C13尿素呼氣試驗(yàn)解析

1、C13尿素-呼氣試驗(yàn),Introduction,幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，簡(jiǎn)稱H. pylori）是一種單極、多鞭毛、末端鈍圓、螺旋形彎曲的細(xì)菌。在體內(nèi)呈螺旋形,在體外為桿狀,故名。 H. pylori長(zhǎng)2.54.0m，寬0.51.0m,有12個(gè)彎曲,革蘭陰性。H pylori是微需氧菌，環(huán)境氧要求58%，在大氣或絕對(duì)厭氧環(huán)境下不能生長(zhǎng)。 H. pylori的尿素酶極為豐富，約含菌體蛋白的15%，活性相當(dāng)于變形桿菌的400倍。尿素酶催化尿素水解形成“氨云”保護(hù)細(xì)菌在高酸環(huán)境下生存。 H. pylori的全基因序列已經(jīng)測(cè)出，VacA基因和CagA基因分別編碼空泡毒素和細(xì)

2、胞毒素相關(guān)蛋白，專家多認(rèn)為這兩種蛋白的表達(dá)與胃疾病關(guān)系較為密切。,幽門螺桿菌（Hp）的危害,感染地域廣泛，人群眾多；全球40 歲以上的人群中有超過(guò)半數(shù)的感染Hp，發(fā)展中國(guó)家人口感染率高于發(fā)達(dá)國(guó)家。中國(guó)是Hp高感染率地區(qū),平均感染率為58.07%，1020 歲感染已達(dá)50%以上。 具有傳染性，中國(guó)家庭內(nèi)傳播可能是Hp 感染的主要途徑。對(duì)兒童危害顯著，兒童Hp感染會(huì)造成發(fā)育遲緩和營(yíng)養(yǎng)不良，且將來(lái)胃癌的發(fā)病率也會(huì)高于成人。 與多種疾病相關(guān)。,Background,1987 年Graham 等首先報(bào)道應(yīng)用穩(wěn)定性核素13C 標(biāo)記的尿素呼氣試驗(yàn)檢查Hp 感染, 由于它的非侵入性和無(wú)創(chuàng)性逐漸被重視, 尤其是

3、近年來(lái)隨著質(zhì)譜儀及13C-尿素價(jià)格的下調(diào), 使13C-UBT 的應(yīng)用得以推廣。 用13C-尿素呼氣試驗(yàn)（UBT）診斷Hp感染在國(guó)內(nèi)也已經(jīng)開展了20余年，技術(shù)趨于成熟。目前已成為根除Hp治療后隨診觀察的首選非侵入性方法。,幽門螺桿菌（Hp）的檢測(cè),幽門螺桿茵(Helicobacter pylori，Hp)感染診斷中的應(yīng)用利用Hp產(chǎn)生尿素酶特性而設(shè)計(jì)的13C-尿素呼氣試驗(yàn)(Urea breath Test，UBT)能反映全胃實(shí)時(shí)的Hp感染狀態(tài)，而避免了由于感染灶分布不均引起的活檢誤差，加上已被廣泛知曉的高準(zhǔn)確度，不少學(xué)者也將13C-尿素呼氣試驗(yàn)視為診斷胃Hp感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”。,幽門螺桿菌檢測(cè)適應(yīng)癥

4、,幽門螺桿菌檢測(cè)方法,幽門螺桿菌檢測(cè)結(jié)果的判斷,C13呼氣檢測(cè)的優(yōu)點(diǎn),13C-尿素呼氣試驗(yàn)測(cè)定Hp感染具有很高的特異性和靈敏度，目前被公認(rèn)為胃部Hp感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，提高Hp感染的檢出率。該試驗(yàn)還具有非侵入性、重復(fù)性好、無(wú)放射性、無(wú)痛苦、安全、可靠、操作簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)老人、小孩、危重病人、孕產(chǎn)婦、懼怕胃鏡檢查者等特殊群體均適用，在臨床中得到了最廣泛應(yīng)用，其操作方法簡(jiǎn)單。,ZHP型C13呼氣質(zhì)譜儀,我院采用北京中科科儀有限公司生產(chǎn)的ZHP-2001型C13呼氣質(zhì)譜儀。 利用13C-呼氣試驗(yàn)的原理進(jìn)行幽門螺桿菌（Hp）及肝臟功能等的檢測(cè)，因具有精確、非侵入性、重復(fù)性好、無(wú)放射性、無(wú)痛苦、操作簡(jiǎn)單等

5、優(yōu)點(diǎn)，受到了廣大患者的歡迎。,丁國(guó)林,于科岐. ZHP-2001型13C呼氣質(zhì)譜儀的研制J. 分析儀器,2004,04:9-14.,13C,13C是一種自然穩(wěn)定的同位素，被用作特殊代謝產(chǎn)物的標(biāo)記?；颊呖诜欢康?3C后，經(jīng)過(guò)特定的復(fù)雜生化代謝過(guò)程，13C成為的13CO2的形式，并通過(guò)呼氣釋放出來(lái)。通過(guò)取樣的形式，我們將呼出的氣體進(jìn)行脫水、除氮、去氧之后，分離出二氧化碳，經(jīng)過(guò)毛細(xì)管直接注入質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行碳同位素分析，然后電氣系統(tǒng)將接收到的離子流信號(hào)經(jīng)過(guò)放大遞交至計(jì)算機(jī)進(jìn)行分析，得出最終檢測(cè)結(jié)果。該過(guò)程無(wú)痛苦，無(wú)放射性，普適于孕婦和兒童等特殊人群。,尿素13C膠囊,我院采用深圳市中核海得威生物科技

6、有限公司產(chǎn)品（計(jì)量：75mg/粒）。 13C-尿素在胃內(nèi)分布較均勻，其與胃黏膜的接觸更廣泛，能更全面反映整個(gè)胃黏膜Hp的感染情況。 研究認(rèn)為13C-呼氣試驗(yàn)是檢測(cè)Hp現(xiàn)癥感染的最好方法。,檢測(cè)操作步驟,醫(yī)生準(zhǔn)備工作：掃描并打印患者檢驗(yàn)條碼，分別貼于3個(gè)樣品管上； 患者準(zhǔn)備工作：空腹?fàn)顟B(tài)最好，次之應(yīng)禁食2小時(shí)以上； 操作步驟：平靜吸氣后向收集管內(nèi)連續(xù)不間斷吹氣4-6s，為零時(shí)氣；而后用80ml涼開水送服13膠囊，靜坐20，30 min后（在此期間禁食水）再向收集管內(nèi)用相同方法各吹氣1次，吹氣過(guò)程中囑患者用力適度均勻，以防影響試驗(yàn)結(jié)果，呼氣完畢后立刻旋緊采集試管蓋子。 封存結(jié)果：將同一受試者的3個(gè)

7、待測(cè)樣品管用送檢單卷好，并用皮套勒住； 送檢樣品：常溫避光保存，小心防壓，避免樣品管的破碎，并檢查封簽、標(biāo)注。,13尿素呼氣試驗(yàn)的原理,尿素13C呼氣試驗(yàn)(13C-UBT)是利用Hp內(nèi)源性尿素酶分解尿素的特性，以13C標(biāo)記的尿素為示蹤劑，經(jīng)檢測(cè)呼氣中13CO2量，從而判定Hp在人體存在的方法。,簡(jiǎn)并實(shí)驗(yàn)步驟,有Hp感染的患者，其尿素酶活性增高持續(xù)時(shí)間至少1小時(shí)，13CO2排出量的峰值大約在20-30分鐘出現(xiàn)。 為了簡(jiǎn)便，有些學(xué)者認(rèn)為只收集本底和30分鐘兩個(gè)樣品進(jìn)行檢測(cè)，仍然能保持試驗(yàn)的準(zhǔn)確性。（也可以在30分鐘時(shí)吹兩管，檢測(cè)其中一管，另一管備用。）,測(cè)量和計(jì)算,13C沒(méi)有放射性，可以被包括質(zhì)譜

8、儀(mass spectrometer)在內(nèi)的多種儀器探測(cè)。 呼氣試驗(yàn)時(shí)，呼出氣體中13C的豐度決定于給予劑量、標(biāo)記底物中13C的豐度以及經(jīng)過(guò)代謝的13CO2的產(chǎn)量，其中給予劑量影響最大。13CO2呼氣分析時(shí)，由于呼氣中13C豐度變化非常小，常采用13CO2超量“”值來(lái)表示，計(jì)算公式為： =(13CO2/12CO2)樣品(13CO2/12CO2)標(biāo)準(zhǔn)品-11000 =-本底,結(jié)果判定,即高于本底的值DAB(delta above baseline)或DOB(delta over baseline)，再根據(jù)單位時(shí)間的CO2產(chǎn)量得到單位時(shí)間13C劑量同收率PDR(percentage dose r

9、ecovered)和累計(jì)PDR(cumulative percent dose reoovered)，單位時(shí)間13C PDR和累計(jì)PDR通常被用于反映代謝的基本情況。 結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)為：口服13C尿素后，呼氣樣本13C原子峰值（電壓值）超過(guò)基線呼氣樣本5%即為陽(yáng)性，也就是說(shuō)： DOB值4.00.4 時(shí)，可判定受試者為Hp陽(yáng)性。,13UBT的靈敏度和特異性,由于尿素13C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)試劑可在胃內(nèi)均勻分布，因此結(jié)果不受細(xì)菌點(diǎn)狀分布的影響,具有較高的準(zhǔn)確性。 大樣本研究及薈萃分析提示：尿素13C呼氣試驗(yàn)與組織病理結(jié)果對(duì)照比較，其靈敏性和特異性均在95%以上；而在有Hp 感染臨床癥狀的患者中，尿素13C

10、呼氣試驗(yàn)的檢出正確率甚至可高達(dá)95 % - 100 %。,謝鵬雁,劉新光,陳紹亮,李培勇,吳靖川,嚴(yán)建,朱瑞森. 評(píng)價(jià)國(guó)產(chǎn)-13C-尿素呼氣試驗(yàn)藥盒診斷幽門螺桿菌感染的效果J. 中國(guó)臨床藥理學(xué)雜志,2004,06:409-411.,檢測(cè)前注意事項(xiàng),受試者應(yīng)空腹或禁食2小時(shí)以上； 檢測(cè)前不可劇烈活動(dòng)，避免血液酸堿度發(fā)生變化； 吹氣管應(yīng)插入樣品管底部，邊呼氣邊徐徐向試管口移動(dòng)； 受試者每次向試管呼氣完成后，應(yīng)隨即蓋緊管蓋； 如下因素可能會(huì)影響該試驗(yàn)的診斷結(jié)果： 一個(gè)月內(nèi)使用過(guò)抗生素、鉍制劑、質(zhì)子泵抑制劑等Hp敏感藥物； 一周內(nèi)的上消化道急性出血可使Hp受抑制，有可能造成假陰性； 部分胃切除手術(shù)可能

11、造成同位素從胃中快速排空或胃酸缺乏。,規(guī)范操作的細(xì)節(jié)步驟,呼氣試管在使用前不得開啟，拆開封后的藥盒應(yīng)盡早使用，暴露在空氣中的時(shí)間不得超過(guò)30 rain，以免吸收空氣中CO2而影響測(cè)量結(jié)果； 鋁塑料板膠囊必須密封，以免造成膠囊潮解粘連，如膠囊破損，不得使用； 試驗(yàn)藥盒應(yīng)在4-8的干燥條件下保存，在18個(gè)月的有效期內(nèi)使用； 指導(dǎo)患者正確進(jìn)行深呼吸訓(xùn)練，確保標(biāo)本采集的質(zhì)量。,表1 C13和C14尿素呼氣試驗(yàn)的比較,實(shí)施中需要注意的問(wèn)題,個(gè)人要求治療,健康教育,向患兒家屬講解感染幽門螺桿菌的危害性及根治Hp的意義，對(duì)于Hp 檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性的患兒，醫(yī)師指導(dǎo)患兒用藥，告知注意觀察用藥后反應(yīng)。 向患兒及家長(zhǎng)講

12、解幽門螺桿菌這個(gè)菌是會(huì)傳染的，必須要和家人分餐，碗筷消毒通風(fēng)，飲食定時(shí)定量，避免食用硬、冷、辛辣等刺激性食物，不要喝碳酸型飲料，餐前便后洗手，避免交叉感染。 在用藥期間有不適及時(shí)復(fù)診，治療結(jié)束停藥1個(gè)月后復(fù)查Hp，如結(jié)果為陰性，則表明Hp已經(jīng)根除。,護(hù)理配合,在臨床檢查Hp 感染的方法很多，非侵入性檢查方法，13 C 呼氣試驗(yàn)檢測(cè)幽門螺桿菌感染的檢查方法具有診斷Hp 感染有較高的敏感性、特異性、無(wú)痛苦、安全的優(yōu)點(diǎn)，13 C 呼氣試驗(yàn)無(wú)放射性，對(duì)環(huán)境無(wú)影響，適用于兒童、孕婦、乳母Hp 感染的診斷及用藥后療效觀察，為了確保試驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，檢測(cè)中要做好患兒及家長(zhǎng)的護(hù)理。,護(hù)理配合,針對(duì)檢測(cè)陽(yáng)性的患者，通過(guò)發(fā)予健康宣教材料及口頭指導(dǎo)等方法講解抗Hp治療的方法，督促患者及早就醫(yī)，嚴(yán)格按醫(yī)囑要求服藥。治療結(jié)束后及時(shí)電話隨訪，確保治療質(zhì)量。,In summary,C13呼氣試驗(yàn)是目前Hp感染的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。由于其敏感性與特異性優(yōu)于快速尿素酶試驗(yàn)（RUT），適用于流行病學(xué)調(diào)查、治療前檢查及治療后復(fù)查