分解纖維素的微生物的分離.ppt

1、第 1 部分,專 題 2,課題 3,理解教材新知,把握熱點(diǎn)考向,應(yīng)用創(chuàng)新演練,知識(shí)點(diǎn)一,知識(shí)點(diǎn)二,考向一,考向二,1.纖維素酶是復(fù)合酶，包括C1酶、Cx酶和 葡萄糖苷酶等組分。 2纖維素酶的作用是：纖維素 纖維二糖 葡萄糖。 3剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被分解 后，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。 4分離后，為確定得到的是纖維素分解菌，還需進(jìn)行發(fā)酵 產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。,自讀教材夯基礎(chǔ) 1纖維素 (1)基本組成單位： 。 (2)含量：是地球上最豐富的 類物質(zhì)。 (3)分布： 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物。此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。,葡萄糖,多糖,棉花,元貝

2、駕考 元貝駕考2016科目一 科目四金手指考試 金手指駕駛員考試,復(fù)合酶,C1酶,Cx酶,葡萄糖苷酶,C1酶和Cx酶,葡萄糖苷酶,(3)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證：,11,1 mL,完全,分解,基本無(wú),變化,3纖維素分解菌的篩選 (1)方法： 染色法，常用的有兩種，一種是先 ，再加入 進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在 時(shí)就加入 。,剛果紅,培養(yǎng)微生物,剛果紅,倒平板,剛果紅,以纖維,素分解菌,紅色,跟隨名師解疑難 纖維素分解菌的篩選 (1)篩選原理： 剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖反應(yīng)。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，該復(fù)合物無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。,

3、(2)篩選方法：,自讀教材夯基礎(chǔ) 1實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)流程 (1)土壤取樣：選擇富含 的環(huán)境,纖維素,濃度,微生物,選擇培養(yǎng)基,搖床,12 d,混濁,(3)梯度稀釋 (4)涂布培養(yǎng)：將樣品涂布到 的培養(yǎng)基上 (5)篩選菌株： 染色法，挑選產(chǎn)生 的菌落,鑒別纖維素分解菌,剛果紅,透明圈,2課題延伸纖維素分解菌的鑒定 (1)為確定得到的透明圈中的菌落是纖維素分解菌，需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn) 的實(shí)驗(yàn)，纖維素酶的發(fā)酵方法有 和 兩種。 (2)纖維素酶的測(cè)定方法，一般是采用對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的 進(jìn)行 測(cè)定。,纖維素酶,液體發(fā)酵,固體發(fā)酵,葡萄糖,定量,1在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，為什么要進(jìn)行梯度稀釋？ 提示：通過(guò)梯度稀

4、釋使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)菌，在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落。 2分離分解纖維素的微生物實(shí)驗(yàn)，只是分離純化的第一步，為確保得到的是纖維素分解菌，還需要做什么工作？ 提示：還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實(shí)驗(yàn)。,跟隨名師解疑難 1纖維素分解菌的篩選過(guò)程中所用兩種培養(yǎng)基的成分和作用 (1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基：,5 g 1g 1.2g 0.9g 0.5g 0.5g 0.5g 0.5 g,(2)鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基：,2纖維素分解菌的篩選過(guò)程中所用兩種培養(yǎng)基的比較 (1)纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，利用液體培養(yǎng)基能使?fàn)I養(yǎng)成分充分消耗，以增加纖維素分解菌的濃度。 (2)纖維素分解菌的鑒

5、別培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，因?yàn)樾枰谂囵B(yǎng)基上形成我們?nèi)庋劭梢?jiàn)的菌落。 (3)在上述選擇培養(yǎng)基中能以纖維素作為碳源和能源的微生物可以正常生長(zhǎng)，而其他絕大多數(shù)微生物不能正常生長(zhǎng)；而在上述鑒別培養(yǎng)基中，絕大多數(shù)微生物都可以正常生長(zhǎng)。,特別提醒 (1)判斷某個(gè)培養(yǎng)基是否具有選擇作用時(shí)，應(yīng)設(shè)立基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行對(duì)照。 (2判斷所使用的培養(yǎng)基是否被雜菌污染時(shí)，應(yīng)設(shè)立不接種該菌種的培養(yǎng)基進(jìn)行空白對(duì)照。,例1 下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述，不正確的是() A剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入 B剛果紅可以在菌落形成后加入 C在菌落形成前倒平板時(shí)加入，剛果紅不需要滅菌 D在菌落形成后加入剛果紅時(shí)，剛果紅不需要滅菌,解

6、析利用剛果紅篩選纖維素分解菌時(shí)，剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入，也可以在菌落形成后加入。在細(xì)菌菌落形成前倒平板時(shí)加入，要進(jìn)行滅菌，以防雜菌的侵入，影響纖維素分解菌菌落的形成；在菌落形成后加入剛果紅，則不需要滅菌。 答案C,例2 某實(shí)驗(yàn)小組欲從土壤中篩選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)步驟如下，請(qǐng)給予合理的補(bǔ)充。 (1)采樣與培養(yǎng)：將采集的土樣混勻后稱取1 g，置于經(jīng)過(guò)_法滅菌處理的_(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基中，28 振蕩培養(yǎng)。,(2)接種與選擇：為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過(guò)高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行_處理。之后，將菌液涂布接種于以_為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，30 條件下培養(yǎng)。為避免污染，需

7、將培養(yǎng)皿呈_狀態(tài)放置。此外，為排除其他因素的影響，提高實(shí)驗(yàn)可信度，本步驟需設(shè)計(jì)_作為空白對(duì)照。 (3)篩選與純化：將適量的碘液滴加在平板中的菌落周?chē)绻渲車(chē)默F(xiàn)象是_，則說(shuō)明此種菌能夠_。從平板中挑取實(shí)驗(yàn)效果明顯的目的菌株，采用_法接種于新的培養(yǎng)基平板上，可對(duì)菌株進(jìn)行進(jìn)一步的純化。,解析(1)對(duì)培養(yǎng)基的滅菌方式是高壓蒸汽滅菌，因?yàn)楹竺嬉M(jìn)行涂布，所以應(yīng)該用液體培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)。 (2)減小培養(yǎng)液菌體濃度一般用稀釋方法。由于題目要求選出能分泌淀粉酶的芽孢桿菌，所以培養(yǎng)基中的碳源就應(yīng)只有淀粉。倒置可以減少培養(yǎng)基受污染，為排除其他因素影響，需要設(shè)置未接種的空白的培養(yǎng)基作對(duì)照組。 (3)淀粉被水解，培養(yǎng)基會(huì)出現(xiàn)透明圈的現(xiàn)象。用平板劃線法來(lái)培養(yǎng)，可進(jìn)一步純化菌種。,答案(1)高壓蒸汽滅菌液體 (2)系列稀釋(或“梯度稀釋”)淀粉倒置未接種的空白培養(yǎng)基(或