發(fā)酵工藝流程

1、精選文庫發(fā)酵工藝標準操作流程 (SOP)一生產(chǎn)前準備每次生產(chǎn)前按品種配方將所需原料稱重準備齊全,并確認生產(chǎn)原料庫存量,保證原料庫存量足夠下次生產(chǎn)所需.二生產(chǎn)前檢查1檢查蒸汽、壓縮空氣、冷卻水進出的管路是否暢通,所有閥門是否良好,并關閉所有閥門.2檢查電路、控制柜、開關的狀態(tài),確保控制柜運行正常.3檢查空壓機油表油表及軸承、三角帶、氣缸等是否正常,確?？諌簷C運行正常.4檢查發(fā)酵罐攪拌減速機的油量及密封軸降溫水是否正常.三總過濾器滅菌當蒸汽總管路上的壓力為0.2-0.25MPa時,打開總過濾器進氣閥輸入蒸汽,同時打開出氣閥的跑分閥、排氣閥、排污閥,當三個閥均排出蒸汽時,調(diào)整進氣閥、排污閥,穩(wěn)定總過

2、濾器壓力0.15-0.2MPa,此時打開壓力表下跑分,計時滅菌2-2.5小時.滅菌結束后啟動空壓機,當空氣輸入管道壓力大于總過濾器壓力時,關閉蒸汽閥,打開空氣閥,將空氣出入總過濾器,然后調(diào)整進氣閥與排污閥,穩(wěn)定總過濾器壓力在0.15-0.2MPa,保持通氣在15-20小時,當出氣閥跑分和排污閥放出的空氣為干燥空氣時,完成滅菌.四分過濾器滅菌 1當蒸汽管路壓力為0.2-0.25MPa時,打開蒸汽過濾器的進氣閥和排污閥,當蒸汽管路中無蒸汽凝結液后,再將蒸汽輸入空氣管路,然后打開分過濾器的進氣閥、排污閥及出氣閥上的跑分,當所有閥門均有蒸汽排出后,調(diào)整進氣與排污閥,是壓力穩(wěn)定在0.11-0.15MPa

3、,計時滅菌30-35分鐘.滅菌結束后,關閉蒸汽過濾器進出氣閥、排污閥,并立即將空氣輸入預過濾器,使空氣通過預過濾器進入到分過濾器,再調(diào)整分過濾器排污閥使壓力穩(wěn)定在0.11-0.15MPa,備用.五發(fā)酵罐空消 (可與分過濾器滅菌同時進行)空消前先將發(fā)酵罐去垢洗凈,添加少量清水,然后密封進料口,將排氣閥打開少許,同事將蒸汽引入盤管(或夾套)進行預熱,待罐溫升到80時(種子罐40即可),關閉盤管(或夾套)進氣閥,再從出料口、進氣口、取樣口三路輸入蒸汽,(蒸汽管路壓力不低于0.2-0.25MPa),當罐內(nèi)溫度達到125-130時,通過三路蒸氣浴出氣閥調(diào)整罐內(nèi)壓力,使其穩(wěn)定在0.11-0.15MPa,計

4、時滅菌30-35分鐘.空消結束后,關閉所有進氣閥并將排氣閥開大,當罐內(nèi)壓力下降至0MPa后,打開進料口和排污閥,再將發(fā)酵罐進行一次沖洗.六發(fā)酵罐實消打開進水閥,按照生產(chǎn)要求放入所需水量,再根據(jù)生產(chǎn)品種按配方依次投入培養(yǎng)基原料,并同時打開攪拌,攪拌5-10分鐘后取樣,用氫氧化鈉和濃鹽酸調(diào)PH值7.2-7.5之間,然后密封進料口將排氣閥打開少許,同時打開盤管(或夾套)的進出氣閥門輸入蒸汽進行預熱,等到罐內(nèi)溫度到達80以上后,關閉盤管(或夾套)進氣閥門,并將排氣閥關小,然后將蒸汽從進氣口、出料口、取樣口三路直接通入罐內(nèi),當罐內(nèi)溫度上升到121-125后,打開發(fā)酵罐體上與空氣進氣閥上的所有跑分,再通過

5、調(diào)整三路進氣與排氣閥將罐內(nèi)壓力穩(wěn)定在0.11-0.15MPa,此時開始計時滅菌30-35分鐘,滅菌期間將攪拌停止.滅菌結束后,關閉所有進蒸汽閥門,將排氣閥開大,同時開啟攪拌,并立即打開進氣閥,輸入無菌空氣,保證罐壓不低于0.05-0.06MPa(當發(fā)酵罐通入無菌空氣后,一定注意分過濾器與空氣總管路壓力一定要大于發(fā)酵罐內(nèi)壓力),打開盤管(或夾套)冷卻水進出閥門(確定蒸汽出閥門關閉),開始降溫,按照不同菌種接種溫度要求控制降溫結束時間(一般在34左右),降溫結束后即可接種.七接種1種子罐接種先將進氣閥逐漸關閉,同時將排氣閥開大,當罐體壓力表與空氣流量計降到0刻度時,關閉排氣閥,用酒精棉圍在接種口四

6、周并點燃,然后打開接種口,將制備好的菌種孢子懸浮液在火焰中直接從接種口倒入罐內(nèi),馬上關閉接種口,同時迅速打開進氣閥使罐內(nèi)壓力上升到0.05MPa以上,打開排氣閥,調(diào)整進氣與排氣閥使罐內(nèi)壓力穩(wěn)定在0.05-0.06MPa2培養(yǎng)罐接種接種前應先將蒸汽輸入接種管道,再把接種管道兩端的跑分打開,當跑分都有蒸汽排出時,計時滅菌15-30分鐘,滅菌結束后關閉跑分和進蒸汽閥,將種子罐排氣閥關小,當種子罐內(nèi)壓力大于培養(yǎng)罐壓力后,先將接種管道進口閥門打開,再打開培養(yǎng)罐端出口閥開始接種,接種量按不同菌種生產(chǎn)需求控制.接種完畢后,先將培養(yǎng)罐端出口閥關閉,再將接種管道進口閥關閉,完成接種,最后把種子罐所有進出氣閥門關

7、閉,停止攪拌. 八發(fā)酵罐培養(yǎng)控制接種后調(diào)整進氣閥與排氣閥,將罐內(nèi)壓力穩(wěn)定在0.05-0.06MPa,同時按照不同菌種的需求調(diào)整好罐內(nèi)的溫度和通氣量當罐內(nèi)溫度超出或者低于標準溫度時,打開盤管或夾套進出閥門,出入冷卻水或者蒸汽,等溫度達到標準溫度后關閉進出閥門,停止冷卻水或者蒸汽的輸入,這就完成了一次溫度的控制調(diào)整.通氣量的控制,按照不同菌種的要求,在確保管內(nèi)壓力穩(wěn)定的前提下,根據(jù)空氣流量計的顯示,通過進氣閥和排氣閥的調(diào)整進行通氣量的調(diào)整.冬季結冰期到來以后,每次生產(chǎn)停止后,應把蒸汽和空氣管路及發(fā)酵罐盤管或者夾套的冷凝水和冷卻水排盡,排不盡的可用空氣把水吹出來,以防止凍裂管路和設備,給生產(chǎn)造成不便.九取樣與放罐取樣檢測時間,按照生產(chǎn)菌種的種類來制定12-16小時不等,開始取樣檢測后,前期每2小時一次,后期取樣時間縮短為0.5-1小時,每次取樣前后都要對取樣口進行10-15分鐘滅菌處理,.當取樣檢測,發(fā)現(xiàn)符合芽孢大量形成,芽孢含量70%,雜菌量3%,含菌量30*108CFU