酶標儀方法確認作業(yè)指導書

酶標儀方法確認作業(yè)指導書酶標儀方法確認作業(yè)指導書一、目的指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率（%）表示。二、精密度指在規(guī)定的測試條件下，同一個均勻供試品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度，一般用偏差、標準偏差或相對標準偏差表示。三、專屬性指在其他成分（如雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、輔料等）可能存在下，采用的方法能正確測定出被測物的特性。色譜法應附代表性圖譜，并標明諸成分在圖中的位置，分離度應符合要求。四、檢出限指試樣中被測物能被檢測出的最低量。色譜法一般采用信噪比法。一般以信噪比為3：1或2：1時相應濃度或注入儀器的量確定檢測限。五、線性指在設計的范圍內(nèi)，測量結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關系的程度。要求列出回歸方程、相關系數(shù)和線性圖。六、范圍指能達到一定精密度、準確度和線性，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。對酶標儀所涉及到的方法進行確認，以證實酶標儀能夠正確運用這些方法，并能證實該方法適用于預期的用途，在誤差的允許范圍之內(nèi)，可在本實驗室內(nèi)運行。2、范圍適用于實驗室酶標儀所涉及到的標準方法及非標準方法。3、職責3.1技術(shù)負責人指定專人負責方法的確認，并對方法確認的結(jié)果進行核查批準；3.2參加方法確認的工程師應詳細記錄試驗現(xiàn)象及數(shù)據(jù)，總結(jié)實驗結(jié)果，并編寫成文件；3.3相關人員嚴格按此作業(yè)指導書作業(yè)書。4、名詞解釋4.1檢出限方法檢出限是指某一方法在給定的置信水平上可以檢出被測物質(zhì)的最小濃度（相對檢出限）或最小質(zhì)量（絕對檢出限）。方法檢出限的確定方法有不同，根據(jù)不同的檢測方法選擇合適的確定方法。線性關系是指分析方法能夠得到與被測物質(zhì)的量或濃度具有直線關系的測定值的能力。4.3精密度精密度是指從均勻樣品中抽取的復數(shù)個待測樣品進行重復分析測定時，所得到的一系列測定數(shù)據(jù)彼此之間的一致程度。測定值的誤差以偏差、標準偏差、或相對標準偏差的形式表示。4.4準確度準確度指分析方法所得測定值與真實值（標準值）相符合的程度，通常以測定重現(xiàn)精密度時所得總平均值與真值的差于真值的比值表示（真值一般使用理論值，如果理論值不存在或即使存在但很難求出的情況下，可采用經(jīng)過確證或認可的數(shù)值來代替）。4.5分析結(jié)果的不確定度測量不確定度：表征合理地賦予被測量之值的分散性，與測量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)。在實際工作中，結(jié)果的不確定度可能有很多來源，例如定義不完整、取樣、基體效應和干擾、環(huán)境條件、質(zhì)量和容器的不確定度、參考值、測量方法和程序中的估計和假定、以及隨機變化等。方法確認時，應努力嘗試找出影響不確定度的所有分量，并作出合量的評估，并應確保報告結(jié)果的表達方式不會引起錯覺。合理的評估應建立在對方法實施知識以及測量范圍的基礎上，并利用過去的經(jīng)驗。對各影響量產(chǎn)生的不確定度分量不應有遺漏，也不能有重復。在評定測量不確定度時，對給定條件的所有重要不確定分量，均應采用適當?shù)姆治龇椒右钥紤]。4.6方法的靈敏度靈敏度可用儀器的響應值或其它指示量與對應的待測物質(zhì)的濃度或量之比來描述。一個方法的靈敏度可因試驗條件的變化而變化。在一定的實驗條件下，靈敏度具有相對的穩(wěn)定性。5、作業(yè)內(nèi)容5.1線性評價5.1.1準備6個不同水平的標準溶液，每個濃度的標準溶液隨機順序測2次，做標準曲線，觀察其回歸方程及線性相關系數(shù)是否符合要求。5.1.2標準曲線的最高點濃度不大于最低點濃度的50倍。5.1.3曲線的最低點最好和報告的檢出限相近。5.2檢出限確認5.2.1方法檢出限（MDL）重復測定試劑空白中的標品至少7次，計算出標準偏差s，乘以3可以得到MDL的估計值。選擇質(zhì)地均勻的樣品，并確保樣品無讀數(shù)，加入和MDL估計值濃度相近的標品，重復試驗至少7次，7次試驗平均分布在三天內(nèi)完成。計算加標試驗的標準偏差，MDL=t（n-1）×s，其中t值是指在99%置信區(qū)間，自由度為n-1時的t分布的系數(shù)，可查表得出注：計算得到的MDL值應該不超過10倍的加標量，否則，應該選擇更低的濃度值重復上述步驟。計算加標樣的回收率和RSD值，回收率的范圍應該在70~130%之間，RSD≤20%?；厥章?標品的實際值/加標的理論值×100%5.3準確度和精確度確認5.3.1準確度確認用加標回收率測定，在樣品中加入一定量標準物質(zhì)測定其回收率。至少測試7次加標樣，且7次加標樣應該平均在三天做完。記錄測試結(jié)果并計算回收率，回收率范圍應該在80~120%之間，RSD≤20%。5.3.2精確度確認試驗應盡量覆蓋方法提及的不同材質(zhì)樣品試驗加標水平應盡量覆蓋方法的測試范圍，要包括比MDL稍大的濃度點，