體外診斷試劑生產(chǎn)工藝及質(zhì)量控制省局.ppt

1、體外診斷試劑的原理、流程和質(zhì)量控制：指可單獨使用或與儀器、器具、設備或系統(tǒng)結合使用的試劑、試劑盒和校準品，用于人體樣本(各種體液、細胞、組織樣本等)的體外檢測。)在疾病預防、診斷、治療監(jiān)測、預后觀察、健康狀況評估和遺傳病預測過程中。概念的解釋，1。檢查的對象是體液、細胞和組織樣本；要測試的物質(zhì)是蛋白質(zhì)、核酸、離子等。目的是檢查或確定樣品中檢測到的物質(zhì)(有或沒有，或多或少)的數(shù)量，以便評估健康狀況。2.一般原理是，不可見物質(zhì)可以通過生物(如細菌生長)、化學(如顏色反應)、生物化學(如酶催化)、免疫(如免疫復合物)和分子生物學(如核酸擴增)反應轉(zhuǎn)化為可觀察的(視覺觀察)或可測量的(光、電、磁和其他

2、物理信號)。3.表格包括：試劑、試劑盒、校準品和質(zhì)量控制產(chǎn)品。4.由于特異性或各種干擾因素的影響，試驗結果一般被用作臨床診斷的輔助手段，且大多不是金標準(結論來自組織病理學檢查、手術發(fā)現(xiàn)、影像診斷、病原體分離培養(yǎng)和長期隨訪)。5.結果中有偏差(假陽性和假陰性)，但它們應該是可控的。體外診斷試劑檢測的物質(zhì)、抗原、抗體(包括血型和組織匹配)和核酸通常是直接指標；其他類型的蛋白質(zhì)、多肽、糖、激素、酶、酯、維生素、無機離子等。通常是輔助指示器；微生物；麻醉藥品、精神藥品和有毒藥品。體外診斷試劑的分類(根據(jù)學科)，1。臨床血液學檢驗試劑；2.臨床體液檢驗試劑；3.臨床化學檢驗試劑；4.臨床免疫學檢驗試劑

3、；5.臨床微生物檢驗試劑；6.組織細胞學檢驗試劑；7、過敏、自身免疫診斷試驗試劑；8、遺傳病檢測試劑；9、分子生物學檢驗試劑。體外診斷試劑有多種形式，涵蓋廣泛的學科。每當生物學、化學、生物化學、分子生物學，特別是物理學中的新技術誕生或被打破時，就會產(chǎn)生一種新型的體外診斷試劑。了解體外診斷試劑的原理、典型應用模式、被測物質(zhì)作用產(chǎn)生的物理信號(光、電、磁)、樣品中的固相或液相、試劑中的化學物質(zhì)和生物活性物質(zhì)(包括標志物)、肉眼或儀器的檢測信號、檢測結果、與對照的比較、放大、對應的關鍵控制點、校準、質(zhì)量控制和標準品(材料)原料質(zhì)量：純度、生物活性(效價、親和力、位點等)。)、多肽核酸序列的準確性、含

4、量、濃度(預延遲反應、后延遲反應)、污染(化學污染、微生物污染)過程：分離、純化、制備、包被、取樣、密封、干燥、真空度、標記、滅活、醛敏化和滲透標準物質(zhì)(指用于體外診斷試劑試驗的物質(zhì)，具有一定的特征值，用于評價測定方法，包括標準物質(zhì)和對照物質(zhì))。套件評估、儀器校準和設置。16種系統(tǒng)評價類型的分類表1(注：帶的類別是我省已經(jīng)或?qū)⑸a(chǎn)的類別)、16種系統(tǒng)評價類型的分類表2、16種系統(tǒng)評價類型的分類表3、體外診斷試劑的分析性能評價，分析性能主要包括：分析靈敏度；分析特異性；測量范圍；測量精度；批內(nèi)不精確；批間不精確。一般來說，上述性能要求應在工廠檢查時進行檢查！原理：酶聯(lián)免疫吸附試驗是一種基于免疫反

5、應，將抗原和抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合的高靈敏度免疫檢測新技術。以酶標板和磁珠(微粒)為載體，將抗原(或抗體)包被在載體上，與樣品中相應的抗體(或抗原)反應形成免疫復合物，然后與不同位點的抗原(或抗體)標記物(包括標記酶、發(fā)光物質(zhì)、稀土元素等)反應。)，最后與底物反應產(chǎn)生可檢測的物理信號，從而實現(xiàn)抗體或抗原的檢測。工藝流程：抗原(或抗體)包被(包被、密封、干燥、抽真空)；標記物和底物的制備、濃度測定(滴定)、制備和分裝；緩沖溶液和其他液體成分的制備。質(zhì)量控制要點：主要生物原料的質(zhì)量控制；標記過程；滴定。涂層工藝；含有蛋白質(zhì)的成分需要抗菌措施。典型的酶聯(lián)免疫吸附試驗，膠體金(

6、硒)試劑，原理：層析加抗原抗體免疫反應?？乖?或抗體)固定在膜上，膠體金標記試劑吸附在結合墊上；當待測樣品加入樣品墊時，其通過毛細管作用向前移動，使結合墊上的膠體金標記物溶解并相互反應，然后在膜上層析，當其移動到固定的抗體(或抗原)區(qū)域時，待測樣品與金標記試劑的結合物與其特異性結合并被截留，并聚集在檢測帶上，肉眼可觀察到顯色結果。工藝流程：膠體金標記物的制備；確定抗原(抗體)和標記物的濃度；膜條的制備、干燥和分裝。質(zhì)量控制要點：主要生物原料的質(zhì)量控制；確定標記物的制劑濃度；貼膜、密封和干燥；薄膜切割(需要防塵措施)；其中，溫度和濕度的控制尤為關鍵：膠體金免疫層析反應示意圖，核酸擴增試劑，原理：

7、聚合酶鏈反應技術是一種利用DNA在體內(nèi)復制的原理和DNA變性復性的特性，在體外大規(guī)模擴增靶基因的技術。聚合酶鏈反應技術在模板、脫氧核糖核酸探針、Mg2等條件下，用耐熱的Taq酶代替脫氧核糖核酸聚合酶，用合成的脫氧核糖核酸引物代替核糖核酸引物。并且通過三個循環(huán)(25-30個循環(huán)):DNA變性、引物-模板組合(復性)和延伸，靶基因被擴增100萬倍。工藝流程：引物(探針)溶液的制備和分裝，核酸提取試劑的制備和分裝，酶類物質(zhì)的分裝，緩沖液的制備和分裝，其他溶液的制備和分裝。質(zhì)量控制要點：引物(探針)的純度和濃度、核酸提取試劑的制備、各種酶的功效和抗污染酶。熒光聚合酶鏈反應檢測示意圖、熒光聚合酶鏈反應檢

8、測擴增曲線、核酸分子雜交試劑、原理：利用核酸的互補、變性和復性雙鏈堿基，以已知堿基序列的單鏈核酸片段為探針，與待測樣品中的單鏈核酸互補配對，判斷是否存在互補的同源核酸序列。包括原位雜交試劑和探針擴增試劑。工藝流程：微孔板(或膜)的包被和密封，各種探針的制備和分裝，各種緩沖液的制備和分裝。質(zhì)量控制要點：捕獲探針的包被和密封，各種探針(目標探針、預擴增探針和擴增探針)的純度和濃度。分子雜交試驗示意圖，常用生化試劑(100，000級要求)，方法：比濁法、比色法和血凝法(凝集時間)產(chǎn)品：酶類：含酶、輔酶和牛血清白蛋白等。干粉或液體形式。2.凝血：試劑成分含有其他活性成分(如兔腦粉等)。)。生產(chǎn)過程：原

9、料稱量、溶解、定容、中試、分裝、組裝和成品檢驗。關鍵控制點：原料稱量、準備和物料平衡。常用生化試劑(清潔環(huán)境)，產(chǎn)品：無機離子檢測(離子選擇電極法，火焰分光光度計干化學試劑，原理：濾紙作為載體，各種試劑成分被浸泡和干燥，作為試劑層并固定在支持物上。試紙上的每個測試塊都會與測試樣品中的成分發(fā)生酶促化學反應，導致試紙塊發(fā)生不同的顏色變化。色深與樣品中的成分含量成正比，然后光電耦合元件解讀試塊的顏色，達到測量樣品中化學成分含量的目的。生產(chǎn)工藝：特定試劑的制備、試劑條的浸泡、干燥、切割、分裝等。關鍵控制點：試劑的準備、試劑條的潤濕和干燥。培養(yǎng)基是微生物、植物和動物組織生長和維持的人工營養(yǎng)物，一般含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽(包括微量元素)、維生素和水等。一些培養(yǎng)基還含有抗生素和色素。工藝特點：按配方稱取原料，混合均勻，調(diào)節(jié)酸堿度，滅菌，檢驗，分裝。由于