生藥的鑒定方法--資源與質量標準

1、1,第十章 生藥鑒定的方法,第一篇,總論,2,第二節(jié),生藥鑒定的方法,基源鑒定法,性狀鑒定法,理化鑒定法,生物鑒定法,顯微鑒定法,生藥鑒定的方法,五大鑒定法,第四節(jié),3,基源鑒定法（又稱“來源鑒定法”），就是應用植物、動物或礦物形態(tài)和分類學等方面的知識，對中藥的來源或原料藥進行鑒定，確定其正確的學名（或礦物的名稱）或中成藥的原料組成，以保證在應用中品種準確的一種方法。,一、基源鑒定法,第四節(jié),4,采用先觀察整體、后觀察局部形態(tài)的原則，掌握形態(tài)上的共性和特性。 描述時要準確使用植物形態(tài)學知識及專業(yè)術語，認真的觀察、解剖和描述之后，方可進行下一步工作，以達到確定品種的目的。 檢品不齊全的，須深入產

2、地調查和采集實物，了解其相關信息，否則就無法著手鑒定。,1 鑒定步驟及方法,（1）觀察及描述,第四節(jié),5,通過查閱有關植物資料或植物分科、分屬的檢索表，確定其科屬。 對于某些未知品種鑒定特征不全或缺少有關資料者，直接查閱與中藥鑒定、藥用植物等相關的綜合性書籍或圖鑒。,即與收藏的已經確定學名的標本核對。 在有條件的情況下，若能與模式標本(發(fā)表新種時所被描述的植物標本)核對，對正確的鑒定更為有利。,（2）查閱文獻資料,（3）標本核對鑒定,第四節(jié),6,通常用于原植物鑒定的標本類型有：蠟葉標本、液浸標本和干燥標本。,（4）標本的采集與制備,自學,2 學名的鑒定,第四節(jié),7,性狀鑒定法也叫“直觀鑒定法”

3、，是用感觀來鑒定中藥性狀是否與規(guī)定的標準或對照品相符合的一種方法。它是由傳統鑒別方法與現代生物和礦物形態(tài)學相結合而形成的。 具體地說，就是用眼看、手摸、鼻嗅、口嘗、感試等十分簡便的方法來鑒別中藥的真?zhèn)巍⒓兌然虼致怨烙嬈焚|的優(yōu)劣。,二、性狀鑒定法,第四節(jié),8,1 性狀特征描述方法,藥材形狀,藥材大小,藥材顏色,表面特征,藥材質地,斷面特征,藥材之氣,藥材之味,藥材性狀包括,通常采用兩種方法描述,第四節(jié),9,一是使用生物學或礦物學的形態(tài)、組織學等名詞，便于掌握藥材鑒定的規(guī)律性，便于分類和推廣。 二是采用廣大醫(yī)藥工作者在長期實踐中積累起來的生動、形象的經驗鑒別術語，語言簡單，好記易懂，針對性強，但不

4、易掌握其規(guī)律性。,第四節(jié),10,觀察形狀時，亦可用下列術語描述，如： 頭（指根及根莖的上部）。 蘆（指根頂端短縮的根莖）。 身（指根的主根）。 梢（指根的下部或支根）。 須（指小根或須根）。 連珠（指根及根莖膨大部分呈連珠狀）。 疙瘩（指突起不規(guī)則）等。,2 性狀鑒定的內容,（1）形狀：指藥材的形狀，一般較為固定，其與藥用部位密切相關。,第四節(jié),11,單位多用“cm” 。 對鑒定部分藥材具有重要意義。,（2）大?。合抵杆幉牡拇笮?、粗細、厚薄等。,牛膝,川牛膝,第四節(jié),12,有些藥材以顏色命名如黃芩、紫草等。 藥材的色澤可作為其質量的標志，如玄參要黑、茜草要紅、黃連要黃。,（3）顏色：常指商品藥

5、材的色澤，一般較為固定。,紫草,第四節(jié),13,色澤的變化與藥材的質量有關，如綿馬貫眾久貯，根莖和葉柄基部斷面變?yōu)樽睾谏荒芩幱?；枸杞子和牛膝變黑后，就說明其已變質。,第四節(jié),14,藥材的顏色，一般均為復合色調，描述的顏色應以后一種色調為主，前一種為附助色調。如小茴香呈黃綠色，即以綠色為主，黃色為附。 另有用“或”和“至”連接，如王不留行呈黑色或棕紅色(未成熟)、天冬的表面呈黃白色至黃棕色。,第四節(jié),15,（4）表面特征：指藥材的表面（包括外表面和內表面、上表面和下表面）所能看到的特征。,是否光滑,是否粗糙,有無皮孔,有無毛茸,有無鱗葉,其它附屬物,有無紋理,有無褶皺,有無槽溝,有無節(jié)等,第四

6、節(jié),16,“松泡”表示質輕而松，斷面多裂隙，如南沙參。 “粉性”表示含有一定量的淀粉，折斷時常有粉塵散落，如山藥。,5 質地：是指用于折試藥材所感知到的特征。描述質地的各種術語，均有一定含義。,南沙參,山藥,第四節(jié),17,“黏性”表示具黏液質，如石斛嚼之則顯黏性。 “油潤”表示其質地柔軟，含油而有潤澤，如熟地黃 “糟”表示枯朽，呈朽木狀，如川木香。,熟地黃,石斛,川木香,第四節(jié),18,“角質”表示質地堅實，斷面且呈半透明狀或有光澤（常因含多量淀粉，蒸煮時致使糊化而成），如法半夏。 “柴性”表示纖維性強，木質成分較多，折之如柴，敲之作響，如桑白皮。,法半夏,桑白皮,第四節(jié),19,（6）斷面特征：

7、包括自然折斷面和刀橫切(或削)的平面。,“菊花心”：指根或根莖的橫切面的中心部位具有類似菊花瓣狀的放射狀紋理，如黃芪。 “車輪紋”：指藥材的斷面紋理呈車輻狀，如防已。,第四節(jié),20,（6）斷面特征：包括自然折斷面和刀橫切(或削)的平面。,“油點”：指具有紅色或紅棕色油室或油細胞，如當歸. “星點”：指大黃髓部的異型復合維管束，如大黃。,第四節(jié),21,（6）斷面特征：包括自然折斷面和刀橫切（或削）的平面。,“霜”或“毛”：指藥材析出的結晶，如茅蒼術。 “云錦花紋” ：指何首烏的花朵狀紋理(異型復合維管束，存在于皮層)，如何首烏。 “金井玉欄”：指某些根類藥材斷面淺棕黃色的形成層環(huán)與類白色的皮部，

8、如桔梗。,第四節(jié),22,（7）氣：藥材的氣是由于含有揮發(fā)性物質的緣故，有些藥材的氣十分特殊，可作為鑒別的主要依據。如阿魏具強烈的蒜樣臭氣；白蘚皮有似羊膻氣；,白蘚皮,第四節(jié),23,（8）味：是用味覺來識別藥材，又稱嘗法。如五味子，甘草。 藥材的味也是評價質量的標準之一。黃連黃柏以味越苦越好；烏梅以酸質量為佳。,第四節(jié),24,（9）水試：利用某些藥材在水中產生各種特殊的變化來鑒別藥材。,如紅花水浸泡后，水液變成金黃色，其花色不褪。 如蘇木投入熱水中，呈鮮艷的桃紅色透明溶液。,第四節(jié),25,（10）火試：是指用火燒、煅藥材，觀察所產生的現象，以鑒別藥材。,血竭粉置白紙上，火烤即熔化，色澤鮮紅如血，

9、透明無殘渣。 海金沙點燃發(fā)出爆鳴聲及閃光，可區(qū)別相似品松花粉及蒲黃。,第四節(jié),26,顯微鑒定法就是利用顯微鏡、顯微技術及顯微化學方法等對中藥進行分析鑒定，以確定其真?zhèn)?、純度、品質以及鑒別依據。,三、顯微鑒定法,第四節(jié),27,橫切片：觀察組織的排列特征。 縱切片：觀察莖木類中藥的某些細胞組織。 磨片：堅硬藥材如骨、貝殼類。,1 顯微標本片的制備,永久制片,半永久片,臨時制片,分類,粉末片：多用于觀察組織碎片、細胞及后含物等。 解離組織片：觀察某些細胞的形狀，如纖維等。 表面片：觀察葉、花、全草、果實和種子表面特征。,第四節(jié),28,通過觀察生物藥的組織構造特征來達到鑒定目的。 主要用于個體較小的完

10、整藥材鑒別。,2 顯微鑒定的主要內容,組織鑒定,粉末鑒定,顯微常數,顯微化學,顯微定量,組織鑒定,第四節(jié),29,通過觀察生藥的細胞、內含物和顆粒物質的性狀特征來達到鑒定的目的。,粉末鑒定,用于粉末藥材、外形較大或組織構造無鑒別特征的藥材、破碎藥材、粉末性的中成藥。,用途,第四節(jié),30,主要有用于植物的葉類中藥鑒別的柵表細胞比、氣孔數、氣孔指數、脈島數和脈端數等。,物理常數測定,用顯微化學反應來檢查中藥中細胞壁和細胞內含物的化學物質的性質來達到鑒定的目的。,顯微化學鑒定,第四節(jié),31,顯微化學反應：主要用于藥材的臨時切片或粉末，主要進行： 細胞壁的鑒別：如木質化細胞壁、木栓化細胞壁等。 各類成分

11、的鑒別：如糖類、蛋白質、生物堿等。 顯微定位：就是用顯微化學的方法確定藥材中化學成分的存在部位(有效部位)，以此鑒定藥材的質量和品種。 基本要求：有效成分明確，選擇有效成分具有的特殊反應。使之產生顏色或結晶，確定有效成分存在部位。 具體方法：,第四節(jié),32,利用顯微鏡及顯微測量的某些手段，對一定重量單味藥材粉末中的某些顯微特征數量進行分析，或測定粉末性中成藥中某個組分百分含量的一種方法。,顯微定量,本法亦適用于粉末中藥混存物的含量測定。 顯微定量分析主要用于解決采用理化方法難以控制中藥質量的一些問題。,用途,基本要求及方法,第四節(jié),33,需定量的藥材應呈細粉狀態(tài)，被測目的物一般需具備2個條件：

12、 一是應輪廓清晰、可以計數的顆粒。 二是應易于檢識且遇常用的顯微化學試劑和封藏劑不發(fā)生形態(tài)變化。,定重量、定面積法：該法是一種直接定量的方法。 比率計數定量法：“石松子法”。,第四節(jié),34,3 顯微特征的觀察與描述,一般描述方法,粉末特征描述,細胞形狀描述,組織排列描述,大小的描述,顏色的描述,數量的描述,先多數后少數,先特殊后一般,先感觀后測試,第四節(jié),35,4 電子顯微鏡鑒定技術,電子顯微鏡主要分為透射電鏡和掃描電鏡兩大類。在中藥鑒定工作中常使用掃描電子顯微鏡或分析電子顯微鏡。,特點,適用范圍,自學,自學,第四節(jié),36,理化鑒定法就是利用中藥中存在某些化學成分的化學性質和物理性質，通過化學

13、的、物理的或儀器分析的手段，鑒定其真?zhèn)?、純度、內在質量，以及有害物質的有無或含量多少。,四、理化鑒定法,第四節(jié),37,1 理化鑒定的應用范圍,2 理化鑒定的一般方法,就是根據中藥具有的各種特殊成分的理化性質，進行的真?zhèn)舞b別。包括物理分析法、化學分析法和物理化學分析法。,就是根據中藥含有的功效成分或主要成分，測定其相對的含量，本法主要用于中藥的質量評價和純度檢查。,定性鑒別,定量鑒別,第四節(jié),38,即使用儀器或其他方法測定某些中藥如揮發(fā)油類、油脂類、樹脂類、加工品類、提取物以及某些液體中藥的物理常數，以鑒定其真?zhèn)魏图兌鹊囊环N方法。,利用中藥中所含的某些化學成分，在一定溫度下能夠升華的性質，獲得升

14、華物后，在顯微鏡下觀察其升華物的形狀、顏色或加某種化學試劑觀察其化學反應作為鑒別的特征。,微量升華,物理常數的測定,第四節(jié),39,利用生藥含有蛋白質帶電荷的成分，在同一電場作用下，由于各組分所帶電荷的性質、電荷數目以及分子質量不同，而泳動方向和速度不同，在一定時間內，各成分的泳動率不同，結合譜帶數和染色不同達到鑒定的目的。,利用某些化學試劑能與中藥中的某種或某類化學成分產生特殊的氣味、顏色、沉淀或結晶等反應，來作為鑒別真?zhèn)蔚氖侄巍?電泳分析法,化學定性分析,第四節(jié),40,生藥的化學定量分析是通過對中藥含有的某種有效成分、有效部位、雜質或有害物質的含量測定，來控制中藥質量的一種方法。 生藥化學定

15、量分析通常包括重量分析法和容量分析法兩大類。,化學定量分析,第四節(jié),41,它是通過測定中藥中被測物質在某些特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度，對該物質進行定性和定量分析的方法。 藥品分析一般用200400nm的紫外光區(qū)；400850nm的可見光區(qū)；2.515m(或按波數計為4000667cm-1)的紅外光區(qū)。,光譜鑒定法,紫外光譜法：利用中藥所含組分的不飽和程度及含量差異，導致紫外光譜峰位和峰強的差別來鑒定。,第四節(jié),42,可見分光光度法：利用中藥溶液顏色對光的吸收度，以鑒定某種成分或組分含量的方法。,紅外光譜法：通常測定中藥粉末、提取物或化學單體的紅外曲線反映中藥所含各組分官能團的差異。,

16、原子吸收光譜法：用于中藥中無機元素和雜質檢查。,第四節(jié),43,熒光光譜法:利用生藥中的某些成分在吸收自然光或紫外光后能發(fā)生熒光的性質，對生藥及其所含成分進行鑒定的一種方法。 熒光定性分析：其方法主要有下列幾種： 一是直接取生藥的飲片、粉末或其浸出液，如秦皮。 二是本身無熒光的中藥，經化學方法處理后。 三是利用熒光顯微鏡觀察生藥的粉末或切片。 熒光定量分析：利用被測物質的熒光強度和溶液濃度成正比的關系，對中藥所含的成分進行含量測定。,第四節(jié),44,色譜鑒定法,柱色譜法,紙色譜法,薄層色譜法,薄層掃描法,毛細管相鑒定法,氣相色譜法,高效液相色譜法,質譜鑒定法,核磁共振光譜鑒定法,熱分析法,色譜光譜

17、聯用分析法,X射線衍射法,聚類分析法,第四節(jié),45,免疫鑒定法 細胞生物學鑒定法 生物效價測定法 純指標測定法 DNA遺傳標記鑒定法 mRNA差異顯示鑒定法,五、生物鑒定法,利用生藥或其所含的化合物對生物體的作用強度，以及用DNA特異性遺傳標記特征和基因表達差異等來鑒別生藥的品種和質量的一種方法。,第四節(jié),46,生藥中含有過量的水分，不僅易霉爛變質或使有效成分分解，還會使應用稱量上相對地減少了實際用量而不能達到治療目的。 控制中藥中的水分含量對于保證中藥質量有密切關系。,第三節(jié),生藥的常規(guī)檢測項目,一、水分測定,1 意義,第五節(jié),47,烘干法：適用于不含揮發(fā)性成分生藥的水分測定。 甲苯法：適用

18、于含揮發(fā)性成分生藥的水分測定。 減壓干燥法：適用于含有揮發(fā)性成分貴重生藥的水分測定。 氣相色譜法：含水量的計算采用外標法。 紅外干燥器：可快速測定生藥的含水量，直接讀出干燥失重的數量，方法簡便，但有一定的誤差。,2 方法,第五節(jié),48,適用于有效成分尚不清楚或有效成分尚無精確定量方法的生藥的質量控制。 生藥中的成分在水、不同濃度的乙醇或醚中，其浸出物的含量大致有一定的范圍。 因此測定生藥浸出物的含量，對于控制生藥質量具有實際意義。,二、浸出物測定,1 意義,第五節(jié),49,水溶性浸出物測定：分冷浸法和熱浸法（%）。 醇溶性浸出物測定：參照水溶性浸出物測定法測定（熱浸法須在水浴上加熱）。 醚溶性浸

19、出物測定：利用脂肪提取器（索氏提取器）進行，用乙醚為溶劑。,2 方法,第五節(jié),50,將生藥粉碎加熱，高溫熾灼至灰化，則細胞組織及其內含物灰燼成為灰分而殘留，由此所得的灰分稱為“生理灰分”。 各種生藥的生理灰分應在一定范圍以內，所測灰分數值高于正常范圍時，說明有其他無機物污染和摻雜。 測定灰分的目的是限制生藥中的泥沙和雜質的含量，以保證生藥的純度。,三、灰分測定,1 意義,第五節(jié),51,總灰分測定：供試品粉碎，先炭化，再使完全灰化并至恒重，根據殘渣重量，計算供試品中含灰分的含量（%）。 酸不溶性灰分測定：取總灰分測定項所得的灰分，加稀鹽酸置水浴上加熱后，用無灰濾紙濾過。根據殘渣重量，計算出供試品

20、中含酸不溶性灰分的含量(%)。,2 方法,第五節(jié),52,利用生藥中所含揮發(fā)油成分能與水蒸氣同時蒸餾出來的性質，在特制的揮發(fā)油測定器中測定其含量。,四、揮發(fā)油測定,1 原理,甲法：相對密度在1.0以下的揮發(fā)油測定方法。直接用揮發(fā)油測定器測定。 乙法：相對密度在1.0以上的揮發(fā)油測定方法，在測定器加入二甲苯。,2 方法,第五節(jié),53,第六節(jié),1、黃曲霉毒素的分析 2、農藥殘留量的檢測 生藥中有機氯類農藥殘留量的分析 生藥中有機磷農藥的分析 3、一般雜質限量檢查 重金屬的檢查 砷鹽的檢查 鐵鹽的檢查 氯化物的檢查,生藥的安全性檢測,第六節(jié),54,第七節(jié),生藥的指紋圖譜是指生藥經過適當處理后，采用一定

21、的分析方法和手段，得到的能夠標示其特征的共有峰圖譜，用以控制生藥質量和品種鑒定。,一、中藥指紋圖譜的內容 二、中藥指紋圖譜的標準 （一）中藥材指紋圖譜 （二）中藥注射劑指紋圖譜,生藥的指紋圖譜測定,第七節(jié),55,重點內容,1、掌握生藥的鑒定方法（四大鑒別）。 2、掌握生藥的常規(guī)檢測項目（方法、定義、原理及意義）。 3、熟悉生藥的安全性檢測。 4、了解生藥指紋圖譜技術。,56,第十一章 生藥的資源及其質量標準的制定,第一節(jié) 生藥的資源,57,藥用植物有11146余種，如五味子、黃柏、茯苓、厚樸、冬蟲夏草等。 藥用動物1581種，蟾酥、斑蝥、蜈蚣、蟬蛻等都是來自野生的藥用動物。 藥用礦物80種。石

22、膏、芒硝、自然銅等都是采自天然的藥用礦物。 資料分析，四川省所產種類最多。,一、生藥資源現狀,生藥的天然資源,58,中藥天然資源的分布,東北產區(qū)（關藥）,華北產區(qū)（北藥）,華東產區(qū)（浙藥部南）,山茱萸,黃芩,蛤蟆油,59,西北產區(qū),青藏產區(qū),海洋產區(qū),九大產區(qū),枸杞子,珍珠,海馬,冬蟲夏草,60,西南產區(qū)（川云貴藥）,華南產區(qū)（廣藥）,內蒙古產區(qū),天麻,鉤藤,甘草,61,藥物類生藥的栽培 動物類生藥的養(yǎng)殖 生藥的組織培養(yǎng) 中藥飲片的加工與炮制 中成藥的生產 藥材產地與道地藥材,二、生藥的人工資源,生藥的人工資源,62,道 地 藥 材,“道地藥材”通俗的理解是指特定產區(qū)的優(yōu)質正品藥材 。 如著名

23、的“四大懷藥”、“浙八味”、“四大北藥”、“四大南藥”。,63,地 黃,山 藥,牛 膝,菊 花,四大 懷藥,64,浙 八味,浙貝母,菊 花,延胡索,白芍,郁 金,白 術,玄 參,麥 冬,65,四大 北藥,當 歸,黃 芪,黨 參,大 黃,66,一、建立和完善藥用植（動）物自然保護區(qū) 二、建立種質資源庫 三、做好科學預測 四、野生瀕危藥用資源的引種與馴化,三、生藥資源的保護與可持續(xù)利用,生藥資源的保護,67,二、生藥資源的開發(fā)與利用,一、從古代本草中挖掘中藥材資源 二、從民間用藥經驗及民族藥中尋找中藥材資源 三、依據植物的親緣關系尋找中藥材資源 四、以化學成分為線索尋找中藥材資源 五、擴大藥用部位，增加新品種,68,第二節(jié)、影響生藥質量的自然因素,生藥品種的影響 植物生長發(fā)育的影響 植物遺傳與變異因素的影響 環(huán)境因素的影響：光