生物藥品的細(xì)胞株開發(fā)與優(yōu)化策略考核試卷

生物藥品的細(xì)胞株開發(fā)與優(yōu)化策略考核試卷考生姓名：答題日期：得分：判卷人：

本次考核旨在評估考生對生物藥品細(xì)胞株開發(fā)與優(yōu)化策略的掌握程度，包括細(xì)胞株的建立、篩選、鑒定、培養(yǎng)條件優(yōu)化及質(zhì)量控制等方面的知識(shí)?？忌杞Y(jié)合所學(xué)理論，分析實(shí)際問題，并提出相應(yīng)的解決方案。

一、單項(xiàng)選擇題（本題共30小題，每小題0.5分，共15分，在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的）

1.生物藥品細(xì)胞株開發(fā)的第一步是（）

A.細(xì)胞篩選

B.細(xì)胞培養(yǎng)

C.細(xì)胞傳代

D.細(xì)胞凍存

2.以下哪種細(xì)胞株適用于大規(guī)模生產(chǎn)重組蛋白？（）

A.293細(xì)胞

B.HeLa細(xì)胞

C.Vero細(xì)胞

D.HepG2細(xì)胞

3.細(xì)胞株的遺傳穩(wěn)定性可以通過以下哪種方法進(jìn)行檢測？（）

A.流式細(xì)胞術(shù)

B.Southern印跡

C.PCR

D.ELISA

4.以下哪種物質(zhì)不是細(xì)胞培養(yǎng)過程中必須添加的？（）

A.胰蛋白酶

B.血清

C.青霉素

D.硫酸銨

5.細(xì)胞株的質(zhì)粒穩(wěn)定性可以通過以下哪種方法進(jìn)行檢測？（）

A.DNA測序

B.Southern印跡

C.PCR

D.ELISA

6.細(xì)胞株的生物學(xué)活性可以通過以下哪種方法進(jìn)行檢測？（）

A.流式細(xì)胞術(shù)

B.免疫熒光

C.Westernblot

D.ELISA

7.以下哪種細(xì)胞株不適用于生產(chǎn)病毒載體？（）

A.293細(xì)胞

B.HeLa細(xì)胞

C.293T細(xì)胞

D.Vero細(xì)胞

8.細(xì)胞株的培養(yǎng)溫度通常設(shè)定為（）

A.35℃

B.37℃

C.39℃

D.41℃

9.細(xì)胞株的pH值通常設(shè)定為（）

A.5.5-6.5

B.6.5-7.5

C.7.5-8.5

D.8.5-9.5

10.細(xì)胞株的氧氣需求量通常為（）

A.10%

B.20%

C.30%

D.40%

11.細(xì)胞株的二氧化碳需求量通常為（）

A.0%

B.2%

C.5%

D.10%

12.細(xì)胞株的傳代頻率通常為（）

A.每天一次

B.每周一次

C.每月一次

D.每季一次

13.細(xì)胞株的凍存方法中，最常用的是（）

A.冷凍干燥

B.低溫冷凍

C.常溫保存

D.液氮保存

14.細(xì)胞株的復(fù)蘇方法中，最常用的是（）

A.恒溫復(fù)蘇

B.溫度梯度復(fù)蘇

C.稀釋復(fù)蘇

D.低溫復(fù)蘇

15.細(xì)胞株的污染檢測中，最常用的是（）

A.抗生素檢測

B.紫外線照射

C.顯微鏡觀察

D.流式細(xì)胞術(shù)

16.以下哪種物質(zhì)不是細(xì)胞培養(yǎng)基的成分？（）

A.葡萄糖

B.胰酶

C.血清

D.酵母提取物

17.細(xì)胞株的培養(yǎng)容器中，最常用的是（）

A.試管

B.培養(yǎng)皿

C.膠管

D.燒杯

18.細(xì)胞株的細(xì)胞密度可以通過以下哪種方法進(jìn)行檢測？（）

A.顯微鏡觀察

B.血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

C.流式細(xì)胞術(shù)

D.PCR

19.以下哪種方法不是細(xì)胞株的凍存方法？（）

A.冷凍干燥

B.低溫冷凍

C.常溫保存

D.液氮保存

20.細(xì)胞株的復(fù)蘇方法中，最不常用的是（）

A.恒溫復(fù)蘇

B.溫度梯度復(fù)蘇

C.稀釋復(fù)蘇

D.低溫復(fù)蘇

21.細(xì)胞株的污染檢測中，最不常用的是（）

A.抗生素檢測

B.紫外線照射

C.顯微鏡觀察

D.流式細(xì)胞術(shù)

22.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，最常使用的抗生素是（）

A.青霉素

B.鏈霉素

C.四環(huán)素

D.紅霉素

23.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，最常用的血清品牌是（）

A.FBS

B.PBS

C.DMEM

D.RPMI

24.細(xì)胞株的凍存溫度通常設(shè)定為（）

A.-80℃

B.-20℃

C.-40℃

D.-60℃

25.細(xì)胞株的復(fù)蘇后培養(yǎng)時(shí)間通常為（）

A.24小時(shí)

B.48小時(shí)

C.72小時(shí)

D.96小時(shí)

26.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，最常使用的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法是（）

A.顯微鏡觀察

B.血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

C.流式細(xì)胞術(shù)

D.PCR

27.細(xì)胞株的污染源主要來自（）

A.培養(yǎng)基

B.培養(yǎng)容器

C.操作人員

D.以上都是

28.細(xì)胞株的污染檢測中，最快速的方法是（）

A.抗生素檢測

B.紫外線照射

C.顯微鏡觀察

D.流式細(xì)胞術(shù)

29.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，最常使用的pH調(diào)節(jié)劑是（）

A.NaOH

B.HCl

C.Tris

D.磷酸鹽緩沖液

30.細(xì)胞株的凍存前需要進(jìn)行（）

A.細(xì)胞計(jì)數(shù)

B.質(zhì)量檢測

C.細(xì)胞傳代

D.以上都是

二、多選題（本題共20小題，每小題1分，共20分，在每小題給出的選項(xiàng)中，至少有一項(xiàng)是符合題目要求的）

1.生物藥品細(xì)胞株開發(fā)過程中，需要考慮的因素包括（）

A.細(xì)胞種類

B.細(xì)胞來源

C.細(xì)胞培養(yǎng)條件

D.細(xì)胞傳代頻率

E.細(xì)胞凍存方法

2.以下哪些是細(xì)胞株培養(yǎng)過程中常見的污染類型？（）

A.細(xì)菌污染

B.真菌污染

C.病毒污染

D.放線菌污染

E.淀粉污染

3.細(xì)胞株的鑒定方法包括（）

A.細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察

B.分子生物學(xué)鑒定

C.細(xì)胞生物學(xué)特性鑒定

D.細(xì)胞代謝產(chǎn)物分析

E.細(xì)胞增殖能力檢測

4.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，需要控制的培養(yǎng)條件包括（）

A.溫度

B.pH值

C.氧氣濃度

D.二氧化碳濃度

E.培養(yǎng)基成分

5.以下哪些是細(xì)胞株傳代過程中需要注意的問題？（）

A.避免細(xì)胞過度擁擠

B.避免細(xì)胞損傷

C.保持細(xì)胞活力

D.控制污染風(fēng)險(xiǎn)

E.選擇合適的傳代時(shí)間

6.細(xì)胞株凍存前需要進(jìn)行哪些準(zhǔn)備工作？（）

A.細(xì)胞計(jì)數(shù)

B.細(xì)胞篩選

C.質(zhì)量檢測

D.選擇合適的凍存劑

E.低溫預(yù)冷

7.以下哪些是細(xì)胞株復(fù)蘇過程中需要注意的問題？（）

A.避免細(xì)胞損傷

B.控制溫度梯度

C.保持細(xì)胞活力

D.選擇合適的復(fù)蘇時(shí)間

E.避免污染

8.細(xì)胞株培養(yǎng)過程中，如何減少污染風(fēng)險(xiǎn)？（）

A.使用無菌操作技術(shù)

B.定期更換培養(yǎng)基

C.使用高純度試劑

D.保持實(shí)驗(yàn)室清潔

E.嚴(yán)格人員管理

9.以下哪些是細(xì)胞株質(zhì)量控制的指標(biāo)？（）

A.細(xì)胞活力

B.細(xì)胞形態(tài)

C.細(xì)胞生長曲線

D.細(xì)胞代謝產(chǎn)物

E.細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性

10.細(xì)胞株的凍存方法有哪些？（）

A.冷凍干燥

B.低溫冷凍

C.常溫保存

D.液氮保存

E.真空冷凍

11.細(xì)胞株復(fù)蘇后，如何進(jìn)行培養(yǎng)？（）

A.逐步升溫

B.逐步調(diào)整pH值

C.逐步增加氧氣濃度

D.逐步增加二氧化碳濃度

E.保持適宜的培養(yǎng)環(huán)境

12.細(xì)胞株培養(yǎng)過程中，如何保證細(xì)胞活力？（）

A.適時(shí)更換培養(yǎng)基

B.控制細(xì)胞密度

C.保持適宜的溫度和pH值

D.保持適宜的氧氣和二氧化碳濃度

E.避免細(xì)胞損傷

13.以下哪些是細(xì)胞株污染的預(yù)防措施？（）

A.使用無菌操作技術(shù)

B.定期更換培養(yǎng)基

C.使用高純度試劑

D.保持實(shí)驗(yàn)室清潔

E.定期檢測細(xì)胞污染

14.細(xì)胞株的質(zhì)量檢測方法包括（）

A.細(xì)胞活力檢測

B.細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察

C.分子生物學(xué)鑒定

D.細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性檢測

E.細(xì)胞代謝產(chǎn)物分析

15.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，如何保證細(xì)胞生長穩(wěn)定？（）

A.適時(shí)更換培養(yǎng)基

B.控制細(xì)胞密度

C.保持適宜的溫度和pH值

D.保持適宜的氧氣和二氧化碳濃度

E.避免細(xì)胞損傷

16.細(xì)胞株的凍存過程中，如何避免細(xì)胞損傷？（）

A.逐步降溫

B.使用合適的凍存劑

C.低溫預(yù)冷

D.避免細(xì)胞聚集

E.使用合適的凍存容器

17.細(xì)胞株復(fù)蘇后，如何進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)？（）

A.顯微鏡觀察

B.血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

C.流式細(xì)胞術(shù)

D.PCR

E.ELISA

18.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，如何保證細(xì)胞生長環(huán)境的穩(wěn)定？（）

A.定期更換培養(yǎng)基

B.控制細(xì)胞密度

C.保持適宜的溫度和pH值

D.保持適宜的氧氣和二氧化碳濃度

E.使用無菌操作技術(shù)

19.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，如何保證細(xì)胞培養(yǎng)的均一性？（）

A.使用均一的培養(yǎng)容器

B.適時(shí)更換培養(yǎng)基

C.控制細(xì)胞密度

D.保持適宜的溫度和pH值

E.使用無菌操作技術(shù)

20.細(xì)胞株的質(zhì)量控制流程包括（）

A.細(xì)胞活力檢測

B.細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察

C.分子生物學(xué)鑒定

D.細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性檢測

E.細(xì)胞代謝產(chǎn)物分析

三、填空題（本題共25小題，每小題1分，共25分，請將正確答案填到題目空白處）

1.生物藥品細(xì)胞株的建立通常采用______技術(shù)。

2.細(xì)胞株的遺傳穩(wěn)定性可以通過______方法進(jìn)行檢測。

3.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，常用的抗生素包括______和______。

4.細(xì)胞株的培養(yǎng)溫度通常設(shè)定為______。

5.細(xì)胞株的培養(yǎng)pH值通常設(shè)定為______。

6.細(xì)胞株的培養(yǎng)容器中，最常用的是______。

7.細(xì)胞株的傳代頻率通常為______。

8.細(xì)胞株的凍存方法中，最常用的是______。

9.細(xì)胞株的復(fù)蘇方法中，最常用的是______。

10.細(xì)胞株的污染檢測中，最常用的是______。

11.細(xì)胞株的生物學(xué)活性可以通過______方法進(jìn)行檢測。

12.細(xì)胞株的質(zhì)量控制指標(biāo)包括______和______。

13.細(xì)胞株的凍存溫度通常設(shè)定為______。

14.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，常用的血清品牌是______。

15.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，常用的培養(yǎng)基是______。

16.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，常用的胰酶是______。

17.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，常用的pH調(diào)節(jié)劑是______。

18.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，常用的氧氣濃度是______。

19.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，常用的二氧化碳濃度是______。

20.細(xì)胞株的凍存前需要進(jìn)行______和______。

21.細(xì)胞株的復(fù)蘇后培養(yǎng)時(shí)間通常為______。

22.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，最常使用的細(xì)胞計(jì)數(shù)方法是______。

23.細(xì)胞株的污染源主要來自______、______和______。

24.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，如何減少污染風(fēng)險(xiǎn)？可以通過______、______和______。

25.細(xì)胞株的質(zhì)量控制流程包括______、______、______和______。

四、判斷題（本題共20小題，每題0.5分，共10分，正確的請?jiān)诖痤}括號(hào)中畫√，錯(cuò)誤的畫×）

1.生物藥品細(xì)胞株的建立只需要進(jìn)行一次傳代即可。（）

2.細(xì)胞株的遺傳穩(wěn)定性越高，其生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量越穩(wěn)定。（）

3.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，可以添加抗生素來預(yù)防污染。（）

4.細(xì)胞株的培養(yǎng)溫度和pH值對細(xì)胞生長沒有影響。（）

5.細(xì)胞株的傳代頻率越高，其活力越強(qiáng)。（）

6.細(xì)胞株的凍存前需要進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)和質(zhì)量檢測。（）

7.細(xì)胞株的復(fù)蘇后可以直接用于實(shí)驗(yàn)研究。（）

8.細(xì)胞株的污染檢測可以通過顯微鏡觀察進(jìn)行。（）

9.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，可以添加血清來提高細(xì)胞活力。（）

10.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，可以使用胰蛋白酶進(jìn)行細(xì)胞傳代。（）

11.細(xì)胞株的凍存溫度越低，其復(fù)蘇后的細(xì)胞活力越好。（）

12.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，氧氣濃度對細(xì)胞生長沒有影響。（）

13.細(xì)胞株的二氧化碳濃度對細(xì)胞生長沒有影響。（）

14.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，可以添加抗生素來促進(jìn)細(xì)胞生長。（）

15.細(xì)胞株的質(zhì)量控制可以通過細(xì)胞活力檢測進(jìn)行。（）

16.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，可以添加血清來預(yù)防污染。（）

17.細(xì)胞株的凍存前需要進(jìn)行細(xì)胞篩選。（）

18.細(xì)胞株的復(fù)蘇后需要逐步升溫以避免細(xì)胞損傷。（）

19.細(xì)胞株的培養(yǎng)過程中，可以添加抗生素來提高細(xì)胞產(chǎn)量。（）

20.細(xì)胞株的質(zhì)量控制可以通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察進(jìn)行。（）

五、主觀題（本題共4小題，每題5分，共20分）

1.請簡述生物藥品細(xì)胞株開發(fā)的主要步驟及其各自的目的。

2.在生物藥品細(xì)胞株的優(yōu)化過程中，如何平衡細(xì)胞生長速度和產(chǎn)品質(zhì)量之間的關(guān)系？

3.請舉例說明在細(xì)胞株開發(fā)與優(yōu)化過程中可能遇到的問題及其解決策略。

4.結(jié)合實(shí)際案例，分析生物藥品細(xì)胞株開發(fā)與優(yōu)化對生物制藥產(chǎn)業(yè)的重要性。

六、案例題（本題共2小題，每題5分，共10分）

1.案例題：

某生物制藥公司在開發(fā)一種新型疫苗時(shí)，需要建立一種能夠高效表達(dá)疫苗抗原的細(xì)胞株。請根據(jù)以下信息，分析該公司在細(xì)胞株開發(fā)與優(yōu)化過程中可能采取的策略：

-疫苗抗原基因已成功克隆并插入到表達(dá)載體中。

-目標(biāo)細(xì)胞株需要能夠在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中高效表達(dá)抗原。

-公司現(xiàn)有的細(xì)胞庫中包含多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞株。

請分析并回答以下問題：

-該公司可能選擇哪種細(xì)胞株作為表達(dá)系統(tǒng)？

-在細(xì)胞株篩選和優(yōu)化過程中，公司可能會(huì)關(guān)注哪些關(guān)鍵指標(biāo)？

-如果在表達(dá)過程中發(fā)現(xiàn)細(xì)胞株表達(dá)效率較低，公司可能會(huì)采取哪些措施來提高表達(dá)水平？

2.案例題：

某研究團(tuán)隊(duì)正在開發(fā)一種用于治療癌癥的生物藥品，該藥品需要通過基因工程技術(shù)在細(xì)胞中表達(dá)一種特定的蛋白質(zhì)。請根據(jù)以下信息，分析該團(tuán)隊(duì)在細(xì)胞株開發(fā)與優(yōu)化過程中可能遇到的挑戰(zhàn)及解決方案：

-蛋白質(zhì)需要在細(xì)胞內(nèi)正確折疊并形成穩(wěn)定的天然構(gòu)象。

-目前的細(xì)胞株在表達(dá)該蛋白質(zhì)時(shí)存在表達(dá)效率低和蛋白質(zhì)穩(wěn)定性差的問題。

-研究團(tuán)隊(duì)已嘗試了多種細(xì)胞株和表達(dá)系統(tǒng)，但效果均不理想。

請分析并回答以下問題：

-該團(tuán)隊(duì)可能如何確定導(dǎo)致蛋白質(zhì)表達(dá)效率低和穩(wěn)定性差的原因？

-在優(yōu)化細(xì)胞株過程中，團(tuán)隊(duì)可能會(huì)考慮哪些因素來提高蛋白質(zhì)的表達(dá)水平和穩(wěn)定性？

-如果優(yōu)化嘗試失敗，團(tuán)隊(duì)可能會(huì)考慮哪些替代策略來克服這些挑戰(zhàn)？

標(biāo)準(zhǔn)答案

一、單項(xiàng)選擇題

1.B

2.A

3.B

4.D

5.B

6.D

7.C

8.B

9.B

10.D

11.C

12.B

13.B

14.D

15.A

16.A

17.C

18.A

19.C

20.D

21.E

22.A

23.A

24.D

25.E

二、多選題

1.ABCDE

2.ABCD

3.ABCDE

4.ABCDE

5.ABCDE

6.ABCDE

7.ABCDE

8.ABCDE

9.ABCDE

10.ABCDE

11.ABCDE

12.ABCDE

13.ABCDE

14.ABCDE

15.ABCDE

16.ABCDE

17.ABCDE

18.ABCDE

19.ABCDE

20.ABCDE

三、填空題

1.培養(yǎng)基

2.Southern印跡

3.青霉素鏈霉素

4.37℃

5.6.5-7.5

6.培養(yǎng)皿

7.每周一次

8.液氮保存

9.恒溫復(fù)蘇

10.顯微鏡觀察

11.ELISA

12.細(xì)胞活力細(xì)胞形態(tài)

13.-80℃

14.FBS

15.DMEM

16.胰蛋白酶

17.Tris

18.20%

19.5%

20.細(xì)胞計(jì)數(shù)質(zhì)量檢測

21.48小時(shí)

22.血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀

23.培養(yǎng)基培養(yǎng)容器操作人員

24.使用無菌操作技術(shù)定期更換培養(yǎng)基使用高純度試劑

25.細(xì)胞活力檢測細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察分子生物學(xué)鑒定細(xì)胞遺傳穩(wěn)定性檢測細(xì)胞代謝產(chǎn)物分析

四、判斷題

1.×

2.√

3.√

4.×

5.×

6.√

7.×

8.√

9.√

10.√

11.×

12.×

13.×