第六章 芳香酸及其酯類藥物的分析.ppt

第六章芳酸及其酯類藥物的分析 基本要求 一 掌握本類藥物的鑒別反應 掌握本類藥物特殊雜質(zhì)檢查方法 掌握本類藥物含量測定方法 二 了解本類藥物的結(jié)構(gòu)特征和理化性質(zhì) 了解本類藥物體內(nèi)分析方法 結(jié)構(gòu)分析 包括 芳酸 芳酸酯 芳酸鹽 共同點 苯環(huán) 羧基 不同點 不同的取代基 如酚羥基 芳伯氨基等 性質(zhì) 一 物理性質(zhì) 1 固體具有一定的熔點 2 溶解性游離芳酸類藥物幾乎不溶于水 易溶于有機溶劑 芳酸堿金屬鹽及其它鹽易溶于水 難溶于有機溶劑 二 化學性質(zhì) 1 芳酸具游離羧基 呈酸性 其pKa在3 6之間 屬中等強度的酸或弱酸 X NO2 OH等吸電子取代基存在使酸性增強 CH3 NH2等斥電子取代基存在使酸性減弱 鄰位取代 間位 對位取代 尤其是鄰位取代了酚羥基 由于形成分子內(nèi)氫健 酸性大為增強 2 芳酸堿金屬鹽易溶于水 水解 溶液呈堿性 但堿性太弱 所以其含量測定方法為雙相滴定法或非水堿量法 3 芳酸酯可水解 利用其水解得到酸和醇的性質(zhì)可進行鑒別 利用芳酸酯水解定量消耗氫氧化鈉的性質(zhì) 芳酸酯類藥物可用水解后剩余滴定法測定含量 芳酸酯類藥物還應檢查因水解而引入的特殊雜質(zhì) 4 UV 5 IR 6 取代芳酸類藥物可利用其取代基的性質(zhì)進行鑒別和含量測定 如具有酚羥基的藥物可用FeCl3反應鑒別 具芳伯氨基的藥物可用重氮化 偶合反應鑒別 亞硝酸鈉滴定法測定含量 7 色譜法 制劑分析 常見的芳酸及其酯類藥物 水楊酸類 貝諾酯 1 酸性SA PKa2 95 ASA PKa3 49 雙水楊酯均有酸性 2 溶解性 均為固體 有一定溶點 除鈉鹽溶于水 其余不溶 3 UV和IR光譜特性 分子結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán) 有UV和IR特征吸收 4 芳伯氨基和酚羥基特性 5 水解特性 ASA 雙水楊酯及其制劑應檢查水楊酸 對氨基水楊酸鈉和貝諾酯檢查間氨基酚和對氨基酚 主要理化性質(zhì) 苯甲酸類 氨甲苯酸 羥苯乙酯 丙磺舒 pKa3 4 布美他尼 主要理化性質(zhì) 1 溶解性 均為固體 有一定溶點 除鈉鹽溶于水 其余不溶 2 UV和IR光譜特性 分子結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán) 有UV和IR特征吸收 3 具有酚羥基特性 4 分解反應特性 苯甲酸鈉分解為苯甲酸 丙磺舒分解為SO25 酸性 苯甲酸 丙磺舒和甲芬那酸有游離的羧基 可用NaOH直接滴定測定其含量 其他芳酸類藥物 氯貝丁酯 酚磺乙胺 1 溶解性 水中不溶 有機溶劑溶解 氯貝丁酯為液體 布洛芬為固體 有一定熔點 2 UV和IR特征吸收光譜 基于分子結(jié)構(gòu)中具有苯環(huán)和特征基團 鑒別試驗 一 FeCl3反應 具酚羥基或水解后能產(chǎn)生酚羥基的藥物 直接 水楊酸 對氨基水楊酸鈉 雙水楊酯 水楊酸二乙胺 酚磺乙胺 對乙酰氨基酚 水楊酸ChP 2005 鑒別 1 取本品的水溶液 加三氯化鐵試液1滴 即顯紫堇色 間接 阿司匹林 貝諾酯 阿司匹林ChP 2005 鑒別 1 取本品約0 1g 加水10ml 煮沸 放冷 加三氯化鐵試液1滴 即顯紫堇色 水楊酸類藥物與三氯化鐵試液反應結(jié)果藥物試驗方法結(jié)果水楊酸本品水溶液 與三氯化鐵試液反應紫堇色水楊酸二乙胺本品水溶液 與三氯化鐵試液反應紫堇色阿司匹林加熱水解后 與三氯化鐵試液反應紫堇色對氨基水楊酸鈉加稀鹽酸呈酸性后 與三氯化鐵試液反應紫紅色貝諾酯加氫氧化鈉試液煮沸水解后 與三氯化鐵試液反應紫堇色雙水楊酯本品稀溶液 與三氯化鐵試液反應紫色 二 重氮化 偶合反應 芳香第一胺類鑒別反應具芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物 直接 對氨基水楊酸鈉 鹽酸普魯卡因 苯佐卡因 鹽酸普魯卡因胺間接 對乙酰氨基酚 撲熱息痛 醋氨苯砜 貝諾酯 三 水解反應 OH 1 分解產(chǎn)物的反應 苯甲酸鹽 四 特殊反應 2 與汞離子及茚三酮反應 3 氧化反應含硫的藥物 4 異羥肟酸鐵反應 六 IR 五 UV 特殊雜質(zhì)檢查 一 阿司匹林中特殊雜質(zhì)的檢查 一 合成工藝 特殊雜質(zhì)檢查 二 檢查 1 溶液澄清度 特殊雜質(zhì)檢查 2 水楊酸的檢查 1 雜質(zhì)來源原料殘存 生產(chǎn)過程中乙?；煌耆?水解產(chǎn)生 貯存過程中水解產(chǎn)生 2 檢查方法對照法反應原理三氯化鐵反應限量原料 0 1 阿司匹林片 0 3 阿司匹林腸溶片 1 5 阿司匹林栓 1 0 HPLC法 其他雜質(zhì) 乙酰水楊酸酐 ASAN 乙酰水楊酰水楊酸 ASSA 水楊酰水楊酸 SSA 二 對氨基水楊酸鈉中間氨基酚的檢查 1 雜質(zhì)來源原料殘存 脫羧產(chǎn)生 2 檢查方法ChP 2005 含量測定法 雙相滴定法 利用對氨基水楊酸鈉不溶于乙醚 間氨基酚溶于乙醚的性質(zhì) 使二者分離后 在乙醚中加水適量 用鹽酸滴定 控制鹽酸滴定液體積以控制間氨基酚限量 USP 24 離子對HPLC法 內(nèi)標法 三 雙水楊酯中有關物質(zhì)的檢查BP 1998 TLC水楊酸 雜質(zhì)對照品法有關物質(zhì) 高低濃度對比法 1 雜質(zhì)對照品法 方法 供試品 供試品溶液 雜質(zhì)對照品 對照品溶液 判斷 供試品中所含雜質(zhì)斑點大小及顏色不得超過相應的雜質(zhì)對照斑點 優(yōu)點 同一物質(zhì) 同一Rf值比較 準確度高 直觀性強 缺點 需要雜質(zhì)對照品 2 高低濃度對比法 方法 判斷 供試品溶液所顯雜質(zhì)斑點不得深于對照溶液的主斑點 或熒光強度 控制雜質(zhì)斑點個數(shù) 控制雜質(zhì)種類 缺點 不同物質(zhì) 不同Rf值比較 準確度差 直觀性差 優(yōu)點 以供試品的稀溶液作為對照液 不需要雜質(zhì)對照品 簡單 價廉 還可配成幾種限量的對照溶液 四 羥苯乙酯中有關物質(zhì)的檢查BP 1998 反相TLC高低濃度對比法 五 酚磺乙胺中氫醌的檢查ChP 2000 HPLC法 六 氯貝丁酯中對氯酚及揮發(fā)性雜質(zhì)的檢查GC 含量測定 一 中和法 1 直接滴定法pKa3 6 阿司匹林ChP 2005 取本品約0 4g 精密稱定 加中性乙醇 對酚酞指示液顯中性 20ml 溶解后 加酚酞指示液3滴 用氫氧化鈉滴定液 0 1mo1 L 滴定 每lml的氫氧化鈉滴定液 0 1mo1 L 相當于18 02mg的C9H8O4 1 測定方法及計算Ka 3 27 10 4反應摩爾比為1 1 2 討論 中性乙醇溶解阿司匹林且防止酯鍵水解 中性 是對中和法所用的指示劑而言 優(yōu)點 簡便 快速缺點 酯鍵水解干擾 不斷攪拌 快速滴定 酸性雜質(zhì)干擾 如水楊酸 適用范圍 不能用于含水楊酸過高或制劑分析 只能用于合格原料藥的含量測定 2 水解后剩余滴定法酯的一般含量測定方法 阿司匹林 USP 24 方法 取本品約1 5g 精密稱定 加入氫氧化鈉滴定液 0 5mo1 L 50 0m1 混合 緩緩煮沸10min 放冷 加酚酞指示液 用硫酸滴定液 0 25mo1 L 滴定剩余的氫氧化鈉 并將滴定結(jié)果用空白試驗校正 每1ml的氫氧化鈉滴定液 0 5mol l 相當于45 04mg的C9H8O4 2NaOH 過量 H2SO4 Na2SO4 2H2O 剩余滴定 水解 反應摩爾比為1 1優(yōu)點 消除了酯鍵水解的干擾缺點 酸性雜質(zhì)干擾 羥苯乙酯含量測定亦可用此法 3 兩步滴定法阿司匹林片 阿司匹林腸溶片氯貝丁酯 如阿司匹林片的測定 取本品10片 精密稱定 研細 精密稱取適量 約相當于阿司匹林0 3g 置錐形瓶中 加中性乙醇 對酚酞指示液顯中性 溶解后 振搖使阿司匹林溶解 加酚酞指示液3滴 滴加氫氧化鈉滴定液 0 1mol L 至溶液顯粉紅色 再精密加氫氧化鈉滴定液 0 1mol L 40m1 置水浴上加熱15分鐘并時時振搖 迅速放冷至室溫 用硫酸滴定液 0 05mol L 滴定 并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正 每lml的氫氧化鈉滴定液 0 1mo1 L 相當于18 02mg的C9H8O4 第一步中和 第二步水解后剩余滴定 水解 2NaOH 過量 H2SO4 Na2SO4 2H2O反應摩爾比為2 1本法消除了酸性雜質(zhì)的干擾 降低了酯鍵水解的干擾 剩余滴定 氯貝丁酯 消除供試品中共存的酸性雜質(zhì) 片劑含量測定結(jié)果的計算 剩余滴定法 含量計算 ASA的標示量百分含量 V0 V C實際 18 02 10 3 0 05Ws W 標示量 100 討論 1 加中性乙醇 助溶 防止水解 2 空白實驗 因為堿液受熱時易吸收二氧化碳 形成碳酸鈉 碳酸鈉對酚酞不顯紅色 3 雙相滴定法 芳酸堿金屬鹽 如苯甲酸鈉ChP 2005 溶劑 水 乙醚 取本品1 5g 精密稱定 置分液漏斗中 加水25m1 乙醚50ml及甲基指示液2滴 用鹽酸滴定液 0 5mo1 L 滴定 隨滴隨振搖 至水層顯橙紅色 分取水層 置具塞錐形瓶中 乙醚層用水5ml洗滌 洗液并入錐形瓶中 加乙醚20m1 繼續(xù)用鹽酸滴定液0 5mo1 L 滴定 隨滴定隨振搖 至水層顯持續(xù)的橙紅色 每1ml的鹽酸滴定液 0 5mol L 相當于72 06mg的C7H5NaO2 乙醚的作用是 萃取反應生成的苯甲酸 使水相中的中和反應進行到底滴定中要強力振搖 隨著滴定不斷進行 苯甲酸不斷被萃取入有機溶劑層 使滴定反應完全 終點清晰 優(yōu)點 消除了反應產(chǎn)物的干擾 5 非水堿量法芳酸堿金屬鹽冰醋酸作溶劑高氯酸的冰醋酸溶液作滴定劑結(jié)晶紫作指示劑指示終點或電位法指示終點 6 縮合后酸堿滴定法氨甲苯酸加入甲醛使與氨甲苯酸作用 生成Schiff堿后 用堿液滴定 氨甲苯酸取本品約0 3g 精密稱定 加水30ml 加熱使溶解 放冷 加甲醛與甲酚紅指示液 用氫氧化鈉滴定液 0 1mo1 L 滴定至溶液顯淡紫色 并將滴定結(jié)果用空白試液校正 每lml的氫氧化鈉滴定液 0 1mo1 L 相當于15 12mg的C8H9NO2 二 亞硝酸鈉滴定法具芳伯氨基或潛在芳伯氨基 芳酰氨基水解或硝基還原 的藥物 三 紫外分光光度法1 直接紫外分光光度法酚磺乙胺注射液ChP 2005 精密量取本品適量 約相當于酚磺乙胺0 25g 置200ml量瓶中 用乙醇稀釋至刻度 搖勻 精密量取2m1 置100ml量瓶中 用乙醇稀釋至刻度 搖勻 在1cm吸收池中 以溶劑為空白 于305nm的波長處測定吸收度 按C10H17NO5S的吸收系數(shù) 為159計算含量 注射液含量測定結(jié)果的計算 紫外分光光度法吸收系數(shù)法 2 過濾后的紫外分光光度法丙磺舒片 取本品10片 精密稱定 研細 精密稱取適量 約相當于丙磺舒60mg 置200m1量瓶中 加乙醇150ml與鹽酸溶液 9 100 4m1 置70 水浴上加熱30min 放冷 用乙醇稀釋至刻度 搖勻 濾過 棄去初濾液 精密量取續(xù)濾液5ml 置100ml量瓶中 加鹽酸溶液 9 100 2m1 用乙醇稀釋至刻度 搖勻 于1cm吸收池中 以溶劑為空白 在249nm的波長處測定吸收度 按C13H19NO4S的吸收系數(shù) 為338計算 紫外分光光度法吸收系數(shù)法 3 柱分配色譜 紫外分光光度法USP 24 阿司匹林膠囊可同時定量測定阿司匹林和水楊酸 1 水楊酸的限量測定固定相 FeCl3SA保留 冰醋酸洗脫 306nm測水楊酸的量 2 含量測定固定相 NaHCO3AAS SA保留冰醋酸洗脫 280nm測總量 4 離子交換后紫外分光光度法氯貝丁酯強堿性陰離子交換樹脂吸附酸性雜質(zhì)后 對照法定量測定氯貝丁酯含量 原料藥對照法 四 HPLC1 阿司匹林栓劑ChP 2000 離子抑制色譜法內(nèi)標法定量 2 對氨基水楊酸鈉USP 24 離子對反相HPLC內(nèi)標法定量 3 丙磺舒USP 24 離子抑制色譜法外標法定量 4 酚磺乙胺ChP 2000 正相HPLC內(nèi)標法定量 練習題1 兩步滴定法測定阿司匹林片是因為 A 片劑中有其他酸性物質(zhì)B 片劑中有其他堿性物質(zhì)C 需用堿定量水解D 阿司匹林具有酸堿兩性E 使滴定終點明顯 2 某藥與碳酸鈉共熱 酸化后有白色沉淀產(chǎn)生 加乙醇和硫酸 共熱 有香氣產(chǎn)生 此藥可能是 A 對氨基水楊酸B 對氨基苯甲酸C 苯甲酸鈉D 乙酰水楊酸E 普魯卡因 3 苯甲酸鈉的含量測定 中國藥典 2005年版 采用雙相滴定法 其所用的溶劑體系為A 水 乙醇B 水 冰醋酸C 水 氯仿D 水 乙醚E 水 丙酮 4 在本類藥物的酸堿滴定中 要求采用中性乙醇做溶劑 所謂 中性 是指 B A PH 7B 對所用指示劑顯中性C 除去酸性雜質(zhì)的乙醇D 對甲基橙顯中性E 相對被測物而言 5 121 125 含量測定方法 中國藥典1995年版 為A 直接中和滴定法B 兩步滴定法C 兩者均可D 兩者均不可121 阿司匹林片122 阿司匹林原料藥123 對氨基水楊酸鈉124 阿司匹林栓劑125 阿司匹林腸溶劑 B A D D B 6 126 130 A 兩步酸堿滴定法B 直接酸堿滴定法C 兩者皆是D 兩者皆不是126 苯甲酸鈉的測定127 氯貝丁酯的測定128 鹽酸的測定129 酸堿滴定法130 阿司匹林片的測定 D A B