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文檔簡介

1、完成實驗,酵母菌種群的數(shù)量是怎樣隨時間變化的?,提出問題,作出假設(shè),設(shè)計實驗,分析結(jié)果,得出結(jié)論,變量如何控制?,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,該探究活動中涉及4個科學(xué)方法: (1)數(shù)學(xué)模型法; (2)抽樣檢測法; (3)顯微觀察法; (4)微生物培養(yǎng)法。,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,關(guān)注本實驗中的幾個關(guān)鍵點: 酵母菌的計數(shù) 利用血球計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù),是一種常用的微生物計數(shù)法,也叫做顯微鏡直接計數(shù)法。 優(yōu)點:直觀、快速。 適用于稀釋的菌懸液(或孢子懸液),即液體培養(yǎng)基中菌體的計數(shù)。 此法計得的是活菌體和死菌體的總和,又稱為總菌計數(shù)法。,酵母菌的計數(shù) (1)計數(shù)工具

2、血球計數(shù)板,實物圖,正面圖,側(cè)面圖,計數(shù)室,滴液處,血球計數(shù)板是一種專門用于計算較大單細胞微生物的一種儀器。 計數(shù)時,常采用樣方法。,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,酵母菌的計數(shù) (1)計數(shù)工具血球計數(shù)板,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,放大后的計數(shù)池,每塊計數(shù)板由H形凹槽分為2個同樣的計數(shù)池。 每個計數(shù)池分為9個大方格。,16個小格,25個小格,25X16 = 400小格,16X25 = 400小格,每個計數(shù)室(大方格)共有400小格,總?cè)莘e為0.1mm3,抽樣檢測: 516=80個小格,抽樣檢測: 425=100個小格,酵母菌的計數(shù) (2)計算: 每毫升培養(yǎng)液中的酵母菌細胞

3、數(shù)是多少?,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,例2:酵母菌的計數(shù)通常用血球計數(shù)板進行,血球計數(shù)板每個大方格容積為0.1mm3 ,由400個小方格組成?,F(xiàn)對某一樣液進行檢測,如果一個小方格內(nèi)酵母菌過多,難以計數(shù),應(yīng)先 后再計數(shù)。若多次重復(fù)計數(shù)后,算得每個小方格中平均有5個酵母菌,則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有 個。,例1 :在用血球計數(shù)板(2mm2mm方格)對某一稀釋50倍樣品進行計數(shù)時,發(fā)現(xiàn)在一個計數(shù)室內(nèi)(蓋玻片下的培養(yǎng)液厚度為0.1mm)酵母菌平均數(shù)為16,據(jù)此估算10mL培養(yǎng)液中有酵母菌 個。,2x107,2108,稀釋,例3 檢測員將1 mL水樣稀釋10倍后,用抽樣檢測的方法檢測

4、每毫升藍藻的數(shù)量;將蓋玻片放在計數(shù)室上,用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計數(shù)室,并用濾紙吸去多余液體。已知每個計數(shù)室由2516400個小格組成,容納液體的總體積為01 mm3。 現(xiàn)觀察到圖中該計數(shù)室所示a、b、c、d、e 5個中格80個小格內(nèi)共有藍藻n個,則上述水樣中約有藍藻 個mL。,5n105,酵母菌的計數(shù) (3)計數(shù)的操作 稀釋:將酵母菌培養(yǎng)液進行適當?shù)南♂?;若菌液不濃?可不必稀釋。 鏡檢計數(shù)室:在加樣前,先對計數(shù)板的計數(shù)室進行鏡檢 。若有污物,則需清洗后才能進行計數(shù)。 加樣品:在清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片,再用無 菌細口滴管將稀釋的酵母菌液由蓋玻片邊緣滴 入一小滴(將計數(shù)室充滿即

5、可),讓菌液沿縫 隙自行滲入計數(shù)室。注意不可有氣泡產(chǎn)生。,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,酵母菌的計數(shù) (3)計數(shù)的操作 顯微計數(shù):靜止5分鐘后,先用低倍鏡(1610)找 到計數(shù)室所在的位置。然后根據(jù)血球計數(shù) 板規(guī)格,每個計數(shù)室選取5個(或4個)中 方格中的菌體進行計數(shù)。每個小方格內(nèi)約 有5-10個菌體為宜。對于壓在小方格界線 上的酵母菌應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。如 遇酵母出芽,芽體大小達到母細胞的一半 時,即作為兩個菌體計數(shù)。計數(shù)一個樣品 要從兩個計數(shù)室中計得的值來計算樣品的 含菌量。,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,酵母菌的計數(shù) (4)血球計數(shù)板的清洗: 使用完畢后,將血球計

6、數(shù)板在水龍頭上用水柱沖洗,切勿用硬刷洗刷,洗完后自行晾干或用吹風(fēng)機吹干。鏡檢,觀察每個小格內(nèi)是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈,則必須重復(fù)洗滌至干凈為止。,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,酵母菌的計數(shù) (5)注意事項: 進行計數(shù)前,應(yīng)先將試管搖勻,目的是使酵母菌在培養(yǎng)液中混合均勻,以減少計數(shù)誤差。 顯微鏡計數(shù)時,對于壓在小方格界線上的酵母菌,應(yīng)取相鄰兩邊及頂角計數(shù)。 若一個小方格內(nèi)酵母菌數(shù)量過多,難以數(shù)清時,則可將培養(yǎng)液稀釋一定倍數(shù)后再計數(shù)。 本實驗無對照實驗,酵母菌每天的數(shù)量變化可形成前后對照。 血球計數(shù)板使用后,切勿用硬物洗刷,可采用浸泡和沖洗的方法清洗。,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群

7、數(shù)量 的動態(tài)變化,酵母菌的計數(shù) (6)討論:計數(shù)前還應(yīng)有哪些步驟?需注意些什么?,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,酵母菌培養(yǎng): 培養(yǎng)液配制 滅菌 接種 培養(yǎng),配制質(zhì)量分數(shù)為5的葡萄糖溶液(葡萄糖20g,1000 mL水),分裝到5個燒杯中(200mL/燒杯),用高壓蒸汽滅菌鍋將培養(yǎng)液和取樣、計數(shù)時所用的滴管分別滅菌。貼標簽。,接種時要在酒精燈附近,用滅菌干凈的1mL刻度吸管每次吸取0.1mL酵母菌母液,往每個燒杯中加入。(注意:滴加量不要太多,避免初始菌數(shù)過多。),將燒杯置于28的恒溫箱中培養(yǎng),無菌 操作,結(jié)果分析 (1)數(shù)據(jù)記錄 以湯麥式血球計數(shù)板的數(shù)據(jù)記錄為例。下表為某一次的數(shù)據(jù)記錄表,其中,A表示五個中方格的總菌數(shù);B表示菌液稀釋倍數(shù):,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,結(jié)果分析 (1)數(shù)據(jù)記錄 下表為一周的數(shù)據(jù)記錄表:,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,第 1 天,第 3 天,第 6 天,第 7 天,死亡,結(jié)果分析 (2)構(gòu)建數(shù)學(xué)模型:,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,實驗再探究 溫度、營養(yǎng)物質(zhì)影響酵母菌的生長嗎?某同學(xué)按下表完成了有關(guān)實驗。,溫度、營養(yǎng)物質(zhì)對酵母菌生長的影響,探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量 的動態(tài)變化,實驗再探究 培養(yǎng)空間、氧氣會影響酵母菌的生長嗎? 例:(2008年江蘇

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