;③設(shè)置空白比照組和若干試驗組,進行相關(guān)操作;④將各組平板置于37℃恒溫箱中培育一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)?;卮鹣铝袉栴}:(1)該培育基中微生物所需的氮來源于____________________。若要完成步驟②,該培育基中的成分X通常是__________。(2)步驟③中,試驗組的操作是____________________________________________。(3)若在某次調(diào)查中,某一試驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板,而空白比照組的一個平板上出現(xiàn)了6個菌落,這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)

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